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乙肝表面抗原突变体的表达及其初步应用
被引量：
3
1
作者
祝长城
罗春贞
王缦
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1136-1139,共4页
目的:构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究。方法:利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM ...
目的:构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究。方法:利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM HBsAgV2(Abbott)酶免试剂盒检测重组表面抗原的活性。结果:通过序列分析确定突变体构建成功,SDS-PAGE显示突变体能在毕赤酵母中有效表达,在Western blot试验中HBsAg突变体被特异性多克隆抗体识别,相对分子质量(Mr)约为38000,AxSYM试剂盒检测结果表明HBsAg突变体具有一定生物活性。结论:利用毕赤酵母表达系统高效表达出具有一定免疫反应性的HBsAg突变体,对于目前市售试剂盒的质量控制和临床应用有较高的实用价值。
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关键词
乙肝表面抗原突变体
毕赤酵母
免疫反应性
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职称材料
单克隆抗体组对重组乙肝表面抗原突变体的结合能力分析
2
作者
祝长城
李基
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期202-203,206,共3页
世界卫生组织（WHO）报道,超过20亿的人曾经感染过HBV,其中有3.5亿是慢性持续感染,以及每年超过百万的慢性乙肝携带者死于肝硬化或肝癌。HBV是一种双链环状DNA病毒[4],DNA长度约为3 200 bp,是通过一RNA作为媒介进行复制的[5],主要是因为...
世界卫生组织（WHO）报道,超过20亿的人曾经感染过HBV,其中有3.5亿是慢性持续感染,以及每年超过百万的慢性乙肝携带者死于肝硬化或肝癌。HBV是一种双链环状DNA病毒[4],DNA长度约为3 200 bp,是通过一RNA作为媒介进行复制的[5],主要是因为DNA聚合酶具有的逆转录酶活性。正是由于逆转录复制的错误率较高,导致了乙肝病毒基因易发生变异,倘若发生在编码表面抗原的抗体结合部位（aa124～147）的基因发生变异,将导致部分突变的抗原对野生型抗原有高亲和力的单克隆抗体（mAb）的结合力降低。
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关键词
乙肝表面抗原突变体
高灵敏度
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职称材料
题名
乙肝表面抗原突变体的表达及其初步应用
被引量：
3
1
作者
祝长城
罗春贞
王缦
机构
华东理工大学生物化学与分子生物学系
上海科华生物工程股份有限公司
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1136-1139,共4页
基金
上海市科学技术委员会科研计划项目(07DZ19502)
文摘
目的:构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究。方法:利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM HBsAgV2(Abbott)酶免试剂盒检测重组表面抗原的活性。结果:通过序列分析确定突变体构建成功,SDS-PAGE显示突变体能在毕赤酵母中有效表达,在Western blot试验中HBsAg突变体被特异性多克隆抗体识别,相对分子质量(Mr)约为38000,AxSYM试剂盒检测结果表明HBsAg突变体具有一定生物活性。结论:利用毕赤酵母表达系统高效表达出具有一定免疫反应性的HBsAg突变体,对于目前市售试剂盒的质量控制和临床应用有较高的实用价值。
关键词
乙肝表面抗原突变体
毕赤酵母
免疫反应性
Keywords
Hepatitis B surface antigen mutant
Pichia pastoris
immunoreactivity
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
单克隆抗体组对重组乙肝表面抗原突变体的结合能力分析
2
作者
祝长城
李基
机构
上海科华生物工程股份有限公司
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第2期202-203,206,共3页
文摘
世界卫生组织（WHO）报道,超过20亿的人曾经感染过HBV,其中有3.5亿是慢性持续感染,以及每年超过百万的慢性乙肝携带者死于肝硬化或肝癌。HBV是一种双链环状DNA病毒[4],DNA长度约为3 200 bp,是通过一RNA作为媒介进行复制的[5],主要是因为DNA聚合酶具有的逆转录酶活性。正是由于逆转录复制的错误率较高,导致了乙肝病毒基因易发生变异,倘若发生在编码表面抗原的抗体结合部位（aa124～147）的基因发生变异,将导致部分突变的抗原对野生型抗原有高亲和力的单克隆抗体（mAb）的结合力降低。
关键词
乙肝表面抗原突变体
高灵敏度
分类号
R446.62 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乙肝表面抗原突变体的表达及其初步应用
祝长城
罗春贞
王缦
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
单克隆抗体组对重组乙肝表面抗原突变体的结合能力分析
祝长城
李基
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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