高良姜素通过下调lncRNA H19的表达抑制ox-LDL诱导的人源 正常主动脉内皮细胞血管生成活性 被引量：1

1

作者 罗瑞 田龙海 杨永曜 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期52-59,共8页

目的探索高良姜素对ox-LDL诱导的人源正常主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及其机制。方法使用不同浓度(0、10、20、40、80μmol/L)的高良姜素孵育HAECs24h后,通过MTT检测细胞活性。以5mg/mLox-LDL诱导的HAECs为模型,使用20、40μmol/L高良... 目的探索高良姜素对ox-LDL诱导的人源正常主动脉内皮细胞(HAECs)的影响及其机制。方法使用不同浓度(0、10、20、40、80μmol/L)的高良姜素孵育HAECs24h后,通过MTT检测细胞活性。以5mg/mLox-LDL诱导的HAECs为模型,使用20、40μmol/L高良姜素孵育24h。为观察高良姜素的作用机制,在HAECs中过表达lncRNAH19,使用40μmol/L高良姜素孵育24 h。通过qRT-PCR检测lncRNAH19的水平,划痕实验和血管形成实验用于观察迁移和管形成能力,使用流式细胞术检测ROS水平。通过Western blot检测VEGFA、MMP-2、MMP-9的蛋白水平。结果低浓度(0、10、20、40μmol/L)的高良姜素对细胞无明显毒性(P>0.05),而80μmol/L高良姜素会抑制HAECs细胞的活性(P<0.01)。ox-LDL诱导的HAECs中lncRNAH19的表达水平增加,高良姜素能降低ox-LDL诱导的HAECs的lncRNAH19的表达水平、迁移能力和血管形成能力,ROS水平以及VEGFA、MMP-2、MMP-9的蛋白水平(P<0.01)。但是,高良姜素的这些生物学作用均能被过表达lncRNAH19逆转(P<0.01)。结论高良姜素可能通过抑制lncRNAH19的表达以降低ox-LDL诱导的HAECs的迁移、氧化应激和血管形成能力来发挥治疗动脉粥样硬化的潜力。 展开更多

关键词 血管生成 人源正常主动脉内皮细胞 高良姜素 lncRNAH19

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黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护作用 被引量：10

2

作者 张少君 吴恒芳 +2 位作者 陈相健 杨笛 朱铁兵 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期889-893,共5页

目的:研究黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护作用。方法:采用两肾一夹制备肾血管性高血压大鼠,术后2周将大鼠随机分为手术组和黄芪甲苷治疗组[5.0 mg/(kg·d)],以假手术组为正常对照,治疗2周后,观察大鼠... 目的:研究黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护作用。方法:采用两肾一夹制备肾血管性高血压大鼠,术后2周将大鼠随机分为手术组和黄芪甲苷治疗组[5.0 mg/(kg·d)],以假手术组为正常对照,治疗2周后,观察大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体超微结构的变化,应用免疫组化染色法观察大鼠胸主动脉内皮细胞锰超氧化物歧化酶(SOD2)的表达。结果:术后2周大鼠收缩压明显高于正常对照大鼠。手术组大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体内嵴断裂、消失,基质电子密度降低,肿胀、空泡化明显;黄芪甲苷治疗后大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体损伤程度明显减轻。手术组大鼠胸主动脉内皮细胞SOD2表达水平较正常对照大鼠明显降低,黄芪甲苷治疗后恢复至正常大鼠水平。结论:黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体的损伤有保护作用,上调主动脉内皮细胞SOD2表达是其可能途径之一。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 肾血管性高血压大鼠 主动脉内皮细胞 线粒体 锰超氧化物歧化酶

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原代大鼠主动脉内皮细胞衰老模型的建立 被引量：5

3

作者 苗新宇 朱潇潇 +2 位作者 龚燕平 谷昭艳 李春霖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期230-235,共6页

目的建立血管衰老模型,观察比较高葡萄糖(HG)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、过氧化氢(H_2O_2)及棕榈酸(PA)对原代大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)诱导衰老作用。方法取2月龄雄性Wistar大鼠,组织贴块法提取原代RAEC并采用免疫荧光细胞化学染色检测CD3... 目的建立血管衰老模型,观察比较高葡萄糖(HG)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、过氧化氢(H_2O_2)及棕榈酸(PA)对原代大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)诱导衰老作用。方法取2月龄雄性Wistar大鼠,组织贴块法提取原代RAEC并采用免疫荧光细胞化学染色检测CD31的表达并进行鉴定。分别应用30 mmol/L葡萄糖(HG)、 10μmol/L AngⅡ、 100μmol/L H_2O_2、 0.5 mmol/L PA处理原代RAEC 24 h。采用β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老情况,实时荧光定量PCR检测衰老相关基因P16 mRNA的水平, Western blot法检测衰老相关基因P16、 P21、 P53蛋白水平;免疫荧光细胞化学染色观察P16的表达, CCK-8法观察细胞存活率。结果与对照组相比,各处理组RAEC中β-半乳糖苷酶染色细胞增加,以H_2O_2、 PA处理组更明显; HG、 AngⅡ、 H_2O_2、 PA处理均可增加RAEC的P16 mRNA水平; AngⅡ、 H_2O_2、 PA处理均可增强RAEC的P16、 P21蛋白水平,以H_2O_2组最显著。各处理组细胞P16表达均增强,与对照组相比, HG组与AngⅡ组细胞存活率变化不大, H_2O_2组与PA组细胞存活率显著降低。结论 HG、 AngⅡ、 H_2O_2及PA均可诱导建立RAEC衰老模型,以H_2O_2诱导衰老作用最强。 展开更多

关键词 衰老 大鼠主动脉内皮细胞(RAEC) 原代培养

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高压培养及卡托普利干预对猪离体主动脉内皮细胞功能的影响 被引量：6

4

作者 王云开 苏海 程晓曙 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期304-305,共2页

目的 :利用高压培养猪离体主动脉血管内皮细胞的实验模型 ,研究高压刺激对血管内皮细胞增殖及分泌一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET)的影响及卡托普利 (Cap)、去甲肾上腺素 (NE)的干预作用。方法 :制备 3 - 6代猪主动脉血管内皮细胞的单细胞悬... 目的 :利用高压培养猪离体主动脉血管内皮细胞的实验模型 ,研究高压刺激对血管内皮细胞增殖及分泌一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET)的影响及卡托普利 (Cap)、去甲肾上腺素 (NE)的干预作用。方法 :制备 3 - 6代猪主动脉血管内皮细胞的单细胞悬液 ,分为 4个组 ,每组 8孔 ,5× 1 0 4 个细胞 /孔 ,①对照 (control)组 ,②Captopril (1 0 - 5mol/L)组 ,③Norepinephrine (1 0 0 μg/L)组 ,④Captopril+norepinephrine组 ,培养 1、3、5d后 ,进行细胞计数 ,培养 48h后测培养液中的NO和ET含量。结果 :①细胞生长试验 :Cap组细胞数明显少于对照组 (P <0 .0 1 )而NE组细胞数明显多于对照组 (P <0 .0 1 ) ,NE +Cap组与对照组无显著差异。②猪主动脉内皮细胞分泌NO及ET含量 :Cap组ET含量低于而NO含量高于对照组 (P <0 .0 1 ) ;而NE组ET含量高于而NO含量低于对照组 (P <0 .0 1 ) ,NE +Cap与对照组无显著差异。结论 :卡托普利抑制高压培养PAEC的增殖 ,抑制ET分泌 ,促进NO分泌 ,而NE则具有相反作用 ; 展开更多

关键词 一氧化氮 内上缩血管肽类 高压培养 卡托普利 猪 离体主动脉内皮细胞 影响

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14,15-DHET对牛主动脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶表达影响的研究 被引量：2

5

作者 左的于 夏勇 +2 位作者 石云敏 皮强中 罗素新 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期255-259,共5页

目的:探讨14,15-二羟基二十碳三烯酸(14,15-DHET)对牛主动脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶表达以及血管形成的影响。方法:将牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cells,BAECs)按照不同14,15-DHET处理浓度分组为0(对照组)、0.1、... 目的:探讨14,15-二羟基二十碳三烯酸(14,15-DHET)对牛主动脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶表达以及血管形成的影响。方法:将牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cells,BAECs)按照不同14,15-DHET处理浓度分组为0(对照组)、0.1、0.5、1、5μmol/L组,刺激时间均为24 h;按照时间梯度分组为0(对照组)、4、8、12、24 h,刺激浓度均为5μmol/L,检测其内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)的蛋白表达水平,同时将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)按照不同14,15-DHET浓度分组为0(对照组)和5μmol/L(处理组),刺激24 h后观察14,15-DHET对血管形成的影响。结果:在浓度梯度组中用0.1、0.5、1、5μmol/L的14,15-DHET处理BAECs后细胞内e NOS蛋白表达水平(1.456±0.008、2.202±0.045、3.931±0.170、4.588±0.179)与对照组相比均明显升高(P<0.05);在时间梯度组中用5μmol/L的14,15-DHET处理BAECs 4、8、12、24 h后细胞内e NOS蛋白表达水平(1.521±0.021、1.922±0.061、3.642±0.173、4.813±0.134)与对照组相比均明显升高(P<0.05);使用5μmol/L的14,15-DHET刺激HUVECs后,处理组小管总长度和小管分枝总长度(13 715.000±448.092,12 538.000±574.182)与对照组(10 426.000±950.537,8 672.000±1 025.486)相比均明显升高(P=0.043,P=0.035)。结论:本研究结果表明14,15-DHET可以增加牛主动脉内皮细胞的e NOS蛋白表达,并且有促进血管形成的作用。 展开更多

关键词 14 15-二羟基二十碳三烯酸 牛主动脉内皮细胞 人脐静脉内皮细胞

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Kv1.5蛋白通道阻滞剂DPO-1对LPS诱导的大鼠主动脉内皮细胞损伤的影响 被引量：1

6

作者 安宁 周贤 +2 位作者 张晓霞 杨涛 许美霞(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第19期2310-2313,共4页

目的:研究Kv1.5蛋白通道阻滞剂DPO-1对LPS诱导的大鼠主动脉内皮细胞损伤的影响。方法:将大鼠随机分为Control组、LPS组、LPS+DPO-11组、LPS+DPO-12组,LPS组静脉注射5 mg/kg LPS建立脓毒症模型,LPS+DPO-11组、LPS+DPO-12组建模后分别腹... 目的:研究Kv1.5蛋白通道阻滞剂DPO-1对LPS诱导的大鼠主动脉内皮细胞损伤的影响。方法:将大鼠随机分为Control组、LPS组、LPS+DPO-11组、LPS+DPO-12组,LPS组静脉注射5 mg/kg LPS建立脓毒症模型,LPS+DPO-11组、LPS+DPO-12组建模后分别腹腔注射不同剂量DPO-1(0.3、3 mg/kg)。取大鼠胸主动脉,分离内膜组织,Western blot检测内皮细胞中Kv1.5蛋白水平,流式细胞仪检测内皮细胞凋亡率;ELISA检测各组大鼠血清内皮细胞标志物内皮细胞特异性分子-1(Endocan)、内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血管性血友病因子(vWF)及血清炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平,并测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)含量。结果:Kv1.5蛋白在Control组及LPS组存在表达,与Control组相比,LPS组Kv1.5蛋白表达增加(P<0.01);流式细胞结果显示,LPS组内皮细胞凋亡率较Control组明显上升(P<0.01),而LPS+DPO-11组及LPS+DPO-12组内皮细胞凋亡率较LPS组下降(P<0.05);与Control组相比,LPS组血清内皮细胞标志物Endocan、VCAM-1、vWF及血清炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平明显升高(P<0.05),给予Kv1.5特异性通道阻滞剂DPO-1干预后,大鼠血清内皮细胞标志物Endocan、VCAM-1、vWF及血清炎症因子IL-6、IL-1β及TNF-α水平下降(P<0.05),且这一效应随DPO-1剂量增加而加强;LPS组较Control组MDA、MPO水平上升,SOD活性降低(P<0.05),而DPO-1预处理可降低MDA、MPO含量、增加SOD活性(P<0.05)。结论:Kv1.5蛋白通道DPO-1通过阻断Kv1.5通道,减轻主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤,抑制炎症反应。 展开更多

关键词 KV1.5 大鼠主动脉内皮细胞 DPO-1 血管内皮细胞损伤

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胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞炎症因子表达影响的研究 被引量：1

7

作者 吕青山 李峰 +1 位作者 曹琳 徐瑜 《海南医学院学报》 CAS 2013年第7期919-923,共5页

目的:观察胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞数种炎症因子表达的影响。方法:用胞壁酰二肽(MDP)按要求对人主动脉内皮细胞(HAECs)进行处理,运用实时定量RT-PCR以及RT-PCR测定IL-1β,IL-8,MCP-1,IFN-α与IFN-β基因的表达。用Western blot与RT... 目的:观察胞壁酰二肽对人主动脉内皮细胞数种炎症因子表达的影响。方法:用胞壁酰二肽(MDP)按要求对人主动脉内皮细胞(HAECs)进行处理,运用实时定量RT-PCR以及RT-PCR测定IL-1β,IL-8,MCP-1,IFN-α与IFN-β基因的表达。用Western blot与RT-PCR方法研究MDP影响IFN-α,IFN-β表达的机制。结果:经MDP处理后,HAECs细胞中炎症因子IFN-α,IFN-β,IL-1β,IL-8和MCP-1的表达上调。结论:MDP可以通过上调HAECs细胞炎症因子的表达。 展开更多

关键词 胞壁酰二肽 人主动脉内皮细胞 炎症因子

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AGEs对人主动脉内皮细胞线粒体融合蛋白表达的影响 被引量：1

8

作者 章顺荣 高越 封菲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1688-1693,共6页

目的:明确晚期糖基化终产物(AGEs)是否可引起内皮细胞线粒体融合蛋白Mfn1和Mfn2表达水平的变化。方法:AGEs用糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)代替。将购买的原代人主动脉内皮细胞株进行体外扩增、传代、分组,进行AGEs干预,分为对照组,不同... 目的:明确晚期糖基化终产物(AGEs)是否可引起内皮细胞线粒体融合蛋白Mfn1和Mfn2表达水平的变化。方法:AGEs用糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)代替。将购买的原代人主动脉内皮细胞株进行体外扩增、传代、分组,进行AGEs干预,分为对照组,不同浓度梯度的AGEs干预组(50 mg/L、100 mg/L和200 mg/L)和干预不同时间组(分别是100 mg/L的AGEs干预人主动脉内皮细胞6 h、12 h、24 h和48 h)。采用实时荧光定量PCR方法对AGEs干预后的人主动脉内皮细胞Mfn1和Mfn2的mRNA表达水平进行检测;采用Western blot法对AGEs干预后的人主动脉内皮细胞Mfn1和Mfn2的蛋白表达水平进行检测。结果:不同浓度AGEs干预人主动脉内皮细胞24 h可引起Mfn1和Mfn2的mRNA和蛋白表达水平显著降低;100 mg/L AGEs干预人主动脉内皮细胞6 h,Mfn1和Mfn2的mRNA和蛋白表达水平与对照组相比无显著变化,而干预12 h、24 h和48 h均引起人主动脉内皮细胞Mfn1和Mfn2的mRNA和蛋白表达水平显著降低。结论:AGEs干预体外培养的人主动脉内皮细胞12 h后其线粒体融合蛋白Mfn1和Mfn2的表达水平降低,提示AGEs可能引起内皮细胞线粒体动力学的改变,并可能通过这一途径引起内皮细胞线粒体功能异常,而导致内皮细胞的功能异常。 展开更多

关键词 晚期糖基化终产物 人主动脉内皮细胞 线粒体动力学 线粒体融合蛋白

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同型半胱氨酸抑制主动脉内皮细胞生长的研究 被引量：1

9

作者 陈小莉 杨庆 +1 位作者 蔡东联 卫立辛 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期196-199,共4页

目的 :探讨同型半胱氨酸 (HCY)对内皮细胞 (EC)生长和功能的影响 ,了解 HCY引起动脉粥样硬化的过程及其可能机制。方法 :体外培养新生牛主动脉 EC,随机分为 6组 ,即正常对照组 ,及 HCY 0 .1、0 .5、1.0、5 .0和 10 .0 mmol/ L组 ;培养2 ... 目的 :探讨同型半胱氨酸 (HCY)对内皮细胞 (EC)生长和功能的影响 ,了解 HCY引起动脉粥样硬化的过程及其可能机制。方法 :体外培养新生牛主动脉 EC,随机分为 6组 ,即正常对照组 ,及 HCY 0 .1、0 .5、1.0、5 .0和 10 .0 mmol/ L组 ;培养2 4 h后 ,显微镜下观察细胞形态同时采用细胞毒试验 ,流式细胞仪检测细胞生长情况 ,检测培养液中的一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET)、前列腺素 (PGI2 )、血栓素 (TXA2 )、氧化型低密度脂蛋白 (ox- L DL)。 结果 :HCY各组的内皮细胞与对照组相比 ,细胞形态不规则 ,立体感差 ,细胞内颗粒多 ;细胞毒试验发现 HCY对 EC的生长与增殖有明显抑制作用 ;流式细胞仪检测可见HCY抑制 EC由 G1 期进入合成的 S期 ;功能检测可见 HCY组 EC释放的血管舒张因子 NO、PGI2 浓度降低 ;血管收缩因子ET、TXA2 升高 ;对内皮细胞有一定损害作用的 ox- L DL含量显著增加。结论 :HCY抑制 EC生长且损伤内皮细胞功能 。 展开更多

关键词 同型半胱氨酸 血管内皮 动脉粥样硬化 主动脉内皮细胞

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树鼩主动脉内皮细胞株的建立及其生物学特性的研究

10

作者 张永蓉 卢耀增 +3 位作者 陈中 苏树芸 佘铭鹏 夏人仪 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1993年第1期49-55,共7页

将树鼩胸主动脉分层剥离,用组织块贴壁法,体外培养出主动脉内皮细胞,历经一年,传至23代,命名为TSaec-8910。倒置显微镜下细胞单层生长,呈铺路石样镶嵌排列,第Ⅷ因子相关抗原阳性,透射电镜观察,细胞质内未找到Weibel-Palade小体。细胞生... 将树鼩胸主动脉分层剥离,用组织块贴壁法,体外培养出主动脉内皮细胞,历经一年,传至23代,命名为TSaec-8910。倒置显微镜下细胞单层生长,呈铺路石样镶嵌排列,第Ⅷ因子相关抗原阳性,透射电镜观察,细胞质内未找到Weibel-Palade小体。细胞生长曲线及分裂指数示9～12d汇合成单层,按1:2或1:3传代,传代间隔为lO～14d,细胞冻存复苏后接种存活率为31.5％,细胞染色体检查为二倍体细胞,2n=62,雄性。内皮细胞生长因子、上皮细胞生长因子、条件培养基和附着底物对TSaec-8910细胞有明显影响,细胞在玻璃瓶壁上贴壁时间为24～18h,而在涂有鼠尾胶瓶壁则为4h左右,内皮细胞生长因子、上皮细胞生长因子能促进TSaec-8910细胞贴壁和增殖,20％TSaec-8910细胞条件培养基亦能良好地维持细胞形态。 展开更多

关键词 主动脉内皮细胞 TS 内皮细胞生长因子 上皮细胞 树鼩 二倍体细胞 复苏后 条件培养基 贴壁法 雄性

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黄芪甲苷促进缺氧损伤后人主动脉内皮细胞血管新生的研究 被引量：21

11

作者 卢飞艳 丁燕子 +3 位作者 陈相健 卞智萍 吴恒芳 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1124-1129,共6页

目的:研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧损伤后人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)的保护作用及对血管生成的影响及可能机制。方法:体外培养HAECs,8%O2制备缺氧模型,实验分为对照组、缺氧组、AS-Ⅳ治疗组... 目的:研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对缺氧损伤后人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)的保护作用及对血管生成的影响及可能机制。方法:体外培养HAECs,8%O2制备缺氧模型,实验分为对照组、缺氧组、AS-Ⅳ治疗组,50μg/mL)。观察AS-IV对缺氧损伤后HAECs的保护作用及对细胞迁移能力、增殖活性和体外成环的影响以及自噬在血管生成过程中的作用。结果:缺氧损伤后与对照组比较,HAECs细胞上清释放的损伤标志物乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)浓度增加[(25.33±1.70)U/L vs.(5.33±1.25)U/L],细胞活力降低[(81.12±0.72)%vs.(100±3.07)%],细胞迁移能力降低,增殖能力降低,体外成环数下降[(30.91±3.78)个vs.(62.10±7.56)个],自噬相关蛋白Beclin及LC3-Ⅱ表达下调(P<0.05)。加入AS-Ⅳ治疗后,与缺氧组比较,细胞上清LDH释放量减少[(18.33±1.25)U/L],细胞活力提高[(85.71±2.48)%],细胞迁移能力增强、增殖活性增加,基质胶体外成环数增加[(48.64±4.80)个],自噬相关蛋白Beclin及LC3-Ⅱ表达上调(P<0.05)。结论:AS-Ⅳ可减轻缺氧对HAECs的损伤,可能通过激活自噬通路促进HAECs血管新生。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人主动脉内皮细胞 缺氧 血管新生

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小檗碱活化AMPK-eNOS减轻油酸所致人主动脉内皮细胞损伤 被引量：7

12

作者 周慧 刘敬 +8 位作者 侯文锋 王尧清 张文彦 许波 马成俊 李忌 孟庆国 孙喜灵 王振华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第5期213-219,共7页

目的:考察小檗碱对油酸所致内皮细胞损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法:以体外培养人主动脉内皮细胞系(human aorta endothelial cells,HAEC)为受试对象;分别以油酸、油酸联合小檗碱、油酸联合单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine mo... 目的:考察小檗碱对油酸所致内皮细胞损伤的保护作用,并探究其作用机制。方法:以体外培养人主动脉内皮细胞系(human aorta endothelial cells,HAEC)为受试对象;分别以油酸、油酸联合小檗碱、油酸联合单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)激活剂(AICAR)或抑制剂(Compound C)处理HAEC;采用油红O染色法观察细胞内脂滴合成;采用比色法检测细胞内甘油三酯、总胆固醇含量,硝酸还原酶法检测NO的水平,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐探针检测细胞内总活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Western Blotting检测细胞总AMPK、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及其磷酸化(p-AMPK、p-eNOS)水平。结果:油酸可浓度依赖性地抑制细胞增殖,小檗碱组各项指标较正常对照组无显著性差异,油酸联合小檗碱组的细胞活性较油酸组明显好转(P<0.01)。与正常对照组比较,油酸组的脂质浸润程度明显,油酸在不同浓度下使内皮细胞的脂质含量呈剂量依赖性增加,加入小檗碱可明显减少这种脂质堆积。油酸组的NO水平较正常对照组明显减少,小檗碱能显著抑制油酸所致的内皮NO水平的减少,并且减少由于油酸所致的ROS水平的升高;油酸抑制了AMPK的活化,使p-AMPK和p-eNOS的蛋白水平明显降低(P<0.01);小檗碱可明显逆转油酸所致AMPK和eNOS磷酸化水平下降,Compound C可拮抗其作用。结论:小檗碱可减轻油酸所致血管内皮细胞损伤,或与其活化AMPK/eNOS信号相关。 展开更多

关键词 小檗碱 油酸 单磷酸腺苷活化蛋白激酶 内皮型一氧化氮合酶 人主动脉内皮细胞

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黄芪甲苷改善过氧化氢诱导的人主动脉内皮细胞氧化应激损伤的研究 被引量：12

13

作者 陈宇琼 孙东岳 +3 位作者 吴恒芳 卞智萍 陈相健 杨笛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2017年第8期949-954,共6页

目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_... 目的 :研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)氧化应激损伤的改善作用。方法 :体外培养的HAECs经饥饿处理后分为对照组、H_2O_2损伤组及AS-Ⅳ治疗组。H_2O_2损伤组细胞经H_2O_2(400μmol/L)持续损伤36 h,AS-Ⅳ治疗组细胞经H_2O_2损伤12 h后加入含50μg/m L AS-Ⅳ的培养基继续干预处理24 h。观察AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤及线粒体功能损伤的修复作用。结果:H_2O_2损伤后HAECs丙二醛(MDA)含量、NADPH氧化酶活性及线粒体活性氧(ROS)水平显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及线粒体膜电位显著降低;H_2O_2损伤的HAECs经AS-IV治疗后,HAECs的MDA含量、NADPH氧化酶活性及线粒体ROS含量明显降低,SOD和Mn-SOD活性及线粒体膜电位显著增高。结论:AS-Ⅳ对H_2O_2诱导的HAECs氧化应激损伤具有保护作用,提高线粒体的抗氧化功能是其可能的机制之一。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 人主动脉内皮细胞 线粒体 过氧化氢

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姜黄素减轻氧化型低密度脂蛋白诱导的人主动脉内皮细胞损伤 被引量：5

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作者 胡勇 苏晓红 +3 位作者 朱火兰 张凌霄 刘飞 刘仲伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1359-1364,共6页

目的:观察姜黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的作用及分子机制。方法:以不同浓度姜黄素预处理体外培养的HAECs,再以ox-LDL对细胞进行干预。MTT法和Ed U法评估细胞增殖能力;ELISA法对培养液中白细胞... 目的:观察姜黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的作用及分子机制。方法:以不同浓度姜黄素预处理体外培养的HAECs,再以ox-LDL对细胞进行干预。MTT法和Ed U法评估细胞增殖能力;ELISA法对培养液中白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGFβ1)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)以及分泌型晚期糖基化终产物受体(sRAGE)浓度进行检测;凝胶电泳迁移率实验(EMSA)评估过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的结合活性;Western blot法检测HAECs中磷酸化PPARγ、血红素氧合酶-1(HO-1)、HMGB1、IL-6、TGFβ1和RAGE的表达水平。结果:ox-LDL处理的HAECs细胞活力和增殖能力下降,细胞内PPARγ/HO-1信号被抑制,其下游HMGB1/RAGE炎症通路被激活,细胞分泌的IL-6、TGFβ1、HMGB1以及sRAGE浓度显著增加。不同浓度姜黄素预处理可激活ox-LDL诱导的HAECs内PPARγ/HO-1信号通路,从而抑制下游HMGB1/RAGE炎症通路,降低IL-6、TGFβ1、HMGB1以及sRAGE炎症因子水平。结论:ox-LDL能够通过抑制PPARγ/HO-1而激活HMGB1/RAGE炎症通路造成HAECs损伤。姜黄素则能够通过活化PPARγ/HO-1通路抑制炎症反应,减轻ox-LDL对HAECs的损伤。 展开更多

关键词 姜黄素 人主动脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ

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miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响 被引量：4

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作者 莫倩 李丹 凌文华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1187-1191,共5页

目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:... 目的:观察miR-18a对人主动脉内皮细胞血管生成能力的影响。方法:分别将10 nmol/L miR-18a mimics和20 nmol/L miR-18a inhibitor转染至人主动脉内皮细胞,qRT-PCR法检测miR-18a表达情况并观察内皮细胞的迁移、黏附和管腔形成能力。结果:转染48 h后,miR-18a mimics组miR-18a表达为对照组的608倍(P<0.05);miR-18a inhibitor组miR-18a表达降低至对照组的31%(P<0.05)。与对照组相比,miR-18a mimics转染后迁移至Transwell小室下层的内皮细胞数目和毛细血管管腔形成数目分别减少60%和52%(P<0.01);而miR-18a inhibitor转染后分别增加100%(P<0.05)和84%(P<0.01),细胞黏附能力增加43%(P<0.05)。结论:miR-18a的表达水平与人主动脉内皮细胞的血管生成能力相关,可能成为血管性疾病治疗的分子靶点。 展开更多

关键词 miR-18a 人主动脉内皮细胞 血管生成

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人主动脉内皮细胞体外培养方法的建立及生物学活性鉴定 被引量：3

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作者 何珂帅 章辉 +3 位作者 张俊杰 吴亚 武晓泓 邵永丰 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期734-738,共5页

目的:建立体外人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)提取和培养的方法。方法:从术中取下的人主动脉组织上剥离内皮层,Ⅰ型胶原酶消化分离HAECs,利用显微镜观察其生长状况,免疫组织化学方法及流式细胞法鉴定及检测细... 目的:建立体外人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)提取和培养的方法。方法:从术中取下的人主动脉组织上剥离内皮层,Ⅰ型胶原酶消化分离HAECs,利用显微镜观察其生长状况,免疫组织化学方法及流式细胞法鉴定及检测细胞纯度,以氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)检测细胞吞噬功能并检测细胞在体外的血管生成能力。结果:0.1%及0.2%的Ⅰ型胶原酶,最佳消化时间均为50 min,2 h贴壁细胞数分别(25.2±2.1)×103,(40.5±3.8)×103)个。细胞融合后在倒置显微镜下呈"鹅卵石"样排列生长。血小板-内皮黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)及Ⅷ因子鉴定为阳性,细胞纯度达(96.43±4.12)%。细胞内吞ox-LDL及血管生成能力较好。结论:钝性分离主动脉内皮层,辅以Ⅰ型胶原酶消化是一种较好的HAECs获取方法,酶浓度及消化时间是其重要的影响因素。 展开更多

关键词 人主动脉内皮细胞 免疫组织化学 细胞分离 细胞培养 流式细胞术

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敲低前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)抑制人主动脉内皮细胞的内皮间质转化 被引量：2

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作者 靳天慧 陈亮 +4 位作者 刘叶红 盛瑛 周雨婷 宣诗怡 宗刚军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1079-1084,共6页

目的以人主动脉内皮细胞(HAEC)为研究对象,探讨敲减前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对β甘油磷酸、地塞米松、L-抗坏血酸诱导内皮间质转化(EndoMT)的保护作用。方法以(0、10、30、50)mmol/Lβ甘油磷酸联合100 nmol/L地塞米松和50μg/ml... 目的以人主动脉内皮细胞(HAEC)为研究对象,探讨敲减前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)对β甘油磷酸、地塞米松、L-抗坏血酸诱导内皮间质转化(EndoMT)的保护作用。方法以(0、10、30、50)mmol/Lβ甘油磷酸联合100 nmol/L地塞米松和50μg/ml L-抗坏血酸诱导HAEC建立EndoMT模型。采用PCSK9的特异性小干扰RNA(si-PCSK9)转染HAEC,实时荧光定量PCR与Western blot法检测HAEC的PCSK9的mRNA和蛋白表达。将HAEC随机分为空白组、EndoMT组、转染阴性对照小干扰RNA的EndoMT组、转染si-PCSK9的EndoMT组。实时荧光定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的mRNA水平,Western blot法检测α-SMA、VE-cadherin的蛋白水平,免疫荧光染色法检测α-SMA的表达。结果30 mmol/Lβ甘油磷酸诱导EndoMT效果最佳,发生EndoMT时,PCSK9的mRNA及蛋白表达上调。而PCSK9敲减后,α-SMA、FSP1的表达下调,VE-cadherin的表达上调。结论敲低PCSK9可抑制HAEC的EndoMT。 展开更多

关键词 内皮间质转化(EndoMT) 前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9) 人主动脉内皮细胞(HAEC)

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外源GDF11对人主动脉内皮细胞钙化的影响 被引量：2

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作者 盛瑛 张宸铭 +5 位作者 陈亮 徐佰达 靳天慧 刘叶红 叶挺 宗刚军 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第11期1689-1694,共6页

目的建立体外人主动脉内皮细胞(HAEC)钙化模型,探讨外源生长分化因子11(GDF11)对钙化的影响。方法使用低浓度(10 mmol/L)/高浓度(30 mmol/L)β-甘油磷酸+100 nmol/L地塞米松+50μg/ml L-抗坏血酸刺激HAEC,筛选出有效钙化诱导方案;使用... 目的建立体外人主动脉内皮细胞(HAEC)钙化模型,探讨外源生长分化因子11(GDF11)对钙化的影响。方法使用低浓度(10 mmol/L)/高浓度(30 mmol/L)β-甘油磷酸+100 nmol/L地塞米松+50μg/ml L-抗坏血酸刺激HAEC,筛选出有效钙化诱导方案;使用不同浓度GDF11(0、30、50、100 ng/ml)刺激HAEC不同时间(0、8、24、48 h),筛选出GDF11有效作用浓度与时间;将HAEC分为空白组、GDF11组、钙化组、GDF11+钙化组。采用Western blot检测骨形态发生蛋白(BMP)2、BMP4、GDF11的表达;细胞免疫荧光检测GDF11的表达;RT-PCR检测成骨细胞特异转录因子(Runx2)、Runx2下游基因Osterix及GDF11的基因表达;茜素红S染色检测钙化沉积。结果 (1)高浓度组的GDF11、BMP4、BMP2蛋白表达水平均高于空白对照组(P<0.05);高浓度组的Runx2、Osterix、GDF11基因表达水平均高于空白对照组(P<0.05);茜素红染色显示,高浓度组钙盐沉积较空白对照组增加;(2) 100 ng/ml GDF11预处理24 h后, BMP2、BMP4蛋白表达较钙化组下降(P<0.05);(3)与钙化组比较,GDF11+钙化组BMP2、BMP4蛋白表达下降(P<0.05),GDF11组与空白组比较差异无统计学意义;与钙化组比较,GDF11+钙化组的钙化沉积减少, GDF11组与空白组比较差异无统计学意义;GDF11+钙化组Runx2、Osterix基因水平均低于钙化组(P<0.05),但GDF11组与空白组比较差异无统计学意义。结论外源GDF11可抑制HAEC钙化,可能与抑制HAEC成骨分化有关。 展开更多

关键词 生长分化因子11 血管钙化 人主动脉内皮细胞

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长期游泳运动后大鼠主动脉内皮细胞的改变 被引量：4

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作者 梁志强 邓道善 廖进昌 《武汉体育学院学报》 CSSCI 北大核心 1997年第4期80-81,共2页

对9只大鼠进行了6个月的游泳训练后，结果发现：内皮细胞胞核增大，染色体增多，细胞质中线粒体增加，有大量微饮小泡存在。运动训练可以引起主动脉形态结构的改变。

关键词 游泳运动的大鼠 主动脉内皮细胞 透射电镜

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蜂胶乙醇提取物对小鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用 被引量：2

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作者 杨博 朱宇轩 +2 位作者 缪晓青 徐晓兰 杨文超 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第15期332-336,共5页

目的:探究蜂胶乙醇提取物(ethanol extracts of propolis,EEP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠主动脉内皮细胞(mouse aortic endothelial cell,MAEC)炎症因子损伤的保护作用。方法:将细胞分为对照组,LPS模型组,蜂胶低(2.5μ... 目的:探究蜂胶乙醇提取物(ethanol extracts of propolis,EEP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠主动脉内皮细胞(mouse aortic endothelial cell,MAEC)炎症因子损伤的保护作用。方法:将细胞分为对照组,LPS模型组,蜂胶低(2.5μg/mL)、中(5μg/mL)、高(10μg/mL)剂量组。采用CCK-8检测MAEC的细胞增殖率,ELISA酶联免疫吸附实验测定MAEC炎症细胞中TNF-α、IL-6的含量,Western Blot法测定MAEC炎症细胞中ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的表达水平。结果:与对照组相比,LPS组MAEC的细胞增殖率极其显著降低(P<0.001),ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、TNF-α以及IL-6的水平极其显著升高(P<0.001)。经不同浓度EEP处理后,MAEC的细胞增殖率显著上升(P<0.05或P<0.01),TNF-α、IL-6的含量以及ICAM-1、VCAM1、MCP-1表达水平降低,各蜂胶组与LPS组相比均有显著性差异(P<0.01或P<0.001)。结论:EEP能够抑制LPS诱导的MAEC中炎症因子的表达,对血管内皮细胞具有保护作用。 展开更多

关键词 蜂胶 小鼠主动脉内皮细胞 脂多糖 抗炎 炎症因子

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