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敲低膀胱癌细胞热休克蛋白60(HSP60)通过上调乳酸脱氢酶A(LDHA)表达抑制人NKL细胞杀伤
被引量:
1
1
作者
杨帆
刘静
+3 位作者
姚田军
吴丹
周幸春
张波
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期1098-1105,共8页
目的探索热休克蛋白60(HSP60)蛋白表达变化影响膀胱癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞免疫监视的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测HSP60在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达,统计学分析HSP60在膀胱癌及癌旁组织的表达差异及HSP60表达水平...
目的探索热休克蛋白60(HSP60)蛋白表达变化影响膀胱癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞免疫监视的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测HSP60在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达,统计学分析HSP60在膀胱癌及癌旁组织的表达差异及HSP60表达水平与膀胱癌患者预后的相关性。利用腺病毒载体构建HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系并与NKL细胞共培养,ELISA及LDH释放实验检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。Western blot法检测膀胱癌细胞乳酸脱氢酶A(LDHA)表达,试剂盒检测乳酸分泌。在HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系,利用小干涉RNA(siRNA)敲低或利用质粒过表达膀胱癌细胞中的LDHA,检测对NKL细胞杀伤能力的影响。利用线粒体活性氧探针MitoSOX检测线粒体活性氧(ROS)水平,Western blot法检测膀胱癌细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达,利用靶向线粒体抗氧化剂MitoEMPO及siRNA降低HSP60稳定干涉膀胱癌细胞中线粒体ROS及HIF-1α水平,探索HSP60表达降低促进LDHA表达的具体机制。结果膀胱癌组织HSP60蛋白的表达水平较癌旁组织显著降低,且HSP60表达越低的膀胱癌患者其预后越差;敲低HSP60蛋白表达可显著上调膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌,反之,过表达HSP60可显著抑制膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌;siRNA LDHA可显著增强HSP60敲低导致NKL细胞的杀伤抑制,同时过表达LDHA可显著抑制HSP60过表达导致NKL杀伤增强。此外,敲低膀胱癌细胞HSP60表达可通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达。结论敲低膀胱癌细胞HSP60表达通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达,抑制NK细胞的杀伤作用。
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关键词
膀胱癌细胞
热休克蛋白60(HSP60)
乳酸
脱
氢
酶
A(
ldha
)
乳酸
自然杀伤(NK)细胞
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职称材料
转牛LDHA基因酿酒酵母构建及产乳酸能力分析
2
作者
左梦娜
何佳宁
+2 位作者
尹千禧
王凤梅
马利兵
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第12期3719-3726,共8页
【目的】探究转牛乳酸脱氢酶A基因(LDHA)酿酒酵母发酵制备食品级乳酸的可行性,为采用转基因商业酿酒酵母规模化制备乳酸提供技术支撑。【方法】从NCBI网站检索牛LDHA基因编码序列,并将编码序列中的同义密码子替换为酿酒酵母偏好密码子,...
【目的】探究转牛乳酸脱氢酶A基因(LDHA)酿酒酵母发酵制备食品级乳酸的可行性,为采用转基因商业酿酒酵母规模化制备乳酸提供技术支撑。【方法】从NCBI网站检索牛LDHA基因编码序列,并将编码序列中的同义密码子替换为酿酒酵母偏好密码子,经人工合成后导入酿酒酵母表达载体pAUR123,再将重组表达载体p AUR123-LDHA导入商业化酿酒酵母EC1118株,采用Aureobasidin A筛选转基因酿酒酵母。将转基因及非转基因酿酒酵母EC1118株分别接种于含200 g/L葡萄糖的YPD液体培养基中连续培养5 d,期间检测2组酿酒酵母的LDHA活性及其发酵产乳酸能力,以评估转牛LDHA基因酿酒酵母发酵制备乳酸的可行性。【结果】牛LDHA基因编码序列长1170 bp,共编码389个氨基酸残基;以酿酒酵母偏好密码子替换牛LDHA基因编码序列中的同义密码子,其替换率高达58.35%。牛LDHA在酿酒酵母中的预计半衰期>20 h,其二级结构富含α-螺旋和无规则卷曲。替换后的牛LDHA基因编码序列由表达载体pAUR123携带导入酿酒酵母中,经Aureobasidin A筛选获得1株转基因酿酒酵母菌株,命名为EC1118-LDHA。转基因酿酒酵母EC1118-LDHA株以200 g/L葡萄糖为碳源,发酵24 h后的LDHA活性达4.7±1.2 mU/mg,发酵2~3 d后约制备出30 g/L乳酸,同时产生约70 g/L乙醇,乳酸产出率约为0.15 g/g葡萄糖。【结论】将替换酿酒酵母偏好密码子后的牛LDHA基因编码序列导入酿酒酵母中能成功构建转牛LDHA基因酿酒酵母,牛LDHA基因的导入不会影响商业化酿酒酵母的发酵能力,且赋予了酿酒酵母以200 g/L葡萄糖为碳源约制备出30 g/L乳酸的能力。因此,采用转牛LDHA基因酿酒酵母制备食品级乳酸完全可行。
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关键词
酿酒酵母
牛
乳糖
脱
氢
酶
A基因(
ldha
)
乳酸
发酵
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职称材料
胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白联合表达的临床病理学意义
被引量:
4
3
作者
赖妙玲
郝卓芳
+3 位作者
黄世章
欧阳小明
郅程
申洪
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017年第14期2275-2280,共6页
目的探讨LDHA/p53联合表达在胶质瘤临床病理学中的意义。方法按照2016年WHO中枢神经系统肿瘤新分类,分析68例胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白的表达特点及其与临床病理特征的关系。结果 68例胶质瘤中,LDHA单独高表达多为高级别胶质瘤,占48.5%...
目的探讨LDHA/p53联合表达在胶质瘤临床病理学中的意义。方法按照2016年WHO中枢神经系统肿瘤新分类,分析68例胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白的表达特点及其与临床病理特征的关系。结果 68例胶质瘤中,LDHA单独高表达多为高级别胶质瘤,占48.5%;突变型p53高表达则多为胶质母细胞瘤,占26.5%。LDHA/p53联合表达在胶质母细胞瘤中显著增高,占22.1%(P=0.005)。高级别胶质瘤中LDHA/p53联合表达增多,占27.9%(P=0.002)。结论 LDHA/p53联合表达有助于高级别胶质瘤的诊断,对胶质母细胞瘤的诊断也具有提示作用。
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关键词
胶质瘤
乳酸
脱
氢
酶
-a
亚基
(
ldha
)
突变型P53
异柠檬酸
脱
氢
酶
1(IDH1)
鉴别诊断
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职称材料
血清 LDH 亚基比值测定的临床意义
被引量:
2
4
作者
刘泽军
潘 虎
+1 位作者
唐 宏
扬 辛
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第8期602-603,共2页
目的:观察血清中 L D H 亚基比值 H/ M 在各种疾病中的变化。方法:在典范电泳仪上用涤纶膜做载体测定正常人和病人的 L D H 同工酶,并计算出两个亚基的比值( H/ M)。结果:心肌梗塞病人的 H/ M 比值显著上升,皮肤...
目的:观察血清中 L D H 亚基比值 H/ M 在各种疾病中的变化。方法:在典范电泳仪上用涤纶膜做载体测定正常人和病人的 L D H 同工酶,并计算出两个亚基的比值( H/ M)。结果:心肌梗塞病人的 H/ M 比值显著上升,皮肤病、烧伤及肺癌等病人组的 H/ M 比值显著下降( P< 0.001)。结论: L D H 亚基比值对心肌梗塞、皮肤疾病、烧伤及肺癌等病症的诊断、疗效观察及预后判断上有一定的作用。
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关键词
血清诊断
乳酸
脱
氢
酶
亚基
比值
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职称材料
题名
敲低膀胱癌细胞热休克蛋白60(HSP60)通过上调乳酸脱氢酶A(LDHA)表达抑制人NKL细胞杀伤
被引量:
1
1
作者
杨帆
刘静
姚田军
吴丹
周幸春
张波
机构
空军军医大学第二附属医院唐都医院泌尿外科
空军军医大学基础医学院病理与病理生理学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期1098-1105,共8页
基金
国家自然科学基金(81872077)。
文摘
目的探索热休克蛋白60(HSP60)蛋白表达变化影响膀胱癌细胞逃避自然杀伤(NK)细胞免疫监视的作用及机制。方法免疫组织化学染色法检测HSP60在膀胱癌组织及癌旁组织中的表达,统计学分析HSP60在膀胱癌及癌旁组织的表达差异及HSP60表达水平与膀胱癌患者预后的相关性。利用腺病毒载体构建HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系并与NKL细胞共培养,ELISA及LDH释放实验检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。Western blot法检测膀胱癌细胞乳酸脱氢酶A(LDHA)表达,试剂盒检测乳酸分泌。在HSP60稳定干涉及过表达的膀胱癌细胞系,利用小干涉RNA(siRNA)敲低或利用质粒过表达膀胱癌细胞中的LDHA,检测对NKL细胞杀伤能力的影响。利用线粒体活性氧探针MitoSOX检测线粒体活性氧(ROS)水平,Western blot法检测膀胱癌细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的蛋白表达,利用靶向线粒体抗氧化剂MitoEMPO及siRNA降低HSP60稳定干涉膀胱癌细胞中线粒体ROS及HIF-1α水平,探索HSP60表达降低促进LDHA表达的具体机制。结果膀胱癌组织HSP60蛋白的表达水平较癌旁组织显著降低,且HSP60表达越低的膀胱癌患者其预后越差;敲低HSP60蛋白表达可显著上调膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌,反之,过表达HSP60可显著抑制膀胱癌细胞LDHA的表达及乳酸的分泌;siRNA LDHA可显著增强HSP60敲低导致NKL细胞的杀伤抑制,同时过表达LDHA可显著抑制HSP60过表达导致NKL杀伤增强。此外,敲低膀胱癌细胞HSP60表达可通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达。结论敲低膀胱癌细胞HSP60表达通过激活ROS/HIF-1α通路促进LDHA的表达,抑制NK细胞的杀伤作用。
关键词
膀胱癌细胞
热休克蛋白60(HSP60)
乳酸
脱
氢
酶
A(
ldha
)
乳酸
自然杀伤(NK)细胞
分类号
R392.32 [医药卫生—免疫学]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
转牛LDHA基因酿酒酵母构建及产乳酸能力分析
2
作者
左梦娜
何佳宁
尹千禧
王凤梅
马利兵
机构
内蒙古科技大学生命科学与技术学院
包头轻工职业技术学院食品药品学院
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第12期3719-3726,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31660340)
内蒙古自然科学基金项目(2022MS03017)
内蒙古科技大学基本科研业务费专项(2023RCTD024)。
文摘
【目的】探究转牛乳酸脱氢酶A基因(LDHA)酿酒酵母发酵制备食品级乳酸的可行性,为采用转基因商业酿酒酵母规模化制备乳酸提供技术支撑。【方法】从NCBI网站检索牛LDHA基因编码序列,并将编码序列中的同义密码子替换为酿酒酵母偏好密码子,经人工合成后导入酿酒酵母表达载体pAUR123,再将重组表达载体p AUR123-LDHA导入商业化酿酒酵母EC1118株,采用Aureobasidin A筛选转基因酿酒酵母。将转基因及非转基因酿酒酵母EC1118株分别接种于含200 g/L葡萄糖的YPD液体培养基中连续培养5 d,期间检测2组酿酒酵母的LDHA活性及其发酵产乳酸能力,以评估转牛LDHA基因酿酒酵母发酵制备乳酸的可行性。【结果】牛LDHA基因编码序列长1170 bp,共编码389个氨基酸残基;以酿酒酵母偏好密码子替换牛LDHA基因编码序列中的同义密码子,其替换率高达58.35%。牛LDHA在酿酒酵母中的预计半衰期>20 h,其二级结构富含α-螺旋和无规则卷曲。替换后的牛LDHA基因编码序列由表达载体pAUR123携带导入酿酒酵母中,经Aureobasidin A筛选获得1株转基因酿酒酵母菌株,命名为EC1118-LDHA。转基因酿酒酵母EC1118-LDHA株以200 g/L葡萄糖为碳源,发酵24 h后的LDHA活性达4.7±1.2 mU/mg,发酵2~3 d后约制备出30 g/L乳酸,同时产生约70 g/L乙醇,乳酸产出率约为0.15 g/g葡萄糖。【结论】将替换酿酒酵母偏好密码子后的牛LDHA基因编码序列导入酿酒酵母中能成功构建转牛LDHA基因酿酒酵母,牛LDHA基因的导入不会影响商业化酿酒酵母的发酵能力,且赋予了酿酒酵母以200 g/L葡萄糖为碳源约制备出30 g/L乳酸的能力。因此,采用转牛LDHA基因酿酒酵母制备食品级乳酸完全可行。
关键词
酿酒酵母
牛
乳糖
脱
氢
酶
A基因(
ldha
)
乳酸
发酵
Keywords
Saccharomyces cerevisiae
bovine
lactate dehydrogenase A gene(
ldha
)
lactic acid
fermentation
分类号
S816.73 [农业科学—饲料科学]
TQ921.3 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白联合表达的临床病理学意义
被引量:
4
3
作者
赖妙玲
郝卓芳
黄世章
欧阳小明
郅程
申洪
机构
南方医科大学南方医院病理科
广州医科大学附属第二医院病理科
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017年第14期2275-2280,共6页
基金
广东省科技计划资助项目(编号:2010B060300001)
文摘
目的探讨LDHA/p53联合表达在胶质瘤临床病理学中的意义。方法按照2016年WHO中枢神经系统肿瘤新分类,分析68例胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白的表达特点及其与临床病理特征的关系。结果 68例胶质瘤中,LDHA单独高表达多为高级别胶质瘤,占48.5%;突变型p53高表达则多为胶质母细胞瘤,占26.5%。LDHA/p53联合表达在胶质母细胞瘤中显著增高,占22.1%(P=0.005)。高级别胶质瘤中LDHA/p53联合表达增多,占27.9%(P=0.002)。结论 LDHA/p53联合表达有助于高级别胶质瘤的诊断,对胶质母细胞瘤的诊断也具有提示作用。
关键词
胶质瘤
乳酸
脱
氢
酶
-a
亚基
(
ldha
)
突变型P53
异柠檬酸
脱
氢
酶
1(IDH1)
鉴别诊断
Keywords
gliomas
lactate dehydrogenase.A subunit(
ldha
)
mutant p53
isocitrate dehydrogenase1(IDH1)
differential diagnosis
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
血清 LDH 亚基比值测定的临床意义
被引量:
2
4
作者
刘泽军
潘 虎
唐 宏
扬 辛
机构
第三军医大学附属西南医院检验科
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999年第8期602-603,共2页
文摘
目的:观察血清中 L D H 亚基比值 H/ M 在各种疾病中的变化。方法:在典范电泳仪上用涤纶膜做载体测定正常人和病人的 L D H 同工酶,并计算出两个亚基的比值( H/ M)。结果:心肌梗塞病人的 H/ M 比值显著上升,皮肤病、烧伤及肺癌等病人组的 H/ M 比值显著下降( P< 0.001)。结论: L D H 亚基比值对心肌梗塞、皮肤疾病、烧伤及肺癌等病症的诊断、疗效观察及预后判断上有一定的作用。
关键词
血清诊断
乳酸
脱
氢
酶
亚基
比值
分类号
R446.112 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
敲低膀胱癌细胞热休克蛋白60(HSP60)通过上调乳酸脱氢酶A(LDHA)表达抑制人NKL细胞杀伤
杨帆
刘静
姚田军
吴丹
周幸春
张波
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
在线阅读
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职称材料
2
转牛LDHA基因酿酒酵母构建及产乳酸能力分析
左梦娜
何佳宁
尹千禧
王凤梅
马利兵
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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职称材料
3
胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白联合表达的临床病理学意义
赖妙玲
郝卓芳
黄世章
欧阳小明
郅程
申洪
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017
4
在线阅读
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职称材料
4
血清 LDH 亚基比值测定的临床意义
刘泽军
潘 虎
唐 宏
扬 辛
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
1999
2
在线阅读
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职称材料
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