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出血性大肠杆菌O157主要毒力因子单克隆抗体的制备
被引量：
3
1
作者
黄海燕
陈萍
+2 位作者
陈亮
任常菲
李月红
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期122-126,共5页
目的利用两种抗原制备针对出血性大肠杆菌EHECO157主要毒力因子的特异性单克隆抗体。方法分别用纯化融合蛋白Eae-Stx1/2B和EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)全菌免疫BALB/C小鼠,通过细胞融合和EHECO157标准株EDL933间接ELISA筛...
目的利用两种抗原制备针对出血性大肠杆菌EHECO157主要毒力因子的特异性单克隆抗体。方法分别用纯化融合蛋白Eae-Stx1/2B和EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)全菌免疫BALB/C小鼠,通过细胞融合和EHECO157标准株EDL933间接ELISA筛选稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株,纯化抗体并鉴定。结果纯化融合蛋白免疫获得了2株单抗2H9和3B4,EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)免疫获得了1株单抗4H7。2H9、3B4和4H7亚类鉴定分别为lgG2b、lgM和lgM;纯化腹水ELISA效价分别为1∶1.28×105、1∶3.2×104、1∶6.4×104,亲和力常数分别为2.9×106、1.4×106、2.6×105。结论3株单克隆抗体均具有较高特异性,2H9效价和亲和力最高,可作为产志贺毒素EHECO157的检测抗体。
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关键词
出血性大肠杆菌O157
主要毒力因子
单克隆抗体
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职称材料
双抗体夹心ELISA法检测食品中出血性大肠杆菌O15
被引量：
4
2
作者
黄海燕
陈亮
陈萍
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期185-188,194,共5页
以灭活重组基因工程菌EHEC O157Δler/stx(p BR322::stx1/2B::eae)免疫新西兰大耳白兔获得的兔多抗作为捕获抗体,以针对出血性大肠杆菌O157主要毒力因子的特异性单抗2H9为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA方法并绘制标准曲线用于食品中出...
以灭活重组基因工程菌EHEC O157Δler/stx(p BR322::stx1/2B::eae)免疫新西兰大耳白兔获得的兔多抗作为捕获抗体,以针对出血性大肠杆菌O157主要毒力因子的特异性单抗2H9为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA方法并绘制标准曲线用于食品中出血性大肠杆菌O157的定量分析。标准曲线线性方程为y=0.3479x-0.4121,R^2=0.9862。该ELISA的重复性变异系数小于5%,稳定性良好。应用该方法测得出血性大肠杆菌O157∶H7 EDL933的最小检出限为10~3cfu/m L。食品样品接种实验表明:牛肉或猪肉样品接种量为0.08 cfu/g,增菌8 h后可以检出阳性反应;蔬菜和牛奶样品接种量为0.12 cfu/g(m L),增菌10 h后可以检出阳性反应。
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关键词
出血性大肠杆菌O157
主要毒力因子
双抗体夹心ELISA
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职称材料
题名
出血性大肠杆菌O157主要毒力因子单克隆抗体的制备
被引量：
3
1
作者
黄海燕
陈萍
陈亮
任常菲
李月红
机构
吉林农业大学食品工程学院
吉林省产品质量技术监督检验院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期122-126,共5页
基金
吉林省科技厅资助项目(20060924)
文摘
目的利用两种抗原制备针对出血性大肠杆菌EHECO157主要毒力因子的特异性单克隆抗体。方法分别用纯化融合蛋白Eae-Stx1/2B和EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)全菌免疫BALB/C小鼠,通过细胞融合和EHECO157标准株EDL933间接ELISA筛选稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株,纯化抗体并鉴定。结果纯化融合蛋白免疫获得了2株单抗2H9和3B4,EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)免疫获得了1株单抗4H7。2H9、3B4和4H7亚类鉴定分别为lgG2b、lgM和lgM;纯化腹水ELISA效价分别为1∶1.28×105、1∶3.2×104、1∶6.4×104,亲和力常数分别为2.9×106、1.4×106、2.6×105。结论3株单克隆抗体均具有较高特异性,2H9效价和亲和力最高,可作为产志贺毒素EHECO157的检测抗体。
关键词
出血性大肠杆菌O157
主要毒力因子
单克隆抗体
Keywords
EHEC O157
main virulence factors
monoclonal antibodies
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
双抗体夹心ELISA法检测食品中出血性大肠杆菌O15
被引量：
4
2
作者
黄海燕
陈亮
陈萍
机构
吉林工程职业学院食品工程分院
吉林农业大学食品安全研究室
出处
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期185-188,194,共5页
文摘
以灭活重组基因工程菌EHEC O157Δler/stx(p BR322::stx1/2B::eae)免疫新西兰大耳白兔获得的兔多抗作为捕获抗体,以针对出血性大肠杆菌O157主要毒力因子的特异性单抗2H9为检测抗体,建立双抗体夹心ELISA方法并绘制标准曲线用于食品中出血性大肠杆菌O157的定量分析。标准曲线线性方程为y=0.3479x-0.4121,R^2=0.9862。该ELISA的重复性变异系数小于5%,稳定性良好。应用该方法测得出血性大肠杆菌O157∶H7 EDL933的最小检出限为10~3cfu/m L。食品样品接种实验表明:牛肉或猪肉样品接种量为0.08 cfu/g,增菌8 h后可以检出阳性反应;蔬菜和牛奶样品接种量为0.12 cfu/g(m L),增菌10 h后可以检出阳性反应。
关键词
出血性大肠杆菌O157
主要毒力因子
双抗体夹心ELISA
Keywords
EHEC O157
main virulence factors
double-antibody sandwich ELISA.
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
出血性大肠杆菌O157主要毒力因子单克隆抗体的制备
黄海燕
陈萍
陈亮
任常菲
李月红
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
双抗体夹心ELISA法检测食品中出血性大肠杆菌O15
黄海燕
陈亮
陈萍
《食品工业科技》
CAS
CSCD
北大核心
2016
4
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