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他莫昔芬抑制G蛋白偶联雌激素受体沉默的乳腺癌相关成纤维细胞的增殖并促进其凋亡 被引量：6
1
作者 严玉钊 余腾骅 +3 位作者 涂刚 柳满然 袁杰 杨光伦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1189-1193,1199,共6页
目的通过构建G蛋白偶联雌激素受体(GPER)的慢病毒短发夹RNA(shRNA)表达载体,感染人乳腺癌相关成纤维细胞(BCAF)后,探讨他莫昔芬对BCAF增殖及凋亡的影响。方法构建GPER-RNAi慢病毒载体及对照病毒载体后,进行病毒包装,实时定量PCR检测GPER... 目的通过构建G蛋白偶联雌激素受体(GPER)的慢病毒短发夹RNA(shRNA)表达载体,感染人乳腺癌相关成纤维细胞(BCAF)后,探讨他莫昔芬对BCAF增殖及凋亡的影响。方法构建GPER-RNAi慢病毒载体及对照病毒载体后,进行病毒包装,实时定量PCR检测GPER mRNA水平,Western blot法检测GPER蛋白水平;将BCAF分为4个组,包括阴性对照组、GPER-RNAi组、阴性对照联合10-8mmol/L他莫昔芬组和GPER-RNAi联合10-8mmol/L他莫昔芬组,CCK-8法检测他莫昔芬处理后细胞增殖,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测他莫昔芬处理后的细胞凋亡情况。结果 Western blot结果显示感染慢病毒的BCAF中,GPER表达显著降低。与阴性对照相比,CCK-8法检测结果显示他莫昔芬显著促进BCAF增殖。GPER敲低的BCAF,他莫昔芬的促增殖作用减弱;流式细胞术检测结果显示,他莫昔芬抑制BCAF凋亡,但在GPER敲低的BCAF,他莫昔芬的抑制细胞凋亡作用减弱。结论 Lenti-GPER-shRNA慢病毒感染BCAF,可有效沉默GPER表达;GPER敲低的BCAF,他莫昔芬刺激细胞增殖和抑制凋亡作用减弱。 展开更多
关键词 G蛋白偶联雌激素受体(GPER) 慢病毒 乳腺癌相关成纤维细胞 他莫昔芬
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乳腺癌相关成纤维细胞miRNA表达的检测和分析 被引量：7
2
作者 曾宗跃 胡萍 +4 位作者 唐曦 张海龙 杜艳娥 文思阳 柳满然 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1071-1075,共5页
目的研究人乳腺癌微环境癌相关成纤维细胞(CAF)与正常成纤维细胞(NF)miRNA表达的差异及其对CAF的生物学功能的影响。方法运用1型胶原酶消化法分别处理临床乳腺癌患者的癌组织和对应癌旁组织标本,原代分离培养CAF和NF细胞;利用免疫荧光法... 目的研究人乳腺癌微环境癌相关成纤维细胞(CAF)与正常成纤维细胞(NF)miRNA表达的差异及其对CAF的生物学功能的影响。方法运用1型胶原酶消化法分别处理临床乳腺癌患者的癌组织和对应癌旁组织标本,原代分离培养CAF和NF细胞;利用免疫荧光法和Western blot法分析CAF和NF细胞成纤维细胞分泌蛋白(FSP)的表达情况,对所分离培养的细胞进行纯度和特性鉴定;利用TranswellTM实验比较CAF与NF细胞的侵袭能力;利用miRNA芯片和芯片结果显著性差异(SAM)分析法分析CAF与NF细胞miRNA表达的差异;对差异miR-205和miR-221,在原代培养的CAF和NF进行实时定量PCR(qRT-PCR)验证;利用多种生物信息学软件预测差异miRNA的靶基因;利用DAVID软件对靶基因进行信号通路富集度分析。利用ELISA检测TGF-β和IL-6信号通路的核心蛋白基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-2和MMP-9的表达差异。结果成功分离得到原代培养的CAF与NF细胞,纯度大于95%;与NF细胞相比,CAF细胞的侵袭能力明显增强;miRNA芯片分析结果显示,CAF有10个变化倍数>1.5的异常表达miRNA(P<0.05),其中3个上调表达(miR-221-5p、miR-31-3p、miR-221-3p),7个下调表达(miR-205、miR-200b、miR-200c、miR-141、miR-101、miR-342-3p、let-7g)。信号通路富集度分析发现,miRNA靶基因与细胞分化、细胞黏附、细胞迁移、细胞增殖、细胞分泌和细胞间相互作用等密切相关,其中,异常表达的miR-200b/c和miR-141等miRNA通过抑制其靶基因,影响TGF-β信号通路、IL-6信号通路,进而影响CAF的侵袭和转移。结论人乳腺癌微环境CAF的miRNA表达谱发生显著变化,CAF细胞中异常表达miRNA可能参与了NF向CAF的转化,并与CAF细胞的增殖、黏附、侵袭、转移有密切关系。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞 乳腺癌 miRNA表达谱 肿瘤微环境
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乳腺癌相关成纤维细胞对MCF7细胞调控效应的研究
3
作者 李振 屠道远 +1 位作者 甄林林 刘敏敏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第3期348-351,358,共5页
目的研究乳腺癌相关成纤维细胞(CAFs)对MCF7细胞的调控效应,探讨肿瘤微环境在乳腺癌发展中的作用。方法采用Ⅰ型胶原酶法分离并培养CAFs。DCFHDA法进行活性氧自由基(ROS)检测。应用鸡胚卵黄囊尿囊膜进行血管生成实验。结果共培养乳腺癌M... 目的研究乳腺癌相关成纤维细胞(CAFs)对MCF7细胞的调控效应,探讨肿瘤微环境在乳腺癌发展中的作用。方法采用Ⅰ型胶原酶法分离并培养CAFs。DCFHDA法进行活性氧自由基(ROS)检测。应用鸡胚卵黄囊尿囊膜进行血管生成实验。结果共培养乳腺癌MCF7细胞和CAFs能促进二者增殖,并可促进ROS生成。在共培养体系中加入过氧化物酶能抑制ROS生成。另外,共培养能明显促进乳腺癌细胞新生血管的生成,而在CAFs中过表达过氧化物酶能显著抑制该过程。结论 CAFs对乳腺癌MCF7细胞的ROS表达具有调节作用,并可促进肿瘤新血管生成。 展开更多
关键词 乳腺癌相关的成纤维细胞 乳腺癌MCF7细胞 活性氧自由基 血管生成
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二甲双胍阻断乳腺癌细胞-间质细胞的交互作用:基于抑制肿瘤相关成纤维细胞缺氧诱导因子-1α的表达
4
作者 邵珊 白薇超 +3 位作者 邹鹏程 罗敏娜 赵新汉 雷建军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期428-436,共9页
目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(... 目的探讨二甲双胍(Met)对乳腺癌肿瘤-间质细胞交互作用的影响及机制。方法将肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与乳腺癌细胞共培养,运用二甲双胍进行干预,分为对照组和Met干预组,ELISA及RT-qPCR检测Met对CAFs中HIF-1α、p-AMPK、基质衍生因子-1(SDF-1)和白细胞介素-8(IL-8)等因子的表达变化以及Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用外源性SDF-1、IL-8干预后,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。运用缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)shRNA或过表达质粒调节CAFs-HIF-1α的表达,以及AMPK-shRNA抑制AMPK的表达,并运用OG和2-OXO调节脯氨酸羟化酶的表达,及运用外源性TGF-β1干预后,Western blot及RT-qPCR检测CAFs中p-AMPK、HIF-1α、SDF-1、IL-8的表达,Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果相较于对照组,Met干预组中CAFs的p-AMPK、SDF-1和IL-8的表达水平升高(P<0.05),HIF-1α表达水平下降(P<0.05),AMPK的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),Met组中乳腺癌细胞侵袭能力下降(P<0.05)。外源性SDF-1、IL-8干预可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用,增加乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05)。过表达HIF-1α及运用脯氨酸羟化酶抑制剂OG提高HIF-1α的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α、SDF-1及IL-8表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);运用HIF-1α-shRNA及运用脯氨酸羟化酶激活剂2-OXO抑制HIF-1α的表达后,降低乳腺癌细胞的侵袭能力(P<0.05);运用AMPK-shRNA抑制p-AMPK的表达后,可降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05);加入外源性TGF-β1后,可部分降低Met对CAFs中HIF-1α表达的抑制作用,并可部分降低Met对乳腺癌细胞侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论Met通过抑制CAFs-HIF-1α的表达进而发挥阻断乳腺癌细胞-间质细胞交互作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 缺氧诱导因子-1Α 二甲双胍 磷酸化-AMPK 肿瘤微环境
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肿瘤相关成纤维细胞在乳腺癌中的作用研究进展 被引量：2
5
作者 陈薏竹 朱荔 +1 位作者 韦禹帆 李席如 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期482-488,共7页
乳腺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一。近年来肿瘤的各类研究均取得了诸多进展。随着对肿瘤认识的不断深入,肿瘤细胞生长的微环境对癌症发生发展的影响受到越来越多的关注。肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)作为肿瘤微环境的重要成分,受肿瘤... 乳腺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一。近年来肿瘤的各类研究均取得了诸多进展。随着对肿瘤认识的不断深入,肿瘤细胞生长的微环境对癌症发生发展的影响受到越来越多的关注。肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)作为肿瘤微环境的重要成分,受肿瘤调控的同时还可通过多种途径释放细胞因子、外泌体等参与调节免疫微环境、重塑细胞外基质,以及促进肿瘤发生、迁移、侵袭和耐药等过程。本文对CAFs在乳腺癌中作用的最新研究进展进行综述,阐述免疫微环境中CAFs与乳腺癌细胞的相互作用模式,以及CAFs促进乳腺癌细胞增殖、侵袭、转移、耐药等恶性生物学行为的多种途径,探讨以CAFs为靶点进行乳腺肿瘤早期筛查及治疗的潜在效能。 展开更多
关键词 乳腺癌 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞
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甲状腺乳头状癌中VCAN、THBS2蛋白的表达与肿瘤相关成纤维细胞的关系
6
作者 武胤彤 方艳 +5 位作者 彭薇 汪树静 黄山 王弦 虞红珍 吴强 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第1期60-69,共10页
目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中多功能蛋白聚糖(versican, VCAN)、血小板反应蛋白2(thrombospondin 2, THBS2)的表达及与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)的关系和临床病理意义... 目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中多功能蛋白聚糖(versican, VCAN)、血小板反应蛋白2(thrombospondin 2, THBS2)的表达及与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)的关系和临床病理意义。方法 采用生物信息学技术分析,从基因表达综合数据库(gene expression omnibus, GEO)及癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库提取PTC单细胞测序数据,利用加权基因共表达网络分析识别CAFs相关基因,并对与CAFs相关的枢纽基因进行富集分析;采用免疫组化EnVision法检测130例PTC组织中VCAN、THBS2和α-SMA的表达,采用Masson染色法评估肿瘤间质纤维化程度。分析它们之间的关系,探讨其临床病理意义。结果 生物信息学分析显示VCAN、THBS2位于GEO数据库和TCGA数据库与CAFs相关性最强模块的交集核心基因中,与CAFs显著相关,富集分析显示VCAN、THBS2主要参与细胞外基质相关通路。PTC中CAFs的增生率为83.1%(108/130),VCAN、THBS2阳性率分别为96.9%(126/130)、75.4%(98/130)。PTC的间质纤维化指数中位数为32.4,四分位距为22.7~50.0。CAFs的高度增生与淋巴结转移(P<0.001)、高TNM分期(P<0.05)呈正相关,并且与PTC的组织学亚型相关。VCAN表达、THBS2表达及PTC间质纤维化程度与淋巴结转移均呈正相关(P<0.001,P<0.05,P<0.001),并且THBS2表达及PTC间质纤维化程度与PTC的组织学亚型相关。肿瘤间质α-SMA阳性细胞百分比与VCAN及THBS2的免疫反应评分(IRS)均呈正相关(r_(s)=0.713,P<0.001;r_(s)=0.646,P<0.001)。PTC中Masson染色面积百分比与肿瘤间质α-SMA阳性细胞百分比、VCAN及THBS2的IRS均呈正相关(r_(s)=0.892,P<0.001;r_(s)=0.729,P<0.001;r_(s)=0.616,P<0.001)。结论 VCAN与THBS2可作为评估PTC侵袭性与淋巴结转移的潜在标志物;VCAN、THBS2与CAFs的密切关系为进一步探究PTC的恶性生物学行为提供了依据。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 甲状腺乳头状癌 肿瘤相关成纤维细胞 VCAN THBS2
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肿瘤相关成纤维细胞中FAP的表达水平对食管鳞癌恶性进展的影响
7
作者 李佳怡 张理 +7 位作者 刘书培 陈攀 张小漫 牛浩瑾 杨平娟 高震东 石林林 高社干 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期13-21,共9页
目的探究成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达水平及对其预后的影响,进一步研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中FAP的表达... 目的探究成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达水平及对其预后的影响,进一步研究肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。方法首先,通过TCGA数据库评估FAP在31种肿瘤的癌和癌旁组织中表达水平的差异,并分析其对ESCC患者预后的影响;进一步收集高发区ESCC患者癌和癌旁新鲜组织用于原代CAFs和癌旁正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs)的提取和分离,利用qRT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光进行表型鉴定和功能分析;收集NFs、CAFs和经FAP抑制剂(FAPi)处理后的CAFs细胞上清,与KYSE150细胞构建体外共培养模型,通过EdU法、CCK-8法、平板克隆、Transwell和划痕实验探究FAP表达水平对KYSE150细胞增殖、侵袭和迁移等恶性行为的影响;最后,通过构建食管癌小鼠皮下荷瘤模型,在体内探究CAFs中FAP的表达对ESCC恶性进展的影响。结果在包含ESCC在内的10种恶性肿瘤中,癌组织中FAP的表达均显著高于癌旁组织,且ESCC中FAP的高表达提示患者的不良预后,并且FAP可作为ESCC患者预后的独立危险因素;从ESCC及其癌旁组织中成功提取、分离出原代CAFs和NFs,经鉴定表型正确;体外共培养结果显示,与NFs相比,CAFs高表达FAP并显著促进ESCC细胞的增殖、侵袭和迁移能力,而FAPi处理可显著抑制上述恶性行为;体内实验证实FAPi和CAFs去激活处理,对荷瘤小鼠肿瘤生长具有显著抑制作用。结论在ESCC中,FAP的高表达与CAFs的活化和患者的不良预后呈正相关,促进肿瘤的恶性进展。 展开更多
关键词 食管鳞癌 成纤维细胞活化蛋白 肿瘤相关成纤维细胞
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胃癌Lauren分型中癌相关成纤维细胞分泌因子的差异表达
8
作者 琚璐 任国涛 +4 位作者 郑诗祺 孙也淇 蔡磊 王瑞芬 王立峰 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第3期324-333,共10页
目的探讨胃癌Lauren分型中弥漫型胃癌相关成纤维细胞(diffuse-type gastric cancer-associated fibroblasts,DGC-CAFs)和肠型胃癌相关成纤维细胞(intestinal-type gastric cancer-associated fibroblasts,IGC-CAFs)分泌因子的表达差异... 目的探讨胃癌Lauren分型中弥漫型胃癌相关成纤维细胞(diffuse-type gastric cancer-associated fibroblasts,DGC-CAFs)和肠型胃癌相关成纤维细胞(intestinal-type gastric cancer-associated fibroblasts,IGC-CAFs)分泌因子的表达差异。方法选取手术切除的6例胃癌新鲜标本,其中弥漫型胃癌(diffuse-type gastric cancer,DGC)和肠型胃癌(intestinal-type gastric cancer,IGC)各3例,分别提取DGC-CAFs、IGC-CAFs原代细胞以获得条件培养基,采用高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)检测DGC-CAFs与IGC-CAFs分泌因子的表达;根据HPLC-MS/MS结果,选择3个差异因子进行免疫组化检测,研究两者在DGC和IGC配对标本中的表达差异;收集GEO和TCGA数据库中1174个胃癌转录组数据,通过ESTIMATE获取基质细胞的分布并对DGC和IGC进行基质评分,应用Kaplan-Meier生存分析研究高基质评分和癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)比例与预后的关系,运用GO富集进行基因和生物学功能分析。结果HPLC-MS/MS分析显示,在DGC-CAFs和IGC-CAFs中均检测到的蛋白仅有10种,即SPARC、COL6A1、COL1A2、COL1A1、COL3A1、FN1、DCN、ACTG1、TIMP1和SHROOM3。在DGC-CAFs中10种蛋白表达均高于IGC-CAFs,且比值>2的蛋白为COL3A1(5.28)、COL1A2(3.98)、DCN(3.71)、TIMP1(3.40)、COL6A1(3.35)、ACTG1(3.13)、COL1A1(2.84)和SHROOM3(2.50)。3例DGC-CAFs中均检测到TUBB和BASP1,1例IGC-CAFs中检测到TUBB,3例IGC-CAFs中均未检测到BASP1。免疫表型:DCN、ACTG1和COL3A1在DGC中的表达高于IGC,与HPLC-MS/MS分析一致。生信分析显示,DGC的基质评分高于IGC,与预后差相关。分析细胞组分发现,相关基因富集在ECM、含胶原的ECM和细胞-细胞连接处,其相关分子功能和生物学过程也以该组分为基础,与HPLC-MS/MS分析一致。结论DGC-CAFs和IGC-CAFs的分泌因子在种类、含量上均存在差异,其差异多集中在ECM相关的信号通路上;基质中高CAFs含量可能通过影响ECM的基因表达和受体通路等影响胃癌患者预后。 展开更多
关键词 胃肿瘤 Lauren分型 癌相关成纤维细胞 高效液相色谱-质谱联用 分泌因子
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雷公藤多苷对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞脂肪分化、炎症及纤维化的影响 被引量：1
9
作者 朱劲 朱姝 +2 位作者 钟宇玲 陈宏 林文劼 《眼科新进展》 北大核心 2025年第3期202-210,共9页
目的探究雷公藤多苷(TGs)对甲状腺相关眼病(TAO)眼眶成纤维细胞(OFs)脂肪分化、炎症及纤维化的影响。方法首先培养从12例TAO患者中提取的OFs并进行鉴定。采用CCK-8实验检测不同浓度TGs(0、12.5、25.0、50.0、100.0 mg·L^(-1))对OF... 目的探究雷公藤多苷(TGs)对甲状腺相关眼病(TAO)眼眶成纤维细胞(OFs)脂肪分化、炎症及纤维化的影响。方法首先培养从12例TAO患者中提取的OFs并进行鉴定。采用CCK-8实验检测不同浓度TGs(0、12.5、25.0、50.0、100.0 mg·L^(-1))对OFs活性的影响。其次,诱导OFs脂肪分化表型并分组:对照组(Control组)、脂肪分化组(DM组)、不同浓度TGs组(12.5 mg·L^(-1)TGs组、25.0 mg·L^(-1)TGs组、50.0 mg·L^(-1)TGs组);诱导OFs炎症表型并分组:Control组、白介素-1β(IL-1β)诱导组(IL-1β组)、不同浓度TGs组(分组及浓度均同上);诱导OFs纤维化表型并分组:Control组、TGF-β1诱导组(TGF-β1组)、不同浓度TGs组(分组及浓度均同上)。油红O染色检测脂肪分化表型各组OFs内脂滴;ELISA检测炎症表型各组OFs的IL-6与TNF-α表达水平,以及纤维化表型各组OFs的HA表达水平;Transwell实验观察纤维化表型各组OFs的细胞迁移率;RT-qPCR及Western blot检测脂肪分化表型OFs各组细胞内PPAR-γ、c/EBP-α、FABP-4、perilipin-1、adiponectin的mRNA及蛋白质表达水平、炎症表型OFs各组细胞内IL-6、TNF-α、COX-2、MCP-1、ICAM-1的mRNA及蛋白质表达水平、纤维化表型OFs各组细胞内Vimentin、Fibronectin、COL1A1、COL1A2、ACTA2的mRNA及蛋白质表达水平。结果细胞鉴定为OFs,12.5、25.0、50.0 mg·L^(-1)TGs干预的OFs细胞活性无明显变化,后续选择这些浓度TGs进行后续实验。在脂肪分化表型的OFs中,经TGs处理后,细胞内橙红色脂滴明显减少;与DM组相比,各TGs组细胞内PPAR-γ、c/EBP-α、FABP-4、perilipin-1、adiponectin的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。在炎症表型的OFs中,与IL-1β组相比,各TGs组细胞培养上清液中IL-6与TNF-α表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与IL-1β组相比,各TGs组细胞内IL-6、TNF-α、COX-2、MCP-1、ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。在纤维化表型的OFs中,与TGF-β1组相比,各TGs组细胞迁移率均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与TGF-β1组相比,各TGs组细胞上清液中HA表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与TGF-β1组相比,各TGs组细胞内Vimentin、Fibronectin、COL1A1、COL1A2、ACTA2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论TGs能够抑制TAO-OFs脂肪分化,抑制IL-1β诱导的TAO-OFs炎症反应和TGF-β1诱导的TAO-OFs纤维化。 展开更多
关键词 甲状腺相关眼病 雷公藤多苷 眼眶成纤维细胞 脂肪分化 炎症 纤维化
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肿瘤相关成纤维细胞通过SDF-1/CXCR4通路介导胰腺导管腺癌中髓源性抑制细胞的迁移
10
作者 张冰冰 胡豪 +3 位作者 石渝川 刘雪霏 祝峙 张晶 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第7期838-846,共9页
目的探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)调节CD13高表达的中性粒细胞样髓源性抑制细胞(CD13hi-nMDSC)迁移的机制,为PDAC的免疫治疗提供实验依据和潜在分子靶标。方法从5例PDAC患者的胰腺癌组织中分离纯化CAF,用细胞免疫... 目的探讨胰腺导管腺癌(PDAC)中肿瘤相关成纤维细胞(CAF)调节CD13高表达的中性粒细胞样髓源性抑制细胞(CD13hi-nMDSC)迁移的机制,为PDAC的免疫治疗提供实验依据和潜在分子靶标。方法从5例PDAC患者的胰腺癌组织中分离纯化CAF,用细胞免疫荧光、流式细胞术鉴定CAF表型和纯度,用qPCR、ELISA技术检测CAF中相关细胞因子的表达。用Transwell系统构建CAF条件培养基及髓源性抑制细胞(MDSC)迁移系统,观察MDSC的迁移情况,研究上述细胞因子参与调节MDSC迁移的具体作用机制。结果分离的原代CAF表达活化标志物成纤维细胞激活蛋白(FAP)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),对照人包皮成纤维细胞(HFF)不表达FAP和α-SMA。qPCR结果显示CAF中IL-6、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)mRNA的表达高于HFF;CAF培养上清中IL-6、MCP-1、SDF-1的含量均高于HFF培养上清(均P<0.01),且随培养时间的延长而升高。与HFF条件培养基和普通培养基(RPMI 1640)相比,CAF条件培养基能招募更多的总MDSC和CD13hi-nMDSC(均P<0.01);在培养体系中单独加入SDF-1重组蛋白可以诱导总MDSC和CD13hi-nMDSC的迁移,并且加入SDF-1中和抗体或CXC趋化因子受体4(CXCR4)阻断抗体后能够减少CAF条件培养基诱导的CD13hi-nMDSC迁移(均P<0.01);虽然单独加入MCP-1也可以诱导总MDSC和CD13hi-nMDSC的迁移,但CD13hi-nMDSC迁移的数量明显少于SDF-1实验组;IL-6重组蛋白不能引起总MDSC和CD13hi-nMDSC的迁移。结论CAF可通过SDF-1/CXCR4通路介导PDAC中总MDSC及CD13hi-nMDSC的迁移。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 肿瘤微环境 肿瘤相关成纤维细胞 髓源性抑制细胞 细胞迁移
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癌症相关成纤维细胞在转移前生态位形成中的作用
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作者 王紫婷 杨贯彤 +4 位作者 樊建春 郜思齐 郭睿 蒋丽娜 郭亚雄 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第1期127-138,共12页
随着全球癌症发病率的不断上升,肿瘤转移已成为导致大多数癌症患者死亡的主要原因。转移前生态位(pre-metastatic niche,PMN)的形成为肿瘤细胞的定植和转移提供了理想的微环境,极大地促进了肿瘤的扩散。在这一过程中,癌症相关成纤维细胞... 随着全球癌症发病率的不断上升,肿瘤转移已成为导致大多数癌症患者死亡的主要原因。转移前生态位(pre-metastatic niche,PMN)的形成为肿瘤细胞的定植和转移提供了理想的微环境,极大地促进了肿瘤的扩散。在这一过程中,癌症相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)因其在肿瘤进展中的多重作用而备受关注。CAFs通过重塑细胞外基质、诱导上皮间质转化、刺激新生血管生成以及调控肿瘤免疫微环境,推动了PMN的建立和肿瘤细胞的侵袭性行为。这些作用不仅加速了肿瘤的转移进程,还为肿瘤的免疫逃逸创造了条件。本文综述了CAFs在肿瘤转移中的核心机制和功能,探讨了其在癌症研究和治疗中的潜在应用,为抗肿瘤转移策略的开发提供了新的视角与方向。 展开更多
关键词 癌症相关成纤维细胞 转移前生态位 细胞外基质 上皮间质转化 肿瘤免疫
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低氧诱导乳腺癌癌相关成纤维细胞能量代谢重塑细胞模型的构建 被引量：2
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作者 唐石伏 周明莉 +13 位作者 孙一帆 王林春 刘春明 杨丽 唐曦 张海龙 高超 黄光明 渠海洋 杜燕娥 徐丽云 文思阳 郎磊 柳满然 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1084-1089,共6页
目的:构建低氧诱导的乳腺癌癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAF)能量代谢重塑(energy metabolism reprogramming,EMR)细胞模型,为其后续分子机制和生物学功能研究奠定基础。方法:以成对的永生化的乳腺癌癌旁组织来源... 目的:构建低氧诱导的乳腺癌癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAF)能量代谢重塑(energy metabolism reprogramming,EMR)细胞模型,为其后续分子机制和生物学功能研究奠定基础。方法:以成对的永生化的乳腺癌癌旁组织来源正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NF)和CAF为处理对象,根据[O2]不同,NF和CAF细胞各分为常氧处理组和低氧处理组。不同氧浓度分别处理NF和CAF细胞0、1、3、6、12 h和24 h。葡萄糖消耗实验和乳酸生成实验检测细胞糖酵解水平;线粒体活性检测实验评估细胞氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OP)活性;Western blot实验检测细胞能量代谢相关蛋白包括单羧酸转运子4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)、细胞色素氧化酶Ⅳ亚基(cytochrome oxidaseⅣsubunit,COXⅣ)和低氧诱导因子1α亚基(hypoxia inducible factor 1αsubunit,HIF1α)的蛋白表达量。结果:低氧与CAF细胞EMR呈剂量效应和时间效应关系,1%[O2]作用24 h为最佳低氧处理条件。与NF常氧组相比,低氧处理(1%[O2]作用24 h)使CAF葡萄糖吸收和乳酸产生能力分别增强2倍和3.1倍,明显抑制其氧化磷酸化活性,使CAF细胞中MCT4和HIF1α蛋白表达量分别上升3.1倍和3.9倍及COXⅣ下调90%。结论:低氧(1%[O2]作用24 h)使CAF具有典型的EMR表型。本研究成功构建低氧诱导的乳腺癌CAF细胞EMR模型。 展开更多
关键词 乳腺癌 癌相关成纤维细胞 低氧 能量代谢重塑 细胞模型
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乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α表达与患者预后相关 被引量：3
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作者 于海明 杨俊兰 +1 位作者 李莹 焦顺昌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期370-374,共5页
目的本研究旨在探讨乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α(FAP-α)表达与临床病理特征以及预后的关系。方法回顾性收集2000-01-01/2002-12-31期间在解放军总医院手术的130例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,免疫组织化学染色检测乳... 目的本研究旨在探讨乳腺癌原发灶成纤维细胞活化蛋白α(FAP-α)表达与临床病理特征以及预后的关系。方法回顾性收集2000-01-01/2002-12-31期间在解放军总医院手术的130例Ⅰ-Ⅲ期乳腺癌患者的临床资料及石蜡切片,免疫组织化学染色检测乳腺癌原发灶FAP-α表达,分析FAP-α表达与转化生长因子β1(TGF-β1)表达强度的关系,并分析FAP-α表达与乳腺癌预后的关联性以及与临床病理特征的相关性。结果 FAP-α表达在肿瘤细胞和间质成纤维细胞的细胞质,FAP-α阳性纤维细胞密度与TGF-β1阳性间质细胞密度正相关。FAP-α肿瘤细胞质强度与TGF-β1阳性肿瘤细胞质表达正相关。在雌激素受体和孕激素受体均阴性患者中,FAP-α阳性纤维细胞密度是无病生存(DFS)和总生存(OS)的独立不良预后因素;FAP-α阳性肿瘤细胞质强度是DFS和OS的独立不良预后因素。结论激素受体阴性乳腺癌患者中,原发灶FAP-α高表达与不良预后相关。乳腺癌原发灶TGF-β1的表达与FAP-α的表达正相关。 展开更多
关键词 成纤维细胞活化蛋白α 转化生长因子-Β1 乳腺癌 预后
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不同体外培养条件对缺氧诱导原代心肌成纤维细胞活化的影响
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作者 付可威 曹梦菲 +1 位作者 罗洁 袁伟 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第4期497-503,共7页
目的探讨不同浓度葡萄糖、血清体外培养对缺氧诱导的原代心肌成纤维细胞活化及Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)表达的影响。方法采用酶消及差速贴壁法分离并纯化原代乳小鼠细胞,随机分为6组:低糖高血清组(1.0 g/L葡萄糖+10%血... 目的探讨不同浓度葡萄糖、血清体外培养对缺氧诱导的原代心肌成纤维细胞活化及Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)表达的影响。方法采用酶消及差速贴壁法分离并纯化原代乳小鼠细胞,随机分为6组:低糖高血清组(1.0 g/L葡萄糖+10%血清),高糖高血清组(4.5 g/L葡萄糖+10%血清),低糖中血清组(1.0 g/L葡萄糖+5%血清),高糖中血清组(4.5 g/L葡萄糖+5%血清),低糖无血清组(1.0 g/L葡萄糖+0%血清),高糖无血清组(4.5 g/L葡萄糖+0%血清)。体外培养24 h观察细胞形态,Western blot检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子(transforming growth factor beta,TGF-β)、Ⅰ型胶原及YAP表达,免疫荧光法观察α-SMA、YAP表达及定位,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷染色以及划痕实验分别评估细胞增殖、迁移能力。结果经1%O_(2)培养24 h后,随着培养液血清水平下降及葡萄糖浓度升高,细胞形态逐渐向肌成纤维细胞变化,以高糖无血清组细胞形态变化最为显著。与高糖高血清组比较,高糖无血清组Ⅰ型胶原、TGF-β、α-SMA及YAP表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与低糖高血清组比较,低糖无血清组α-SMA荧光强度明显升高[(9.23±2.45)%vs(2.40±2.04)%,P<0.05];与低糖无血清组比较,高糖无血清组Ⅰ型胶原、TGF-β、α-SMA及YAP表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与高糖高血清组和低糖无血清组比较,高糖无血清组α-SMA荧光强度、YAP入核、细胞迁移明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在1%O_(2)缺氧条件下,选用高糖无血清培养对于构建缺氧诱导活化的体外细胞模型最为合适,并且YAP激活程度最为显著。 展开更多
关键词 缺氧 成纤维细胞 体外培养技术 Yes相关蛋白
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肿瘤相关成纤维细胞通过p38/MAPK信号通路促进人乳腺癌细胞迁移 被引量：6
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作者 付立新 席磊 +2 位作者 陈燕林 杨丹 柳满然 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期163-168,共6页
目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)对人乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231的迁移能力影响及可能的分子机制。方法:CAF上清液作用人乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231后,采用Transwell迁移实验检测BT549和MDA-MB-231... 目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)对人乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231的迁移能力影响及可能的分子机制。方法:CAF上清液作用人乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231后,采用Transwell迁移实验检测BT549和MDA-MB-231细胞的迁移能力变化,蛋白质印迹法检测迁移相关蛋白E-cadherin、Vimentin的表达及p38/MAPK通路的活化情况。CAF上清液处理人乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231后,采用SB203580抑制p38/MAPK通路,Transwell迁移实验和蛋白质印迹分别检测BT549和MDA-MB-231细胞的迁移能力及E-cadherin、Vimentin蛋白的表达变化。结果:CAF作用后乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231的穿膜细胞数增多(P<0.05),抑制BT549和MDA-MB-231细胞中E-cadherin表达水平(P<0.01),上调Vimentin的表达水平(P<0.05);CAF激活乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231 p38/MAPK信号通路,促进通路关键分子p-P38蛋白表达(P<0.01);SB203580抑制p38/MAPK通路,CAF作用后乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231穿膜细胞数明显减少(P<0.01),且上调E-cadherin蛋白表达水平(P<0.05)、下调Vimentin蛋白表达水平(P<0.01)。结论:CAF通过激活p38/MAPK信号通路促进人乳腺癌细胞BT549和MDA-MB-231的迁移。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 p38/MAPK信号通路 乳腺癌 细胞迁移
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肿瘤相关成纤维细胞中雌激素/GPER/PKA/FGF2信号轴促进乳腺癌细胞侵袭 被引量：4
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作者 余腾骅 王智亮 +1 位作者 彭美茜 邱宇安 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期1730-1737,共8页
目的探讨共培养下乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中细胞质G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)活化对成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factors 2,FGF2)的表达调控机... 目的探讨共培养下乳腺癌肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)中细胞质G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)活化对成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factors 2,FGF2)的表达调控机制及其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法细胞免疫荧光法检测单独及与雌激素受体阳性(estrogen receptor positive, ER^+)乳腺癌MCF-7或ER阴性(ER^-)乳腺癌MDA-MB-468细胞共培养下CAFs中GPER的细胞内定位;荧光定量PCR法与ELISA法分别检测不同处理后CAFs细胞内FGF2的mRNA表达及细胞上清液中的分泌水平;Western blot法检测CAFs细胞中GPER下游ERK、AKT及PKA信号通路活化情况;Transwell小室实验检测不同药物处理下乳腺癌细胞侵袭能力的改变。结果两种亚型的乳腺癌细胞均可诱导CAFs中GPER由细胞核转位入细胞质。共培养条件下,17-β雌二醇(E2)可显著促进CAFs中FGF2的mRNA表达及细胞上清液中的分泌量,突变GPER氨基酸序列中的核输出信号(nucleus export signal, NES)可显著抑制以上变化(P<0.05)。CAFs单独培养下则无以上现象。同时,E2处理共培养下CAFs细胞后显著活化细胞内GPER/AKT与GPER/PKA信号通路,促进下游p-AKT与p-PKA的蛋白表达(P<0.05)。突变GPER中NES序列后可显著抑制下游PKA信号的活化,反而促进p-ERK的表达(P<0.05)。用PKA特异性抑制剂(H-89)可明显阻断CAFs中E2诱导的FGF2表达(P<0.05),AKT特异性抑制剂(WM)则不能。CAFs中E2刺激下的FGF2旁分泌明显提高乳腺癌细胞侵袭能力,该效应被FGF2中和抗体所阻断(P<0.05)。结论雌激素活化CAFs中细胞质GPER依赖性的下游PKA信号旁分泌FGF2进而促进乳腺癌细胞侵袭,上述通路或在肿瘤进展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 G蛋白偶联雌激素受体 成纤维细胞生长因子2 细胞侵袭 乳腺癌
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去甲肾上腺素通过肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌A549细胞增殖迁移
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作者 陈曦 汤涛 +1 位作者 俞鹏翼 王辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2093-2098,共6页
目的研究去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)在调控肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)促进肺癌细胞增殖迁移中的作用。方法培养原代CAFs和肺癌A549细胞,RT-PCR和蛋白质印迹检测NE干预后肿瘤相关成纤维细胞VEGF、IL-... 目的研究去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)在调控肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)促进肺癌细胞增殖迁移中的作用。方法培养原代CAFs和肺癌A549细胞,RT-PCR和蛋白质印迹检测NE干预后肿瘤相关成纤维细胞VEGF、IL-6和IL-8表达,并检测NE对共培养的CAFs和肺癌A549细胞中E-cadherin和Vimentin表达的影响,细胞划痕实验验证NE促进肺癌A549细胞的迁移能力。结果NE可诱导CAFs VEGF、IL-8和IL-6的高表达,并呈浓度依赖性。β肾上腺素受体抑制剂普萘诺尔PROP可抑制CAFs表达VEGF、IL-8和IL-6;NE可抑制与CAFs共培养的肺癌A549细胞E-cadherin表达,并促进Vimentin上调,增强A549细胞的迁移能力。结论NE通过CAFs协同促进肺癌A549细胞增殖迁移能力。 展开更多
关键词 肺癌 肿瘤相关成纤维细胞 去甲肾上腺素 增殖 迁移 肿瘤微环境
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癌相关成纤维细胞与M2型巨噬细胞相互作用促进肿瘤发生发展的研究进展
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作者 吴江为 张巧玲 +4 位作者 杨泽羊 张瑞 张舰 曾柱 吴介恒 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期168-173,共6页
癌相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境(TME)中主要成分之一。在TME中,肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间或非肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间的相互作用能促进肿瘤发生发展。CAF可与多种免疫细胞之间产生相互作用,通过抑制适应性免疫细胞功能,重塑TME中... 癌相关成纤维细胞(CAF)是肿瘤微环境(TME)中主要成分之一。在TME中,肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间或非肿瘤细胞与非肿瘤细胞之间的相互作用能促进肿瘤发生发展。CAF可与多种免疫细胞之间产生相互作用,通过抑制适应性免疫细胞功能,重塑TME中免疫微环境促进肿瘤的发生发展。其中CAF与巨噬细胞相互作用,并诱导巨噬细胞向M2型极化在促进肿瘤发生发展中起到重要作用。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞(CAF) M2型巨噬细胞 肿瘤微环境(TME) 细胞相互作用 综述
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重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗乳腺癌根治术后皮瓣坏死的临床观察 被引量：7
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作者 马宇光 武力 +1 位作者 王红磊 马大昌 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第4期436-438,共3页
关键词 重组人酸性成纤维细胞生长因子 术后皮瓣坏死 临床观察 根治术后 综合治疗 乳腺癌 成纤维细胞因子 生物活性蛋白质
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G蛋白耦联雌激素受体在癌症相关成纤维细胞中的活化对乳腺癌转移的作用及其中药干预研究 被引量：4
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作者 何悦双 刘姣 +3 位作者 颜倩 杨佳迪 陈梦 赵丕文 《世界中医药》 CAS 2023年第12期1759-1765,共7页
乳腺癌的转移是其临床治疗面临的重点和难点,其侵袭性的高低受周围基质的影响很大。癌症相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤基质的重要成分,同时也是新型膜雌激素受体——G蛋白耦联雌激素受体(GPER)阳性细胞。研究表明,GPER可能是作用于癌细胞... 乳腺癌的转移是其临床治疗面临的重点和难点,其侵袭性的高低受周围基质的影响很大。癌症相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤基质的重要成分,同时也是新型膜雌激素受体——G蛋白耦联雌激素受体(GPER)阳性细胞。研究表明,GPER可能是作用于癌细胞与肿瘤微环境(TM)的多种重要传导因子之间的关键交叉点,GPER在CAFs中活化对乳腺癌发生、发展和转移过程中发挥着重要的作用。多种中药单体的抗乳腺癌作用也与其靶向激活CAFs中的GPER通路是相关的。现就GPER在CAFs中的活化机制及其对乳腺癌转移的作用、中药单体对该过程的干预研究进行综述,以期为寻找乳腺癌治疗的新靶点、拓展乳腺癌症治疗策略提供思路。 展开更多
关键词 乳腺癌 癌症相关成纤维细胞 G蛋白耦联雌激素受体 信号转导 信号通路 肿瘤微环境 癌症转移 中药单体
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