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题名编码草菇中性内切葡聚糖酶Ⅰ的基因克隆与表达研究
被引量：2
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作者
王超凯
李剑芳
司晨妍
王瑾
孙军亭
邬敏辰
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机构
江南大学食品学院
江南大学生物工程学院
江南大学医药学院
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出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第7期7-11,16,共6页
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基金
国家自然科学基金(No．20776061)
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文摘
采用RT-PCR法,以草菇Volvariella.volvacea V23总RNA为模板,克隆了包括自身信号肽在内的中性内切葡聚糖酶Ⅰ基因(egⅠ)的cDNA序列。测序结果表明,它全长1167 bp,编码389个氨基酸,推测第1～23位氨基酸为信号肽,第24～389位氨基酸为成熟肽,属于糖苷水解酶第5家族。PCR扩增成熟肽编码基因并将其插入到分泌型表达载体pPIC9K中,重组载体经SalⅠ线性化后电转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,筛选得到了1株高产中性内切葡聚糖酶Ⅰ的工程菌株P.pastoris-EGⅠ1。SDS-PAGE检测表明,重组中性内切葡聚糖酶Ⅰ分子质量约为42 ku。在甲醇诱导96h时,酶活达到3 698 U/mL。
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关键词
中性内切葡聚糖酶ⅰ
草菇
毕赤酵母
分泌表达
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Keywords
neutral endoglucanase ⅰ , Volvariella volvacea, Pichia pastoris, secretive expression
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分类号
Q943.2
[生物学—植物学]
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