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家蚕乳糖酶-根皮苷水解酶基因BmLPH014192的表达和序列选择性剪接分析 被引量：1
1
作者 黄飞飞 赵小靓 鲁成 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期21-27,共7页
乳糖酶-根皮苷水解酶(lactase-phlorizin hydrolase,LPH)是肠组织上皮细胞微绒膜上的一种糖蛋白,对乳糖和根皮苷有水解活性。鉴定了家蚕基因组中的一个LPH基因,命名为BmLPH014192。该基因CDS长1 305 bp,编码434个氨基酸,预测蛋白质分子... 乳糖酶-根皮苷水解酶(lactase-phlorizin hydrolase,LPH)是肠组织上皮细胞微绒膜上的一种糖蛋白,对乳糖和根皮苷有水解活性。鉴定了家蚕基因组中的一个LPH基因,命名为BmLPH014192。该基因CDS长1 305 bp,编码434个氨基酸,预测蛋白质分子质量为50.8 kD,等电点(pI)为5.35。将该基因的cDNA与家蚕基因组序列比对,显示其具有7个外显子,外显子/内含子边界处均符合GT-AG规则。将BmLPH014192与哺乳动物人、褐鼠、家兔和昆虫黑腹果蝇、冈比亚按蚊、二化螟、佛罗里达弓背蚁、大红斑蝶等的LPH进行氨基酸序列比对,相似度都在60%左右;聚类分析中BmLPH014192与昆虫类LPH聚在一起。芯片数据分析结果表明BmLPH014192在家蚕5龄第3天幼虫的9个组织中,只在中肠中有表达,并且表达量很高。在绿茧品种大造和白茧品种19-710幼虫的中肠中扩增到的特异性条带其长度分别为1 000 bp和750 bp,存在序列选择性剪接;在其它白茧品种的中肠中没有扩增出特异性条带。推测BmLPH014192的特殊表达方式可能与其在不同家蚕品种中肠组织中的特异性功能有关。 展开更多
关键词 家蚕 乳糖酶-根皮苷水解酶 序列特征 表达 选择性剪接
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苹果根皮苷-2-O-糖基转移酶基因克隆与表达模式分析 被引量：1
2
作者 冉军舰 梁新红 +3 位作者 陈晓静 李向阳 焦凌霞 赵瑞香 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期202-207,共6页
目的:根皮苷-2-O-糖基转移酶(phloridzin 2’-O-glycosyltransferase,P2’-GT)是根皮苷合成最后一步关键酶,可以把根皮素转化成根皮苷,本研究在富士苹果中克隆出P2’-GT基因,对基因编码产物进行生物信息学分析和基因的表达模式分析。方... 目的:根皮苷-2-O-糖基转移酶(phloridzin 2’-O-glycosyltransferase,P2’-GT)是根皮苷合成最后一步关键酶,可以把根皮素转化成根皮苷,本研究在富士苹果中克隆出P2’-GT基因,对基因编码产物进行生物信息学分析和基因的表达模式分析。方法:以苹果皮为材料,提取RNA反转录合成cDNA为模板,设计特异性引物进行扩增和测序,利用Pro Param tool、TMHMM等在线软件对编码蛋白进行生物信息学分析,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime?uorescence quatitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)分析P2’-GT在苹果不同部位、不同苹果品种和不同生长时期的表达差异。结果:P2’-GT cDNA全长1 452 bp,编码483个氨基酸,相对分子质量53.6 kDa,等电点5.76,该基因编码蛋白是不稳定蛋白,不具有明显的跨膜结构,二级结构主要有α-螺旋、无规卷曲和延伸链组成,三级结构结果显示P2’-GT蛋白模型与对苯二酚葡萄糖基转移酶相似度最高(41.32%),进化分析表明P2’-GT与白梨糖基转移酶同源性最高。RTFQ-PCR分析发现P2’-GT在3种苹果皮中均高效表达,在叶和根中微量表达,在果肉中不表达;P2’-GT的转录表达受苹果发育调控,在生长初期几乎不表达,随着苹果发育表达量逐渐增加,在生长中期达到最高值,随后开始减少,至苹果成熟期下降到最高值的50%水平。此外,P2’-GT在3种苹果品种中表达不同,在澳洲青苹中表达量最高,在嘎啦中表达量最低。结论:本研究明确了P2’-GT的生物信息学特性及P2’-GT基因在不同生长期和不同部位的表达差异,为调控根皮苷合成的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 根皮苷 根皮苷-2-O-糖基转移酶 克隆 生物信息学 实时荧光定量聚合酶链式反应
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3-羟基根皮苷对小鼠血糖及糖异生关键酶G-6-Pase的影响 被引量：3
3
作者 汪鋆植 边宇 +4 位作者 邓改改 吴翠 李澳 廖兴悦 黄永梅 《三峡大学学报（自然科学版）》 CAS 2021年第4期106-112,共7页
探究湖北海棠(Malus hupehensis(Pamp.) Rehd.)叶中主要成分3-羟基根皮苷对小鼠血糖及糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase, G-6-Pase)的影响,为稳定血糖提供可行方案.采用葡萄糖氧化酶法测定胰岛素抵抗模型HepG2细胞的... 探究湖北海棠(Malus hupehensis(Pamp.) Rehd.)叶中主要成分3-羟基根皮苷对小鼠血糖及糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase, G-6-Pase)的影响,为稳定血糖提供可行方案.采用葡萄糖氧化酶法测定胰岛素抵抗模型HepG2细胞的葡萄糖摄取;注射链脲佐菌素建立二型糖尿病小鼠模型,血糖试纸测定小鼠糖耐量、空腹血糖及餐后血糖;蛋白印迹法检测G-6-Pase的表达.结果表明:3-羟基根皮苷增强了胰岛素抵抗细胞模型对葡萄糖的摄取;3-羟基根皮苷增强了不同健康状况下,小鼠的糖耐受能力,升高正常小鼠空腹血糖水平,降低糖尿病小鼠空腹血糖水平,降低正常小鼠及糖尿病小鼠餐后血糖水平;高血糖水平时,抑制G-6-Pase表达,低血糖水平时增加G-6-Pase表达.因此,3-羟基根皮苷不仅具有降低糖尿病小鼠血糖的作用,还具有稳定血糖,减少血糖波动的作用,其机制与双向调节G-6-Pase表达相关. 展开更多
关键词 3-羟基根皮苷 糖尿病 G-6-Pase 血糖稳定 湖北海棠
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3-羟基根皮苷的雌激素样作用及其作用机制研究
4
作者 武玲 汪鋆植 +4 位作者 罗华军 郭东艳 陈北燕 余海立 贺海波 《三峡大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第3期108-112,共5页
研究了3-羟基根皮苷雌激素作用并初步探讨其发挥作用的可能机制.通过MTT法检测3-羟基根皮苷对MCF-7细胞及MDA-MB-231细胞增殖的影响;小鼠子宫增重实验检测3-羟基根皮苷对子宫、卵巢系数的影响,并用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中雌二... 研究了3-羟基根皮苷雌激素作用并初步探讨其发挥作用的可能机制.通过MTT法检测3-羟基根皮苷对MCF-7细胞及MDA-MB-231细胞增殖的影响;小鼠子宫增重实验检测3-羟基根皮苷对子宫、卵巢系数的影响,并用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中雌二醇(E2)含量,Western blot法检测小鼠子宫组织中雌激素受体(ERs)的表达;计算机辅助药物设计法及酵母双杂交实验检测3-羟基根皮苷与ERs的结合能力.结果表明,与空白组相比,3-羟基根皮苷浓度为6×10^(-5)~3×10^(-4) mol/L可促进MCF-7细胞增殖,对MDA-MB-231细胞增殖无显著影响;3-羟基根皮苷可促进小鼠子宫发育,提高体内E2的含量,对子宫组织中ERα表达有促进作用;计算机模拟3-羟基根皮苷与ERs分子对接及酵母双杂交实验表明3-羟基根皮苷与ERβ有较强结合能力.3-羟基根皮苷具有雌激素样作用,可能通过与ERs结合,并影响雌激素分泌及ERα表达发挥作用. 展开更多
关键词 3-羟基根皮苷 雌激素 雌激素受体
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响应面优化柚皮苷制备根皮乙酰苯-4'-新橘皮糖苷工艺 被引量：1
5
作者 刘燕青 程凯 +4 位作者 王严飞 刘松 单燕 余勃 陆豫 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期731-737,共7页
本文通过碱催化反应使柚皮苷水解为根皮乙酰苯-4'-β-新橘皮糖苷,利用响应面对溶剂、时间、碱浓度、温度、料液比等主要因素进行了优化。实验结果表明,柚皮苷水解为根皮乙酰苯-4'-新橘皮糖苷的最佳工艺条件如下:氢氧化钾为催化... 本文通过碱催化反应使柚皮苷水解为根皮乙酰苯-4'-β-新橘皮糖苷,利用响应面对溶剂、时间、碱浓度、温度、料液比等主要因素进行了优化。实验结果表明,柚皮苷水解为根皮乙酰苯-4'-新橘皮糖苷的最佳工艺条件如下:氢氧化钾为催化剂,水作为溶剂,碱浓度为15%(w/w),料液比为15(v/w),100℃反应2 h。柚皮苷水解为根皮乙酰苯-4'-新橘皮糖苷的产率最高达70%。 展开更多
关键词 柚皮苷 根皮乙酰苯-4'-新橘皮糖苷 响应曲面法 优化 工艺参数
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乳糖酶的应用及发展现状 被引量：30
6
作者 王敏 檀建新 +3 位作者 张伟 李长文 马雯 路玲玲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期89-92,共4页
对水解酶 β 半乳糖苷酶的酶源、特性、体内代谢作简要介绍 ,同时讨论了固定化技术、基因工程技术生产乳糖酶的发展现状。
关键词 水解酶-β-半乳糖苷酶 酶源 固定化 基因工程 乳糖酶 乳制品
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大鼠肠道水解酶对射干黄酮苷吸收特征的影响 被引量：1
7
作者 邹桂欣 尤献民 +1 位作者 王光函 李国信 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期2608-2609,共2页
目的:研究大鼠肠道水解酶(LPH酶)对射干黄酮苷中射干苷及野鸢尾苷大鼠肠道吸收特征的影响。方法:应用大鼠在体肠灌流模型,采用高效液相法测定射干苷及野鸢尾苷含量,比较加入LPH酶抑制剂葡糖酸内酯前后,射干苷、野鸢尾苷肠道吸收率变化... 目的:研究大鼠肠道水解酶(LPH酶)对射干黄酮苷中射干苷及野鸢尾苷大鼠肠道吸收特征的影响。方法:应用大鼠在体肠灌流模型,采用高效液相法测定射干苷及野鸢尾苷含量,比较加入LPH酶抑制剂葡糖酸内酯前后,射干苷、野鸢尾苷肠道吸收率变化。结果:与未加入抑制剂前比较,2个射干黄酮苷成分在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠的水解抑制率均有不同程度的变化,其中射干苷在4个肠段的水解抑制率分别为66%、52%、43%、38%;野鸢尾苷分别为51%、45%、26%、31%。结论:LPH酶抑制剂葡糖酸内酯能一定程度地抑制射干苷和野鸢尾苷的水解,提示大鼠肠黏膜上的LPH酶可能参与了射干中射干苷和野鸢尾苷在肠道的代谢过程。 展开更多
关键词 葡糖酸内酯 乳糖酶根皮苷水解酶抑制剂 射干黄酮苷 水解抑制率
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多穗柯4-香豆酸辅酶A连接酶基因的克隆和表达分析 被引量：5
8
作者 邢朝斌 冯若宣 +4 位作者 王志焱 张妍彤 王卓 黄剑 龙月红 《经济林研究》 北大核心 2019年第3期16-21,共6页
为了克隆多穗柯4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate-CoAligase,4CL)基因,了解其表达情况,从而为深入研究4CL基因分子功能及黄酮类化合物生物合成奠定基础,依据多穗柯转录组测序结果,设计特异性引物,PCR扩增得到4CL基因cDNA全长序列,利用... 为了克隆多穗柯4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate-CoAligase,4CL)基因,了解其表达情况,从而为深入研究4CL基因分子功能及黄酮类化合物生物合成奠定基础,依据多穗柯转录组测序结果,设计特异性引物,PCR扩增得到4CL基因cDNA全长序列,利用相关软件进行生物信息学分析;采用qRT-PCR法检测4CL基因在不同器官中的表达情况,使用SPSS18.0软件分析其表达量与根皮苷含量间的关系。结果表明:多穗柯4CL基因cDNA全长1704bp,包含长1629bp的开放阅读框,编码含542个氨基酸的蛋白质。该蛋白定位于细胞质中,属亲水性蛋白。多穗柯4CL基因在除根以外的各个器官中均有表达,且表达量与根皮苷含量间呈极显著的正相关关系(P<0.01)。 展开更多
关键词 多穗柯 4-香豆酸辅酶A连接酶 根皮苷 QRT-PCR
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家蚕LPH基因的生物信息学分析及表达模式研究
9
作者 黄飞飞 常平安 《安徽农业科学》 CAS 2016年第3期111-114,共4页
[目的]对家蚕LPH基因进行系统的分析。[方法]以家蚕基因组数据和EST数据为基础,用比较基因组学方法从基因组层次系统地鉴定家蚕LPH基因,对基因的结构、染色体分布、基因进化以及与其他模式昆虫的LPH基因进行比较分析,并利用基因芯片数据... [目的]对家蚕LPH基因进行系统的分析。[方法]以家蚕基因组数据和EST数据为基础,用比较基因组学方法从基因组层次系统地鉴定家蚕LPH基因,对基因的结构、染色体分布、基因进化以及与其他模式昆虫的LPH基因进行比较分析,并利用基因芯片数据对LPH基因在家蚕5龄3 d组织中的表达情况进行研究。[结果]家蚕LPH是一个基因家族,包含19个直向同源基因,分布于6条染色体上,系统发生树分析表明它们主要分成二大类群;基因芯片数据分析表明家蚕LPH基因具有不同的表达模式,推测可能具有不同的功能,其中绝大部分基因在中肠组织中有表达,推测其可能参与黄酮类物质在家蚕体内的转运途径。[结论]该研究为家蚕LPH自身功能的研究提供分子基础,更重要的是为研究其他昆虫的LPH基因提供参考。 展开更多
关键词 乳糖酶-根皮苷水解酶 生物信息学 表达模式 功能分析
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