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二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药单链抗体的制备及广谱特异性 被引量:7
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作者 周丽君 黄启欣 +5 位作者 雷红涛 王欲晓 王强 徐振林 王弘 孙远明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2012年第10期2269-2274,共6页
从分泌抗二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞系(12C2)中提取了总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,设计带linker引物,采用重叠延伸PCR制备单链抗体(scFv)基因,将其克隆到噬菌体载体p3MH中,构建成噬菌体单链抗体... 从分泌抗二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞系(12C2)中提取了总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,设计带linker引物,采用重叠延伸PCR制备单链抗体(scFv)基因,将其克隆到噬菌体载体p3MH中,构建成噬菌体单链抗体表达载体,转化大肠杆菌表达出噬菌体表面展示scFv,对经过Phage-ELISA鉴定的阳性克隆进行噬菌体外壳蛋白基因geneⅢ的去除,用IPTG诱导其可溶性表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western-Blot及ELISA鉴定,并与亲本MAb进行性能对比.结果表明,可溶性表达的scFv分子量为27000;scFv与DPPs的交叉反应率比其亲本MAb提高了1.3~3.5倍,表明其广谱特异性有所提高.由于scFv与MAb相比具有诸多优点,因此本研究为有机磷农药多残留检测方法的建立提供了一种更广谱、更灵敏的新型识别分子. 展开更多
关键词 二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药 单链抗体 噬菌体展示 广谱特异性
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含硅二硫代磷酸酯的合成及生物活性
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作者 贺峥杰 李正名 +1 位作者 毕富春 王文丽 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1997年第5期739-743,共5页
硅基甲硫醇R1R2CH3SiCH2SH与O,O-二烷基二硫代磷酸酯(RO)2P(S)SH及甲醛可顺利地发生类Mannich缩合反应.利用此反应和硅基甲硫醇与O,O-二乙基-S-(2-溴乙基)二硫代磷酸酯的取代反应合成了37种新的含硅二硫代磷酸酯化合物(R... 硅基甲硫醇R1R2CH3SiCH2SH与O,O-二烷基二硫代磷酸酯(RO)2P(S)SH及甲醛可顺利地发生类Mannich缩合反应.利用此反应和硅基甲硫醇与O,O-二乙基-S-(2-溴乙基)二硫代磷酸酯的取代反应合成了37种新的含硅二硫代磷酸酯化合物(RO)2P(S)S(CH2)nSCH2SiCH3R1R2(n=1,2).在初筛浓度下,该类化合物具有一定的杀虫、杀螨活性. 展开更多
关键词 有机 硫代磷酸 生物活性 有机磷 农药
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大气中O,S-二甲基-甲基硫代磷酸酯与OH自由基降解反应的理论研究
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作者 路成刚 童毅 +2 位作者 唐沂珍 冯兰 吕谋 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第6期459-462,共4页
采用量子化学计算方法,几何构型在M062X/6-31+G(d,p)理论水平,单点能在M062X/6-311++G(3df,2pd)理论水平下,对大气中O,S-二甲基-甲基硫代磷酸酯(OSDMMP)与OH自由基反应的降解过程进行了详细的机理研究。结果显示:整个反应过程需要经历3... 采用量子化学计算方法,几何构型在M062X/6-31+G(d,p)理论水平,单点能在M062X/6-311++G(3df,2pd)理论水平下,对大气中O,S-二甲基-甲基硫代磷酸酯(OSDMMP)与OH自由基反应的降解过程进行了详细的机理研究。结果显示:整个反应过程需要经历3个氢抽提反应通道,经过这3个反应通道分别生成3种不同的产物,即产物1 CH_3SP(O)(CH_3)OCH_2、产物2 CH_2SP(O)(CH_3)OCH_3和产物3 CH_3SP(O)(CH_2)OCH_3,其中生成产物1和产物2所需要跨越的能垒比生成产物3要低,在发生反应时的竞争优势更为明显;产物1CH_3SP(O)(CH_3)OCH_2和产物2 CH_2SP(O)(CH_3)OCH_3在环境中与氧化剂NO和O_2发生后继反应所生成的最终产物其毒性比反应物OSDMMP有明显的降低,而产物3 CH_3SP(O)(CH_2)OCH_3的最后降解产物其毒性与OSDMMP相近。 展开更多
关键词 有机磷农药 O S-甲基-甲基硫代磷酸 降解机理
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DPPs类有机磷农药宽谱酶联免疫吸附分析方法的建立 被引量:9
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作者 吕丽兰 张娅 +7 位作者 陆覃昱 邹承武 甘志勇 李冬桂 吴静娜 王艺霖 李鑫生 何丽珊 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第11期2659-2666,共8页
【目的】制备识别二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析法(ic-ELISA),为实现农产品有机磷农药残留快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酰氧基)-肉桂酸为半抗原,制备完全... 【目的】制备识别二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析法(ic-ELISA),为实现农产品有机磷农药残留快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酰氧基)-肉桂酸为半抗原,制备完全抗原。筛选免疫小鼠,制备稳定分泌可识别DPPs抗体的单克隆细胞株,筛选出抗原和抗体最佳工作浓度组合,建立该单抗的ic-ELISA标准曲线,并分析该单抗与6种DPPs的交叉反应率,评估ic-ELISA的广谱性。利用所得抗体与喹硫磷交叉反应最强的特性对采购的柑橘和鲜橙样品进行喹硫磷添加回收试验。【结果】成功合成识别DPPs的人工抗原,包括包被抗原DPPs-OVA和免疫抗原DPPs-BSA。通过有限稀释法筛选获得灵敏度高、广谱性最强的单克隆细胞株5G_(8)。以0.5μg/mL包被抗原DPPs-OVA、1.0μg/mL抗体5G_(8)2D_(5)为最佳工作浓度组合,将细胞株筛选过程中抗体识别率较高的有机磷农药——对硫磷选定为抑制标准物,建立对硫磷ic-ELISA及其标准曲线,其半抑制浓度(IC_(50))为41.78 ng/mL,检测范围(IC_(20)~IC_(80))为3.21~239.59 ng/mL;所建立的ic-ELISA与5种DPPs(蝇毒磷、喹硫磷、甲拌磷、甲基对硫磷和倍硫磷)均存在不同程度的交叉反应,其中以喹硫磷的交叉反应率最高,达19.79%。比较ic-ELISA和气相色谱法(GC)对柑橘和鲜橙样品中喹硫磷的添加回收结果发现,ic-ELISA的添加回收率为75.80%~116.12%,GC的添加回收率介于92.5%~115.00%,2种方法的检测结果一致性较好。【结论】建立的ic-ELISA经GC交叉验证准确性较高,可用于快速检测农产品中的喹硫磷残留。 展开更多
关键词 二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs) 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附分析法(ic-ELISA) 气相色谱法(GC) 农药残留检测
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气相色谱法测定血浆中含硫的有机磷代谢产物 被引量:4
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作者 金忠秀 许媛媛 储成顶 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第9期1120-1123,共4页
采用气相色谱法(火焰光度检测器)检测血浆中有机磷农药的含硫代谢产物。经过相关的前处理及检测方法的优化后,血浆中有机磷的含硫代谢产物二乙基硫代磷酸酯和二乙基二硫代磷酸酯线性良好,杂质干扰少,回收率分别为92.46%和98.10%,日内精... 采用气相色谱法(火焰光度检测器)检测血浆中有机磷农药的含硫代谢产物。经过相关的前处理及检测方法的优化后,血浆中有机磷的含硫代谢产物二乙基硫代磷酸酯和二乙基二硫代磷酸酯线性良好,杂质干扰少,回收率分别为92.46%和98.10%,日内精密度分别为0.37%和0.23%。检出限分别为5.0μg/L和1.0μg/L。经实际样品分析,证明该分析方法操作简便、准确可靠、灵敏度较高。 展开更多
关键词 含硫代谢产物 有机磷农药 乙基硫代磷酸 乙基硫代磷酸 气相色谱法
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农药混用原则、类别及注意事项 被引量:1
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作者 郑伟 《河南农业》 2020年第1期24-24,共1页
一、农药混用的原则(一)混用后不发生不良化学反应多数有机磷杀虫剂、氨基甲酸酯类杀虫剂、拟除虫菊酯类杀虫剂等对敌稗、波尔多液、石硫合剂、硫酸锌石灰液等碱性农药敏感,混用时很快发生水解反应,从而降低药效;福美双、代森环、克菌... 一、农药混用的原则(一)混用后不发生不良化学反应多数有机磷杀虫剂、氨基甲酸酯类杀虫剂、拟除虫菊酯类杀虫剂等对敌稗、波尔多液、石硫合剂、硫酸锌石灰液等碱性农药敏感,混用时很快发生水解反应,从而降低药效;福美双、代森环、克菌丹等杀毒剂,有效成分在碱性介质中会发生复杂的化学反应而被破坏;有的农药如2,4-D钠盐、二钾四氯钠盐、双甲脒等有效成分在本性酸性条件下会分解或降低药效,常见的酸性药剂有硫酸铜、硫酸烟碱、抗菌剂401、乙烯利水剂等;有机硫类和有机磷类农药不能与含铜制剂的农药混用,如二硫代氨基甲酸盐类杀菌剂、2,4-D盐类除草剂与铜制剂混用,因与铜离子结合,而失去活性。 展开更多
关键词 农药混用 碱性农药 铜制剂 拟除虫菊酯类杀虫剂 硫代氨基甲酸盐 有机磷杀虫剂 有机磷农药 硫酸烟碱
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