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猪戊型肝炎病毒ORF2主要抗原表位区间接ELISA方法的初步建立被引量：4: 1; 作者闻晓波王密 +4 位作者冉旭华周恩民李晓娟侯喜林朴范泽《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第5期99-102,共4页; 应用原核表达系统表达猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端和N端的主要抗原表位区,重组蛋白命名为ORF2-C和ORF2-N,初步建立间接ELISA诊断方法。用重组蛋白ORF2-C和ORF2-N作为诊断抗原,对反应条件进行优化,初步建立ELISA诊断方法。抗原最适包被浓... 展开更多; 关键词猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区 ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端主要抗原表位区的原核表达被引量：2: 2; 作者冉旭华闻晓波 +2 位作者王密李冬野侯喜林《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期51-54,共4页; 用原核表达系统表达猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端的主要抗原表位区。通过对GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基酸序列进行分析,确定了其N端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了1对特异性引物,RT-PCR扩增该区段,并将此片段... 展开更多; 关键词猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端主要抗原表位区的原核表达被引量：1: 3; 作者冉旭华闻晓波 +2 位作者王密李冬野侯喜林《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第1期24-27,共4页; 利用分子生物学软件分析GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基酸序列,确定了其C端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了一对特异性引物,RT-PCR扩增该区域,并将此片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上,命名为pET30a-ORF2C,然后... 展开更多; 关键词猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪细小病毒GZ分离株NS1基因主要抗原表位区原核表达研究被引量：2: 4; 作者刘建汤德元 +2 位作者姜德荣王洪光李达《山地农业生物学报》 2013年第5期397-402,共6页; 根据GenBank登录的猪细小病毒NADL-2株和China株NS1基因序列设计1对特异性引物,对贵州大学动物生物技术实验中心分离的猪细小病毒GZ株接种ST细胞传代培养后,提取病毒DNA,进行PCR扩增PPV NS1基因主要抗原表位区,克隆后测序,随后将该基因... 展开更多; 关键词猪细小病毒 NS1基因主要抗原表位区原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

伪狂犬病病毒gB基因的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：7: 5; 作者王雨吉艺宽 +3 位作者程艺张宝石向柯宇琚春梅《动物医学进展》北大核心 2015年第6期19-23,共5页; 为了建立评价伪狂犬病疫苗免疫效果的方法,应用PCR方法扩增gB基因的主要抗原表位区序列,大小为768bp,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切后克隆至pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pETgB768,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后,通过IPTG进行诱导表达,经SDS-P... 展开更多; 关键词伪狂犬病病毒 GB基因主要抗原表位区 gB768-ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪戊型肝炎病毒ORF2主要抗原表位区间接ELISA方法的初步建立被引量：4: 1; 作者闻晓波王密冉旭华周恩民李晓娟侯喜林朴范泽; 机构黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医学省重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第5期99-102,共4页; 基金黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(11521201); 文摘应用原核表达系统表达猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端和N端的主要抗原表位区,重组蛋白命名为ORF2-C和ORF2-N,初步建立间接ELISA诊断方法。用重组蛋白ORF2-C和ORF2-N作为诊断抗原,对反应条件进行优化,初步建立ELISA诊断方法。抗原最适包被浓度ORF2-C为8μg/mL、ORF2-N为12μg/mL;血清最适稀释度均为1∶50,ORF2-C作用时间为50min、ORF2-N作用时间为90min;酶标抗体最适稀释度为1∶5000;ORF2-C判定标准:D450nm值≥0.348为阳性,D450nm值<0.348为阴性;ORF2-N判定标准:D450nm值≥0.397为阳性,D450nm值<0.397为阴性。与戊型肝炎病毒诊断试剂盒检测结果相比,阳性符合率分别为93.3%、86.7%。利用重组蛋白建立的ELISA方法特异性、敏感性和重复性均较好,且ORF2-C的检测效率明显高于ORF2-N,该方法的初步建立为进一步完善猪戊型肝炎病毒诊断方法奠定基础。; 关键词猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区 ELISA; Keywords swine Hepatitis E ORF2 major epitope domain ELISA; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端主要抗原表位区的原核表达被引量：2: 2; 作者冉旭华闻晓波王密李冬野侯喜林; 机构黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医学省重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期51-54,共4页; 基金黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(11521201); 文摘用原核表达系统表达猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端的主要抗原表位区。通过对GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基酸序列进行分析,确定了其N端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了1对特异性引物,RT-PCR扩增该区段,并将此片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上,命名为pET30a-ORF2N,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,1.0 mmol/LIPTG37℃诱导表达。RT-PCR扩增得到424 bp的片段,重组蛋白大小约为21.8 ku,与预期大小相符。West-ern blotting分析结果表明,该蛋白能与阳性血清发生特异性反应,证明该蛋白具有生物学活性。猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端主要抗原表位区在大肠杆菌中成功表达,具有一定的反应原性,为进一步用其建立诊断方法奠定基础。; 关键词猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区表达; Keywords swine hepatitis E ORF2 major epitope domain expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端主要抗原表位区的原核表达被引量：1: 3; 作者冉旭华闻晓波王密李冬野侯喜林; 机构黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医学省重点实验室; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第1期24-27,共4页; 基金黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(11521201); 文摘利用分子生物学软件分析GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基酸序列,确定了其C端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了一对特异性引物,RT-PCR扩增该区域,并将此片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上,命名为pET30a-ORF2C,然后转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,1.0 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。结果表明,RT-PCR扩增得到301 bp的片段,重组蛋白大小约为18 ku,与预期大小相符。Western blot分析表明,该蛋白与阳性血清发生特异性反应,为进一步利用其建立诊断方法奠定了基础。; 关键词猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区表达; Keywords Swine hepatitis E virus ORF2 major epitope domain expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学] S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪细小病毒GZ分离株NS1基因主要抗原表位区原核表达研究被引量：2: 4; 作者刘建汤德元姜德荣王洪光李达; 机构贵州大学动物科学学院; 出处《山地农业生物学报》 2013年第5期397-402,共6页; 基金贵州大学研究生创新基金项目"猪细小病毒NS1蛋白主要抗原区间接ELISA方法的建立"(研农2013020) 贵州省2011年农业攻关项目"贵州省规模化猪场主要病毒性疫病的调查及综合防控对策的研究与示范"[黔科合NY字(2011)3103号]; 文摘根据GenBank登录的猪细小病毒NADL-2株和China株NS1基因序列设计1对特异性引物,对贵州大学动物生物技术实验中心分离的猪细小病毒GZ株接种ST细胞传代培养后,提取病毒DNA,进行PCR扩增PPV NS1基因主要抗原表位区,克隆后测序,随后将该基因亚克隆至pET-32a(+)载体,构建pET-32a-NS1重组质粒,转化得到重组菌,经IPTG诱导表达,通过亲和柱纯化并复性,制备重组蛋白。Western-blot检测发现,经诱导表达的NS1基因主要抗原表位区蛋白约为64 ku,与预测的大小一致,而且,重组蛋白在纯化复性后能被PPV阳性血清所识别,具有较好的反应原性。; 关键词猪细小病毒 NS1基因主要抗原表位区原核表达; Keywords Porcine parvovirus NS1 gene major antigen regions prokaryotic expression; 分类号 S852.659.2 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名伪狂犬病病毒gB基因的原核表达及间接ELISA方法的建立被引量：7: 5; 作者王雨吉艺宽程艺张宝石向柯宇琚春梅; 机构华南农业大学兽医学院; 出处《动物医学进展》北大核心 2015年第6期19-23,共5页; 基金国家自然科学基金项目(31001074); 文摘为了建立评价伪狂犬病疫苗免疫效果的方法,应用PCR方法扩增gB基因的主要抗原表位区序列,大小为768bp,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切后克隆至pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pETgB768,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后,通过IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测融合蛋白的表达情况及其反应原性。用纯化的gB768蛋白作为包被抗原建立间接gB768-ELISA检测方法,试验结果表明,该方法具有良好的敏感性、特异性、重复性。用该方法检测128份临床送检猪血清样本,并与商品化ELISA试剂盒检测结果进行比较,符合率为93.8%。该方法的建立为猪伪狂犬病疫苗免疫效果的评估奠定了基础。; 关键词伪狂犬病病毒 GB基因主要抗原表位区 gB768-ELISA; Keywords Pseudorabies virus gB gene major epitope domain gB768-ELISA; 分类号 S852.655 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪戊型肝炎病毒ORF2主要抗原表位区间接ELISA方法的初步建立	闻晓波王密冉旭华周恩民李晓娟侯喜林朴范泽	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白N端主要抗原表位区的原核表达	冉旭华闻晓波王密李冬野侯喜林	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端主要抗原表位区的原核表达	冉旭华闻晓波王密李冬野侯喜林	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪细小病毒GZ分离株NS1基因主要抗原表位区原核表达研究	刘建汤德元姜德荣王洪光李达	《山地农业生物学报》	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	伪狂犬病病毒gB基因的原核表达及间接ELISA方法的建立	王雨吉艺宽程艺张宝石向柯宇琚春梅	《动物医学进展》北大核心	2015	7	在线阅读下载PDF 职称材料