玉米乙烯应答元件结合蛋白基因启动子克隆与功能验证 被引量：6

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作者 刘鑫 邹郁陶 +2 位作者 牟巍 李晚忱 付凤玲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期629-637,共9页

为了给玉米转基因研究提供更多的非生物逆境诱导启动子,寻找只在逆境胁迫条件下适当驱动外源抗逆基因的表达,在生物信息学分析的基础上,克隆与水稻DREB1B转录因子基因同源的玉米乙烯应答元件结合蛋白基因sb CBF6的启动子psb CBF6,在非... 为了给玉米转基因研究提供更多的非生物逆境诱导启动子,寻找只在逆境胁迫条件下适当驱动外源抗逆基因的表达,在生物信息学分析的基础上,克隆与水稻DREB1B转录因子基因同源的玉米乙烯应答元件结合蛋白基因sb CBF6的启动子psb CBF6,在非生物逆境应答元件分析和实时定量PCR验证其非生物逆境胁迫响应特性后,用以构建驱动报告基因GUS的表达载体,并使用基因枪法转化玉米愈伤组织,通过愈伤组织的GUS荧光值与荧光素酶发光值的比值,评价psb CBF6启动子在非生物逆境胁迫及激素诱导条件下的驱动活性。结果表明,sb CBF6基因在各种非生物逆境胁迫下差异表达。psb CBF6启动子长1 479 bp,存在多种与非生物逆境胁迫应答相关的调控元件,可在非生物胁迫条件下驱动外源抗逆基因在转基因植物中诱导表达。试验结果为研究抗逆转基因玉米提了供参考。 展开更多

关键词 非生物逆境 乙烯应答元件结合蛋白 启动子 玉米

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ERFs转录因子及其在植物胁迫应答中的作用 被引量：8

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作者 卢丞文 潘晓琪 朱本忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期22-27,共6页

ERFs(ethylene-responsive factors)是植物特有的一类转录因子,位于乙烯信号转导途径的下游,具有一个高度保守的含58或59个氨基酸的DNA结合域,通过结合相关基因的启动子顺式作用元件调控植物生物和非生物胁迫反应。综述ERF转录因子的结... ERFs(ethylene-responsive factors)是植物特有的一类转录因子,位于乙烯信号转导途径的下游,具有一个高度保守的含58或59个氨基酸的DNA结合域,通过结合相关基因的启动子顺式作用元件调控植物生物和非生物胁迫反应。综述ERF转录因子的结构特征和分类及其在植物抗逆作用中的研究进展。 展开更多

关键词 erfs 转录因子 乙烯 胁迫应答

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番茄2个ERF-B1亚族转录因子基因的克隆及其对生物和非生物胁迫响应 被引量：13

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作者 王雅慧 李彤 +3 位作者 黄莹 刘洁霞 王枫 熊爱生 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1893-1904,共12页

为进一步研究番茄ERF转录因子调控植物抗逆的分子机理,本研究以番茄浙杂-301为试验材料,分别克隆获得2个乙烯反应元件结合蛋白基因SlERF83和SlERF109,并对其进行序列及表达分析。结果表明,番茄SlERF83和SlERF109基因分别含有678 bp和669... 为进一步研究番茄ERF转录因子调控植物抗逆的分子机理,本研究以番茄浙杂-301为试验材料,分别克隆获得2个乙烯反应元件结合蛋白基因SlERF83和SlERF109,并对其进行序列及表达分析。结果表明,番茄SlERF83和SlERF109基因分别含有678 bp和669 bp的开放阅读框,编码225和222个氨基酸,各含有1个保守的AP2结构域,属于亲水性蛋白。进化分析表明,这2个ERF转录因子均属于AP2/ERF家族中ERF亚族的B1组。SlERF83和SlERF109三级结构都含有1个α-螺旋和3个β-折叠。酵母单杂交及β-半乳糖苷酶活性测定结果证明SlERF83转录因子可以与GCC-box结合。番茄2个ERF蛋白启动子含有多种逆境相关的顺式作用元件。采用荧光定量PCR检测SlERF83和SlERF109在非生物和生物胁迫下的表达,结果表明,高盐和干旱胁迫下,SlERF83和SlERF109基因的表达均被抑制;水杨酸处理能够诱导SlERF83和SlERF109基因的表达;茉莉酸甲酯处理下SlERF83表达水平提高,SlERF109表达量降低;番茄黄化曲叶病毒侵染下,SlERF83和SlERF109基因的表达均被抑制。SlERF83和SlERF109转录因子可能参与了番茄对生物及非生物胁迫的响应过程。本研究结果为进一步深入开展ERF转录因子调控番茄抗逆分子机制研究提供了一定的理论依据。 展开更多

关键词 番茄 转录因子 乙烯反应元件结合蛋白 生物和非生物胁迫 酵母单杂交 响应

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乙烯信号转导新调控因子MHZ3的作用机制

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《种业导刊》 2018年第3期35-35,共1页

乙烯在植物生长发育过程中以及环境应答反应中起着重要的调控作用.研究人员通过解析水稻乙烯不敏感突变体MHZ3,鉴定膜蛋白MHZ3及通过影响EIN2的N端跨膜区促进乙烯信号转导的作用机制.MHZ3编码一个内质网膜蛋白,其表达在转录和蛋白水平... 乙烯在植物生长发育过程中以及环境应答反应中起着重要的调控作用.研究人员通过解析水稻乙烯不敏感突变体MHZ3,鉴定膜蛋白MHZ3及通过影响EIN2的N端跨膜区促进乙烯信号转导的作用机制.MHZ3编码一个内质网膜蛋白,其表达在转录和蛋白水平均受到乙烯诱导. 展开更多

关键词 乙烯信号转导 调控因子 机制 生长发育过程 膜蛋白 研究人员 调控作用 应答反应

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高住低练对大鼠骨骼肌丙酮酸激酶及其转录调节因子的影响 被引量：1

5

作者 黄森 林文弢 +2 位作者 翁锡全 刘建红 周志宏 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2013年第7期76-80,共5页

目的:探讨HiLo训练对大鼠骨骼肌PK及其转录调节因子HIF-1α和ChREBP的影响。方法:40只适应训练后8w龄SD大鼠随机分为低住安静组(LC)、低住低练组(LoLo)、高住安静组(HC)、高住低练组(HiLo)。高住组每天低氧暴露12 h(氧浓度13.6%,相当于... 目的:探讨HiLo训练对大鼠骨骼肌PK及其转录调节因子HIF-1α和ChREBP的影响。方法:40只适应训练后8w龄SD大鼠随机分为低住安静组(LC)、低住低练组(LoLo)、高住安静组(HC)、高住低练组(HiLo)。高住组每天低氧暴露12 h(氧浓度13.6%,相当于海拔3500 m),低练组进行35 m/min、1 h/d、5d/w跑台训练、共训练4w。比色法检测腓肠肌PK活性,RQ-PCR和WB检测PK、HIF-1α和ChREBP的基因和蛋白表达。结果:(1)低氧显著降低PK活性(P<0.01),运动显著升高PK蛋白表达(P<0.05),低氧和运动均能显著提高PK mRNA表达(P<0.01)且具有显著的交互作用(P<0.01);(2)低氧和运动均能显著提高HIF-1αmRNA和蛋白表达(P<0.01)且具有显著的交互作用(P<0.01);(3)运动对ChREBP mRNA和蛋白表达影响显著(P<0.05和P<0.01),且低氧和运动具有显著的交互作用(P<0.01)。结论:4周HiLo训练能够降低大鼠腓肠肌安静状态下PK活性,并通过上调其转录调节因子HIF-1α和ChREBP基因和蛋白的表达诱导PK基因表达,有利于PK在机体安静状态储备能量和在运动状态激发活性,是HiLo训练适应的结果。 展开更多

关键词 高住低练 丙酮酸激酶 低氧诱导因子 糖类应答元件结合蛋白

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植物内质网胁迫应答研究进展 被引量：8

6

作者 杨正婷 刘建祥 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期84-96,共13页

内质网是所有分泌蛋白和大部分膜蛋白合成和折叠的场所。当植物处于逆境时,错误折叠和未折叠蛋白会大量积累在内质网,导致内质网胁迫,为了缓解胁迫,细胞会启动保守的未折叠蛋白应答途径去帮助蛋白折叠,或将错误折叠蛋白降解。内质网胁... 内质网是所有分泌蛋白和大部分膜蛋白合成和折叠的场所。当植物处于逆境时,错误折叠和未折叠蛋白会大量积累在内质网,导致内质网胁迫,为了缓解胁迫,细胞会启动保守的未折叠蛋白应答途径去帮助蛋白折叠,或将错误折叠蛋白降解。内质网胁迫应答在植物发育、抗逆、抗病等过程中发挥了重要的作用。总结了近年来内质网胁迫在植物中的相关报道,对膜结合转录因子和内质网胁迫之间的关系进行了阐述,并提出在研究内质网胁迫途径中未解决的问题,以期为进一步理解内质网胁迫和抗逆的关系提供一些参考。 展开更多

关键词 蛋白折叠 内质网胁迫 未折叠蛋白应答 膜结合转录因子

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细胞动粒蛋白Hec1启动子的结构及功能分析

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作者 李良维 刘兢 +1 位作者 姚雪彪 程联胜 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期869-875,共7页

细胞的分裂是一个严格调控,高度有序的过程.为了将复制后的染色体均匀、准确地传递给两个子细胞,细胞在分裂中后期受到纺锤体检验点的严格监控.Hec1定位于动粒,是纺锤体检验点调控的关键蛋白之一,它通过螺旋-螺旋结构域与其他动粒蛋白... 细胞的分裂是一个严格调控,高度有序的过程.为了将复制后的染色体均匀、准确地传递给两个子细胞,细胞在分裂中后期受到纺锤体检验点的严格监控.Hec1定位于动粒,是纺锤体检验点调控的关键蛋白之一,它通过螺旋-螺旋结构域与其他动粒蛋白相互作用调节姐妹染色体的精确分离.为研究Hec1转录水平的调控机理,采用BLAST工具,从GenBank中搜索到了人Hec1基因上游的序列,并利用在线工具http://mbs.cbrc.jp/research/db/TFSEARCH.html提供的转录因子结合位点搜索引擎,对其5′启动子调节区段进行了分析.分析结果表明:在Hec1基因上游-200～-1序列内,存在E2F、ATF4和cAMP应答元件结合蛋白(CREB)等转录因子调控元件.在结构分析的基础上,提取HeLa细胞基因组DNA,用PCR方法克隆了Hec1基因启动子,并构建了多个含启动子不同区段的pGL3荧光素酶报告基因表达质粒.瞬时转染HeLa细胞后的结果表明,-70～-63以及-155～-144之间的启动子区对维持荧光素酶活性最为关键.凝胶迁移实验证明,这两个区段分别能够和转录因子CREB以及ATF4结合.随后,采用野生型的以及含有133位磷酸化位点突变的CREB转染HeLa细胞,通过荧光定量PCR实验发现,Hec1的表达水平分别出现明显上升和下降.该结果表明,Hec1表达的调控是通过CREB的活化来完成的. 展开更多

关键词 Hecl 动粒 启动子 活化转录因子4 cAMP应答元件结合蛋白

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丹参抗性基因SmORA1的克隆及诱导表达分析 被引量：2

8

作者 化文平 刘文超 +2 位作者 贾林泉 王喆之 李翠芹 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2185-2190,共6页

该研究采用PCR方法从丹参中克隆出一条乙烯应答因子结合蛋白(ERF)转录因子编码基因,命名为SmORA1,GenBank登录号为KT359598。经分析发现该基因全长648bp,不包含内含子,编码206个氨基酸残基。编码蛋白SmORA1含有典型的AP2结合结构域。表... 该研究采用PCR方法从丹参中克隆出一条乙烯应答因子结合蛋白(ERF)转录因子编码基因,命名为SmORA1,GenBank登录号为KT359598。经分析发现该基因全长648bp,不包含内含子,编码206个氨基酸残基。编码蛋白SmORA1含有典型的AP2结合结构域。表达分析结果表明,SmORA1主要在丹参根中表达,且该基因的表达明显受到茉莉酸甲酯(MeJA)、脱落酸(ABA)、乙烯(ET)、机械创伤和病原菌等逆境信号的诱导,但低温和脱水情况下SmORA1表达下调。研究表明,SmORA1参与丹参生物胁迫反应,可整合JA、ABA、ET和病原菌等胁迫信号途径。 展开更多

关键词 丹参 乙烯应答因子结合蛋白(erf) 基因克隆 表达模式 胁迫

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七氟醚麻醉对老年小鼠空间认知能力以及海马组织pCreb和Egr1表达的影响 被引量：2

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作者 周国霞 朋立超 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1125-1129,共5页

目的探讨七氟醚麻醉对老年小鼠空间认知能力以及海马组织中磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(pCreb)和早期生长反应因子1(Egr1)表达的影响。方法将12只18月龄老年小鼠随机分为麻醉组和对照组,每组各6只。麻醉组小鼠吸入3%七氟醚4 h,而对... 目的探讨七氟醚麻醉对老年小鼠空间认知能力以及海马组织中磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(pCreb)和早期生长反应因子1(Egr1)表达的影响。方法将12只18月龄老年小鼠随机分为麻醉组和对照组,每组各6只。麻醉组小鼠吸入3%七氟醚4 h,而对照组小鼠吸入100%氧气4 h。水迷宫空间学习记忆能力测量在麻醉后48 h进行,获得训练结束后24 h进行空间探索试验。空间探索试验结束后15 min分离海马组织,通过Western blotting和实时定量PCR方法检测海马组织Egr1、Creb和pCreb的表达。结果麻醉组小鼠第4、5、6日逃逸潜伏期显著长于对照组(P<0.05);在空间探索试验中,对照组平台象限时间、路程百分比显著高于麻醉组(P<0.01)。与对照组比较,麻醉组小鼠海马组织Egr1的表达量显著下降(P<0.05);而两组Creb的表达量无显著差异(P>0.05),但麻醉组磷酸化水平下降(P<0.05)。结论七氟醚麻醉下调海马组织Egr1表达和Creb磷酸化水平,影响老年小鼠空间认知能力。 展开更多

关键词 海马 环腺苷酸应答元件结合蛋白 早期生长反应因子1 空间探索试验 老年小鼠 七氟醚

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七氟醚-N2O麻醉对青年小鼠空间学习和记忆功能及pCREB和Egr1表达的影响

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作者 王蓓 周国霞 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期412-418,共7页

目的研究七氟醚-N2O麻醉后青年小鼠的空间学习和记忆能力以及海马磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(phosphorylated cyclic AMP response element-binding protein,pCREB)和早期生长反应因子1(early growth response factor 1,Egr1)的表... 目的研究七氟醚-N2O麻醉后青年小鼠的空间学习和记忆能力以及海马磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(phosphorylated cyclic AMP response element-binding protein,pCREB)和早期生长反应因子1(early growth response factor 1,Egr1)的表达,并与老年小鼠进行比较。方法12只3月龄和12只18月龄小鼠随机分为对照组和实验组,每组各6只。48 h后进行为期6天的获得训练。获得训练结束后24 h进行空间探索实验,实验结束后15 min收集两组小鼠的海马组织,通过Western blot和实时定量PCR方法评估pCREB和Egr1的表达水平。结果未见麻醉损害青年小鼠的空间学习和记忆功能以及海马中pCREB和Egr1的表达水平,麻醉组与对照组比较差异均无统计学意义;而老年小鼠Sev+N2O组在麻醉后第4、5、6天逃逸潜伏期显著长于对照组(P<0.05),两组小鼠游泳速度差异无统计学意义;在空间探索实验中,Sev+N2O组目标象限路程百分比和时间百分比显著低于对照组(P<0.01);海马中pCREB和Egr1的表达水平均较对照组显著下降(P<0.05)。结论七氟醚-N2O麻醉对青年小鼠的空间学习记忆能力没有损害,也不影响海马中pCREB和Egr1的表达,但会对老年小鼠造成损害。 展开更多

关键词 七氟醚 一氧化二氮(N2O) 环腺苷酸应答元件结合蛋白(pCREB) 早期生长反应因子1(Egr1) 小鼠 MORRIS水迷宫

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天麻破壁粉基于CREB/BDNF信号通路对癫痫大鼠的干预研究

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作者 莫换好 肖署阳 黄玉莲 《中国临床解剖学杂志》 2025年第6期671-676,共6页

目的 分析天麻破壁粉基于环腺苷酸应答元件结合蛋白/脑源性神经营养因子(CREB/BDNF)信号通路对癫痫大鼠的干预效果。方法 选取SPF级SD雄性大鼠40只(建模过程死亡2只),其中对照组10只,模型组12只,药物对比组8只,天麻破壁粉组8只。对照组... 目的 分析天麻破壁粉基于环腺苷酸应答元件结合蛋白/脑源性神经营养因子(CREB/BDNF)信号通路对癫痫大鼠的干预效果。方法 选取SPF级SD雄性大鼠40只(建模过程死亡2只),其中对照组10只,模型组12只,药物对比组8只,天麻破壁粉组8只。对照组、模型组仅进行生理盐水灌胃,不做其他处理。药物对比组给予吡仑帕奈0.3 g/kg水溶液灌胃,天麻破壁粉组给予天麻破壁粉1.0 g/kg灌胃。评估大鼠自身行为;记录癫痫持续时间;观察细胞凋亡率;检测TNF-α、IL-1β、IL-6、CAT、MDA、SOD水平;评估大鼠记忆能力;检测CREB/BDNF信号通路相关蛋白。结果 相较对照组,模型组、药物对比组、天麻破壁粉组行为学评分水平、细胞凋亡率情况、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平、逃避潜伏期时间均升高(P<0.05),CAT、SOD水平、穿越平台次数情况、p-CREB/CREB、BDNF蛋白表达量均降低(P<0.05);相较模型组、药物对比组,天麻破壁粉组行为学评分水平、细胞凋亡率、发作持续时间、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA水平、逃避潜伏期时间均降低(P<0.05),CAT、SOD水平、穿越平台次数、p-CREB/CREB、BDNF蛋白表达均升高(P<0.05)。结论 天麻破壁粉上调CREB/BDNF通路活性,可改善癫痫大鼠记忆能力,抑制细胞凋亡率,缓解神经炎症、抑制氧化应激状态。 展开更多

关键词 天麻破壁粉 环腺苷酸应答元件结合蛋白/脑源性神经营养因子信号 癫痫 大鼠

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