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人中性粒细胞多肽1,3真核表达载体的构建与鉴定 被引量:3
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作者 刘娟 孙永涛 +3 位作者 杜德伟 李光玉 刘秋平 翟嵩 《医学研究生学报》 CAS 2004年第10期868-871,共4页
目的 :扩增人中性粒细胞多肽 1,3(HNP1,3)基因片段 ,构建真核表达载体pcDNA3.1/V5 His TOPO/HNP1,3。 方法 :从健康人中性粒细胞中提取总RNA ,用RT PCR方法扩增出HNP1,3基因完整的cDNA片段 ,应用TA克隆插入pMD18 T载体 ,经酶切鉴定及... 目的 :扩增人中性粒细胞多肽 1,3(HNP1,3)基因片段 ,构建真核表达载体pcDNA3.1/V5 His TOPO/HNP1,3。 方法 :从健康人中性粒细胞中提取总RNA ,用RT PCR方法扩增出HNP1,3基因完整的cDNA片段 ,应用TA克隆插入pMD18 T载体 ,经酶切鉴定及序列分析确证后 ,将其亚克隆至真核表达载体 pcDNA3.1/V5 His TOPO中。 结果 :从人中性粒细胞中克隆出人HNP1,3基因 ,经测序分析与GenBank公布的人HNP1,3核苷酸序列同源性为 10 0 % ,成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1/V5 His TOPO/HNP1,3。 结论 :真核表达载体pcDNA3.1/V5 His TOPO/HNP1,3的成功构建 ,为后续重组基因的真核 /表达及其对HIV 展开更多
关键词 中性粒细胞多肽 反转录-聚合酶联反应 基因 克隆
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