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中国野生毛葡萄白粉菌诱导响应VqAP基因的克隆及表达分析被引量：2: 1; 作者牛姣王西平《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第2期101-107,116,共8页; 【目的】克隆中国野生毛葡萄"商-24"天冬氨酸蛋白酶(AP)基因的cDNA序列,明确其在葡萄抗病防御机制中的作用。【方法】在前期获得的中国野生毛葡萄株系"商-24"AP基因(VqAP)EST序列的基础上,采用RT-PCR克隆AP基因的c... 展开更多; 关键词中国野生毛葡萄天冬氨酸蛋白酶(AP) VqAP基因表达分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

中国野生毛葡萄芪合成酶基因克隆及表达分析被引量：3: 2; 作者曹江玲贺明阳 +1 位作者朱自果王跃进《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期859-865,共7页; 采用RT-PCR技术克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因,命名为VqDSTS1,并进行序列及表达模式分析.结果表明:VqDSTS1基因cDNA编码区全长为1 179bp,GenBank登录号为JQ342086,编码392个氨基酸;氨基酸序列分析表明,VqDSTS1含有芪合成酶... 展开更多; 关键词中国野生毛葡萄芪合成酶白藜芦醇表达分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

中国野生毛葡萄VqTLP15基因的克隆与抗病性功能研究被引量：1: 3; 作者王雅闫筱筱 +2 位作者张修铭李智王西平《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期727-738,共12页; 该研究以抗病品种中国野生毛葡萄‘商-24’和感病品种欧洲葡萄‘红地球’为材料,利用RT-PCR方法克隆TLP15基因,分别命名为VqTLP15和VvTLP15(GSVIVT01018769001),对其进行生物信息学分析、亚细胞定位、转化拟南芥,并接种不同病原菌观察... 展开更多; 关键词 VqTLP15 白粉病灰霉病菌 PstDC3000 气孔中国野生毛葡萄; 在线阅读下载PDF 职称材料

野生毛葡萄芪合成酶基因双向启动子活性分析被引量：3: 4; 作者和静李瑞民王跃进《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期137-147,共11页; 【目的】研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’(Vitis quinquangularis‘Danfeng-2’)芪合成酶(stilbene synthase)基因双向启动子的启动活性与差异。【方法】通过染色体步移技术克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因双向启动子,并与Uid ... 展开更多; 关键词中国野生毛葡萄芪合成酶双向启动子 GUS; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国野生毛葡萄白粉菌诱导响应VqAP基因的克隆及表达分析被引量：2: 1; 作者牛姣王西平; 机构西北农林科技大学园艺学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第2期101-107,116,共8页; 基金国家自然科学基金项目(30871701 31071782); 文摘【目的】克隆中国野生毛葡萄"商-24"天冬氨酸蛋白酶(AP)基因的cDNA序列,明确其在葡萄抗病防御机制中的作用。【方法】在前期获得的中国野生毛葡萄株系"商-24"AP基因(VqAP)EST序列的基础上,采用RT-PCR克隆AP基因的cDNA序列,对其序列及编码产物进行生物信息学分析,并通过实时定量PCR和半定量PCR,分析VqAP基因在白粉菌诱导不同时间(0,6,12,24,48,72,96和120h),不同激素(100μmol/L水杨酸,50μmol/L乙烯和0.5g/L茉莉酸甲酯)刺激及不同组织(嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须)中的表达情况。【结果】序列分析表明,VqAP基因序列长度为1 377bp,具有开放阅读框,编码458个氨基酸残基,相对分子质量为50.48ku,等电点为8.73。保守结构域分析表明,VqAP编码产物含有2个保守的具有催化活性的天冬氨酸残基,位于Asp-Thr/Ser-Gly(DT/SG)结构域,该基因编码的氨基酸序列属于植物天冬氨酸蛋白酶A1家族,为非典型的天冬氨酸蛋白酶。荧光定量PCR结果表明,接种白粉菌后6h,VqAP基因表达量为0h的6倍多,之后迅速下调;不同激素处理后,该基因也均诱导表达,这可能是由于VqAP基因参与了植物早期的抗病反应,以及由不同激素诱导的发病相关基因的调节作用。半定量PCR结果表明,在葡萄嫩叶、嫩茎、花、果皮、卷须等不同组织中VqAP基因的表达量不同,这可能与它参与了植物不同组织中功能蛋白的合成与降解有关。【结论】VqAP的表达响应病原菌侵染并受生物胁迫相关激素的调控,可能在葡萄防御病原菌侵染的机制中发挥重要作用。; 关键词中国野生毛葡萄天冬氨酸蛋白酶(AP) VqAP基因表达分析; Keywords Chinese wild Vitis quinquangularis aspartic protease（AP） VqAP gene expression analysis; 分类号 S663.1 [农业科学—果树学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国野生毛葡萄芪合成酶基因克隆及表达分析被引量：3: 2; 作者曹江玲贺明阳朱自果王跃进; 机构西北农林科技大学园艺学院; 出处《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期859-865,共7页; 基金国家自然科学基金(30971972); 文摘采用RT-PCR技术克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因,命名为VqDSTS1,并进行序列及表达模式分析.结果表明:VqDSTS1基因cDNA编码区全长为1 179bp,GenBank登录号为JQ342086,编码392个氨基酸;氨基酸序列分析表明,VqDSTS1含有芪合成酶基因家簇的特征识别序列‘IPNSAGAIAGN’和‘GVLFGFG-PGLT’;序列比对显示,VqDSTS1与其他葡萄种质的芪合成酶氨基酸序列一致性在95.2%～98.7%之间;半定量RT-PCR分析表明,VqDSTS1受白粉病诱导表达,呈双峰模式.为进一步研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因家族的表达及功能分析提供了基础.; 关键词中国野生毛葡萄芪合成酶白藜芦醇表达分析; Keywords Chinese wild Vitis quinquangularis stilbene synthase resveratrol expression analysis; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中国野生毛葡萄VqTLP15基因的克隆与抗病性功能研究被引量：1: 3; 作者王雅闫筱筱张修铭李智王西平; 机构西北农林科技大学园艺学院旱区作物逆境生物学国家重点实验室农业部西北地区园艺作物生物学与种质创新重点实验室; 出处《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期727-738,共12页; 基金国家自然科学基金(31272136) 葡萄种质资源与育种创新团队(2013KCT-25)。; 文摘该研究以抗病品种中国野生毛葡萄‘商-24’和感病品种欧洲葡萄‘红地球’为材料,利用RT-PCR方法克隆TLP15基因,分别命名为VqTLP15和VvTLP15(GSVIVT01018769001),对其进行生物信息学分析、亚细胞定位、转化拟南芥,并接种不同病原菌观察分析转基因株系的抗性,采用qRT-PCR检测SA和JA/Eth信号途径以及调控气孔运动的相关基因表达。结果显示:(1)成功克隆获得VqTLP15基因的开放阅读框(ORF);氨基酸序列比对显示,VqTLP15基因与葡萄基因组网站欧洲葡萄‘黑比诺’VvTLP15和‘红地球’克隆的VvTLP15基因的同源性分别为98.99%和99.66%。(2)亚细胞定位表明,VqTLP15定位于细胞质。(3)成功获得VqTLP15转基因拟南芥株系(L1、L2、L3)。(4)接种观察发现:白粉菌处理7 d后转基因株系对白粉菌的抗性较野生型(Col-0)提高,且其叶片的白粉菌孢子浓度显著低于Col-0;灰霉菌诱导的叶片坏死性损伤在转基因株系(L1、L2和L3病斑面积>40%的比例分别为71%、62%和67%)中显著大于Col-0(43%);接种PstDC3000后转基因株系叶片的病害表型没有Col-0明显,叶片孔径减小程度大于Col-0,且细菌浓度低于Col-0。(5)组织化学染色分析表明:白粉菌处理后转基因株系叶片胼胝质沉积、细胞死亡率和O2^-·水平都显著大于Col-0;灰霉菌处理后转基因株系的细胞死亡率、H2O2和O2^-·水平均高于Col-0;PstDC3000处理后细胞死亡率和O2^-·积累水平都高于Col-0。(6)qRT-PCR检测显示:接种白粉菌后,转基因株系中PR1和ICS1的表达水平均升高,PR1表达在接种72 h时达到峰值,而ICS1在接种120 h时达到峰值,LOX3的表达水平逐渐降低,并于接种120 h时降至最低水平,但仍高于Col-0;接种灰霉菌后,转基因株系中PR1、NPR1和PDF1.2基因的表达均上调,并在接种48 h时达到峰值,LOX3基因的表达水平下降,但仍高于Col-0;接种PstDC3000后,转基因株系中PR1、PDF1.2和NHL10的表达均高于Col-0,但WRKY53的表达低于Col-0,L1中COI1、FRK1、ATPPC2、FLS2、OST1的表达水平高于Col-0;接种flg22或LPS后,L1中COI1基因的表达低于Col-0,但ATPPC2、FLS2、OST1基因的表达水平高于Col-0。研究表明,过量表达VqTLP15基因降低了对白粉菌和PstDC3000的敏感性,增加了对灰霉菌的敏感性。VqTLP15基因可能通过介导水杨酸(SA)和茉莉酸/乙烯(JA/Eth)信号转导途径以及气孔免疫反应来参与植物的抗病防御反应,为葡萄抗病分子育种提供了一个可能的候选基因。; 关键词 VqTLP15 白粉病灰霉病菌 PstDC3000 气孔中国野生毛葡萄; Keywords VqTLP15 powdery mildew Botrytis cinerea PstDC3000 stomatal Chinese wild Vitis quinquangularis; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名野生毛葡萄芪合成酶基因双向启动子活性分析被引量：3: 4; 作者和静李瑞民王跃进; 机构西北农林科技大学园艺学院旱区作物逆境生物学国家重点试验室农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点试验室; 出处《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期137-147,共11页; 基金国家自然科学基金(No.31372039); 文摘【目的】研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’(Vitis quinquangularis‘Danfeng-2’)芪合成酶(stilbene synthase)基因双向启动子的启动活性与差异。【方法】通过染色体步移技术克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因双向启动子,并与Uid A基因(β-葡萄糖苷酶基因,GUS)融合,利用真空渗透法在葡萄叶片中瞬时表达,组织化学染色和GUS蛋白定量法分别检测白粉菌接种、温度处理、茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸处理对双向启动子活性的影响。以毛葡萄‘丹凤-2’和欧洲葡萄‘赤霞珠’不同成熟时期果实的c DNA为模板,通过荧光实时定量PCR的方法分析Vq STS12/Vv STS31和Vq STS33/Vv STS32的表达情况。【结果】Pvq DSTS12受到白粉菌、茉莉酸甲酯、高温和低温的诱导后,启动活性增强,对水杨酸和脱落酸处理不敏感;Pvq DSTS33在茉莉酸甲酯处理下启动活性增强,在高温和低温的处理下启动活性降低,对水杨酸、脱落酸和白粉病处理不敏感。荧光实时定量PCR结果显示,在果实发育的6个时期中,‘丹凤-2’Vq STS12和Vq STS33的表达量均高于‘赤霞珠’Vv STS31和Vv STS32。4个基因的基本表达趋势为:浆果转色期之前持续增长,转色后期下降,浆果半熟期达到最高峰,浆果成熟期表达降低。其中毛葡萄‘丹凤-2’Vq STS12的表达量在转色后期并未降低且增加到上一时期的2.3倍;欧洲葡萄Vv STS32基因在成熟期表达量升高为前一时期的1.42倍。【结论】双向启动子活性的研究为利用植物天然双向启动子提供依据。; 关键词中国野生毛葡萄芪合成酶双向启动子 GUS; Keywords Chinese wild V. quinquangularis Stilbene synthase Bidirectional promoter GUS; 分类号 S663.1 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	中国野生毛葡萄白粉菌诱导响应VqAP基因的克隆及表达分析	牛姣王西平	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	中国野生毛葡萄芪合成酶基因克隆及表达分析	曹江玲贺明阳朱自果王跃进	《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	中国野生毛葡萄VqTLP15基因的克隆与抗病性功能研究	王雅闫筱筱张修铭李智王西平	《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	野生毛葡萄芪合成酶基因双向启动子活性分析	和静李瑞民王跃进	《果树学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料