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中脑导水管周围灰质外侧区神经元P2X7受体激活对胞内钙离子水平的影响 被引量:4
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作者 李鹏涛 李尤艳 肖智 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第6期602-605,共4页
目的P2X7受体活化的主要细胞内信号是钙离子升高,随后通过多种胞内信号转导途径呈现其生理、病理功能的多样性。探讨原代培养的大鼠中脑导水管周围灰质外侧区(lPAG)神经元P2X7受体激活对胞内钙离子水平的影响。方法将原代培养lPAG神经... 目的P2X7受体活化的主要细胞内信号是钙离子升高,随后通过多种胞内信号转导途径呈现其生理、病理功能的多样性。探讨原代培养的大鼠中脑导水管周围灰质外侧区(lPAG)神经元P2X7受体激活对胞内钙离子水平的影响。方法将原代培养lPAG神经元细胞随机分为4组:空白对照组(不加入药物);BzATP组(100μmol/L);A-740003+BzATP组:先加入100nmol/LA-740003孵育10min,再加入10μmol/L的BzATP;BzATP对照组:先加入无钙液孵育20min,再加入BzATP。其中空白对照组、BzATP组、A-740003+BzATP组孵育液均为DMEM/F12培养基,BzATP对照组孵育液为无钙液。激光共聚焦显微镜技术观察:不同浓度BzATP对培养lPAG神经元胞内钙离子变化;A-740003或无钙液预孵育对BzATP诱发的lPAG神经元胞内钙离子变化的影响。结果BzATP呈剂量依赖性升高lPAG神经元胞内钙离子水平;A-740003和无钙液预孵育可抑制BzATP诱发的lPAG神经元胞内钙离子水平升高。激光共聚焦显微镜下观察显示:BzATP组神经元胞内钙离子荧光强度(2.48±1.05)较空白对照组、BzATP对照组、A-740003+BzATP组([1.12±0.03)、(1.09±0.03)、(1.14±0.08)]明显升高(P<0.01)。结论P2X7受体激活后可以升高lPAG神经元胞内钙离子水平且与细胞外钙离子胞内有关。 展开更多
关键词 中脑导水管周围灰质外侧 神经元 P2X7受体 钙离子
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骨癌痛大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区P2X7受体激活对D?丝氨酸释放的影响
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作者 李鹏涛 肖智 +1 位作者 文松 李尤艳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第1期12-17,共6页
目的中脑导水管周围灰质腹外侧区(vlPAG)P2X7受体激活介入骨癌痛的形成和维持机制。文章拟建立骨癌痛大鼠模型,通过脑微透析结合ELISA技术观察vlPAG中P2X7受体激活对D-丝氨酸水平的影响。方法雌性SD大鼠42只,随机数字表法分成4组:正常... 目的中脑导水管周围灰质腹外侧区(vlPAG)P2X7受体激活介入骨癌痛的形成和维持机制。文章拟建立骨癌痛大鼠模型,通过脑微透析结合ELISA技术观察vlPAG中P2X7受体激活对D-丝氨酸水平的影响。方法雌性SD大鼠42只,随机数字表法分成4组:正常对照组(n=12)、假手术组(n=12)、骨癌痛组(n=12)和P2X7受体特异性拮抗剂(A-438079)组(n=6)。骨癌痛组大鼠建立大鼠胫骨转移性骨癌痛模型,注入20μL含SHZ-88乳腺癌细胞的RPMI-1640培养基细胞悬液(癌细胞1×10^7个/0.5 mL);假手术组注入等体积的经过处理的癌细胞(SHZ-88乳腺癌细胞在90℃沸水中持续20 min),其余操作同骨癌痛组;正常对照组不进行任何处理。P2X7受体拮抗剂组前面操作同骨癌痛组,但灌流液中加入P2X7受体特异性拮抗剂A-438079。正常对照组、假手术组和骨癌痛组分别于同一时间点检测大鼠建模侧后足热痛阈值和机械痛阈值;免疫组化法检测各组21 d时间点大鼠vlPAG中P2X7受体阳性表达;正常对照组、假手术组、骨癌痛组和P2X7受体拮抗剂组使用ELISA法检测各组大鼠vlPAG透析液中D-丝氨酸变化。结果骨癌痛组大鼠机械痛阈值和热痛阈值在第5、7、10、14、18、21天均低于正常对照组和假手术组(P<0.01)正常对照组和假手术组大鼠vlPAG中有散在P2X7阳性表达,骨癌痛组大鼠P2X7受体阳性细胞数较正常对照组和假手术组显著升高(P<0.01)。骨癌痛组大鼠vlPAG中D-丝氨酸含量[(220.28±63.38)ng/mL]较正常对照组大鼠[(148.09±46.89)ng/mL]和假手术组[(147.32±51.44)ng/mL]大鼠明显升高(P<0.05)。P2X7受体拮抗剂组大鼠vlPAG中D-丝氨酸含量[(134.20±41.77)ng/mL]较骨癌痛组明显降低(P<0.05)。结论vlPAG P2X7受体激活后促进D-丝氨酸释放进而参与大鼠骨癌痛机制的调节。 展开更多
关键词 骨癌痛 微透析 中脑导水管周围灰质腹外侧 P2X7受体
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多巴胺D3受体在吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱及戒断反应中的作用
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作者 赖佳灵 张耀中 +2 位作者 杜桂芝 王昕 刘巧凤 《成都医学院学报》 2025年第2期181-185,共5页
目的研究多巴胺受体(D3R)在吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱反应及戒断反应中的作用。方法60只6~8周龄Wistar雄性健康大鼠体重180~220 g,随机分为6组,Ⅰ组(生理盐水组)、Ⅱ组(吗啡组)、Ⅲ组(D3R激动剂ML417+吗啡组)、Ⅳ组(D3R拮抗剂GSK5988... 目的研究多巴胺受体(D3R)在吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱反应及戒断反应中的作用。方法60只6~8周龄Wistar雄性健康大鼠体重180~220 g,随机分为6组,Ⅰ组(生理盐水组)、Ⅱ组(吗啡组)、Ⅲ组(D3R激动剂ML417+吗啡组)、Ⅳ组(D3R拮抗剂GSK598809+吗啡组)、Ⅴ组(ML417+盐水组)、Ⅵ组(GSK598809+盐水组)。Ⅰ组大鼠腹腔注射生理盐水后放入黑色非伴药箱30 min,Ⅱ组腹腔注射吗啡后放入白色伴药箱30 min,次日记录大鼠在黑白箱中的停留时间。通过计算大鼠在白箱中的停留时间与预试期的差值,评估条件性偏爱的形成,当观察到统计学差异时,说明大鼠对白箱表现出明显的偏好。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组大鼠在白箱的停留时间增加(P<0.05)。与Ⅱ组比较,Ⅲ组大鼠在白箱的停留时间进一步增加(P<0.01),同时Raf和磷酸化ERK(p-ERK)的表达也增强(P<0.05)。相反,与Ⅱ组比较,Ⅳ组大鼠在白箱的停留时间减少(P<0.001),Raf和p-ERK的水平也明显降低(P<0.05或P<0.01),戒断分数降低(P<0.001)。结论D3受体在维持吗啡诱导的条件性位置偏爱反应和戒断反应方面发挥作用,D3R可能通过下调中脑导水管灰质区中的Raf-ERK信号通路,从而减轻对吗啡的偏好。 展开更多
关键词 吗啡 多巴胺D3受体 RAF 细胞外信号调节激酶 条件性位置偏爱反应 中脑导水管灰质区
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SCH23390对吗啡戒断反应和突触素的影响 被引量:1
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作者 唐珊 周圣荃 刘巧凤 《中国医药导报》 CAS 2021年第5期14-17,共4页
目的研究多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390对吗啡戒断反应和突触素(SYN)的影响。方法将40只大鼠按随机数字表法分为对照组、吗啡组、SCH23390组、SKF38393组,每组10只。吗啡组、SCH23390组和SKF38393组大鼠按剂量递增方式注射吗啡5 d建立吗... 目的研究多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390对吗啡戒断反应和突触素(SYN)的影响。方法将40只大鼠按随机数字表法分为对照组、吗啡组、SCH23390组、SKF38393组,每组10只。吗啡组、SCH23390组和SKF38393组大鼠按剂量递增方式注射吗啡5 d建立吗啡暴露动物模型。SCH23390组和SKF38393组大鼠在第1~4天上午腹腔注射吗啡前15 min中脑导水管灰质区注射0.5μL 10 mmol/L SCH23390或0.5μL 5 mmol/L SKF38393,在第5天所有大鼠注射纳络酮观察戒断反应,免疫组化和免疫印迹方法检测SYN水平。结果吗啡组戒断反应总分及齿颤、腹泻、反常姿势、眯眼、湿狗样抖动评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。SCH23390组戒断反应总分及齿颤、腹泻评分低于吗啡组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。SKF38393组和吗啡组戒断反应总分及齿颤、腹泻、眯眼、湿狗样抖动评分比较,差异无统计意义(P>0.05);而SKF38393组反常姿势评分高于吗啡组,差异有统计学意义(P<0.05)。吗啡组SYN蛋白表达水平高于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。SCH23390组SYN蛋白表达水平低于吗啡组,差异有统计学意义(P<0.05)。SKF38393组SYN蛋白表达高于吗啡组,差异有统计学意义(P<0.05)。吗啡组SYN阳性神经元数量高于对照组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。SCH23390组SYN阳性神经元数量低于吗啡组,差异有统计学意义(P<0.05)。SKF38393组SYN阳性神经元数量高于吗啡组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SCH23390可能通过下调SYN减轻吗啡戒断反应。 展开更多
关键词 多巴胺D1受体 吗啡 突触素 中脑导水管灰质区
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