松材线虫乙酰胆碱酯酶基因Bx-ace-2的克隆和序列分析 被引量：3

1

作者 熊玉芬 王暄 +1 位作者 梁中伟 李红梅 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期42-48,共7页

利用RT-PCR和RACE技术克隆了一个松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)乙酰胆碱酯酶基因Bx-ace-2,该基因cDNA全长为2010bp,有1878bp的开放阅读框(ORF),推测其编码的蛋白有625个氨基酸;Bx-ace-2基因组克隆长为2192bp,含有7个内含子。氨... 利用RT-PCR和RACE技术克隆了一个松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)乙酰胆碱酯酶基因Bx-ace-2,该基因cDNA全长为2010bp,有1878bp的开放阅读框(ORF),推测其编码的蛋白有625个氨基酸;Bx-ace-2基因组克隆长为2192bp,含有7个内含子。氨基酸序列比对和同源性分析显示:松材线虫Bx-ace-2编码的乙酰胆碱酯酶与已报道的秀丽小杆线虫ACE-1、ACE-3和ACE-4型乙酰胆碱酯酶的相似性为28%～31%,而与秀丽小杆线虫ACE-2及甘薯茎线虫、南方根结线虫、大豆胞囊线虫、马铃薯白线虫和胎生网尾线虫的ACE-2型乙酰胆碱酯酶的氨基酸序列相似性为44%～52%。构建的系统进化树也显示:松材线虫乙酰胆碱酯酶与其他线虫的ACE-2型乙酰胆碱酯酶具有相对更近的遗传距离,因此推测该松材线虫乙酰胆碱酯酶也属于ACE-2型。 展开更多

关键词 松材线虫 乙酰胆碱酯酶基因 CDNA克隆 Race

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野桑蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmmace1)5′端非翻译区序列的剪切方式分析

2

作者 李兵 王东 +5 位作者 王燕红 赵华强 许雅香 卫正国 陈玉华 沈卫德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期658-662,共5页

通过5′cDNA末端快速扩增(RACE)的方法,克隆了野桑蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmmace1)的cDNA 5′端非翻译区序列(5′UTR)区域,与家蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmace1)的cDNA 5′UTR(242个碱基)进行比较分析表明,Bmmace1的5′UTR包含有231个碱基... 通过5′cDNA末端快速扩增(RACE)的方法,克隆了野桑蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmmace1)的cDNA 5′端非翻译区序列(5′UTR)区域,与家蚕乙酰胆碱酯酶1型基因(Bmace1)的cDNA 5′UTR(242个碱基)进行比较分析表明,Bmmace1的5′UTR包含有231个碱基,存在2个位点的点突变和一段连续11个碱基的缺失。通过克隆和测序分析野桑蚕基因组中Bmmace1的5′UTR片段,表明Bmmace1和Bmace1基因的RNA剪切都遵循GT-AG规则,但在其cDNA 5′UTR的RNA剪接过程中可能存在差异,Bmmace1在其cDNA上游+33处存在比Bmace1少剪接的序列TGATTTGAAGG,而在其基因组中5′UTR的TGATTTGAAGG序列下游-4位点缺失ACAGA序列。研究结果可为深入探讨Bmmace1基因与野桑蚕产生抗药性的关系提供基础信息。 展开更多

关键词 野桑蚕 乙酰胆碱酯酶基因 剪切方式

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蓖麻蚕乙酰胆碱酯酶基因Pcrace2的克隆及序列与表达分析 被引量：6

3

作者 刘娟 张月华 +4 位作者 张华光 高丽 钱荷英 孙平江 徐安英 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期460-466,共7页

昆虫乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标。利用RT-PCR和RACE技术从蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini)幼虫头部组织克隆了乙酰胆碱酯酶基因Pcrace2。该基因cDNA全长为2 051 bp... 昆虫乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标。利用RT-PCR和RACE技术从蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricini)幼虫头部组织克隆了乙酰胆碱酯酶基因Pcrace2。该基因cDNA全长为2 051 bp,包含1 497 bp的ORF,编码498个氨基酸,蛋白质的分子质量为56.25 kD,等电点(pI)为5.11,含有由23个氨基酸组成的前体信号肽,推测为分泌型蛋白质。基于PcrAChE2同源氨基酸序列的系统进化分析表明:蓖麻蚕与小菜蛾(Plutella xy-lostella)、棉铃虫(Helicoverpa armigera)、烟青虫(Helicoverpa assulta)的亲缘关系最近,与家蚕(Bombyx mori)和野桑蚕(Bombyxmandarina)的亲缘关系也比较近。利用Real-time PCR方法分析Pcrace2基因在蓖麻蚕5龄第3天幼虫的头部、脂肪体、丝腺、中肠和血液中均有表达,以头部的表达量最高;在蓖麻蚕不同发育时期,Pcrace2在蛾期的表达量明显高于其它发育时期,在5龄幼虫期的表达量最低。研究结果有助于进一步分析蓖麻蚕乙酰胆碱酯酶基因的功能。 展开更多

关键词 蓖麻蚕 乙酰胆碱酯酶 基因克隆 序列特征 表达谱 实时定量PCR

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昆虫乙酰胆碱酯酶基因研究进展 被引量：20

4

作者 王敦 唐振华 +1 位作者 尚金燕 张传溪 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期497-503,共7页

对昆虫乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC3·1·1·7)的基因结构和表达等方面的研究进展进行了综述。分析了昆虫乙酰胆碱酯酶基因的结构,包括10个外显子的特征。对已经报道的昆虫AChE基因进行了系统归纳,并基于已... 对昆虫乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC3·1·1·7)的基因结构和表达等方面的研究进展进行了综述。分析了昆虫乙酰胆碱酯酶基因的结构,包括10个外显子的特征。对已经报道的昆虫AChE基因进行了系统归纳,并基于已知全序列的昆虫AChE基因,进行了昆虫AChE基因的分子进化分析。对昆虫AChE基因的结构特点及其功能,以及昆虫AChE基因的活性位点、AChE的变构与昆虫抗药性的关系进行了探讨。最后对昆虫AChE基因研究中存在的问题和前景进行了分析和展望。 展开更多

关键词 乙酰胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶基因 分子进化 基因突变 抗药性

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转CpTI基因杨树对美国白蛾幼虫中肠解毒酶及乙酰胆碱酯酶的影响 被引量：18

5

作者 丁双阳 李怀业 +2 位作者 李学锋 张志毅 高恒 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期100-102,共3页

以转CpTI基因毛白杨回交杂种 [(Populustomentosa×Populusbolleana)×Populustomentosa]叶片饲喂 4～ 5龄美国白蛾 (HyphantriacuneaDrury)幼虫 ,对其中肠解毒酶和乙酰胆碱酯酶活性进行了测定。结果表明 ,酯酶、羧酸酯酶的活... 以转CpTI基因毛白杨回交杂种 [(Populustomentosa×Populusbolleana)×Populustomentosa]叶片饲喂 4～ 5龄美国白蛾 (HyphantriacuneaDrury)幼虫 ,对其中肠解毒酶和乙酰胆碱酯酶活性进行了测定。结果表明 ,酯酶、羧酸酯酶的活力受到明显抑制 ,且随时间的延长抑制强度增加 ,饲喂 48h后 ,上述两种酶的活力分别比对照降低 76 .42 %和 73.91% ;多功能氧化酶在饲喂的前 12h ,表现为受到抑制 ,最大抑制率为 35 .78% ,2 4h后酶活力反而高于对照 ;谷胱甘肽S -转移酶和乙酰胆碱酯酶活力受到抑制 ,而且两者表现极为相似 ,均在饲喂后 4h抑制作用最强 ,酶活力分别比对照降低 5 1.40 %和 40 .5 7% ,但在整个试验过程中 ,均没有表现出随时间加强的趋势。 展开更多

关键词 转CpTI基因 杨树 美国白蛾 酯酶 幼虫 肠解毒酶 乙酰胆碱酯酶

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与昆虫抗药性相关的乙酰胆碱酯酶基因突变研究进展 被引量：22

6

作者 林建国 张传溪 唐振华 《农药学学报》 CAS CSCD 2005年第1期1-6,共6页

有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的广泛使用导致许多害虫产生了明显的抗药性。害虫对这些杀虫剂产生抗性的一个重要原因是其乙酰胆碱酯酶 (AChE)基因发生突变,从而导致AChE敏感度下降。简要概述了AChE基因发生突变的昆虫种类,介绍了AChE基... 有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的广泛使用导致许多害虫产生了明显的抗药性。害虫对这些杀虫剂产生抗性的一个重要原因是其乙酰胆碱酯酶 (AChE)基因发生突变,从而导致AChE敏感度下降。简要概述了AChE基因发生突变的昆虫种类,介绍了AChE基因突变对其结构与功能的影响、变构AChE的特性、AChE基因突变对适合度的影响以及AChE突变不同组合对抗性的影响。这些突变可为设计新颖的反抗性化合物开辟新的途径。 展开更多

关键词 昆虫 乙酰胆碱酯酶 基因突变 抗药性

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大鼠脊髓损伤后运动终板内乙酰胆碱酯酶和降钙素基因相关肽的变化 被引量：7

7

作者 张皑峰 欧喜超 +3 位作者 杨朝阳 刘玉军 鲁强 李晓光 《中国康复理论与实践》 CSCD 2008年第11期1030-1032,共3页

目的观察大鼠不同类型脊髓损伤后降钙素基因相关肽(CGRP)与乙酰胆碱酯酶(AChE)在后肢腓肠肌运动终板内的变化,以探讨不同类型脊髓损伤后CGRP和AChE与运动终板退变的关系。方法60只成年Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、切割型脊髓损伤... 目的观察大鼠不同类型脊髓损伤后降钙素基因相关肽(CGRP)与乙酰胆碱酯酶(AChE)在后肢腓肠肌运动终板内的变化,以探讨不同类型脊髓损伤后CGRP和AChE与运动终板退变的关系。方法60只成年Wistar大鼠随机分为假手术组(A组)、切割型脊髓损伤组(B组)和撞击型脊髓损伤组(C组),术后1、2、4、10周分别用Karnovsky-Roots直接法染色检测AChE、免疫组化法检测CGRP的变化。结果两损伤组大鼠术后运动终板中CGRP和AChE浓度均下降,但C组10周时有了明显恢复,而B组一直处于较低水平;CGRP的改变早于AChE。结论在大鼠不同类型脊髓损伤后,CGRP和AChE的活性和浓度与运动终板退变的程度不同。 展开更多

关键词 脊髓损伤 运动终板 降钙素基因相关肽 乙酰胆碱酯酶 大鼠

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转双价基因(Bt+CpTI)抗虫棉对棉蚜羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶比活力的影响 被引量：4

8

作者 薛丽 卢延 +2 位作者 周正堂 高希武 宋敦伦 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第25期15314-15316,共3页

[目的]研究了转双价基因棉SGK321对棉蚜Aphis gossypii Glover羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶比活力的影响,为转基因棉的生物安全性评价提供理论依据。[方法]在SGK321及其亲本棉石远321上长期饲养棉蚜,研究2种棉花品种对棉蚜短期(第1、2、3代)... [目的]研究了转双价基因棉SGK321对棉蚜Aphis gossypii Glover羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶比活力的影响,为转基因棉的生物安全性评价提供理论依据。[方法]在SGK321及其亲本棉石远321上长期饲养棉蚜,研究2种棉花品种对棉蚜短期(第1、2、3代)和长期(第41、42、43代)的影响。[结果]在SGK321上取食1代的棉蚜种群羧酸酯酶比活力显著高于在亲本棉上取食1、2、3代的棉蚜种群,转双价基因棉SGK321上饲养1、2、3代的棉蚜乙酰胆碱酯酶比活力均显著高于在石远321上饲养相同代数的棉蚜。但长期饲养的2种棉蚜之间羧酸酯酶比活力、乙酰胆碱酯酶比活力无显著差异。[结论]长期取食转双价基因棉SGK321的棉蚜通过棉蚜解毒酶的调节作用对SGK321产生了适应性。 展开更多

关键词 转双价基因棉 棉蚜 羧酸酯酶 乙酰胆碱酯酶

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斜纹夜蛾乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段的克隆和序列分析 被引量：6

9

作者 陈亮 李兵 浦冠勤 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期138-142,共5页

斜纹夜蛾(Spodoptera litura)是桑树的主要害虫之一。昆虫体内的乙酰胆碱酯酶(AChE,EC3.1.1.7)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标。通过设计简并引物,利用RT-PCR技术克隆了斜纹夜蛾的乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段(GenBank登录号:FJ95... 斜纹夜蛾(Spodoptera litura)是桑树的主要害虫之一。昆虫体内的乙酰胆碱酯酶(AChE,EC3.1.1.7)是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标。通过设计简并引物,利用RT-PCR技术克隆了斜纹夜蛾的乙酰胆碱酯酶基因cDNA片段(GenBank登录号:FJ959384)。序列分析结果表明,该cDNA片段全长1 191 bp,编码397个氨基酸,包含了乙酰胆碱酯酶基因的特征位点区域。基于乙酰胆碱酯酶氨基酸同源序列的进化分析表明,斜纹夜蛾与甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)的亲缘关系最近,与棉蚜(Aphis gossypii)的亲缘关系最远。该基因cDNA片段的克隆有助于对斜纹夜蛾乙酰胆碱酯酶结构、功能及抗药性的分子机制研究。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾 乙酰胆碱酯酶 基因克隆 反转录PCR 序列分析

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转Bt基因杨树对美国白蛾幼虫中肠解毒酶及乙酰胆碱酯酶的影响 被引量：4

10

作者 丁双阳 李怀业 +1 位作者 李学锋 张志毅 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期28-30,共3页

以转Ｂｔ基因欧洲黑杨叶片饲喂４～５龄美国白蛾幼虫、对其中肠几种重要解毒酶及乙酰胆碱酯酶的 活性进行了测定．结果表明，中肠多功能氧化酶受到强烈抑制．饲喂４ｈ后．多功能氧化酶的活性比对照降低 ５０．８９％．４８ｈ后、该酶活... 以转Ｂｔ基因欧洲黑杨叶片饲喂４～５龄美国白蛾幼虫、对其中肠几种重要解毒酶及乙酰胆碱酯酶的 活性进行了测定．结果表明，中肠多功能氧化酶受到强烈抑制．饲喂４ｈ后．多功能氧化酶的活性比对照降低 ５０．８９％．４８ｈ后、该酶活性仅为对照的１／６。酯酶及羧酸酯酶的活性也受到明显抑制．饲喂４８ｈ后．上述两种酶 的活性分别比对照降低７３．５８％和５６．５５％。谷胱甘肽Ｓ－转移酶变化比较复杂．饲喂２４ｈ后其活性出现峰值： ４８ ｈ后与对照持平。中肠乙酰胆碱酯酶活性无明显变化。转基因叶片对幼虫中肠解毒酶活性的抑制可能是其毒杀 害虫的作用机制之一。 展开更多

关键词 转Bt基因杨树 美国白蛾 解毒酶 乙酰胆碱酯酶

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北京地区家蝇乙酰胆碱酯酶不敏感基因表现型的检测 被引量：3

11

作者 汪中明 高希武 郑炳宗 《农药学学报》 CAS CSCD 2001年第3期29-34,共6页

在 1998～ 1999年对北京地区室外家蝇种群乙酰胆碱酯酶 (ACh E)的不敏感基因表现型进行了检测。以敏感品系为标准 ,海淀区 (A)、海淀区 (B)、丰台区、朝阳区家蝇种群具有的对敌敌畏不敏感基因表现型频率分别为 11%、34 %、5 6%和 2 4 % ... 在 1998～ 1999年对北京地区室外家蝇种群乙酰胆碱酯酶 (ACh E)的不敏感基因表现型进行了检测。以敏感品系为标准 ,海淀区 (A)、海淀区 (B)、丰台区、朝阳区家蝇种群具有的对敌敌畏不敏感基因表现型频率分别为 11%、34 %、5 6%和 2 4 % ;对灭多威不敏感基因表现型频率为 4 %、4 %、8%和 2 0 %。ACh E对敌敌畏和灭多威的不敏感基因表现型 ,北京地区家蝇可分成 4种 :1)对敌敌畏和灭多威均敏感型 ;2 )对敌敌畏不敏感 ,对灭多威敏感型 ;3)对敌敌畏敏感 ,对灭多威不敏感型 ;4 )对敌敌畏和灭多威均不敏感型。目前 ,在北京地区以对敌敌畏和灭多威均敏感的 ACh E表现型为主 ,其次为第二种类型 。 展开更多

关键词 家蝇 乙酰胆碱酯酶 抗药性 杀虫剂 不敏感基因 表现型

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三化螟两个乙酰胆碱酯酶基因克隆及序列分析 被引量：2

12

作者 罗光华 宋俊贤 +2 位作者 姚静 郑少秋 方继朝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期521-527,共7页

乙酰胆碱酯酶(ACh E)是有机磷(Organophosphate,OP)和氨基甲酸酯(Carbamate,CB)类杀虫剂的作用靶标。昆虫乙酰胆碱酯酶基因(ace)表达量的上升或基因突变导致其对杀虫剂的敏感性下降是昆虫产生抗药性的重要原因。本研究利用RT-PCR技术和c... 乙酰胆碱酯酶(ACh E)是有机磷(Organophosphate,OP)和氨基甲酸酯(Carbamate,CB)类杀虫剂的作用靶标。昆虫乙酰胆碱酯酶基因(ace)表达量的上升或基因突变导致其对杀虫剂的敏感性下降是昆虫产生抗药性的重要原因。本研究利用RT-PCR技术和c DNA末端快速扩增(RACE)技术成功克隆到三化螟(Scirpophaga incertulas Walker)的两个乙酰胆碱酯酶基因,分别命名为Siace1和Siace2。Siace1的完整开放阅读框(Open reading frame,ORF)长2 085 bp,编码含694个氨基酸的乙酰胆碱酯酶1(Si ACh E1)。Siace2的ORF长1 917 bp,编码含638个氨基酸的乙酰胆碱酯酶2(Si ACh E2)。将三化螟的两个乙酰胆碱酯酶与已报道的各物种的乙酰胆碱酯酶进行相似性比较,结果显示在蛋白水平上,Si ACh E1与台湾稻螟的ACh E1有最高的相似性,达到94%;Si ACh E2与二化螟的ACh E2具有最高的相似性,为98%。本研究为水稻上重要螟虫的乙酰胆碱酯酶基因对比研究提供了基础。 展开更多

关键词 三化螟 乙酰胆碱酯酶基因 克隆

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转双抗虫基因741杨对靶标害虫主要解毒酶和乙酰胆碱酯酶的影响 被引量：3

13

作者 张炬红 高宝嘉 刘军侠 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期66-70,共5页

用不同系号转基因741杨叶片饲养杨扇舟蛾、舞毒蛾和美国白蛾4～6龄幼虫,测定其中肠重要的两种解毒酶和乙酰胆碱酯酶比活力,研究转基因741杨对靶标害虫生理代谢的影响。结果表明,转基因741杨显著抑制了羧酸酯酶、谷胱苷肽-S-转移酶和乙... 用不同系号转基因741杨叶片饲养杨扇舟蛾、舞毒蛾和美国白蛾4～6龄幼虫,测定其中肠重要的两种解毒酶和乙酰胆碱酯酶比活力,研究转基因741杨对靶标害虫生理代谢的影响。结果表明,转基因741杨显著抑制了羧酸酯酶、谷胱苷肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶的比活力,其中PB11和PB29的抑制作用达到了极显著水平,与转基因741杨抗虫性的生测结果一致。转基因741杨对靶标害虫解毒酶和乙酰胆碱酯酶比活力的抑制作用是其抗虫性的生理机制之一。 展开更多

关键词 转基因741杨 靶标害虫 解毒酶 乙酰胆碱酯酶

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电鳐乙酰胆碱酯酶单链抗体基因的克隆及表达(英文) 被引量：1

14

作者 王玉霞 武军华 +2 位作者 滕霞 郭崇志 孙曼霁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-5,共5页

目的　欲用计算机模拟及分子对接技术揭示抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体 3F3抑酶的分子基础 ,但 3F3分子远大于乙酰胆碱酯酶 (AChE) ,难以操作 ,故拟用其单链抗体为工具进行研究。本研究旨在设计、克隆并表达抗AChE单链抗体Sc3F3基因 ,推演... 目的　欲用计算机模拟及分子对接技术揭示抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体 3F3抑酶的分子基础 ,但 3F3分子远大于乙酰胆碱酯酶 (AChE) ,难以操作 ,故拟用其单链抗体为工具进行研究。本研究旨在设计、克隆并表达抗AChE单链抗体Sc3F3基因 ,推演重组单链抗体的氨基酸顺序 ,并证明纯化的重组单链抗体有抑制AChE的作用。方法　使用分泌抗电鳐AChE单克隆抗体 3F3(3F3Ab)的杂交瘤细胞提取总RNA。用RT PCR技术扩增重链可变区 (VH)cDNA及轻链可变区 (VL)cDNA基因 ,通过连接肽(Gly4 Ser) 3 基因将VH 基因和VL 基因连接 ,制成单链抗体基因 (ScFv)。将ScFv基因插入载体pCANTAB 5E用于表达。在大肠杆菌中表达的 3F3单链抗体(Sc3F3)用SephadexG75凝胶过滤和QAE SephadexA 5 0离子交换层析纯化。AChE与抗体的免疫反应性用ELISA法测定。AChE活性用微量羟胺比色法测定。结果　测序结果证明所克隆的ScFv基因是功能重排基因 ,长度为 72 3bp。重、轻链基因长度分别为 35 7bp和 32 1bp。ScFv基因 (含连接肽基因 )所编码的纯化的重组Sc3F3的分子量为 31.6ku。Sc3F3与AChE反应良好 ,但对AChE活性的抑制明显弱于 3F3Ab。Sc3F3的抑制效力约为 3F3Ab的 1/10。 展开更多

关键词 抗体 单链 乙酰胆碱酯酶 基因克隆 基因表达

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人乙酰胆碱酯酶(hAchE)基因4个分泌型酵母表达载体的构建 被引量：2

15

作者 谭建华 马兴元 +1 位作者 史洛 于师宇 《黑龙江八一农垦大学学报》 2004年第1期65-68,共4页

设计合成3条引物,以载体pcDNA3.1-hAchE为模板,扩增出两端带有EcoRⅠ的约1.8 kb 去除信号肽但保留18 bp分子内伴侣序列的hAchE结构基因,及去除信号肽序列与分子内伴侣序列的hAchE成熟肽基因。将两个基因插入到酵母分泌型表达载体pPIC9和... 设计合成3条引物,以载体pcDNA3.1-hAchE为模板,扩增出两端带有EcoRⅠ的约1.8 kb 去除信号肽但保留18 bp分子内伴侣序列的hAchE结构基因,及去除信号肽序列与分子内伴侣序列的hAchE成熟肽基因。将两个基因插入到酵母分泌型表达载体pPIC9和pHIL-S1,获得正向插入的4个分泌型酵母表达载体。为转化酵母,筛选分泌型高效表达hAchE菌株奠定了基础。 展开更多

关键词 人乙酰胆碱酯酶 hAchE 基因 酵母 表达载体 蛋白质

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大鼠耳蜗传出神经系统发育中降钙素基因相关肽和乙酰胆碱酯酶的时空分布 被引量：3

16

作者 丁大连 张建辉 +6 位作者 杨琨 蒋海燕 亓卫东 时海波 刘芳 李鹏 Richard Salvi 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期662-668,共7页

目的探讨耳蜗发育过程中传出神经的发育分布。方法应用Tublin免疫组织化学方法标记出生后3~15天以及出生后4个月大鼠耳蜗基底膜上所有传入和传出神经纤维及其末梢的分布;应用酶组织化学或免疫组织化学方法观察出生后不同时间耳蜗基底膜... 目的探讨耳蜗发育过程中传出神经的发育分布。方法应用Tublin免疫组织化学方法标记出生后3~15天以及出生后4个月大鼠耳蜗基底膜上所有传入和传出神经纤维及其末梢的分布;应用酶组织化学或免疫组织化学方法观察出生后不同时间耳蜗基底膜上降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)和乙酰胆碱脂酶(AchE)的表达和分布。结果耳蜗传入神经纤维及末梢在大鼠出生后当天已经与内、外毛细胞建立起突触联系;从出生后第五天开始CGRP出现在内毛细胞周围及底部,但AchE标记的传出神经尚未进入Corti器,出生后第七天AchE才开始与CGRP同时出现在内侧螺旋束和隧道螺旋束的耳蜗传出神经纤维及末梢。结论 CGRP和乙酰胆碱出现在Corti器的时间均明显早于耳蜗传出神经末梢在耳蜗靶细胞的就位;在大鼠耳蜗发育早期出现在内毛细胞区域的CGRP和乙酰胆碱或许是由内毛细胞及其周围支持细胞分泌的一种诱导耳蜗传出神经纤维朝着耳蜗螺旋器趋向性生长的引导信号。 展开更多

关键词 耳蜗发育 耳蜗传出神经 降钙素基因相关肽 乙酰胆碱酯酶

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5龄家蚕乙酰胆碱酯酶基因的转录水平 被引量：1

17

作者 曹雅琪 王彬彬 +3 位作者 顾芝亚 张霞 沈卫德 李兵 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第6期45-46,85,共3页

乙酰胆碱酯酶(AChE)是有机磷和氨基甲酸酯类物质的作用靶酶。通过半定量PCR的方法测定家蚕4龄眠到上蔟期的2种ace基因的表达量,并测定该时期家蚕的AChE活性,以及5龄3 d各组织中2种ace基因的表达量。结果表明,ace1基因在4龄眠到5龄第2天,... 乙酰胆碱酯酶(AChE)是有机磷和氨基甲酸酯类物质的作用靶酶。通过半定量PCR的方法测定家蚕4龄眠到上蔟期的2种ace基因的表达量,并测定该时期家蚕的AChE活性,以及5龄3 d各组织中2种ace基因的表达量。结果表明,ace1基因在4龄眠到5龄第2天,第6天到第8天的转录表达量较多,第3天到第5天表达量相对较少;ace2基因在4龄眠期转录表达量多,进入5龄后,转录表达量减少且隔天转录表达量大致相同。在5龄中期和后期,AChE各具有1个峰值。5龄3 d,ace1基因在脂肪体、脑、卵巢中的转录表达量多,在其他组织中表达量较少,其中在血液中最少,ace2基因在脂肪体、精巢、卵巢中转录表达量多,在其他组织中表达量较少。 展开更多

关键词 家蚕 乙酰胆碱酯酶基因 转录

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桃蚜乙酰胆碱酯酶基因克隆及我国多地区桃蚜S431F突变频率检测 被引量：2

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作者 刘晓岚 田兆丰 李永丹 《江苏农业科学》 2018年第7期91-95,共5页

克隆我国桃蚜乙酰胆碱酯酶基因(ace1、ace2)cDNA。我国桃蚜ace1经与NCBI(Gen Bank:AF287291.1)比对未发现氨基酸替换,ace2基因经c DNA末端快速克隆技术得到全长(NCBI已注册的ace2 GenBank:AY147797.1缺失3'端182 bp),ace2全长为2 02... 克隆我国桃蚜乙酰胆碱酯酶基因(ace1、ace2)cDNA。我国桃蚜ace1经与NCBI(Gen Bank:AF287291.1)比对未发现氨基酸替换,ace2基因经c DNA末端快速克隆技术得到全长(NCBI已注册的ace2 GenBank:AY147797.1缺失3'端182 bp),ace2全长为2 022 bp,编码674个氨基酸,序列已提交NCBI(GeneBank:KJ561353)。与NCBI(Gen Bank:AY147797.1)比对发现,我国桃蚜ace2除已报道的与桃蚜抗药性有关的S431F突变(氨基酸序列431位丝氨酸变为苯丙氨酸)外,在氨基酸序列55位处发现亮氨酸突变为丝氨酸(L55S)。利用突变检测技术,对2015、2016年采自我国河北、辽宁、江苏、青海等多个地区的桃蚜种群单头乙酰胆碱酯酶基因突变(S431F)频率进行检测。结果表明,2015、2016年各种群桃蚜单头乙酰胆碱酯酶基因突变(S431F)频率均大于85%,均已处于高水平突变,突变频率与生物测定抗性水平趋势一致。 展开更多

关键词 桃蚜 乙酰胆碱酯酶 基因克隆 CDNA 变异检测

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线虫乙酰胆碱酯酶基因研究进展 被引量：2

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作者 陈玉艳 胡长志 崔汝强 《生物灾害科学》 2015年第4期284-289,共6页

乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)是生物神经传导中的一种关键性酶。它可以降解胆碱能突触间的乙酰胆碱,终止神经递质对突触后膜的兴奋作用,从而保证神经信号在生物体内的正常传递。分析线虫乙酰胆碱酯酶基因的特征... 乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE,EC 3.1.1.7)是生物神经传导中的一种关键性酶。它可以降解胆碱能突触间的乙酰胆碱,终止神经递质对突触后膜的兴奋作用,从而保证神经信号在生物体内的正常传递。分析线虫乙酰胆碱酯酶基因的特征,介绍已报道的线虫AChE基因的特点和功能,对线虫AChE基因研究中存在的问题和前景进行分析和展望。 展开更多

关键词 线虫 乙酰胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶基因

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RNA干扰对家蚕细胞系中乙酰胆碱酯酶基因表达的抑制

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作者 丛恒 戴俊 +2 位作者 曹亚琪 沈卫德 李兵 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第11期20-22,共3页

为研究RNAi技术对家蚕细胞系BmN中2种乙酰胆碱酯酶基因的干扰,通过细胞转染不同干扰位点片段的方法筛选出干扰效果显著的siRNA片段。结果表明:Bm-ace1-1526和Bm-ace2-1132分别使BmN细胞ace1、ace2基因表达降低到对照的37.4%和33.4%,这2... 为研究RNAi技术对家蚕细胞系BmN中2种乙酰胆碱酯酶基因的干扰,通过细胞转染不同干扰位点片段的方法筛选出干扰效果显著的siRNA片段。结果表明:Bm-ace1-1526和Bm-ace2-1132分别使BmN细胞ace1、ace2基因表达降低到对照的37.4%和33.4%,这2个位点分别对2种基因干扰显著。 展开更多

关键词 RNA干扰 家蚕细胞 乙酰胆碱酯酶 基因表达 ace基因

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