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乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体的构建及鉴定 被引量：1
1
作者 唐鲁兵 高海东 +4 位作者 田春艳 孙靖中 刘焕涛 马榕 王甜甜 《中国现代普通外科进展》 CAS 2006年第2期86-88,共3页
目的构建乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)真核表达载体pcDNA3.1/myc-BRMS1,为研究抑制恶性肿瘤转移的机制奠定基础。方法设计含有HindⅢ和XhoⅠ酶切位点的一对引物,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人乳腺癌细胞株MCF-7中扩增到BRMS1... 目的构建乳腺癌转移抑制基因(BRMS1)真核表达载体pcDNA3.1/myc-BRMS1,为研究抑制恶性肿瘤转移的机制奠定基础。方法设计含有HindⅢ和XhoⅠ酶切位点的一对引物,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人乳腺癌细胞株MCF-7中扩增到BRMS1的cDNA基因片断,经回收、纯化、酶切后,连接到质粒pcDNA3.1/myc-His(+)A上,鉴定正确后并转染人胚肾细胞HEK-293进行Western blot验证其是否表达。结果琼脂糖凝胶电泳及基因测序证实重组的pcDNA3.1/myc-BRMS1cDNA的碱基组成与GenBank中的人BRMS1cDNA的基因片断组成相同。结论成功构建了乳腺癌转移抑制基因BRMS1真核表达载体并测序鉴定。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 转移抑制基因 BRMS1 基因表达
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肿瘤转移抑制基因-1在食管鳞癌组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义 被引量：6
2
作者 刘博 吕洋 +3 位作者 林媛媛 刘军超 李秀娟 乔海霞 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期536-539,548,共5页
目的探讨肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)在食管鳞癌(ESCC)组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义。方法采用SP免疫组织化学染色法检测136例ESCC及37例正常食管黏膜组织中TMSG-1蛋白的表达情况,分析TMSG-1与ESCC患者临床病理指标的关系;培养... 目的探讨肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)在食管鳞癌(ESCC)组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义。方法采用SP免疫组织化学染色法检测136例ESCC及37例正常食管黏膜组织中TMSG-1蛋白的表达情况,分析TMSG-1与ESCC患者临床病理指标的关系;培养人食管癌EC109细胞并用常用化疗药物顺铂(CDDP)干预,同时设对照组,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,半定量RT-PCR法检测细胞TMSG-1的表达情况。结果 TMSG-1在ESCC和正常食管黏膜的阳性率分别为52.2%(71/136)、94.6%(35/37),差异具有统计学意义(P<0.05)。TMSG-1的异常表达与ESCC组织学分级、患者的TNM分期、淋巴结转移情况相关。顺铂干预组EC109细胞的增殖抑制率较对照组显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR结果显示,干预组EC109细胞TMSG-1的mRNA表达明显高于对照组(P<0.01)。结论 TMSG-1的异常表达与ESCC的发展及转移相关,可作为较为理想的肿瘤标志物辅助诊断并指导临床治疗。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1) EC109细胞 免疫组织化学 RT-PCR 细胞增殖 顺铂(CDDP)
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超声联合血清OPN、IL-1β诊断乳腺癌骨转移的研究 被引量：4
3
作者 宋军 刘翔 《影像科学与光化学》 CAS 北大核心 2022年第5期1138-1142,共5页
本文探讨超声(US)联合血清骨桥蛋白(OPN)、白细胞介素-1β(IL-1β)在乳腺癌骨转移中的诊断价值。对60例乳腺癌患者进行了US检查,并通过酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定患者血清OPN和IL-1β水平。结果显示,US诊断骨转移的敏感性为82.35%,... 本文探讨超声(US)联合血清骨桥蛋白(OPN)、白细胞介素-1β(IL-1β)在乳腺癌骨转移中的诊断价值。对60例乳腺癌患者进行了US检查,并通过酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定患者血清OPN和IL-1β水平。结果显示,US诊断骨转移的敏感性为82.35%,特异性为80.77%。与未骨转移的患者相比,骨转移患者血清OPN和IL-1β水平均显著升高(P<0.001)。与US阴性组的患者相比,US阳性组患者血清OPN和IL-1β水平均显著升高(P<0.001)。随着US分级的升高,血清OPN和IL-1β水平均逐渐升高(P<0.05)。OPN诊断骨转移的敏感性为52.94%,特异性为96.15%。IL-1β诊断骨转移的敏感性为82.35%,特异性为84.62%。OPN和IL-1β联合诊断骨转移的敏感性为79.41%,特异性为80.77%。US、OPN和IL-1β在诊断乳腺癌骨转移中均具有不同的作用,其中,US和IL-1β的敏感性更高,OPN的特异性更高,联合更有利于乳腺癌骨转移的早期诊断。 展开更多
关键词 超声 乳腺癌 骨转移 骨桥蛋白 白细胞介素-1Β
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转移抑制基因nm23-H1及在母胎界面的表达 被引量：3
4
作者 侯晓帆 赵洪波 +2 位作者 金莉萍 唐传玲 李大金 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2009年第1期41-43,47,共4页
母胎界面的滋养细胞具有类似恶性肿瘤细胞的侵袭能力,但滋养细胞的侵袭受到严格控制。转移抑制基因nm23-H1广泛表达于多种肿瘤细胞,可有效抑制肿瘤细胞的侵袭与转移。nm23-H1亦在母胎界面表达,并可能对滋养细胞的增殖、侵袭、分化以及... 母胎界面的滋养细胞具有类似恶性肿瘤细胞的侵袭能力,但滋养细胞的侵袭受到严格控制。转移抑制基因nm23-H1广泛表达于多种肿瘤细胞,可有效抑制肿瘤细胞的侵袭与转移。nm23-H1亦在母胎界面表达,并可能对滋养细胞的增殖、侵袭、分化以及凋亡等生物学功能发挥重要的调节作用。进一步研究nm23-H1在母胎界面的生物学作用将有助于更加全面认识胚泡植入及滋养细胞侵袭调控,并且具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 NM23-H1 转移抑制基因 母胎界面 滋养细胞 免疫耐受 侵袭
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PD-L1表达作为生物标志物预测PD-1/PD-L1抑制剂治疗三阴性乳腺癌疗效的Meta分析 被引量：3
5
作者 李晓雯 项荣武 梁建坤 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1050-1056,共7页
目的采用Meta分析评价方法,探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand l,PD-L1)表达可否作为生物标志物预测程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)及其配体(PD-L1)抑制剂治疗三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC... 目的采用Meta分析评价方法,探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand l,PD-L1)表达可否作为生物标志物预测程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)及其配体(PD-L1)抑制剂治疗三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)的疗效。方法检索PubMed、Embase、Cochrane Library、ScienceDirect、Web of Science数据库,收集2019年9月前发表的关于PD-L1表达与PD-1/PD-L1抑制剂治疗TNBC疗效相关的临床研究。根据纳入排除标准,筛选文献并提取研究数据信息,采用纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa scale,NOS)进行文献质量评价,采用Stata/SE 15.1软件的Egger法及Begg法评估发表偏倚,并采用Review Manager 5.3软件进行统计分析。对于二分类变量,如客观缓解率(objective response rate,ORR)采用相对危险度(relative risk,RR)及95%可信区间(CI)作为效应量进行评估;对于生存时间数据,如无进展生存期(progression free survival,PFS)、总生存期(overall survival,OS)采用风险比(hazard ratio,HR)及95%可信区间(CI)进行评估。结果共纳入6篇文献(共845例患者),分析结果显示,PD-L1表达阳性(≥1%)患者与PD-L1表达阴性(<1%)患者比较,PD-L1阳性患者可获得更长的PFS及OS;然而PD-L1阳性患者的ORR并未显著高于PD-L1阴性患者。结论 PD-L1表达可作为预测患者疗后无进展生存期及总生存期的生物标志物,但无法预测患者的疗后客观缓解率。 展开更多
关键词 程序性死亡受体-1 探讨程序性死亡配体-1 三阴性乳腺癌 免疫检查抑制剂 生物标志物
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PD⁃1抑制剂联合全身化疗治疗复发转移性宫颈癌的临床效果观察 被引量：2
6
作者 王翠 李亚玲 《临床误诊误治》 CAS 2024年第2期76-81,共6页
目的探讨程序性细胞死亡受体-1(PD-1)抑制剂(卡瑞利珠单抗)免疫治疗联合全身化疗治疗复发转移性宫颈癌的临床效果。方法选择2019年2月—2021年6月定州市人民医院收治的复发转移性宫颈癌64例,依据随机数字表法分为研究组和对照组各32例... 目的探讨程序性细胞死亡受体-1(PD-1)抑制剂(卡瑞利珠单抗)免疫治疗联合全身化疗治疗复发转移性宫颈癌的临床效果。方法选择2019年2月—2021年6月定州市人民医院收治的复发转移性宫颈癌64例,依据随机数字表法分为研究组和对照组各32例。对照组给予紫杉醇联合顺铂全身化疗方案,研究组给予全身化疗方案+PD-1卡瑞利珠单抗免疫治疗。比较2组临床疗效,分析治疗前及治疗3个周期后鳞状细胞癌抗原(SCC)、外周血淋巴细胞/单核细胞(LMR)及血小板/淋巴细胞(PLR)指标水平及Kamofsky评分变化,并观察治疗期间毒性作用发生情况及随访期间患者总生存期。结果研究组总有效率、疾病控制率分别为93.75%(30/32)、96.88%(31/32),高于对照组的68.75%(22/32)、75.00%(24/32),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个周期后,2组血清SCC、PLR水平较治疗前降低,LMR较治疗前升高,且研究组改善程度优于对照组(P<0.05)。治疗后,2组Kamofsky评分均较治疗前升高,且研究组高于对照组(P<0.05)。治疗后研究组1、2年生存率及总生存期高于或长于对照组(P<0.05)。2组毒性作用多数为1~2级。研究组血小板下降和转氨酶升高比例分别为37.50%(12/32)和28.12%(9/32),高于对照组的18.75%(6/32)和9.38%(3/32),差异有统计学意义(P<0.05);2组贫血、白细胞下降、恶心、腹泻、乏力等毒性作用发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);研究组中发生反应性毛细血管增生症、甲状腺功能减退、皮疹、带状疱疹、过敏等经对症处理后症状消失。结论PD-1抑制剂联合全身化疗治疗复发转移性宫颈癌提高了临床效果、生存质量及生存率,延长生存期,改善了机体的炎症免疫反应状态,毒性作用较少,患者耐受性好。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 复发转移性 全身化疗 免疫治疗 程序性细胞死亡受体-1抑制剂 鳞状细胞癌抗原 外周血淋巴细胞/单核细胞 血小板/淋巴细胞
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KAI-1转移抑制基因在裸鼠肾癌转移中的意义
7
作者 杜宁克 潘东亮 +1 位作者 晋连超 那彦群 《中国医药科学》 2011年第7期41-43,共3页
目的通过临床回顾性分析发现T1-3aN0M0肾癌术后转移的发生与KAI-1表达缺失密切相关,提示KAI-1基因缺失可能参与了T1-3aN0M0肾癌术后转移。本研究拟运用动物实验进一步验证KAI-1在抑制肾癌转移方面的作用。方法选择1例肾癌KAI-1表达阴性... 目的通过临床回顾性分析发现T1-3aN0M0肾癌术后转移的发生与KAI-1表达缺失密切相关,提示KAI-1基因缺失可能参与了T1-3aN0M0肾癌术后转移。本研究拟运用动物实验进一步验证KAI-1在抑制肾癌转移方面的作用。方法选择1例肾癌KAI-1表达阴性标本,制成肾癌细胞悬液并传代培养。通过KAI-1质粒转染阴性肾癌细胞成KAI-1阳性肾癌细胞。分别用KAI-1阳性和阴性肾癌细胞各接种40只裸鼠,观察计算皮下成瘤生长情况和肺脏表面转移瘤数量。采用χ~2检验比较转移瘤数量差异。应用免疫组织化学和PCR方法检测KAI-1表达。结果所有裸鼠接种成瘤顺利,肿瘤增长迅速,接种后2～3周最为明显。40只KAI-1表达阳性裸鼠肺脏表面可见直径1～2mm灰红色米粒状结节,数量0～11个,平均6个。40只KAI-1表达阴性裸鼠肺脏表面结节数量0～57个,平均31个,数量比较χ~2=5.01,P〈0.05。结论 KAI-1表达缺失促进了肾癌细胞的转移,为临床检测KAI-1表达预测肾癌转移提供了可靠的实验证据。 展开更多
关键词 肾癌 转移 KAI-1 转移抑制基因
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乳腺癌腋窝淋巴结转移的超声特征及CYFRA21-1检测的价值 被引量：3
8
作者 马亚杰 解记臣 王崑 《中国现代普通外科进展》 CAS 2020年第9期722-724,共3页
探讨乳腺癌腋窝淋巴结(ALN)转移的超声特征及细针穿刺抽吸活检洗脱液中细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)检测的意义。选取2015年1月-2019年1月河南省濮阳市第五人民医院收治的186例乳腺癌患者(204个可疑ALN),所有患者均接受了超声乳腺及... 探讨乳腺癌腋窝淋巴结(ALN)转移的超声特征及细针穿刺抽吸活检洗脱液中细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)检测的意义。选取2015年1月-2019年1月河南省濮阳市第五人民医院收治的186例乳腺癌患者(204个可疑ALN),所有患者均接受了超声乳腺及ALN检测、细针穿刺抽吸活检;以病理学结果作为判断金标准,其中检出ALN转移阳性120个(转移组)、ALN转移阴性84个(非转移组);对比两组ALN的超声声像特征、细针穿刺抽吸活检洗脱液CYFRA21-1水平;以病理学结果作为金标准计算超声、洗脱液中CYFRA21-1检测诊断ALN转移的价值。转移组和非转移组的边界、内部回声、内部血流、微小钙化灶检出率、纵横径之比对比,差异有统计学意义(P<0.05);转移组ALN细针穿刺抽吸活检洗脱液CYFRA21-1水平显著高于非转移组,差异有统计学意义(P<0.05);超声诊断ALN发生转移的敏感度为77.50%、特异度为82.14%;CYFRA21-1诊断ALN发生转移的敏感度为85.00%、特异度为88.10%;超声联合CYFRA21-1诊断ALN发生转移的敏感度为96.67%、特异度为94.05%。依据超声检测特征、细针穿刺抽吸活检洗脱液中CYFRA21-1水平对于判断ALN发生转移具有较高的临床实用价值。 展开更多
关键词 乳腺癌 腋窝淋巴结转移 超声 细针穿刺 细胞角蛋白19片段21-1
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腹腔镜微创远端胃癌D2根治术治疗老年胃癌的效果及其对免疫功能、低氧诱导因子-1α和结肠癌转移相关基因1表达的影响 被引量：30
9
作者 汪昱 游红勇 +4 位作者 刘东涛 陈智敏 赵昕波 李海 孙坤 《中国医药导报》 CAS 2016年第8期21-24,共4页
目的探讨腹腔镜微创远端胃癌D2根治术治疗老年胃癌的效果及其对免疫功能、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达的影响。方法选取2009年2月~2013年8月于四川省崇州市人民医院诊治的78例老年胃癌患者为研究对象,... 目的探讨腹腔镜微创远端胃癌D2根治术治疗老年胃癌的效果及其对免疫功能、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达的影响。方法选取2009年2月~2013年8月于四川省崇州市人民医院诊治的78例老年胃癌患者为研究对象,采用随机数字表法分为腹腔镜微创远端胃癌D2根治术组(微创组)和开腹远端胃癌D2根治术组(传统组),每组各39例,比较两组患者的近远期疗效、并发症情况、治疗前后免疫功能、HIF-1α和MACC1表达水平。结果微创组患者术中出血量少于传统组,胃肠道功能恢复时间短于传统组,并发症发生率低于传统组(P<0.05);两组患者手术时间和淋巴结清扫数目比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者平均生存时间、1年生存率、2年生存率和局部复发与转移率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗后IgM、IgG、CD4^+和CD4^+/CD8^+水平较治疗前升高,CD8^+、HIF-1α和MACC1水平较治疗前降低,且微创组上述指标的改善程度明显优于传统组(P<0.05);两组患者治疗前后Ig A和CD3^+水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜微创远端胃癌D2根治术可显著提高老年胃癌患者的近期临床疗效,改善患者免疫功能,抑制肿瘤相关基因HIF-1α和MACC1的表达。 展开更多
关键词 腹腔镜 胃癌 免疫功能 低氧诱导因子-1Α 结肠癌转移相关基因1
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MACC1激活HGF/c-MET通路促进结直肠癌侵袭迁移的机制研究
10
作者 熊漫 谭益冰 +3 位作者 杨明 孙晓宁 刘思德 宋阳 《西安交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期86-93,共8页
目的 探讨结直肠癌转移相关基因-1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)对结直肠癌增殖、侵袭的作用及其机制。方法 分析TCGA数据库中结直肠癌样本和癌旁样本中MACC1的表达及MACC1高低表达组患者的生存差异;将HCT116细胞分... 目的 探讨结直肠癌转移相关基因-1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)对结直肠癌增殖、侵袭的作用及其机制。方法 分析TCGA数据库中结直肠癌样本和癌旁样本中MACC1的表达及MACC1高低表达组患者的生存差异;将HCT116细胞分为Vector(不做任何处理组)、MACC1 OE组(转染pcDNA3.1-MACC1过表达质粒),si-NC组(转染siRNA阴性对照)、si-MACC1组(转染MACC1 siRNA);MTT实验检测细胞活力;EDU和细胞克隆形成实验检测细胞增殖;划痕及侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭情况;RT-qPCR检测肝细胞生长因子受体(cellular-mesenchymal to epithelial transition factor, c-MET)的mRNA表达水平;Western blotting检测MACC1、c-MET的蛋白表达情况。将转染MACC1 OE的结直肠癌细胞HCT116接种至裸鼠皮下建立肿瘤模型,测量肿瘤体积及质量。结果 结直肠癌组织及结直肠细胞株中MACC1表达升高(P<0.05)。MACC1高表达组的患者总生存期低于MACC1低表达组(P=0.003)。MACC1过表达可提高HCT116细胞活力(F=86.070,P<0.001)。与si-NC组相比,si-MACC1组的HCT116细胞增殖能力、迁移、侵袭及克隆形成能力降低(P<0.01)。MACC1与c-MET蛋白的表达呈正相关(r=0.802,P=0.002)。过表达MACC1可提高c-MET的表达(t=13.532,P<0.001),而干扰MACC1可降低c-MET的表达(t=14.626,P<0.001);荧光素酶报告实验表明,MACC1可激活c-MET转录。MACC1过表达可提高裸鼠肿瘤体积及质量(P<0.01)。结论 MACC1可通过激活肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)/c-MET通路促进结直肠癌的侵袭和迁移。 展开更多
关键词 结直肠癌 结直肠癌转移相关基因-1(MACC1) 肝细胞生长因子(HGF) 肝细胞生长因子受体(c-MET) 侵袭 迁移
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部分引进猪种α1-岩藻糖转移酶基因多态性研究 被引量：4
11
作者 吴圣龙 鞠慧萍 +5 位作者 孙鹏翔 包文斌 朱国强 李碧春 谢恺舟 陈国宏 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第6期52-54,共3页
本研究采用PCR-RFLP技术对4个引进猪种杜洛克、约克夏、长白猪和皮特兰共计122头猪的FUT1基因进行了多态性分析。结果表明:4个猪种在该FUT1基因座位存在多态性,但抗性基因型AA仅在杜洛克和皮特兰猪中分布。卡方检验结果表明,长白猪与皮... 本研究采用PCR-RFLP技术对4个引进猪种杜洛克、约克夏、长白猪和皮特兰共计122头猪的FUT1基因进行了多态性分析。结果表明:4个猪种在该FUT1基因座位存在多态性,但抗性基因型AA仅在杜洛克和皮特兰猪中分布。卡方检验结果表明,长白猪与皮特兰间FUT1基因基因型分布差异极显著,长白猪与杜洛克猪之间差异显著,约克夏与皮特兰间差异也显著。 展开更多
关键词 引进猪种 α1-岩藻糖转移酶基因 PCR-RFLP
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猪、牛成纤维细胞α-1，3-半乳糖基转移酶基因的敲除以及人白细胞抗原-G1基因的敲入 被引量：4
12
作者 周健 林爱星 陈永福 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期301-306,共6页
构建了敲除猪α-1,3-GT并敲入人白细胞抗原HLA-G1基因的打靶载体pZJ,其中以新霉素抗性基因（Neo）为正筛选基因,绿色荧光蛋白基因（GFP）为负筛选基因。采用优化的脂质体转染法将打靶载体pZJ转染于一个长势良好的胎猪成纤维细胞系中,经7... 构建了敲除猪α-1,3-GT并敲入人白细胞抗原HLA-G1基因的打靶载体pZJ,其中以新霉素抗性基因（Neo）为正筛选基因,绿色荧光蛋白基因（GFP）为负筛选基因。采用优化的脂质体转染法将打靶载体pZJ转染于一个长势良好的胎猪成纤维细胞系中,经7天G418（600μg/ml）药物筛选,共获得30个Neo抗性细胞克隆,其中12个为非绿色荧光细胞克隆,7个扩大培养良好,提取阳性克隆细胞的基因组DNA并进行PCR检测。经PCR结果检测,打靶载体转入到胎猪成纤维细胞中,其中3个非荧光阳性单克隆细胞在细胞基因组中进行了定点整合。以同样的脂质体转染条件将pZJ转染牛胎儿成纤维细胞,经筛选并对其进行PCR检测,其中2个均为定点整合阳性。该研究为今后克隆出表达HLA-G1而不表达α-1,3-GT基因的个体猪,从而提供可以真正用于临床的异种器官打下了基础,也为猪牛之间的跨物种敲除提供了一个佐证。 展开更多
关键词 α-1 3-半乳糖基转移酶基因 基因打靶 人白细胞抗原HLA-G1
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敲除猪α1,3-半乳糖基转移酶基因并敲入HLA-G1基因的打靶载体构建 被引量：2
13
作者 周健 林爱星 陈永福 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期498-502,共5页
本实验室已克隆到猪α1,3半乳糖基转移酶基因(α1,3GT,第九外显子不全)。其中pMD3arm载体上有5.0kb的片段,该片段包括了小部分第8外显子,完整的第8内含子和一部分第9外显子。本实验中利用LAPCR的方法,从猪的基因组中获得约2.0kb的猪α1,... 本实验室已克隆到猪α1,3半乳糖基转移酶基因(α1,3GT,第九外显子不全)。其中pMD3arm载体上有5.0kb的片段,该片段包括了小部分第8外显子,完整的第8内含子和一部分第9外显子。本实验中利用LAPCR的方法,从猪的基因组中获得约2.0kb的猪α1,3GT的第9外显子序列的扩增产物,将片段克隆于pGEMTeasy载体。将5.0kb和2.0kb片段分别作为打靶载体的5′,3′同源臂,以neo为正选择标记基因,以GFP为负选择标记基因,构建敲除猪α1,3半乳糖基转移酶基因并同时能表达人白细胞抗原HLAG1基因的的打靶载体pZJ。经酶切图谱和测序结果的鉴定成功地构建出敲除猪α1,3半乳糖基转移酶基因并同时能表达人白细胞抗原HLAG1基因的正负双向选择的打靶载体,为异种器官移植提供了很好的探索。 展开更多
关键词 α1 3-半乳糖基转移酶基因 基因打靶 人白细胞抗原HLA-G1
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miR-139-5p靶向调控DNMT1抑制胶质母细胞瘤的生长和转移 被引量：3
14
作者 李传坤 王伟 +1 位作者 姜海涛 何雅玲 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期238-244,共7页
目的考察miR-139-5p在胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)中的表达及生物学作用,以及miR-139-5p对DNA甲基转移酶1(DNMT1)的调控作用。方法通过qRT-PCR检测GBM肿瘤组织、配对癌旁组织、人正常神经胶质细胞系HEB和人神经胶质瘤细胞系U251中m... 目的考察miR-139-5p在胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)中的表达及生物学作用,以及miR-139-5p对DNA甲基转移酶1(DNMT1)的调控作用。方法通过qRT-PCR检测GBM肿瘤组织、配对癌旁组织、人正常神经胶质细胞系HEB和人神经胶质瘤细胞系U251中miR-139-5p的表达。通过转染miR-139-5p模拟物来上调U251细胞中miR-139-5p的表达,通过转染靶向DNMT1的siRNA(DNMT1-siRNA)来下调DNMT1的表达。qRT-PCR、Western blotting、免疫组织化学和免疫荧光检测组织和细胞中DNMT1和2型神经纤维瘤病(NF2)的表达。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、流式细胞术和Matrigel Transwell评估U251细胞的增殖、凋亡和侵袭能力。结果与癌旁组织或HEB细胞相比,GBM组织和U251细胞中的miR-139-5p表达被抑制(P<0.05)。与对照细胞相比,转染miR-139-5p模拟物明显下调了DNMT1的表达并上调了NF2的表达(P<0.05)。与对照细胞相比,转染DNMT1-siRNA明显促进了NF2的表达(P<0.05)。转染miR-139-5p模拟物或DNMT1-siRNA均可诱导U251细胞凋亡并抑制细胞侵袭(P<0.05)。结论 miR-139-5p在GBM中发挥抗癌作用,miR-139-5p通过靶向负调控DNMT1来抑制肿瘤的增殖和转移。 展开更多
关键词 miR-139-5p 胶质母细胞瘤 DNA甲基转移酶1 2型神经纤维瘤病(NF2)基因 细胞增殖 细胞侵袭
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谷胱甘肽-S-转移酶-Π和p53在乳腺癌的表达及其相互关系 被引量：1
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作者 吕正梅 贾雪梅 +2 位作者 贾友苏 吴强 王惠珠 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期27-30,F002,共5页
目的 :探讨 p5 3、谷胱甘肽 S 转移酶 π(GST π)在乳腺癌表达的病理意义及相互间关系。 方法 :应用免疫组化SP法检测 91例未经抗肿瘤治疗的原发性乳腺癌组织和 1 8例复治乳腺癌中GST π、p5 3蛋白表达。 结果 :( 1 ) p5 3、GST π与肿... 目的 :探讨 p5 3、谷胱甘肽 S 转移酶 π(GST π)在乳腺癌表达的病理意义及相互间关系。 方法 :应用免疫组化SP法检测 91例未经抗肿瘤治疗的原发性乳腺癌组织和 1 8例复治乳腺癌中GST π、p5 3蛋白表达。 结果 :( 1 ) p5 3、GST π与肿瘤大小、组织学类型、临床分期、淋巴结转移及是否化疗复治无明显相关。 ( 2 )p5 3与组织学分级有关。( 3 ) p5 3与GST π蛋白表达呈负相关。 结论 :GST π与 p5 3在乳腺癌的表达密切相关 ,GST π可能参与乳腺癌的发病。 展开更多
关键词 P53基因 谷胱甘肽-S转移酶-π 乳腺癌 肿瘤病理学 免疫组化SP法 临床分期 肿瘤转移
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VEGF-C、MT1-MMP在乳腺癌淋巴管生成过程中的共表达机制 被引量：1
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作者 姚广裕 何萍 +2 位作者 杨名添 刘民锋 叶长生 《山东医药》 CAS 2012年第35期5-7,共3页
目的探讨乳腺癌淋巴管生成过程中血管内皮生长因子C(VEGF-C)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)共表达的机制。方法将乳腺癌细胞株MCF-7分为4组,空白对照组不干预、转染组转入表皮生长因子受体2(ErbB2)基因、空白质粒组加入空白质粒、加... 目的探讨乳腺癌淋巴管生成过程中血管内皮生长因子C(VEGF-C)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)共表达的机制。方法将乳腺癌细胞株MCF-7分为4组,空白对照组不干预、转染组转入表皮生长因子受体2(ErbB2)基因、空白质粒组加入空白质粒、加药组于转染ErbB2后加入曲妥珠单抗。采用Western印迹法和RT-PCR法分别检测各组VEGF-C和MT1-MMP蛋白、mRNA表达情况。结果空白对照组、空白质粒组仅检测到少量的VEGF-C和MT1-MMP蛋白、mRNA的表达;转染组VEGF-C和MT1-MMP蛋白、mRNA表达明显增强;加药组VEGF-C和MT1-MMP蛋白表达明显低于转染组。结论 VEGF-C和MT1-MMP在乳腺癌中存在共同表达的机制,即均受ErbB2基因的调控;MT1-MMP可能参与乳腺癌的淋巴管生成。 展开更多
关键词 膜型基质金属蛋白酶-1 血管内皮生长因子C 表皮生长因子受体2基因 曲妥珠单抗 乳腺肿瘤 乳腺癌
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JNKK1蛋白表达对乳腺癌转移和预后的影响
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作者 周健 袁传涛 戴功 《中国医药导报》 CAS 2010年第16期11-13,共3页
目的:探讨JNKK1基因表达对乳腺癌转移和预后的影响。方法:应用免疫组织化学方法检测103例乳腺癌组织中JNKK1蛋白表达,结合乳腺癌临床表现进行分析。结果:在乳腺癌组织中,JNKK1蛋白阳性表达率为44.7%(46/103),阴性表达率为55.3%(57/103)... 目的:探讨JNKK1基因表达对乳腺癌转移和预后的影响。方法:应用免疫组织化学方法检测103例乳腺癌组织中JNKK1蛋白表达,结合乳腺癌临床表现进行分析。结果:在乳腺癌组织中,JNKK1蛋白阳性表达率为44.7%(46/103),阴性表达率为55.3%(57/103)。JNKK1蛋白阴性表达的乳腺癌转移率高(P<0.01),分化程度差,患者大于5年生存率低(P<0.01)。结论:JNKK1蛋白表达与乳腺癌转移密切相关,检测JNKK1蛋白表达可作为诊断与治疗乳腺癌的参考指标。 展开更多
关键词 乳腺癌 抑癌基因 JNKK1 转移 免疫组织化学
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组织基质金属蛋白酶抑制剂-1、2在鼻咽癌浸润与转移中的机制初探
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作者 冯海燕 黄光武 《广西中医学院学报》 2003年第3期13-15,共3页
[目的 ]探讨组织基质金属蛋白酶抑制剂 - 1、2 (Tissue lnhibitors of the MMP- 1、2 ,TIMP- 1、2 )与鼻咽癌浸润与转移的关系。 [方法 ]应用免疫组化 S- P法 ,检测 4 8例鼻咽癌组织 ,16例鼻咽粘膜炎组织中 TIMP- 1,TIMP- 2的表达。 [结... [目的 ]探讨组织基质金属蛋白酶抑制剂 - 1、2 (Tissue lnhibitors of the MMP- 1、2 ,TIMP- 1、2 )与鼻咽癌浸润与转移的关系。 [方法 ]应用免疫组化 S- P法 ,检测 4 8例鼻咽癌组织 ,16例鼻咽粘膜炎组织中 TIMP- 1,TIMP- 2的表达。 [结果 ]鼻咽癌与鼻咽粘膜炎两组患者 ,TIMP- 1,TIMP- 2比较有统计学意义 (P<0 .0 1) ;随着鼻咽癌原发灶从 T1 期到 T3期以及鼻咽癌临床分期从 期到 期 ,TIMP- 1都有增加的趋势。 [结论 ]TIMP- 1可能作为鼻咽癌局部浸润的信号。 展开更多
关键词 组织基质金属蛋白酶抑制剂-1 组织基质金属蛋白酶抑制剂-2 鼻咽癌 肿瘤浸润 肿瘤转移
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miR-217、USP10、LZTS1在晚期非小细胞肺癌癌组织与癌旁组织中的表达及与临床疗效的关系
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作者 谢芳芳 樊静 李建梅 《临床误诊误治》 2025年第8期73-79,共7页
目的探讨微小核糖核酸-217(miR-217)、泛素特异性肽酶10(USP10)、亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织与癌旁组织中的表达及与临床疗效的关系。方法选取2021年1月至2023年1月收治的晚期NSCLC患者108例作为... 目的探讨微小核糖核酸-217(miR-217)、泛素特异性肽酶10(USP10)、亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织与癌旁组织中的表达及与临床疗效的关系。方法选取2021年1月至2023年1月收治的晚期NSCLC患者108例作为研究对象,比较癌组织与癌旁组织中miR-217、USP10、LZTS1水平:均给予个体化治疗,根据1年后随访病情分为疾病控制组与疾病进展组,比较2组临床资料及癌组织miR-217、USP10、LZTS1水平,分析miR-217、USP10、LZTS1水平与临床疗效的关系及预测价值,对比不同miR-217、USP10、LZTS1表达患者1年生存率。结果晚期NSCLC患者癌组织miR-217、LZTS1 mRNA低于癌旁组织,USP10 mRNA高于癌旁组织(P<0.01);108例晚期NSCLC患者经治疗后,将44例部分缓解患者和33例稳定患者纳入疾病控制组,31例进展患者纳入疾病进展组;疾病进展组癌组织miR-217、LZTS1 mRNA低于疾病控制组,USP10 mRNA高于疾病控制组(P<0.01);多因素logistic回归分析显示,在校正其他因素前后,miR-217、USP10、LZTS1均是晚期NSCLC患者临床疗效的独立影响因素(P<0.01)。癌组织miR-217、USP10、LZTS1联合预测晚期NSCLC患者疾病进展的价值明显高于各指标单独预测(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析显示,miR-217、LZTS1低表达患者1年生存率为35.00%(14/40)、31.71%(13/41)低于高表达患者的69.70%(46/66)、72.31%(47/65),USP10高表达患者1年生存率为32.61%(15/46)低于低表达患者的75.00%(45/60),差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-217、LZTS1在晚期NSCLC患者癌组织中呈低表达,USP10呈高表达,三者与其临床疗效独立相关,能有效预测临床疗效,且与生存预后联系紧密。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞 晚期 微小核糖核酸-217 泛素特异性肽酶10 亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1 临床疗效 预测价值 生存曲线
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乳腺癌细胞中E1AF、MMP-2、VEGF的表达及意义 被引量：2
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作者 郭璐 李贵新 +2 位作者 路中 李文通 张禄尧 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第27期37-38,共2页
目的探讨乳腺癌发生侵袭和转移的分子机制。方法应用免疫细胞化学技术检测雌激素受体阳性(ER+)乳腺癌细胞MCF-7和雌激素受体阴性(ER-)乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435s中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)表达,采用RT-... 目的探讨乳腺癌发生侵袭和转移的分子机制。方法应用免疫细胞化学技术检测雌激素受体阳性(ER+)乳腺癌细胞MCF-7和雌激素受体阴性(ER-)乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435s中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)表达,采用RT-PCR法检测细胞株中E1AF mRNA表达。结果 MDA-MB-231中E1AF mNA、MMP-2及VEGF表达水平均明显高于MCF-7和MDA-MB-435s,且E1AF表达与MMP-2、VEGF呈正相关。结论 MMP-2、VEGF与E1AF在肿瘤细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用,其机制可能在转录水平调节基因表达,增加肿瘤侵袭性。E1AF可能是乳腺癌侵袭转移的重要因子。 展开更多
关键词 E1AF基因 基质金属蛋白酶-2 血管内皮生长因子 乳腺癌细胞 雌激素受体
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