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健脾益气补肝健肾中药治疗重症肌无力眼肌型患儿的乙酰胆碱受体抗体的临床研究 被引量:15
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作者 乞国艳 刘鹏 +4 位作者 顾珊珊 薛银萍 刘朝英 董会民 杨红霞 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第3期624-628,共5页
目的:1统计重症肌无力(MG)眼肌型患儿乙酰胆碱受体抗体的阳性率;2评价和探讨健脾益气补肝健肾中药治疗肾上腺糖皮质激素治疗复发或无效的重症肌无力眼肌型(MGI型)患儿的临床疗效,以及疗效与乙酰胆碱受体抗体(Ach R-Ab)之间的关系。方法... 目的:1统计重症肌无力(MG)眼肌型患儿乙酰胆碱受体抗体的阳性率;2评价和探讨健脾益气补肝健肾中药治疗肾上腺糖皮质激素治疗复发或无效的重症肌无力眼肌型(MGI型)患儿的临床疗效,以及疗效与乙酰胆碱受体抗体(Ach R-Ab)之间的关系。方法:选择2010年5月—2015年1月就诊于石家庄市第一医院住院或门诊的明确诊断重症肌无力眼肌型、发病年龄小于15岁、肾上腺糖皮质激素治疗无效或复发的患儿149例,单纯接受我院健脾益气补肝健肾为主方的中药治疗,在治疗前、后1、3、6、12个月时应用重症肌无力许氏绝对与相对评分法评价重症肌无力症状的严重程度[1],同时检测治疗前和治疗后1、3、6、12个月外周血液中乙酰胆碱受体抗体的滴度。结果:1149例患儿中,98例乙酰胆碱受体抗体阳性的患儿,占65.77%;51例阴性的患儿,占34.23%。2乙酰胆碱受体抗体阳性与阴性患儿在治疗后1、3、6、12个月时临床相对评分≥75%(有效率)的患儿相比较有显著性差异(P<0.05),到12个月时Ach R-Ab阳性患儿达到98.9%,阴性患儿达90.9%,有统计学意义;3相对评分≥90%(临床痊愈率)的患儿在1、3、6、12个月时相比有显著性差异(P<0.05),到12个月时Ach R-Ab阳性患儿达到97.8%,阴性患儿达88.0%,有统计学意义。4乙酰胆碱受体抗体阳性患儿的Ach RAb滴度治疗后3、6、12个月与治疗前相比有显著性差异(P<0.05),有统计学意义;经两两比较,治疗后3个月与治疗前患儿Ach R-Ab滴度比较差异无统计学意义(P>0.05),其余组内两两比较均有统计学意义(P<0.05);12个月时Ach R-Ab滴度由(3.40±2.08)nmmol/L下降至(0.38±1.08)nmmol/L,有统计学意义。结论:本组研究乙酰胆碱受体抗体阳性患儿阳性率65.77%;健脾益气补肝健肾中药治疗乙酰胆碱受体抗体阳性的重症肌无力眼肌型患儿的总有效率和临床痊愈率均高于Ach R-Ab阴性的患儿;乙酰胆碱受体抗体阳性眼肌型患儿的抗体浓度随着肌无力的缓解逐渐下降至阴性。 展开更多
关键词 健脾益气补肝健肾中药(JPYQBGJS) 重症肌无力眼肌型(MG1型) 乙酰胆碱受体抗体(achr-ab) 临床绝对和相对评分
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乙酰胆碱受体抗体测定对重症肌无力的诊断价值 被引量:5
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作者 徐文桢 龚潮樑 +7 位作者 高国勖 樊剑英 王代德 陈流球 蔡凤泉 高立霞 朱明霞 苟婴如 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期4-7,共4页
用双抗体放射免疫分析方法对100例MG患者进行血清AChRab滴度测定,阳性率84%,全身型阳性率为91.4%,抗体滴度范围0.5—111.88×10^(-9)M,全身型患者以第Ⅲ型最高,病情重度者高,有胸腺瘤者最高。抗体对免疫抑制剂敏感。本方法是采用... 用双抗体放射免疫分析方法对100例MG患者进行血清AChRab滴度测定,阳性率84%,全身型阳性率为91.4%,抗体滴度范围0.5—111.88×10^(-9)M,全身型患者以第Ⅲ型最高,病情重度者高,有胸腺瘤者最高。抗体对免疫抑制剂敏感。本方法是采用先进放免法,具有微量,灵敏度非常高的优点。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体 抗体
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重症肌无力患者血清抗乙酰胆碱受体抗体和抗突触前膜抗体检测 被引量:6
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作者 崔新征 高峰 +5 位作者 杨鲲鹏 魏云 燕东海 郭亮 张水兰 张清勇 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第1期63-65,共3页
目的:探讨重症肌无力(MG)患者血清抗乙酰胆碱受体抗体(AchRab)和抗突触前膜抗体(Psmab)水平与其临床特征之间的关系。方法:采用ABC—ELISA法检测186例MG患者及35例正常人血清AchRab和Psmab。结果:MG患者血清AchRab和Psmab水平... 目的:探讨重症肌无力(MG)患者血清抗乙酰胆碱受体抗体(AchRab)和抗突触前膜抗体(Psmab)水平与其临床特征之间的关系。方法:采用ABC—ELISA法检测186例MG患者及35例正常人血清AchRab和Psmab。结果:MG患者血清AchRab和Psmab水平及阳性率均高于对照组(P〈0.01),且2抗体水平高度相关(r=0.72,P〈0.001)。2抗体水平与MG患者的性别无关;1~14岁患者2抗体水平较低;胸腺瘤患者2抗体水平高于胸腺增生者;危象型患者高于轻型和混合型患者;手术摘除胸腺后,2抗体水平较术前下降(P均〈0.05)。结论:AchRab和Psmab与MG患者病情程度及病理类型有关,可用于MG的病情监测。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体抗体 抗突触前膜抗体
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重症肌无力病人乙酰胆碱受体抗体的测定及临床意义 被引量:11
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作者 赖祥青 杨明山 曹学斌 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期207-209,共3页
用ELISA(固相酶联免疫吸附)法测定172例MG病人血清乙酰胆碱受体抗体(AchRab),结果显著高于健康献血员组和非MG病人组。不同性别、病程及临床类型与AchRab无相关性,但41~50岁组的显著高于其他年龄组... 用ELISA(固相酶联免疫吸附)法测定172例MG病人血清乙酰胆碱受体抗体(AchRab),结果显著高于健康献血员组和非MG病人组。不同性别、病程及临床类型与AchRab无相关性,但41~50岁组的显著高于其他年龄组。67例类固醇激素治疗组、22例大剂量两种球蛋白治疗组、12例胸腺切除术组及3例MG危象病人24次血浆交换疗法(PE)组,治疗后伴随肌无力症状的好转,AchRab均显著低于治疗前。结果表明:AchRab测定为MG诊断提供了可靠的实验依据,为类固醇激素、大剂量丙种球蛋白、胸腺切除术和PE等治疗MG提供理论依据和疗效评定的实验指标,进一步证实了MG免疫学发病机理。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体 抗体
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中西医结合治疗重症肌无力对乙酰胆碱受体抗体和CD_4^+CD_(25)^+T调节免疫细胞的研究 被引量:16
5
作者 乞国艳 薛银萍 +3 位作者 杨红霞 顾珊珊 周云辙 刘超英 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第2期415-420,共6页
目的:比较中西医结合治疗(包括免疫抑制剂和以补中益气汤为主的辩证加减联合治疗)和单纯免疫抑制剂治疗重症肌无力两种治疗方案的临床疗效和免疫调节细胞CD_4^+CD_(25)^+Tr的影响研究。方法:选择2006年1月—2008年1月在石家庄市第一医... 目的:比较中西医结合治疗(包括免疫抑制剂和以补中益气汤为主的辩证加减联合治疗)和单纯免疫抑制剂治疗重症肌无力两种治疗方案的临床疗效和免疫调节细胞CD_4^+CD_(25)^+Tr的影响研究。方法:选择2006年1月—2008年1月在石家庄市第一医院住院治疗的明确诊断220例重症肌无力全身型患者。将患者随机分为两组即A组和B组,各组均有110例患者。A组治疗方法为免疫抑制剂(甲泼尼松龙和硫唑嘌呤)配伍中药重剂补中益气汤治疗;B组治疗方法为单纯免疫抑制剂(甲泼尼松龙冲击配伍硫唑嘌呤)治疗,监测两组患者治疗后6个月和18个月的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)值和免疫调节细胞CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比的动态变化,同时用许氏评分法的相对临床计分来判定治疗后6个月和18个月的临床疗效。结果:(1)治疗后6个月:因各种原因没有完成治疗的出组患者A组3例,B组5例;(2)治疗前两组患者乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值和CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05);(3)分别比较两组患者治疗后6个月的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值、CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比、临床相对计分,其差异无统计学意义(P>0.05);(4)两组患者治疗后18个月,A组患者的乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)浓度值明显低于B组,且差异有明显统计学意义(P<0.01);A组患者的CD_4^+CD_(25)^+Tr百分比明显高于B组,且差异具有明显的统计学意义;A组患者的临床相对计分50%以上的患者人数高于B组,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:免疫抑制剂配伍重剂补中益气汤辨证加减治疗重症肌无力可使乙酰胆碱受体抗体(AchRAb)值下降更明显、CD_4^+CD_(25)^+Tr免疫调节细胞值明显升高,患者的临床完全缓解率高,且稳定而不易复发。 展开更多
关键词 重症肌无力 中西医结合治疗 乙酰胆碱受体抗体(Ach RAb) CD+4CD+25Tr免疫调节细胞 临床相对计分
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重症肌无力患者抗乙酰胆碱受体抗体的测定及意义 被引量:4
6
作者 景少巍 马文环 +3 位作者 李红花 马文杰 李英信 孟繁平 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期9-10,共2页
用ELISA法对56例重症肌无力(MG)患者治疗前后的血清乙酰胆碱受体(AchR)抗体进行了检测。检测结果为MG患者治疗前后的血清AchR抗体阳性率46.4%。而且发病年龄越大,患者体内AchR抗体阳性率越高。患者患病时间越长体内AchR抗体含量降低。... 用ELISA法对56例重症肌无力(MG)患者治疗前后的血清乙酰胆碱受体(AchR)抗体进行了检测。检测结果为MG患者治疗前后的血清AchR抗体阳性率46.4%。而且发病年龄越大,患者体内AchR抗体阳性率越高。患者患病时间越长体内AchR抗体含量降低。伴发胸腺瘤的患者AchR抗体阳性率明显高于胸腺正常者,全身型MG患者AchR抗体检测阳性率高于眼肌型患者。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体 抗体 ELISA
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重症肌无力血清乙酰胆碱受体抗体的阳性率及其影响因素 被引量:7
7
作者 吕传真 肖保国 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期211-213,共3页
采用ABC-ELISA法检测162例重症肌无力患者的224份血清标本,100例正常人和78例其他疾病病人的血清中AchRab。重症肌无力病人的抗体阳性率为80.2%,其中单纯眼肌型63.1%,脊髓肌型90.0%,延髓肌型93.8%和全身肌型91.5%。合并胸腺瘤的阳... 采用ABC-ELISA法检测162例重症肌无力患者的224份血清标本,100例正常人和78例其他疾病病人的血清中AchRab。重症肌无力病人的抗体阳性率为80.2%,其中单纯眼肌型63.1%,脊髓肌型90.0%,延髓肌型93.8%和全身肌型91.5%。合并胸腺瘤的阳性率为83.3%,与全组阳性率无显著性差异。激素和血浆交换治疗均未影响抗体阳性结果。随访观察表明,重症肌无力病人的AchRab阳性率与疾病严重程度不成线性相关。我们认为,AchRab滴度虽然与临床状况不相关,但在重症肌无力的诊断和自身免疫病因的研究中,仍是一项重要参数。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体 抗体
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血清乙酰胆碱受体抗体阳性和阴性重症肌无力患者罗库溴铵肌松时效的比较 被引量:1
8
作者 曹迎亚 鲁卫华 +4 位作者 姜小敢 鲁美静 吴敬医 秦雪梅 姚卫东 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2014年第10期1153-1157,共5页
目的:探讨罗库溴铵在血清乙酰胆碱受体(AchR)抗体阳性和阴性重症肌无力(MG)患者中的肌松效应。方法:选择择期行胸骨正中切口胸腺切除术的20例MG患者,根据术前血液生化检查分为AchR抗体阳性组(P组,n=10)和AchR抗体阴性组(N组,n=10)。依... 目的:探讨罗库溴铵在血清乙酰胆碱受体(AchR)抗体阳性和阴性重症肌无力(MG)患者中的肌松效应。方法:选择择期行胸骨正中切口胸腺切除术的20例MG患者,根据术前血液生化检查分为AchR抗体阳性组(P组,n=10)和AchR抗体阴性组(N组,n=10)。依次静脉注射芬太尼2μg/kg,咪唑安定0.05mg/kg,丙泊酚1.5mg/kg行麻醉诱导,气管插管,采用四个成串刺激监测拇内收肌肌颤搐,刺激电流60mA,间隔12s,频率2Hz,波宽0.2ms,定标后静脉注射罗库溴铵0.6mg/kg。分别记录肌松起效时间、T125%恢复时间、T150%恢复时间和恢复指数。术中使用多功能监测仪进行心率变异性分析。结果:两组患者各时点MAP、HR、HRV、LF/HF差异无统计学意义(P>0.05)。与N组比较,P组肌松起效时间的差异无统计学意义(P>0.05),P组T125%恢复时间、T150%恢复时间及恢复指数延长(P<0.05)。结论:罗库溴铵在血清AchR抗体阳性MG患者的维持时间长于血清阴性患者,而起效时间无差异。 展开更多
关键词 雄甾烷醇类 重症肌无力 乙酰胆碱受体抗体 神经肌肉阻滞 心率变异性
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斑点免疫结合实验用于乙酰胆碱受体抗体的检测 被引量:1
9
作者 唐吟岫 谈华 +1 位作者 虞伟 武建国 《医学研究生学报》 CAS 2000年第6期392-393,共2页
关键词 斑点免疫实验 乙酰胆碱受体抗体 重症肌无力
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抗乙酰胆碱受体α-银环蛇毒素结合区抗体可变区的序列分析 被引量:1
10
作者 孟繁平 杨康鹃 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期296-298,共3页
通过对3株抗乙酰胆碱受体(AChR)的α-银环蛇毒素(α-BT)结合区抗体的配位特异性测定和可变区基因序列分析,探讨重症肌无力(MG)的发病机制。这3株抗体相互竞争对AChR的结合,说明它们具有共同的识别部位。3株抗... 通过对3株抗乙酰胆碱受体(AChR)的α-银环蛇毒素(α-BT)结合区抗体的配位特异性测定和可变区基因序列分析,探讨重症肌无力(MG)的发病机制。这3株抗体相互竞争对AChR的结合,说明它们具有共同的识别部位。3株抗体的H链可能来源于同─种系基因,并且在抗原亲和成熟过程中发生体细胞突变;L链则由不同的亚组基因编码。结果表明,抗AChRα-BT结合区抗体的H链在决定抗体配位特异性上起重要作用。 展开更多
关键词 乙酰胆碱受体 重症肌无力 自身抗体 核苷酸序列
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由人免疫球蛋白转基因小鼠制备人抗乙酰胆碱受体单克隆抗体
11
作者 杨康鹃 孟繁平 +4 位作者 李辉 齐栋 李芳芳 Stassen M De Baets M 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期212-214,共3页
目的:从人免疫球蛋白(Ig)转基因小鼠制备人源性抗乙酰胆碱受体(AChR)单克隆抗体。方法:以电鳐(Torpedo)AChR(tAChR)作为基础免疫原,分别以tAChR或人AChR(hAChR)α亚单位1~210位氨基酸(Hα1-210)与thioredoxin(Trx)融... 目的:从人免疫球蛋白(Ig)转基因小鼠制备人源性抗乙酰胆碱受体(AChR)单克隆抗体。方法:以电鳐(Torpedo)AChR(tAChR)作为基础免疫原,分别以tAChR或人AChR(hAChR)α亚单位1~210位氨基酸(Hα1-210)与thioredoxin(Trx)融合制备的融合蛋白Trx-Hα1-210作为加强免疫原,注射人Ig转基因小鼠。应用ELISA检查由该小鼠制备的杂交瘤细胞培养上清液中人源性抗tAChR或抗Trz-Hα1-210单克隆抗体的分泌,应用放射免疫测定法(RIA)测定抗tAChR或抗Trx-Hα1-210单克隆抗体与hAChR的交叉反应性。结果:从tAChR作为加强免疫原组小鼠得到433株分泌人源性抗tAChR单克隆抗体的细胞株,从抗Trx-Hα1-210作为加强免疫原组小鼠得到20株分泌人源性抗Trx-Hα1-210单克隆抗体的细胞株。但这些人源性抗体均不能与hAChR起交叉反应。结论:由人Ig转基因小鼠制备人源性抗AChR单克隆抗体是可行的。 展开更多
关键词 转基因小鼠 乙酰胆碱受体 单克隆抗体 重症肌无力
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一株乙酰胆碱受体单克隆抗体的序列分析
12
作者 李红花 魏成淑 +1 位作者 李英信 孟繁平 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期61-61,共1页
探讨重症肌无力自身抗体分子结构及其在发病机制中的作用。利用PCR从分泌乙酰胆碱受体(AChR)单抗A49的杂交瘤细胞株扩增抗体可变区(V)基因,经转化大肠杆菌DH5α克隆后,进行核苷酸序列分析。A49的重性V区基因由小鼠VHNP族基因编码... 探讨重症肌无力自身抗体分子结构及其在发病机制中的作用。利用PCR从分泌乙酰胆碱受体(AChR)单抗A49的杂交瘤细胞株扩增抗体可变区(V)基因,经转化大肠杆菌DH5α克隆后,进行核苷酸序列分析。A49的重性V区基因由小鼠VHNP族基因编码,轻链V区基因由小鼠VK2组基因编码。与致病性AChR抗体V区比较,其同源性均在70%以下。A49的分子结构与致病性AChR抗体不同。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱 单克隆抗体 受体 序列分析
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乙酰胆碱受体抗体抑制烟碱对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的研究
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作者 郑金瓯 梁志坚 莫雪安 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期446-448,i0015,共4页
目的研究乙酰胆碱受体抗体(nAchRab)IgG在烟碱模拟应激状态下对下丘脑-垂体-肾上腺 (HPA)轴各层面活动的影响,探讨重症肌无力(MG)和MG危象发生机制与HPA内分泌轴变化的关系。方法将 nAchRab IgG或正常人IgG注入大鼠侧脑室,继后经烟碱刺... 目的研究乙酰胆碱受体抗体(nAchRab)IgG在烟碱模拟应激状态下对下丘脑-垂体-肾上腺 (HPA)轴各层面活动的影响,探讨重症肌无力(MG)和MG危象发生机制与HPA内分泌轴变化的关系。方法将 nAchRab IgG或正常人IgG注入大鼠侧脑室,继后经烟碱刺激;应用原位杂交、放射免疫和化学发光免疫法观察:实验组和对照组鼠下丘脑、海马和颞叶促肾上腺皮质释放激素(CRH)mRNA表达和血浆促肾上腺皮质激素(ACTH) 及皮质酮(CORT)浓度。结果在基础状态,nAchRab抑制下丘脑CRHmRNA表达,对海马、颞叶CRHmRNA表达无抑制,对血浆ACTH及CORT水平无影响;nAchRab抑制烟碱所诱导的下丘脑、海马及颞叶CRHmRNA表达,血浆 ACTH及CORT水平下降。结论 nAchRab能与下丘脑、海马及颞叶的乙酰胆碱受体(nAchR)结合,基础状态仅抑制下丘脑CRHmRNA表达;在烟碱诱导的状态下则整个HPA功能受抑制,结果模拟了应激状态MG发病和MG危象时的状况,提示MG发病和MG危象发生可能与HPA功能低下有关。 展开更多
关键词 乙酰胆碱受体抗体 促肾上腺皮质释放激素 促肾上腺皮质激素 皮质酮 烟碱
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儿童重症肌无力抗乙酰胆碱受体抗体和抗突触前膜抗体的探讨:附20例分析
14
作者 吴洁 叶祥枝 《临床儿科杂志》 CSCD 北大核心 1998年第2期110-112,共3页
为了评价抗乙酰胆碱受体(AchR)抗体和抗突触前膜(PrM)抗体在儿童重症肌无力(MG)发病中的作用。对20例儿童MG患儿进行了AchR抗体和PrM抗体的测定。结果表明;AchR抗体阳性率为30%,PrM抗体阳性率为35%,两者基本同步,且均为眼肌型。AchR... 为了评价抗乙酰胆碱受体(AchR)抗体和抗突触前膜(PrM)抗体在儿童重症肌无力(MG)发病中的作用。对20例儿童MG患儿进行了AchR抗体和PrM抗体的测定。结果表明;AchR抗体阳性率为30%,PrM抗体阳性率为35%,两者基本同步,且均为眼肌型。AchR抗体和PrM抗体阳性与否与起病年龄、临床治疗的效果以及其他实验室检查无相关性。本文提示除AchR抗体外,PrM抗体在儿童重症肌无力发病中占有同样重要的地位。 展开更多
关键词 儿童 重症肌无力 乙酰胆碱 受体 抗体 突触前膜
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乙酰胆碱受体抗体浓度在重症肌无力病情评估中的应用 被引量:7
15
作者 陈嘉欣 黄鑫 冯慧宇 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期306-310,共5页
重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的发生发展与机体免疫异常相关,自身免疫抗体在其中发挥重要作用[1]。乙酰胆碱受体抗体(acetylcholine receptors antibody,ACh RAb)是MG最常见的致病抗体,在全身型和眼肌型MG中的阳性率分别约为80%和5... 重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的发生发展与机体免疫异常相关,自身免疫抗体在其中发挥重要作用[1]。乙酰胆碱受体抗体(acetylcholine receptors antibody,ACh RAb)是MG最常见的致病抗体,在全身型和眼肌型MG中的阳性率分别约为80%和50%[2]。目前临床上检测血清中ACh R-Ab主要用于辅助确立MG的诊断和临床亚组分型,但其浓度与MG病情严重程度及预后的关系,尚有争议,且未得到足够重视[3-4]。本文就ACh R-Ab在MG病情评估中的应用现状进行综述。 展开更多
关键词 乙酰胆碱受体抗体 浓度 重症肌无力 病情评估
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抗人乙酰胆碱受体单链抗体1956#在大肠杆菌中的可溶性表达 被引量:1
16
作者 宋琛 徐江 +2 位作者 张芳琳 白文涛 李柱一 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期292-294,297,共4页
目的:重组表达抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(scFv)1956#,提高scFv1956#的可溶性表达量。方法:用PCR扩增含抗人AChR scFv1956#的载体pHEN1中的scFv1956#结构基因,并将其插入到原核表达载体pET44a(+)。用重新构建的载体转化E.coli BL21... 目的:重组表达抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(scFv)1956#,提高scFv1956#的可溶性表达量。方法:用PCR扩增含抗人AChR scFv1956#的载体pHEN1中的scFv1956#结构基因,并将其插入到原核表达载体pET44a(+)。用重新构建的载体转化E.coli BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。用SDS-PAGE来比较更换载体及不同温度和时间对可溶性表达量的影响,并通过Western blot进行鉴定。结果:PCR产物大小为785bp,与预计相符;所构建质粒经测序证实scFv1956#核苷酸序列正确,并正确插入载体pET44a(+)。诱导后得到的可溶性表达量优于原载体pHEN1。结论:载体pET44a(+)表达的端融蛋白NusA可以帮助scFv1956#的正确折叠,从而获得大量可溶性表达。低温长时间诱导有助于提高可溶性表达的量。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体 单链抗体 NUSA
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单链抗体融合人血白蛋白对重症肌无力患者血清与乙酰胆碱受体结合的抑制 被引量:1
17
作者 温爱萍 孟繁平 +4 位作者 李芳芳 穆永佳 孙昌元 李红花 李英信 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期940-942,共3页
目的:研究抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(ScFv637)融合人血白蛋白(HSA-ScFv637)在体外对重症肌无力(MG)的治疗作用。方法:构建出HSA-ScFv637基因,利用甲醇诱导表达出HSA-ScFv637蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印... 目的:研究抗人乙酰胆碱受体(AChR)单链抗体(ScFv637)融合人血白蛋白(HSA-ScFv637)在体外对重症肌无力(MG)的治疗作用。方法:构建出HSA-ScFv637基因,利用甲醇诱导表达出HSA-ScFv637蛋白,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白印迹试验分析融合蛋白的分子量及特异性;应用竞争性ELISA测定法对HSA-ScFv637抑制MG患者血清与人AChR结合率及表达产物稳定性进行测定。结果:HSA-ScFv637对MG患者血清与人AChR结合的抑制率最高可达77.4%,对AChR的这种保护能力可持续3天,随着样品的衰变HSA-ScFv637保护作用减弱至消失。结论:HSA-ScFv637在体外能抑制MG患者血清与AChR的结合,对AChR具有保护作用。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体 单链抗体 融合蛋白
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ABC-ELISA测定重症肌无力患者血清抗乙酰胆碱受体抗体水平的研究 被引量:1
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作者 肖鹏 姚娟 +1 位作者 蒋定国 周善仁 《南京医学院学报》 CSCD 1990年第3期210-212,共3页
采用ABC-ELIsA法检测了50例重症肌无力(MG)患者,20例其它中枢神经系统(CNS)疾病患者及30例正常人血清。发现:临床对照及正常对照组乙酰胆硷受体抗体(AchRAb)均为阴性。50例MG中有21例阳性(42%),全身型MG阳性率明显高于单纯眼肌型(P<0... 采用ABC-ELIsA法检测了50例重症肌无力(MG)患者,20例其它中枢神经系统(CNS)疾病患者及30例正常人血清。发现:临床对照及正常对照组乙酰胆硷受体抗体(AchRAb)均为阴性。50例MG中有21例阳性(42%),全身型MG阳性率明显高于单纯眼肌型(P<0.005),随着病程延长,病情好转,大多患者的AchR抗体OD值呈下降转阴趋势。个别病例抗体比值与临床不符,可能是由于AchRAb的异质性所造成。ABC-ELISA法简便、快速可靠,为MG深入研究提供了有效手段。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱 抗体 受体
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血清毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体水平对甲胎蛋白阴性肝细胞癌的诊断价值 被引量:4
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作者 亚库甫·托合提 张凯楠 +4 位作者 赵辉 吾布里塔里甫·达吾提 张蕊 林仁勇 吕国栋 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2022年第17期2110-2114,共5页
背景肝细胞癌(HCC)是一种恶性程度较高的癌症。甲胎蛋白(AFP)是临床常用的HCC诊断标志物,但其灵敏度仅为41%~65%,漏诊率较高,因此亟须寻找新的诊断标志物和诊断方法以提升AFP阴性患者等的HCC检出率。目的评估毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗... 背景肝细胞癌(HCC)是一种恶性程度较高的癌症。甲胎蛋白(AFP)是临床常用的HCC诊断标志物,但其灵敏度仅为41%~65%,漏诊率较高,因此亟须寻找新的诊断标志物和诊断方法以提升AFP阴性患者等的HCC检出率。目的评估毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体(m3AchR-Ab)对AFP阴性HCC患者的诊断效能,并探索m3AchR-Ab对HCC患者的诊断价值。方法选取2011年11月至2015年9月入库于新疆医科大学第一附属医院标本库的257例患者血清样本,其中90例已确诊为HCC患者的血清样本为HCC组,89例已确诊为良性肝病(肝硬化及肝血管瘤等肝病)患者的血清样本为良性肝病组,78例健康受试者的血清样本为对照组。使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测并比较3组血清m3AchR-Ab水平,分析血清m3AchR-Ab水平与HCC患者性别、年龄、HCC肿瘤大小(最大直径)和数量、TNM分期、淋巴结转移、远处转移、乙肝表面抗原(HBsAg)的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清m3AchR-Ab水平对AFP阴性HCC的诊断价值。结果HCC组血清m3AchR-Ab水平高于良性肝病组和对照组血清(P<0.05)。m3AchR-Ab水平与HCC肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移和HBsAg相关(P<0.05)。血清m3AchR-Ab水平诊断AFP阴性HCC的ROC曲线下面积为0.69〔95%CI(0.54,0.83)〕,最佳截断值为74.00 ng/ml,灵敏度为64.00%,特异度为91.02%。血清m3AchR-Ab联合AFP水平诊断HCC的ROC曲线下面积为0.90〔95%CI(0.85,0.95)〕,灵敏度为90.00%,特异度为88.02%。结论血清m3AchR-Ab水平对AFP阴性HCC具有一定的诊断价值,且使用m3AchR-Ab和AFP联合诊断可提高HCC诊断效能,这可为未来研究新型HCC诊断标志物提供更多参考。 展开更多
关键词 肝肿瘤 甲胎蛋白类 毒蕈碱乙酰胆碱受体m3自身抗体 生物标志物 灵敏度 特异度 影响因素分析 诊断
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抗人乙酰胆碱受体scFv-人血清白蛋白融合蛋白的构建及在大肠杆菌中的表达 被引量:8
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作者 范华英 孟繁平 +4 位作者 齐栋 魏晶 李强 李英信 李红花 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期507-509,共3页
目的:制备抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,提高scFv637的稳定性。方法:用PCR扩增人HSA基因,并克隆到含有抗人乙酰胆碱受体scFv637基因的载体pHEN2中构建重组载体pHEN2-scFv637-HSA。以重组载体转化... 目的:制备抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,提高scFv637的稳定性。方法:用PCR扩增人HSA基因,并克隆到含有抗人乙酰胆碱受体scFv637基因的载体pHEN2中构建重组载体pHEN2-scFv637-HSA。以重组载体转化E.coliHB2151,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE和Westernblot鉴定其融合蛋白的相对分子质量(Mr)。结果:琼脂糖凝胶电泳显示,扩增的人HSA基因和融合基因的大小分别为1770bp和7054bp。构建的scFv637-HSA经测序证实核苷酸序列正确,并且正确克隆至载体的开放读码框架内。表达产物仅存在于pHEN2-scFv637-HSA转化的E.coliHB2151外周质裂解液中。表达的融合蛋白的Mr约为95900。结论:在E.coli中成功地表达scFv637-HSA融合蛋白,为进一步对其进行功能研究和应用奠定了基础。 展开更多
关键词 重症肌无力 乙酰胆碱受体 单链抗体 融合蛋白
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