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幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因napA克隆及序列分析
被引量：
2
1
作者
康巧珍
段广才
+1 位作者
范清堂
郗园林
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2004年第5期743-745,共3页
目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PC...
目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PCR产物和pNEB193空质粒 ,T4DNA酶连接酶切产物 ,重组质粒转化E .coliTB1工程菌 ,蓝白斑试验筛选阳性克隆 ;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物学软件进行序列分析。结果 :DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEB napA的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间切出一个 4 35bp的DNA片断 ,测序结果与J99napA同源性为 96 .5 % ,与H .pylori其他菌株的同源性为 92 %～ 97%。结论 :成功构建H .pylori中性白细胞激活蛋白基因的重组质粒pNEB napA ;序列分析表明HP napA是一类高度保守的原核型基因 ,可作为H .pylori疫苗候选基因。
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关键词
幽门螺杆菌
中性白细胞激活蛋白
基因
克隆
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职称材料
题名
幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因napA克隆及序列分析
被引量：
2
1
作者
康巧珍
段广才
范清堂
郗园林
机构
郑州大学生物工程系
河南省分子医学重点学科开放实验室
郑州大学公共卫生学院流行病学教研室
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2004年第5期743-745,共3页
基金
河南省医学科技创新人才工程项目基金资助 2 0 0 0 84
文摘
目的 :从幽门螺杆菌 (H .pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法 :提取H .pylori郑州分离株MEL HP2 7基因组DNA作模板 ;根据H .pyloriJ99全基因组序列设计napAPCR引物 ,高保真酶扩增napA片断 ;限制性内切酶切PCR产物和pNEB193空质粒 ,T4DNA酶连接酶切产物 ,重组质粒转化E .coliTB1工程菌 ,蓝白斑试验筛选阳性克隆 ;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物学软件进行序列分析。结果 :DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEB napA的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间切出一个 4 35bp的DNA片断 ,测序结果与J99napA同源性为 96 .5 % ,与H .pylori其他菌株的同源性为 92 %～ 97%。结论 :成功构建H .pylori中性白细胞激活蛋白基因的重组质粒pNEB napA ;序列分析表明HP napA是一类高度保守的原核型基因 ,可作为H .pylori疫苗候选基因。
关键词
幽门螺杆菌
中性白细胞激活蛋白
基因
克隆
Keywords
H.pylori
neutrophil-activating protein
gene
cloning
分类号
R183 [医药卫生—流行病学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因napA克隆及序列分析
康巧珍
段广才
范清堂
郗园林
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2004
2
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