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临床实验室检测乙型肝炎病毒表面抗原的方法学关联及效能分析
1
作者 汪海霞 张舒林 +4 位作者 赵莹莹 冯扬帆 杜伟鹏 梁靖宜 李佳蔚 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第7期1772-1776,1781,共6页
目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)在临床实验室不同检测系统之间存在的关联及检测效能分析,进而对检测结果进行科学合理的解读,使临床实验室更好地服务于临床。方法:收集南阳市中心医院2021年6月至2022年7月期间,临床科室(感... 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)在临床实验室不同检测系统之间存在的关联及检测效能分析,进而对检测结果进行科学合理的解读,使临床实验室更好地服务于临床。方法:收集南阳市中心医院2021年6月至2022年7月期间,临床科室(感染肝病科为主)送检的筛查、疑似及确诊HBV感染患者标本100425例,检测方法学为HBsAg定量(电化学发光法和化学发光法)、定性(金标法)、半定量(ELISA法)和高灵敏HBV-DNA(RT-PCR法),分析各方法学之间的优劣及密切程度。罗氏HBsAg两套检测系统之间存在的关系采用相关分析方法。HBsAg效能分析采用Cut/Off值设定和检出限验证,进而分析假阳性和假阴性报告模型的分布。结果:低浓度和中浓度HBsAg的检测结果在电化学发光半定量法与ELISA法之间有相关性。ELISA法检测HBsAg在灵敏度和特异度方面仍具有检测优势,与国内外HBsAg定量检测系统相比无显著差异。依据CNAS-GL038文件进行性能验证显示,本实验室ELISA法检测HBsAg计算所得HBsAg最低检出限至0.1U/ml,ROC曲线设定Cut/Off值=0.105时,曲线下面积最大(AUC=0.986)。以罗氏电化学发光半定量检测和患者病史为依据,ELISA法检测HBsAg假阳性的发生例数在乙肝五项常见报告模型中,以单独HBsAg阳性出现的频次最高,HBsAg在OD值小于0.5区间内出现假阳性频次最高。在ELISA法检测HBsAg报告阴性结果中,随着OD值由0.01到0.10逐渐增大,假阴性结果发生例数随之增多。罗氏Elecsys HBsAgⅡquantⅡ和Elecsys HBsAgⅡ两套检测系统在一定条件下存在较好的线性关系,两者之间的倍数约为1/0.18。在ElecsysHBsAgⅡquantⅡ检测系统下,HBsAg待测标本经400倍稀释后的检测结果与原倍检测结果之间具有高度的一致性,判定系数R^(2)=0.9938。结论:HBsAg多检测系统之间在一定条件下存在密切联系,且ELISA法检测HBsAg可以满足临床检测需求。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒表面抗原 方法学 效能评价
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隐匿性乙型肝炎病毒感染
2
作者 刘永振 廖昊 鲁凤民 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第9期1246-1256,共11页
隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)是潜在的HBV传染源,可通过输血等方式传播。同时,OBI还可使乙肝相关疾病慢性进展,并维持乙肝慢性感染的状态,在免疫机能下降或接受免疫抑制治疗情况下可能导致HBV感染... 隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)是潜在的HBV传染源,可通过输血等方式传播。同时,OBI还可使乙肝相关疾病慢性进展,并维持乙肝慢性感染的状态,在免疫机能下降或接受免疫抑制治疗情况下可能导致HBV感染再激活,引发急性肝炎或肝衰竭等严重肝病。因而,OBI是一个重要的公共卫生问题,严重影响该人群生命健康和我国HBV感染防控。OBI的核心特征是用灵敏的试剂检测血清乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)阴性,但肝内存在复制全能性(replication competent)HBV基因组,以致循环血中的HBV DNA可呈间歇低值阳性(通常<200 IU/mL),HBV存在再激活风险。随着慢性乙型肝炎功能性治愈的不断扩大,国内外各大指南对功能性治愈的定义也在不断完善,其中均提到血清乙肝表面抗原持续消失的功能性治愈者肝组织内仍可能有HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的存在,提示这部分功能性治愈者的病毒学指征类似于隐匿性感染状态。本文围绕OBI定义、分类、对公共卫生影响、发生机制和临床再激活预防等方面进行阐述,梳理OBI相关研究进展,更新对OBI的认知,以期提高临床和公共卫生从业者对新形势下OBI人群的关注。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 隐匿性乙型肝炎病毒感染 功能性治愈 乙型肝炎病毒表面抗原
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乙型肝炎病毒表面抗原清除影响因素的研究进展 被引量：1
3
作者 陈巧霞 蒋雪梅 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期462-468,共7页
近年来,随着各种抗病毒药物的使用及乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)疫苗和母婴阻断的广泛普及,慢性乙型肝炎(CHB)的防治取得了显著进步。但数据显示,2019年全球一般人群乙肝病毒表面抗原(HBsAg)流行率为3.8%,约有150万新发HBV感染者,2.96亿慢... 近年来,随着各种抗病毒药物的使用及乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)疫苗和母婴阻断的广泛普及,慢性乙型肝炎(CHB)的防治取得了显著进步。但数据显示,2019年全球一般人群乙肝病毒表面抗原(HBsAg)流行率为3.8%,约有150万新发HBV感染者,2.96亿慢性感染者,82万人死于HBV感染相关疾病[1],HBV感染仍然是全球范围内威胁人类健康的重大公共卫生问题。但研究也表明HBsAg清除后持久性佳,复发率低,乙肝相关不良事件(肝癌、失代偿肝硬化、肝移植和/或死亡)发生率也显著下降[2],并且HBsAg清除是CHB患者最接近临床治愈[持续病毒学应答且HBsAg阴转伴或不伴有抗-HBs阳转、丙氨酸转氨酶(ALT)正常、肝组织病变轻微或无病变]的一个指标。而寻找有利于HBsAg清除的相关因素进行个体化治疗提高临床治愈率一直是临床关注的热点问题。因此本文主要从宿主、病毒、治疗方案等角度对与HBsAg清除有关的相关因素进行概述。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 慢性 乙型肝炎表面抗原 影响因素
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抗乙型肝炎病毒表面抗原T7噬菌体抗体库的构建 被引量：4
4
作者 刘兵 马晓宇 +1 位作者 李响 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期84-87,共4页
构建T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体。从抗-HBs阳性患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第1条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PCR组成scFv基因,并... 构建T7噬菌体单链抗体(scFv)库筛选抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体。从抗-HBs阳性患者外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录合成cDNA第1条链,PCR分别扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),经重叠延伸拼接(SOE)PCR组成scFv基因,并将其与T7噬菌体载体的2个臂相连接。体外包装后,在宿主菌BLT5403中,扩增重组噬菌体抗体库。以乙型肝炎病毒表面抗原进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的筛选,酶免疫实验检测抗体活性。所建抗体库库容为1.53×107,扩增后初级库滴度为2.42×1010pfu/mL。以乙型肝炎病毒表面抗原筛选后抗体出现特异性富集,经酶免疫实验鉴定,得到2株与HBsAg抗原特异结合的噬菌体抗体,成功构建了抗HBsAg蛋白T7噬菌体抗体库。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒表面抗原 SCFV T7噬菌体抗体库
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用反向被动血凝抑制试验进行乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体的位阻分析 被引量：2
5
作者 刘新铭 李文琦 +5 位作者 李益民 阎伟 高鸿瑞 谢溱 蔡玲民 彭学芳 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期17-21,共5页
本文报告获得28株分泌抗HBsAg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,均为抗HBsAg“a”决定簇抗体。产生鼠IgM抗体的有一个细胞系;IgG1 18个系;IgG 2a 1个系;IgG 2b 6个系;IgG 3两个系。采用反向被动血凝抑制法测定了其中24种McAb的交互抑制现象。24... 本文报告获得28株分泌抗HBsAg单克隆抗体的杂交瘤细胞系,均为抗HBsAg“a”决定簇抗体。产生鼠IgM抗体的有一个细胞系;IgG1 18个系;IgG 2a 1个系;IgG 2b 6个系;IgG 3两个系。采用反向被动血凝抑制法测定了其中24种McAb的交互抑制现象。24种McAb可分为10个不同的抑制群。并对这种简单易行的位阻分析方法在实用中的价值做了讨论。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒表面抗原 反向被动血凝抑制试验 单克隆抗体 抗HBSAG 杂交瘤细胞系 IgM抗体 血凝抑制法 IgG MeAb McAb 决定簇
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鸭乙型肝炎病毒的致病性及致癌性研究──Ⅲ．单克隆抗体夹心ELISA检测血清中鸭乙型肝炎病毒表面抗原的研究 被引量：3
6
作者 陈义平 王宝安 朱坤熹 《中国畜禽传染病》 CSCD 1994年第6期13-17,共5页
以５Ｂ８株抗ＤＨＢｓＡｇ特异性单克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体，首次建立了检测血清中ＤＨＢｓＡｇ的单抗夹心ＥＬＩＳＡ．对纯化ＤＨＢｓＡｇ的最小检出量为１０ｎｇ／ｍｌ．对雏鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒等９种禽类常见的病毒病抗原... 以５Ｂ８株抗ＤＨＢｓＡｇ特异性单克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体，首次建立了检测血清中ＤＨＢｓＡｇ的单抗夹心ＥＬＩＳＡ．对纯化ＤＨＢｓＡｇ的最小检出量为１０ｎｇ／ｍｌ．对雏鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒等９种禽类常见的病毒病抗原及人乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）均不发生反应，且能被多克隆的兔抗ＤＨＢｓＩｇＧ及５Ｂ８株单抗本身所阻断。应用本试验方法调查江苏省部分地区麻鸭ＤＨＢＶ的感染率分别为：高邮２４．５％、常州２１．７％、仪征４０．３％、启东５０．０％。１日龄雏鸭静脉接种ＤＨＢＶ后，经本法检测，结果ＤＨＢｓＡｇ阳性率从４０％上升到７９％，６个月后又下降至６９％。 展开更多
关键词 鸭 乙型肝炎病毒 致病 致突变 表面抗原
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乙型肝炎病毒前S_1抗原及抗体的检测及临床意义 被引量：34
7
作者 刘惠珍 闵福援 +3 位作者 王健 李秀惠 黄己实 骆抗先 《首都医科大学学报》 CAS 1997年第3期246-248,共3页
用合成乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ１肽及其免疫抗体制备的试剂，检测１９例急性、１０３例慢性乙型肝炎患者血清中的前Ｓ１抗原和抗体。结果：前Ｓ１抗原及抗体的阳性率在急性乙型肝炎患者分别为８４．２％和８９．５％，在慢性乙型肝... 用合成乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ１肽及其免疫抗体制备的试剂，检测１９例急性、１０３例慢性乙型肝炎患者血清中的前Ｓ１抗原和抗体。结果：前Ｓ１抗原及抗体的阳性率在急性乙型肝炎患者分别为８４．２％和８９．５％，在慢性乙型肝炎患者分别为２５．０％和８４．２％。前Ｓ１抗原在血清学表达上与ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ的阳性符合率分别高达８９．３％和８７．５％。前Ｓ１抗体与抗ＨＢｓ在体内有明显相伴随关系。提示：前Ｓ１蛋白是ＨＢＶ在体内复制的可靠标志，而前Ｓ１抗体反映疾病的恢复和病毒的清除。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 前S1抗原 抗体 检测
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正常妊娠晚期母婴乙型肝炎表面抗体浓度相关性研究 被引量：6
8
作者 王文龙 唐晓鹏 +3 位作者 丁依玲 杨旭 许允 范幸 《中国感染控制杂志》 CAS 2004年第2期106-108,共3页
目的　定量研究正常妊娠晚期母婴乙型肝炎表面抗体 (HBsAb)浓度相关性。方法　 1 5 2例乙型肝炎表面抗原阴性产妇 ,分娩前 2 4h抽静脉血 ;其新生儿收集脐血。用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测母血HBsAb ;用时间分辨免疫荧光分析 (TRF)法测H... 目的　定量研究正常妊娠晚期母婴乙型肝炎表面抗体 (HBsAb)浓度相关性。方法　 1 5 2例乙型肝炎表面抗原阴性产妇 ,分娩前 2 4h抽静脉血 ;其新生儿收集脐血。用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测母血HBsAb ;用时间分辨免疫荧光分析 (TRF)法测HBsAb定性阳性的母血及其相应脐血的HBsAb浓度。结果　ELISA法检测母血HBsAb阳性率为 2 8.95 % (4 4 / 1 5 2 ) ;TRF法测母血HBsAb浓度 >1 0mU/mL者 4 1例 (>1 0mU/mL为阳性 ) ,与ELISA法相符率为 93.1 8% (4 1 / 4 4 ) ,测母血HBsAb阳性对应脐血的HBsAb浓度 >1 0mU/mL者 4 2例。 4 4例母血HBsAb阳性组中 ,其相应脐血有 6 8.1 8% (30 / 4 4 )HBsAb浓度高于母血。结论　正常妊娠晚期HBsAb可通过胎盘主动转运至胎儿体内 ,脐血中HBsAb浓度与母血呈显著正相关 。 展开更多
关键词 妊娠晚期 母婴 乙型肝炎表面抗体 浓度 肝炎抗体 母体获得性
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截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白原核表达、多克隆抗体的制备和鉴定 被引量：2
9
作者 王超 田拥军 +5 位作者 张娥娟 吴洪坤 刘嘉 王宝菊 赵西平 杨东亮 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期467-470,共4页
目的：构建截短型鸭乙型肝炎病毒（DHBV）核心蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，制备多克隆抗体。方法：应用基因工程技术将编码截短型DHBV核心蛋白（DH-BcAg 1～214aa）的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内，在宿主菌Rosetta（... 目的：构建截短型鸭乙型肝炎病毒（DHBV）核心蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中表达，制备多克隆抗体。方法：应用基因工程技术将编码截短型DHBV核心蛋白（DH-BcAg 1～214aa）的基因片段装入原核表达载体pRSET-B内，在宿主菌Rosetta（DE3）pLacI内进行诱导表达，运用Ni-NTA方法纯化目的蛋白。用纯化的重组蛋白免疫BALB／c小鼠制备多克隆抗体，并采用酶联免疫吸附实验（ELISA），Western blot及免疫组化检测抗体的灵敏度和特异性。结果：成功地构建了含截短型DHBV核心区基因的质粒，并纯化得到了相对分子质量（Mr）约为28000的目的蛋白，用之免疫BALB／c小鼠获得了高效价的特异性多克隆抗体。结论：获得的重组截短型DHBV核心抗原纯度高，免疫反应性强；获得的多克隆抗体有较高的效价和较好的特异性，为DHBV的检测和研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 鸭乙型肝炎病毒 核心蛋白 原核表达载体 多克隆抗体
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乙型肝炎病毒慢性感染与其表面抗原基因突变的相关性 被引量：5
10
作者 王卫华 宋建新 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期258-261,共4页
目的基于一个完整的乙型肝炎病毒(HBV)感染自然史的4个时期(免疫耐受期、免疫清除期、不活动期和HBeAg阴性肝炎阶段),研究HBV表面抗原各抗原表位的免疫逃逸突变分布。方法收集280例患者的临床资料及血清标本,按照HBV自然史的不同时期分... 目的基于一个完整的乙型肝炎病毒(HBV)感染自然史的4个时期(免疫耐受期、免疫清除期、不活动期和HBeAg阴性肝炎阶段),研究HBV表面抗原各抗原表位的免疫逃逸突变分布。方法收集280例患者的临床资料及血清标本,按照HBV自然史的不同时期分为4组,提取DNA并荧光定量,通过巢式PCR扩增HBV表面基因序列,以PCR产物作为模板进行DNA测序。分析比较4组乙肝表面抗原中辅助性T细胞(Th)表位、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位及B细胞抗原表位的突变差异。结果 Th抗原表位突变中,4组间比较具有差异的是17-31、37-51、67-81等区域,CTL抗原表位突变中具有差异的是14-22、41-49等区域,在B细胞抗原表位区域发现了Q101K、P120S、T126S、Q129H、M133L、M133I、和M133T等7个乙肝表面抗原免疫逃逸突变。结论在HBV感染自然史中,表面抗原突变的累积发生在免疫清除期,突变的产生有利于HBV逃避免疫系统的攻击。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 表面抗原 突变 病毒感染自然史
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乙型肝炎病毒表面抗原调控Fas介导的肝癌细胞株凋亡 被引量：3
11
作者 刘磊 费锐 +1 位作者 仝巧云 刘伟 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期388-393,共6页
目的探讨乙肝病毒表面抗原(HBsAg)对Fas介导的人肝癌细胞株细胞毒性及凋亡的影响。方法构建pcDNA3.1-HBsAg重组载体并筛选表达HBsAg的肝癌细胞株,通过CCK-8实验检测HBsAg对Fas激动型抗体(antiFas CH11)介导的HepG2、Huh7、Hep3B细胞毒... 目的探讨乙肝病毒表面抗原(HBsAg)对Fas介导的人肝癌细胞株细胞毒性及凋亡的影响。方法构建pcDNA3.1-HBsAg重组载体并筛选表达HBsAg的肝癌细胞株,通过CCK-8实验检测HBsAg对Fas激动型抗体(antiFas CH11)介导的HepG2、Huh7、Hep3B细胞毒性的影响;通过TUNEL和AnnexinⅤ实验检测HBsAg对CH11介导的HepG2、Huh7、Hep3B细胞凋亡的影响;自噬抑制剂3-MA预处理后,观察HBsAg对CH11介导的HepG2细胞凋亡的影响。结果 HBsAg以表达量依赖的方式促进CH11介导的HepG2细胞毒性(P<0.05);HBsAg促进CH11介导的HepG2细胞凋亡可以被Fas封闭性抗体(anti-Fas ZB4)完全阻断(P<0.05);过表达mFas受体后HBsAg可促进CH11介导的Huh7和Hep3B细胞毒性及凋亡(P<0.05);CH11介导的HBsAg促凋亡效应可被3-MA抑制(P<0.05)。结论 HBsAg促进Fas介导的肝细胞凋亡依赖于mFas受体,可能与HBsAg诱导自噬机制有关。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒表面抗原 mFas 凋亡 自噬
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原代培养人肝细胞体外乙型肝炎病毒感染和乙型肝炎病毒表面抗原黏附模型初探 被引量：1
12
作者 潘桃 唐莉 +3 位作者 习东 魏来 明长生 陈知水 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期479-482,共4页
目的研究建立人肝细胞体外乙型肝炎病毒(HBV)感染模型和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)黏附模型,为后期研究小分子抗体Fab的作用打下基础。方法体外原代培养人肝细胞,对人原代肝细胞进行HBsAg黏附实验及HBV感染实验。采用正常人胎肝细胞系(L-... 目的研究建立人肝细胞体外乙型肝炎病毒(HBV)感染模型和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)黏附模型,为后期研究小分子抗体Fab的作用打下基础。方法体外原代培养人肝细胞,对人原代肝细胞进行HBsAg黏附实验及HBV感染实验。采用正常人胎肝细胞系(L-02)及鼠原代肝细胞进行实验对照。倒置相差显微镜下观察细胞形态,生化法检测其白蛋白分泌功能。免疫组化法检测HBsAg黏附情况和HBV感染肝细胞内HBsAg的表达。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝细胞感染HBV后HBsAg的持续表达。PCR检测肝细胞内HBV复制中间体-闭合环状双链DNA(cccDNA)。结果人原代肝细胞体外培养达2周以上。HBsAg黏附实验检测到HBsAg可黏附于人原代肝细胞、L-02、鼠原代肝细胞胞膜。HBV体外仅感染人原代肝细胞,从第2天起即可检测到细胞培养上清中存在HBsAg,并持续到观察结束第16天,免疫组化检测人原代肝细胞内HBsAg呈阳性;PCR检测到人原代肝细胞内存在HBV-cccDNA,而L-02及鼠原代肝细胞实验检测结果均为阴性。结论人原代肝细胞体外分离培养成功,HBsAg黏附和HBV感染模型初步建立于人原代肝细胞。 展开更多
关键词 人原代肝细胞 乙型肝炎病毒表面抗原 乙型肝炎病毒 感染
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大容量天然人源单链抗体库的构建及抗乙型肝炎病毒PreS1单链抗体的淘选 被引量：1
13
作者 盛辉 苑春莉 +2 位作者 张志超 胡学军 迟宝荣 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期753-755,共3页
目的 :从大容量抗体库中淘选全人源化抗乙型肝炎病毒 Pre S1的单链抗体。方法 :以 6 0例健康供者的外周血淋巴细胞为来源 ,构建了 10 1 0人源天然单链抗体库 ,并以 Pre S1抗原肽进行淘选。 3轮淘选后 ,单克隆经 EL ISA检测 ,富集的特异... 目的 :从大容量抗体库中淘选全人源化抗乙型肝炎病毒 Pre S1的单链抗体。方法 :以 6 0例健康供者的外周血淋巴细胞为来源 ,构建了 10 1 0人源天然单链抗体库 ,并以 Pre S1抗原肽进行淘选。 3轮淘选后 ,单克隆经 EL ISA检测 ,富集的特异性单克隆经 E.coli HB2 15 1表达后进行 Western检测并测序。结果 :3轮淘选之后 ,噬菌体的投入 /产出比提高了 10 0倍。抗原抗体反应结果显示 ,A4 1 0 =1.0的抗 Pre S1的单链抗体得到富集。Western结果显示其插入的单链抗体片段正确。该抗体基因序列的 DNAPL OT软件分析结果进一步表明该抗体是人抗体 ,其 VH 属于 VH1亚族 ,Vλ属于 Vλ1亚族。结论 :这一技术是获得全人源化抗 Pre S1的单链抗体的有效途径 ,同时为基因工程抗体用于临床治疗乙型肝炎奠定基础。 展开更多
关键词 单链抗体 肝炎病毒 乙型 肝炎表面抗原 乙型 细菌噬菌体 抗体库
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IgM类抗HBs独特型抗体的检测与乙型肝炎病毒感染 被引量：2
14
作者 江淑芳 潘婉贞 董文峰 《临床肝胆病杂志》 CAS 1990年第3期130-132,共3页
1985年Troisi氏等在HBV感染患者的血循环中发现抗HBs独特型抗体,首次报道了独特型抗体存在于自然病毒感染期;
关键词 乙型肝炎 乙肝病毒 抗体检测 HBS
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鸭乙型肝炎病毒表面抗原的纯化及应用 被引量：1
15
作者 唐霓 黄爱龙 +1 位作者 郭树华 张定凤 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2001年第1期14-16,共3页
目的：从鸭乙型肝炎病毒（DHBV）感染鸭血清中纯化表面抗原（DHBsAg），初步应用于病毒感染后复制的研究。 方法：用蔗糖密度梯度离心纯化病毒表面抗原，经Bradford法定量血清中该蛋白含量； 建立DHBsAg ELISA检测方法， 并与DHBV DNA... 目的：从鸭乙型肝炎病毒（DHBV）感染鸭血清中纯化表面抗原（DHBsAg），初步应用于病毒感染后复制的研究。 方法：用蔗糖密度梯度离心纯化病毒表面抗原，经Bradford法定量血清中该蛋白含量； 建立DHBsAg ELISA检测方法， 并与DHBV DNA斑点杂交相比较。 结果：纯化DHBsAg 经ELISA检测OD490nm≥1.0，Western杂交显示主要肽分子量为17KDa和35KDa；Bradford法定量血清蛋白含量为2.85～5.10μg/ml, DHBsAg ELISA检测100份血清标本阳性数为84例, 斑点杂交检测阳性数为88例,两者吻合率为94%。 结论：DHBsAg 的制备及ELISA方法的建立，为进一步研究病毒感染后复制及体内免疫应答状况奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭乙型肝炎病毒表面抗原 Western杂交 纯化 DHBV
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高亲和力抗乙型肝炎表面抗原单克隆抗体制备及检测变异HBsAg方法的建立 被引量：1
16
作者 刘慎沛 田拥军 +1 位作者 杨燕 杨东亮 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期667-670,共4页
目的制备抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)单克隆抗体,建立检测变异HBsAg的方法。方法用血源HB-sAg免疫BALB/c小鼠,制备可以识别变异HBsAg的抗-HBs单抗。筛选出可以较好识别变异HBsAg的单抗mAb1,优化该抗体ELISA检测HBsAg的方法,与2种HBsAg检... 目的制备抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)单克隆抗体,建立检测变异HBsAg的方法。方法用血源HB-sAg免疫BALB/c小鼠,制备可以识别变异HBsAg的抗-HBs单抗。筛选出可以较好识别变异HBsAg的单抗mAb1,优化该抗体ELISA检测HBsAg的方法,与2种HBsAg检测试剂比较检测变异HBsAg的能力。对6份临床样品进行检测及序列分析,以证实方法的可靠性。结果经过筛选,得到1种可以较好识别包括G145R在内的大多数变异HB-sAg的单抗。检测变异HBsAg的能力优于市售HBsAg诊断试剂。结论制备的单抗可以用于ELISA检测变异HB-sAg,减少HBsAg变异株的漏检率。 展开更多
关键词 乙型肝炎表面抗原 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定
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含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究 被引量：1
17
作者 胡贵方 吴小兵 +3 位作者 俞守义 董小岩 陈清 候云德 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期553-556,共4页
目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂... 目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中,G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-HBsAg;用具有rAAV包装功能的HSV-1- HSV1-rc/△UL2感染BHK-HBsAg,纯化后得到rAAV-HBsAg;ELISA检测重组病毒表面抗原基因在BHK-21细胞和293细胞中的表达;用rAAV-HBsAg免疫BalB/C小鼠,RIA法检测血清中表面抗体的滴度。结果ELISA法检测到混合细胞系BHK-HBsAg中HBsAg的表达量为(28.6±6.7)ng/5×106细胞;rAAV-HBsAg感染BHK-21细胞和293细胞后均能检测到HBsAg的表达,表达量随感染复数的增加而升高;rAAV-HBsAg免疫的BalB/C小鼠能产生表面抗体(抗-HBs抗体)。结论rAAV-HBsAg在体外能表达,免疫动物能诱导体液免疫反应的产生。rAAV-HBsAg有希望成为乙型肝炎候选疫苗,也可以进一步用于探索慢性乙型肝炎的免疫治疗。 展开更多
关键词 乙型肝炎表面抗原 基因表达 重组腺相关病毒 PCR法 PTHBV-1质粒
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慢性乙型肝炎功能性治愈离完全治愈还有多远?
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作者 高娜 高志良 《临床肝胆病杂志》 北大核心 2025年第1期15-23,共9页
功能性治愈是目前国内外慢性乙型肝炎的理想抗病毒治疗终点,其外周血HBsAg清除及HBV DNA检测不到并维持24周以上,标志着HBV感染的消退。然而,针对HBsAg清除后的肝内HBV标志物特点尚未有系统性描述。本文针对慢性乙型肝炎功能性治愈的最... 功能性治愈是目前国内外慢性乙型肝炎的理想抗病毒治疗终点,其外周血HBsAg清除及HBV DNA检测不到并维持24周以上,标志着HBV感染的消退。然而,针对HBsAg清除后的肝内HBV标志物特点尚未有系统性描述。本文针对慢性乙型肝炎功能性治愈的最新定义、血清HBsAg清除后的肝内病毒学标志物特征、血清HBsAg高敏检测意义及低水平HBsAg是否需要治疗等问题等进行阐述,以期提高临床医生对慢性乙型肝炎功能性治愈的认识。 展开更多
关键词 乙型肝炎 慢性 功能性治愈 乙型肝炎表面抗原 DNA 病毒
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截短型鸭乙型肝炎病毒核心蛋白单克隆抗体的制备及初步应用
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作者 王超 田拥军 +5 位作者 龚劲松 张娥娟 刘嘉 王宝菊 赵西平 杨东亮 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期740-742,共3页
目的:制备能与鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHB-cAg)特异性结合的单克隆抗体(mAb),使之能特异性地对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)进行检测。方法:以原核表达的截短型鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg1-214)免疫BALB/c小鼠后常规杂交瘤技术进行细胞融... 目的:制备能与鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHB-cAg)特异性结合的单克隆抗体(mAb),使之能特异性地对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)进行检测。方法:以原核表达的截短型鸭乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg1-214)免疫BALB/c小鼠后常规杂交瘤技术进行细胞融合,有限稀释法克隆化,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学(IHC)筛选、鉴定。结果:筛选出3株(3H4、4A11、5A12)能有效分泌抗鸭乙肝病毒核心抗原的杂交瘤细胞株。该mAb可用于ELISA、IHC和Westernblot研究。结论:获得了3株有效分泌抗核心抗原的mAb,可用于鸭乙肝病毒相关肝病组织与血清的检测。 展开更多
关键词 鸭乙型肝炎病毒 核心蛋白 单克隆抗体
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酵母双杂交筛选与乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白相互作用的肝细胞蛋白
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作者 陈婉南 刘玲玲 +3 位作者 吴云丽 焦伯延 林万松 林旭 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期907-911,共5页
目的筛选与乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白(Middle hepatitis B surface protein,MHBs protein)相互作用的肝细胞蛋白。方法 PCR扩增MHBs编码基因并将S区起始密码子突变,获得目的基因MHBs-mut,克隆于诱饵载体pGBKT7。在证实MHBs-mut蛋白不... 目的筛选与乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白(Middle hepatitis B surface protein,MHBs protein)相互作用的肝细胞蛋白。方法 PCR扩增MHBs编码基因并将S区起始密码子突变,获得目的基因MHBs-mut,克隆于诱饵载体pGBKT7。在证实MHBs-mut蛋白不具有自激活作用的前提下,以酵母双杂交系统筛查与MHBs-mut蛋白相互作用的肝细胞蛋白,并在酵母细胞内验证蛋白的相互作用。结果构建酵母双杂交诱饵载体,获得重组质粒pGBKT7-MHBs-mut。Western blot显示其在酵母中表达MHBs-mut蛋白。酵母双杂交筛选并验证,得到与MHBs-mut蛋白相互作用的肝细胞蛋白:COP9信号体第五个亚单位(COPS5,又名C-Jun结合蛋白1,c-Jun-activation-domain binding protein 1,JAB1)。结论乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白与COPS5在酵母AH109细胞中具有相互作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 表面抗原中蛋白 酵母双杂交
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