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鸭乙型肝炎病毒核酸荧光定量PCR方法的建立及应用 被引量：7
1
作者 陈压西 黄爱龙 +1 位作者 齐珍元 郭树华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第1期36-38,52,共4页
目的:建立鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)荧光定量的方法。方法:根据DHBV DNA S基因区的序列设计扩增所需3条引物,通过偶联反应用AmpliSensor荧光信号标记半巢式引物,经过前期不对称扩增、半巢式扩增及在线检测建立DHBV DNA阳性标准品QPC... 目的:建立鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)荧光定量的方法。方法:根据DHBV DNA S基因区的序列设计扩增所需3条引物,通过偶联反应用AmpliSensor荧光信号标记半巢式引物,经过前期不对称扩增、半巢式扩增及在线检测建立DHBV DNA阳性标准品QPCR的标准曲线,并将70份鸭血清分别用荧光定量PCR方法和地高辛标记的DHBV DNA探针斑点杂交的方法检测,比较结果的相关性。结果:DHBV DNA阳性标准品经过30次循环后,扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳检测,可以看出有180bp、70bp两个片段,与设计的片段大小相符,扩增产物的浓度与标准品的起始浓度成正比,扩增指数的数值大小与该循环时已合成的扩增产物的量成正比,起始浓度的大小与要合成的一定扩增产物的量所需的循环次数成反比。用荧定量PCR方法和斑点杂交的方法检测血清中DHBV DNA的结果有良好的相关性(r=0.97,P<0.01,v=58)。结论:荧光定量PCR方法可作为检测DHBV DNA含量的一个重要手段。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核酸 荧光定量 PCR DHBV DNA
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乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗对猕猴的体液免疫原性观察 被引量：5
2
作者 黄祖瑚 庄辉 +4 位作者 卢山 朱万孚 蔡洁 郭人花 朱永红 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第1期69-69,共1页
关键词 乙型肝炎病毒 核酸疫苗 体液免疫原理
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碱性磷酸酶直接标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒DNA方法的建立及应用 被引量：5
3
作者 陈压西 齐珍元 黄爱龙 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第2期140-143,共4页
目的 :建立碱性磷酸酶直接 (AlkPhosDirec)标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸 (DHBVDNA)方法。方法 :应用AlkPhosDirec[TM] 将碱性磷酸酶直接标记纯化的DHBVDNA全基因制备探针 ,与目标核酸杂交后加入CDP -Star化学发光试剂 ,用... 目的 :建立碱性磷酸酶直接 (AlkPhosDirec)标记核酸探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸 (DHBVDNA)方法。方法 :应用AlkPhosDirec[TM] 将碱性磷酸酶直接标记纯化的DHBVDNA全基因制备探针 ,与目标核酸杂交后加入CDP -Star化学发光试剂 ,用胶片放射自显影检测DHBVDNA。同时检测了探针的灵敏度和特异性。比较了AlkPhosDirec标记DHBVDNA探针与地高辛标记的DHBVDNA探针检测鸭血清标本 10 0份结果。并用AlkPhosDirec标记探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸的方法考核了活性肽类物质保尔佳 (Polyerga)及其 8种单体体内抗鸭乙型肝炎病毒作用。 结果 :探针灵敏度为10 pg ,无非特异性的结果出现 ,与地高辛探针比较 ,用AlkPhosDirect标记探针检测方法的敏感性为 10 0 % ,特异性为 10 0 % ,符合率为 10 0 % ;抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验表明 ,保尔佳 0 0 1号单体 (CMS0 0 1)能使血清中DHBVDNA明显降低 (P<0 .0 5 )。结论 :AlkPhosDirec标记DHBVDNA探针检测血清中鸭乙型肝炎病毒核酸方法灵敏、特异 ,与地高辛标记的DHBVDNA探针检测结果完全相符合 ,可作为药物抗鸭乙型肝炎病毒作用动物实验疗效评价的手段。 展开更多
关键词 碱性磷酸酶 标记 鸭乙型肝炎病毒 核酸
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国产磁珠法试剂在荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸中的应用 被引量：3
4
作者 王瑞莲 张婷 +4 位作者 龙军 陈晓娇 林丽娟 方艳平 彭永正 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第21期3594-3596,共3页
目的:评价国产磁珠法试剂在荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸的临床应用价值。方法:首先,用国产磁珠法试剂B与进口磁珠法试剂A(罗氏试剂)对78例标本进行乙型肝炎病毒核酸的平行测定,比较其相关性。然后,对8个梯度浓度的结果重复检测3次... 目的:评价国产磁珠法试剂在荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸的临床应用价值。方法:首先,用国产磁珠法试剂B与进口磁珠法试剂A(罗氏试剂)对78例标本进行乙型肝炎病毒核酸的平行测定,比较其相关性。然后,对8个梯度浓度的结果重复检测3次,评价其精密度。最后,用试剂B与煮沸裂解法试剂C对58例标本进行比较,评价其阳性检出率。结果:在相关性方面,试剂A与试剂B显著相关(r=0.987,P<0.05)。在精密度方面,3次重复检测结果之间差异无显著性(F=0.999,P>0.05)。在阳性检出率方面,试剂B阳性检出率(60.34%)高于试剂C(39.77%)。结论:国产磁珠法试剂与进口磁珠法试剂相关性强,精密度和阳性检出率高,且价格较低廉,适合临床推广使用。 展开更多
关键词 国产磁珠法 荧光定量PCR 乙型肝炎病毒 核酸
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乙型肝炎病毒核心抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的构建与体外表达 被引量：4
5
作者 杨永林 张学光 黄祖瑚 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期324-327,共4页
目的:构建可同时表达乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和Flt3配体(FL)胞外段的双表达核酸疫苗。方法:将HBcAg和FL胞外段的基因用PCR方法扩增并分别引入相应的限制性内切酶酶切位点,然后克隆入真核双表达载体pIRES,获得含双基因片段的表达质... 目的:构建可同时表达乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和Flt3配体(FL)胞外段的双表达核酸疫苗。方法:将HBcAg和FL胞外段的基因用PCR方法扩增并分别引入相应的限制性内切酶酶切位点,然后克隆入真核双表达载体pIRES,获得含双基因片段的表达质粒;再取该表达质粒中的内部核糖体切入位点(IRES)序列和基因片段克隆入pJW4303载体中,获得相应的双表达核酸疫苗,经筛选鉴定后,以293T细胞瞬时表达检测两基因的表达水平。结果:构建成功以pIRES、pJW4303为载体的4种HBcAg和FL胞外段的双表达核酸疫苗,体外表达证实HBcAg和FL胞外段均能高效表达,基因位于IRES上游时表达水平较高。结论:用IRES元件实现了HBcAg和FL胞外段双表达核酸疫苗的构建,pJW4303为载体的核酸疫苗两基因表达水平优于pIRES为载体的核酸疫苗。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒核心抗原 FLT3配体 双表达载体 核酸疫苗
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弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究Ⅰ.pcDNA3-HBsAg-GRA1真核表达质粒的构建及鉴定 被引量：3
6
作者 王丹静 舒衡平 +2 位作者 蔡力汀 吴翔 蒋立平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期122-125,共4页
目的　构建 pcDNA3-HBsAg -GRA1真核表达质粒 ,为提高弓形虫DNA疫苗保护性做出新的探索 ,并期望“一 / +-苗两用”。方法　采用PCR分别扩增HBsAg、GRA1;经BclⅠ、EcoRⅠ双酶切HBsAg ;EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切GRA1;BamHⅠ、XhoⅠ双酶切载体 p... 目的　构建 pcDNA3-HBsAg -GRA1真核表达质粒 ,为提高弓形虫DNA疫苗保护性做出新的探索 ,并期望“一 / +-苗两用”。方法　采用PCR分别扩增HBsAg、GRA1;经BclⅠ、EcoRⅠ双酶切HBsAg ;EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切GRA1;BamHⅠ、XhoⅠ双酶切载体 pcDNA3 0 ;HBsAg、GRA1、pcDNA3 0双酶切纯化产物与T4DNA连接酶在 2 2℃连接过夜 ,用双酶切及双脱氧末端终止法测序鉴定重组质粒。结果　成功构建pcDNA3-HBsAg -GRA1真核表达质粒。结论　为进一步研究 pcD NA3-HBsAg -GRA1诱导的保护性免疫奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫 乙型肝炎病毒 混合核酸疫苗 I.pcDNA3-HBsAg—GRA1 真核表达质粒 构建 鉴定
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佐剂白细胞介素2对乙型肝炎病毒核酸疫苗免疫效应的影响 被引量：1
7
作者 李文波 姚志强 +2 位作者 周永兴 权启镇 冯志华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期182-182,185,共2页
关键词 乙型肝炎病毒 白细胞介素2 核酸疫苗 免疫效应
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猕猴对乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗的特异性细胞免疫应答 被引量：1
8
作者 郭人花 庄辉 +1 位作者 蔡洁 黄祖瑚 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第6期420-422,共3页
目的　观察乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗即 HBc Ag核酸疫苗 (p JW430 3/ HBc)免疫猕猴的特异性细胞免疫应答。方法　猕猴分别在第 0、2、4、6个月肌肉注射法接种核酸疫苗 (p JW430 3/ HBc)或对照质粒 (p JW430 3) ;EL ISA法检测猕猴外... 目的　观察乙型肝炎病毒核心抗原核酸疫苗即 HBc Ag核酸疫苗 (p JW430 3/ HBc)免疫猕猴的特异性细胞免疫应答。方法　猕猴分别在第 0、2、4、6个月肌肉注射法接种核酸疫苗 (p JW430 3/ HBc)或对照质粒 (p JW430 3) ;EL ISA法检测猕猴外周血单个核细胞 (PBMC) ,经特异性抗原 (HBc Ag)刺激后 ,培养上清中人白细胞介素 - 4(IL- 4)和干扰素 γ(IFN- γ)以及猕猴血清中抗 - HBc Ig G亚类水平 ;3H- TDR掺入法测定猕猴 PBMC特异性增殖反应。结果　接种核酸疫苗后猕猴 PBMC培养上清中以IFN- γ升高为主。血清中特异性抗体 (抗 - ΗΒc) Ig G亚类以 Ig G2占优势。免疫组猕猴 PBMC抗原特异性增殖反应明显增强 ,增殖指数达 3.83,与对照猕猴相比有显著差异。结论　 p JW430 3/ 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 核心抗原 核酸疫苗 猕猴 细胞免疫
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乙型肝炎病毒BCP变异与拉米夫定治疗后HBVDNA反弹关系的研究
9
作者 苏明华 江建宁 +2 位作者 周元平 陈茂伟 刘志红 《临床肝胆病杂志》 CAS 2008年第3期172-174,共3页
目的探讨HBV BCP变异与拉米夫定抗病毒治疗后HBVDNA反弹的关系。方法应用PCR-序列分析法,检测拉米夫定治疗(100mg/d)1年以上,达到病毒学应答半年以上,再出现HBV DNA反弹(HBV DNA拷贝数≥1.0×104拷贝/ml)的27例乙型肝炎患者(治疗组)... 目的探讨HBV BCP变异与拉米夫定抗病毒治疗后HBVDNA反弹的关系。方法应用PCR-序列分析法,检测拉米夫定治疗(100mg/d)1年以上,达到病毒学应答半年以上,再出现HBV DNA反弹(HBV DNA拷贝数≥1.0×104拷贝/ml)的27例乙型肝炎患者(治疗组),以及19例从未用过抗病毒治疗患者(对照组)的HBV C区基本核心启动子(BCP)的突变位点。结果1.治疗组HBVDNA反弹的27例BCP(A1762T+G1764A)变异检出率44.44%(12/27)高于对照组26.32%(5/19),但无统计学差异,P>0.05。2.4例HBVDNA反弹患者治疗前未检出BCP(A1762T+G1764A)变异,治疗后有2例检出BCP(A1762T+G1764A)变异。结论BCP(T1762/A1764)变异可能与拉米夫定治疗后HBVDNA反弹有关。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基本核心启动子变异 拉米夫定 hbvdna反弹
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乙型肝炎病毒核酸相关抗原在评价病毒复制中的应用价值
10
作者 王强 汪光蓉 +4 位作者 凡瞿明 赵明才 唐中 何兰 张国元 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期2058-2060,共3页
目的通过对乙型肝炎病毒核酸相关抗原(hepatitis B virus nucleic acid related antigen,HBV NRAg)与HBeAg和乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virus DNA,HBV DNA)之间的比较,探讨HBV NRAg在评价病毒复制中的应用价值。方法收集157例HBsAg... 目的通过对乙型肝炎病毒核酸相关抗原(hepatitis B virus nucleic acid related antigen,HBV NRAg)与HBeAg和乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virus DNA,HBV DNA)之间的比较,探讨HBV NRAg在评价病毒复制中的应用价值。方法收集157例HBsAg阳性血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光微粒子免疫测定(CMIA)和荧光定量PCR法分别对血清进行HBV NRAg、HBeAg和HBV DNA含量检测。同时对188例HBsAg阴性血清进行HBV NRAg特异性检测。结果 157例HBsAg阳性血清中,HBV NRAg,HBeAg和HBV DNA阳性率分别为75.79%(119/157)、37.57%(59/157)和51.59%(81/157),HBV NRAg与HBeAg和HBV DNA比较,差别有统计学意义(χ2=19.88,P=0.000;χ2=46.69,P=0.000)。分别在HBeAg和HBV DNA阳性病例中,HBV NRAg S/CO值与HBeAg S/CO值和HBV DNA基因组拷贝数呈正相关(r=0.506,P=0.000;r=0.499,P=0.000)。在一致性评价中,HBV NRAg同HBeAg和HBV DNA两个指标联合用于评价病毒复制的一致性较好(Kappa=0.52),其阳性符合率为94.79%,总符合率为78.98%。HBV NRAgELISA检测特异性为99.40%。结论 HBV NRAg可作为临床评价HBV复制以及乙肝治疗效果监测的初筛指标,适合在各个层次的医院开展检测。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒核酸相关抗原 HBEAG HBV DNA HBV复制
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血清乙型肝炎病毒核酸定量与肝损伤及干扰素应答的关系
11
作者 和振坤 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期381-381,385,共2页
关键词 血清乙型肝炎病毒 核酸 定量 肝损伤 干扰素应答 漫性乙型肝炎
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肽核酸钳制PCR早期检测乙型肝炎病毒YMDD耐药变异 被引量：3
12
作者 张迎迎 何海棠 +1 位作者 杨洁 侯金林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期853-856,共4页
目的建立乙型肝炎病毒肽核酸钳制PCR(PNA-PCR)耐药监测方法,以提前监测乙型肝炎病毒YMDD耐药株的产生。方法选取rtM204(IATT)、rtM204V(GTG)突变型质粒与野生型质粒rtM204(ATG)按照不同比例混合后,用PNA-PCR法及直接测序法对耐药位点进... 目的建立乙型肝炎病毒肽核酸钳制PCR(PNA-PCR)耐药监测方法,以提前监测乙型肝炎病毒YMDD耐药株的产生。方法选取rtM204(IATT)、rtM204V(GTG)突变型质粒与野生型质粒rtM204(ATG)按照不同比例混合后,用PNA-PCR法及直接测序法对耐药位点进行检测,评价两种方法的灵敏度及特异性;选取临床耐药检测患者血清标本85例,采用PNA-PCR法及直接测序法进行耐药检测,比较两种方法的耐药检出率。结果 PNA-PCR法可在105倍野生型YMDD基因背景下检测出突变,灵敏度为0.001%,可检测到最低限为101拷贝。而直接测序法可检测的基因突变的最低极限为104拷贝,检测灵敏度为10%。85例临床耐药检测患者中,PNA-PCR法YMDD检测阳性率为85.9%(73/85∶YIDD∶40,YVDD∶23,YIDD+YVDD∶10),而PCR产物直接测序法检阳性率仅为40%(34/85∶YIDD∶21,YVDD∶11,YIDD+YVDD∶2)。阴性对照,两种方法均未测出HBV病毒,两种方法的特异性均较好。结论 PNA-PCR方法在灵敏度及特异性上均优于直接测序法,而且操作简便,快捷,在科研和临床上都有很好的应用前景。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 肽核酸钳制PCR 直接测序法
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乙型肝炎病毒携带者肾移植术后临床观察 被引量：6
13
作者 庄杰 代波 +4 位作者 巫丽娟 周英 陆小军 应斌武 林涛 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第1期66-72,共7页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)携带者肾移植术后肝、肾功能变化的特点。方法以116例HBV感染肾移植患者及348例同期无HBV感染肾移植患者为研究对象,收集患者术前及术后1、3、6、12、18、24、36、60个月的肝功能[丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)携带者肾移植术后肝、肾功能变化的特点。方法以116例HBV感染肾移植患者及348例同期无HBV感染肾移植患者为研究对象,收集患者术前及术后1、3、6、12、18、24、36、60个月的肝功能[丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)]、肾功能[血清肌酐(Scr)]指标。比较乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)(+)与HBs Ag(–)组肾移植患者术前和术后肝、肾功能的变化;根据术前乙型肝炎病毒血清学、术前HBV DNA定量、术前肝功能检查结果,分别将116例HBs Ag(+)肾移植患者再分为大三阳组与小三阳组、HBV DNA(+)组与HBV DNA(–)组、术前肝功能正常组与异常组,比较不同亚组间肾移植患者术前和术后肝、肾功能的变化。结果 (1)术前HBs Ag(+)组患者的ALT、AST均高于HBs Ag(–)组,肾移植术后36个月内,两组患者的肝功能比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),但术后60个月两组患者的肝功能比较,差异无统计学意义(均为P>0.05)。HBs Ag(+)与HBs Ag(–)组肾移植患者术前和术后60个月内的Scr比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。(2)大三阳组与小三阳组及HBV DNA(+)组与HBV DNA(–)组肾移植患者术前和术后60个月内的肝、肾功能比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。(3)术前肝功能正常组与异常组肾移植患者术前和术后1、3、6、12个月的ALT比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),两组患者术后其他时间点的ALT比较,差异无统计学意义(均为P>0.05);肾移植术前和术后1个月,两组患者的AST比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),两组患者术后其他时间点的AST比较,差异无统计学意义(均为P>0.05)。两组肾移植患者术前和术后60个月内肾功能比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 HBV感染对肾移植患者术后5年内的肾功能不会有显著影响,但会影响术后短期肝功能。 展开更多
关键词 肾移植 乙型肝炎病毒 乙型肝炎表面抗原 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸 乙型肝炎E抗原 乙型肝炎E抗体 乙型肝炎核心抗体 肝功能 肾功能
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慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA负荷与其肝组织炎症活动度的相关性研究 被引量：32
14
作者 刘伟 赵伟 罗婵 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2002年第1期26-27,共2页
探讨慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ水平与其肝组织炎症活动度的相关性。随机选择８２例慢性乙型肝炎患者，检测其血清ＨＢＶＤＮＡ和ＡＬＴ水平，肝穿刺活检，光镜多视野观察其肝组织炎症活动度。随着慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤ... 探讨慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ水平与其肝组织炎症活动度的相关性。随机选择８２例慢性乙型肝炎患者，检测其血清ＨＢＶＤＮＡ和ＡＬＴ水平，肝穿刺活检，光镜多视野观察其肝组织炎症活动度。随着慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ水平升高，其血清ＡＬＴ和肝组织炎症活动度明显升高（Ｐ＜０．０５）。慢性乙型肝炎患者ＨＢＶＤＮＡ负荷与其肝组织炎症活动度有相关性。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 肝组织 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸 炎症 丙氨酸氨基转移酶 定量PCR法
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HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因变异和分型研究 被引量：13
15
作者 苏荣 罗娜 +2 位作者 杨延斌 庄健海 黄星华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1804-1807,共4页
目的探讨HBeAg阴性的慢性乙肝患者乙肝病毒基因变异情况和分型的关系及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、实时荧光PCR检测乙肝病毒基因分型、PCR-反向点杂交方法检测乙肝病毒基因变异... 目的探讨HBeAg阴性的慢性乙肝患者乙肝病毒基因变异情况和分型的关系及其临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、实时荧光PCR检测乙肝病毒基因分型、PCR-反向点杂交方法检测乙肝病毒基因变异,并对其关系进行分析。结果在389例HBeAg阴性的慢性乙肝患者血清中HBV-DNA检出阳性214例(55.01%),阴性175例(44.99%),HBV-DNA拷贝数在1×103-水平的例数最高,为102例(26.22%),其次为1×104-水平,41例(10.54%),两者比较有性差异(P<0.001);基因变异方面,HBV-DNA载量在1×105-水平发生前-C区变异比例为71.43%(15例),发生BCP区变异比例为52.38%(11例),两者比较有性差异(P<0.001),并且HBV-DNA载量越高基因变异发生比例越大;214例HBeAg阴性HBV-DNA阳性的慢性乙肝患者基因分型与基因变异结果中,基因分型A型6例(2.80%),B型84例(39.25%),C型106例(49.53),D型7例(3.27),混合型11例(5.14%),两者比较有性差异(P<0.001);而发生前-C区变异结果中A型发生比例为16.67%(1例),B型发生比例为36.90%(31例),C型发生比例为44.34%(47例);在BCP区变异结果中B型发生比例为19.05%(16例),C型发生比例为26.42%(28例),两者比较有性差异(P<0.001),A、D型与混合型均未检出变异。结论 HBeAg阴性HBV-DNA阳性的慢性乙肝患者病毒复制水平处于一个相对较低水平;HBV-DNA载量越高基因变异发生比例越大;本地区乙肝病毒基因分布以B、C型为主,其中B、C基因型HBeAg阴性的慢性乙肝患者基因变异发生率较高。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 乙肝病毒脱氧核糖核酸 聚合酶链反应 基因分型 变异
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慢性乙型肝炎患者血清IL-10与HBVDNA复制水平检测及临床意义 被引量：12
16
作者 吴晓蔓 郭海波 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2004年第3期151-152,共2页
检测慢性乙型肝炎 (CHB)患者血清IL - 10与HBVDNA、ALT水平 ,探讨乙型肝炎慢性化的机理。检测 77例CHB临床血清标本 ,用实时荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)测HBVDNA含量 ;用双抗体夹心ELISA法定量检测血清IL - 10水平。CHB患者血清IL -... 检测慢性乙型肝炎 (CHB)患者血清IL - 10与HBVDNA、ALT水平 ,探讨乙型肝炎慢性化的机理。检测 77例CHB临床血清标本 ,用实时荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)测HBVDNA含量 ;用双抗体夹心ELISA法定量检测血清IL - 10水平。CHB患者血清IL - 10浓度明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,HBVDNA阳性组高于HBVDNA阴性组 ;CHB组患者血清ALT异常者的IL - 10浓度明显高于ALT正常组 ;IL - 10水平与HBVDNA复制程度呈正相关。CHB患者血清IL - 10水平升高与HBV持续感染、HBVDNA高复制合并肝损害有关。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 血清 IL-10 hbvdna复制 检测 乙型肝炎病毒 白细胞介素10
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乙型肝炎病毒核心基因克隆及其重组体的构建 被引量：5
17
作者 韦嘉 杨林 +2 位作者 姚集鲁 姚春斓 卢建溪 《中山医科大学学报》 CSCD 2000年第3期199-201,共3页
【目的】构建含乙型肝炎病毒 (HBV)编码核心蛋白 (HBcAg)的核心 (C)基因的真核表达重组体 ,以进行核酸免疫及相关研究。【方法】以含HBV(ayw亚型 )全基因序列的质粒pHBV1为模板 ,用PCR的方法获得编码HBcAg的C基因片段(nt1889～ 2 45 7) ... 【目的】构建含乙型肝炎病毒 (HBV)编码核心蛋白 (HBcAg)的核心 (C)基因的真核表达重组体 ,以进行核酸免疫及相关研究。【方法】以含HBV(ayw亚型 )全基因序列的质粒pHBV1为模板 ,用PCR的方法获得编码HBcAg的C基因片段(nt1889～ 2 45 7) ,该基因片段两端设计了BamHⅠ和EcoRⅠ的限制性内切酶位点 ,以便通过定向克隆将其插入真核表达质粒载体pcDNA3相应的多克隆位点。【结果】经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切后琼脂糖凝胶电泳鉴定 ,以及重组体插入片段的DNA序列测定 ,证实成功地构建了含C基因的真核表达重组体pcDNA3 HBc。【结论】pcDNA3 HBc的构建成功为研究其表达及进行动物免疫研究提供了物质基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 免疫学 聚合酶链反应 重组核酸
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乙型肝炎病毒基因型检测及其与肝功能的关系 被引量：2
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作者 朱凤群 霍康 +1 位作者 李春姬 狄鹏超 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期729-731,共3页
目的探讨乙型肝炎病毒基因型与肝功能的关系。方法采用微板核酸分子杂交ELISA法检测93例不同临床类型的乙型肝炎患者的基因型并同时测定肝功能。结果93例不同临床类型乙型病毒性肝炎患者中,B型24例(25.81%),C型59例(63.44%),D型5例(5.38... 目的探讨乙型肝炎病毒基因型与肝功能的关系。方法采用微板核酸分子杂交ELISA法检测93例不同临床类型的乙型肝炎患者的基因型并同时测定肝功能。结果93例不同临床类型乙型病毒性肝炎患者中,B型24例(25.81%),C型59例(63.44%),D型5例(5.38%),混合型5例(B/D 3例,C/D 2例,占5.38%)。93例不同临床类型的乙型肝炎患者中,以C基因型为主,其次为B基因型,部分以D型和混合型存在,无A、E、F型。按照慢性乙型肝炎、亚急性重型肝炎、肝硬化的顺序,C基因型的检出率逐渐增多,B基因型的检出率逐渐减少。肝癌患者C基因型的检出率没有依次增高。C基因型各型乙型肝炎患者的ALT、AST、TBIL均高于B型,ALB低于B型,但差别无统计学意义。结论西安地区病毒性肝炎以C基因型为主,部分以B、D及混合型存在,未发现A、E、F型。除肝癌外,C型的检出率随临床类型的加重而增多。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因型 微板核酸分子杂交 肝功能
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乙型肝炎病毒基因变异和耐药与临床肝病的关系 被引量：3
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作者 蒋自卫 史文高 《临床肝胆病杂志》 CAS 2010年第4期438-440,445,共4页
关键词 HBV基因变异 乙型肝炎病毒 嗜肝DNA病毒 hbvdna 肝病 临床 耐药 转录复制
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慢性乙型肝炎患者肝功能与血清HBVDNA负荷及肝脏病理的关系 被引量：2
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作者 丁虹 陆忠华 蒋祥虎 《临床肝胆病杂志》 CAS 2006年第3期173-174,共2页
探讨慢性乙型肝炎患者肝功能与血清HBVDNA负荷及肝脏病理的相关性。随机选择207例慢性乙型肝炎患者,检测其血清ALT、HBVDNA含量,肝穿刺活检,光镜多视野观察其肝组织的病理情况。随着慢性乙型肝炎患者血清ALT的升高,HBVDNA复制程度的增高... 探讨慢性乙型肝炎患者肝功能与血清HBVDNA负荷及肝脏病理的相关性。随机选择207例慢性乙型肝炎患者,检测其血清ALT、HBVDNA含量,肝穿刺活检,光镜多视野观察其肝组织的病理情况。随着慢性乙型肝炎患者血清ALT的升高,HBVDNA复制程度的增高,其肝组织的炎症活动度、纤维化程度明显升高(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者血清ALT、HBVDNA含量与肝组织的炎症活动度、纤维化程度有相关性。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 肝组织 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸 肝功能
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