产气荚膜梭菌ε毒素突变基因的表达及其抗体中和效价测定 被引量：4

1

作者 王超 唐丽杰 +4 位作者 葛俊伟 乔薪媛 崔文 姜艳萍 李一经 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期500-503,共4页

为研究突变产气荚膜梭菌ε毒素(mε)的抗体是否具有中和作用,本研究以毒素D型产气荚膜梭菌全基因组D N A为模板,应用重叠延伸PCR技术(SO E-PCR)将ε毒素第106位的组氨酸残基定点突变为脯氨酸残基,扩增出mε基因,使其丧失生物学毒性而保... 为研究突变产气荚膜梭菌ε毒素(mε)的抗体是否具有中和作用,本研究以毒素D型产气荚膜梭菌全基因组D N A为模板,应用重叠延伸PCR技术(SO E-PCR)将ε毒素第106位的组氨酸残基定点突变为脯氨酸残基,扩增出mε基因,使其丧失生物学毒性而保持免疫原性。以pET-28a为表达载体,构建重组表达质粒pET-mε,并转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达重组mε蛋白。SDS-PAGE及w estern blot分析显示,重组蛋白约39 ku,主要以包涵体形式存在。将重组蛋白免疫家兔,所制备的产气荚膜梭菌mε毒素蛋白的抗血清经10倍稀释后,与一个绝对致死量的产气荚膜梭菌培养上清等体积混合时,能够有效中和ε毒素。这些结果表明,重组突变的ε毒素具有较强的抗原性,为产气荚膜梭菌候选亚单位疫苗的研究及其血清学检测方法的建立奠定了基础。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌ε毒素 突变基因 大肠杆菌表达 抗体中和效价

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Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护相关性研究

2

作者 李斌 路晓 +4 位作者 刘美丽 赵鲁宁 张帆 于可响 韩易航 《家禽科学》 2023年第1期3-7,共5页

为了研究Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护的相关性,取3批实验室试制抗体,分别通过预防试验和紧急预防试验模型进行抗体中和效价与靶动物攻毒保护力相关性试验。预防试验:21日龄SPF鸡经颈背部皮下注射中和效价分别为1:64、1:... 为了研究Ⅰ群4型禽腺病毒蛋黄抗体中和效价与攻毒保护的相关性,取3批实验室试制抗体,分别通过预防试验和紧急预防试验模型进行抗体中和效价与靶动物攻毒保护力相关性试验。预防试验:21日龄SPF鸡经颈背部皮下注射中和效价分别为1:64、1:128、1:256的蛋黄抗体,每只0.5 mL,168 h后接种Ⅰ群4型禽腺病毒检验用强毒,观察10日。紧急预防试验:先给21日龄SPF鸡接种Ⅰ群4型禽腺病毒检验用强毒,36 h后经颈背部皮下注射不同中和效价的抗体,每只0.5 mL,观察10日。结果表明:当中和效价为1:128时,攻毒保护率均达到80%以上;当中和效价为1:256时,攻毒保护率均达到90%以上。故本研究结果表明,抗体效价不低于1:128时可有效抵御Ⅰ群4型禽腺病毒的攻击。 展开更多

关键词 Ⅰ群4型禽腺病毒 蛋黄抗体 中和效价 攻毒保护 相关性

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猪伪狂犬病毒gB、gC和gD蛋白多抗制备及交叉中和抗体效价测定 被引量：8

3

作者 刘飞 童武 +3 位作者 梁超 杨莘 郑浩 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期73-76,共4页

为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价... 为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价的i／n,4定。结果显示，JS．2012和Bartha．K61株的gC蛋白和gD蛋白多抗对PRVJS．2012变异株、SC经典强毒株和Bartha．K61弱毒疫苗株的交叉中和效价均无显著差异；而两个病毒株的2B蛋白多抗对JS．2012和sc株的中和效价较低，分别为1：29．0～56．7和1：56．2～137．0，对Bartha—K61株以及其他毒力基因缺失弱毒疫苗株的中和效价较高，分别为1：75．0--490．0和1：198．6～986．9，差异显著，推测该结果可能与PRV毒力基因缺失有关。本研究为进一步鉴定PRV流行株的抗原变异奠定基础。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 多克隆抗体 中和抗体效价

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单稀释法间接ELISA和终点法中和试验检测犊牛轮状病毒疫苗抗体效价比较 被引量：1

4

作者 简子健 曹竹亭 +4 位作者 马素贞 高文斌 张晓红 王晓萍 袁江玲 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第4期733-737,共5页

用NCDV标准毒株接种恒河猴肾细胞(MA-104),制备病毒抗原液,制成油乳佐剂灭活疫苗进行3月龄以内的犊牛田间免疫试验。结果表明,免疫组的OD492nm平均值为0.6,免疫40 d后达到峰值1.5,免疫后609、0 d仍维持较高的抗体效价,OD492nm平均值分别... 用NCDV标准毒株接种恒河猴肾细胞(MA-104),制备病毒抗原液,制成油乳佐剂灭活疫苗进行3月龄以内的犊牛田间免疫试验。结果表明,免疫组的OD492nm平均值为0.6,免疫40 d后达到峰值1.5,免疫后609、0 d仍维持较高的抗体效价,OD492nm平均值分别是1.4和0.9。中和抗体效价在二次免疫时、二次免疫40、60、90 d平均值分别为56.668、413.025、314.9、104.64。实验评价OD492nm值和血清中和抗体效价关系,相关性很大,并证明这种疫苗对预防轮状病毒引起犊牛腹泻是安全有效的。 展开更多

关键词 轮状病毒 间接ELISA OD值 中和抗体效价

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鸡减蛋综合征病毒中和性单克隆抗体的制备、鉴定及在双抗体夹心ELISA中的应用 被引量：1

5

作者 魏蔷 李青梅 +3 位作者 金前跃 宋亚鹏 白怡霖 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2024年第2期128-135,共8页

为了制备针对鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的中和性单克隆抗体,首先纯化得到重组EDSV纤维蛋白,经血凝试验(HA)鉴定纤维蛋白的血凝活性,HA效价为1∶2~7。之后将纤维蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,小鼠血清的间接酶联免疫吸附试验(iE... 为了制备针对鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的中和性单克隆抗体,首先纯化得到重组EDSV纤维蛋白,经血凝试验(HA)鉴定纤维蛋白的血凝活性,HA效价为1∶2~7。之后将纤维蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,小鼠血清的间接酶联免疫吸附试验(iELISA)效价最高达到1∶409 600,间接免疫荧光试验(IFA)效价最高达到1∶12 800。取效价最高免疫小鼠脾细胞进行细胞融合制备杂交瘤细胞,结合iELISA和IFA检测,经过多轮亚克隆,最终成功获得了2株稳定分泌中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株9G12和10E11。iELISA结果显示,单克隆抗体9G12和10E11的腹水效价分别为1∶128 000和1∶1 020 000;IFA效价分别为1∶2 000和1∶8 000。Western blot检测结果显示,单克隆抗体9G12和10E11均不能识别变性的EDSV纤维蛋白,表明二者识别纤维蛋白的构象型表位。病毒中和试验结果表明,单克隆抗体9G12和10E11均具有中和活性,中和效价分别为1∶2~7和1∶2~4。亚型鉴定表明,这2种单克隆抗体的轻链均为Kappa型,重链均为IgG1亚型。将基于单克隆抗体9G12和10E11建立的双抗体夹心ELISA方法应用于临床检测EDSV抗原,与荧光定量PCR检测结果的符合率为91.7%。综上,成功筛选出9G12和10E11杂交瘤细胞株,二者分泌抗EDSV特异性抗体,且这2种抗体具有中和EDSV感染活性,可应用于EDSV的临床检测。 展开更多

关键词 减蛋综合征病毒 纤维蛋白 中和性单克隆抗体 抗体中和效价 双抗体夹心ELISA

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几种植物提取物对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的防治作用评价

6

作者 施婕妤 李凯媛 +4 位作者 黄俊杰 郑和 张文海 伊小宾 李金贵 《家禽科学》 2025年第6期20-28,I0006,I0007,共11页

为探究没食子酸、丝兰皂苷、桉叶油、姜黄素及其联合对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染鸡的防治作用。将110只15日龄黄羽肉鸡平衡体重后分成11组(10只/组),即空白对照组、模型组、阳性对照组(地克珠利)、没食子酸组、丝兰皂苷组、没食子... 为探究没食子酸、丝兰皂苷、桉叶油、姜黄素及其联合对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染鸡的防治作用。将110只15日龄黄羽肉鸡平衡体重后分成11组(10只/组),即空白对照组、模型组、阳性对照组(地克珠利)、没食子酸组、丝兰皂苷组、没食子酸+丝兰皂苷组、桉叶油组、没食子酸+桉叶油组、姜黄素组、没食子酸+姜黄素组、姜黄素饮水组。各植物提取物组预混剂给药量均为250mg/kg(预混剂/饲料),地克珠利和姜黄素饮水组饮水给药,其它各组药物均拌料给药。除空白对照组外,其余各组鸡均于15日龄经口感染8×10^(4)个E.tenella孢子化卵囊建立球虫感染模型,同时开始连续给药7日。试验期间观察各组鸡只的临床表现,于感染后192h称重后剖杀各组鸡,采集盲肠、肝脏、脾脏,统计相对增重率、存活率、病变值、卵囊值、脏器指数,并计算各药物组的抗球虫指数(ACI)。此外,将植物提取物预混剂与新收取卵囊共孵育,检测卵囊的孢子化率。试验结果表明,与模型组相比,没食子酸组、桉叶油组、姜黄素组的ACI值明显提高,肝脏、脾脏指数降低,对卵囊的孢子生殖有一定的抑制作用;其中以桉叶油组效果最好,ACI达到160左右,且在24 h内对卵囊的孢子生殖有良好的抑制作用。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 特异性阳性血清 检验 中和效价 制备方法

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国家参考品鸡传染性支气管炎阳性血清(检验用)制备与检定

7

作者 赵海明 马通通 +2 位作者 张娜 崔松奇 黄丽英 《家禽科学》 2025年第6期14-19,共6页

本研究旨在制备抗鸡传染性支气管炎病毒的特异性阳性血清(以下简称IB阳性血清),用于鸡传染性支气管炎病毒活疫苗、毒种的鉴别检验和外源病毒检测,以及鸡新城疫、支气管炎二联活疫苗的效力检验。对4周龄SPF鸡(公鸡)进行3次免疫,首次用H12... 本研究旨在制备抗鸡传染性支气管炎病毒的特异性阳性血清(以下简称IB阳性血清),用于鸡传染性支气管炎病毒活疫苗、毒种的鉴别检验和外源病毒检测,以及鸡新城疫、支气管炎二联活疫苗的效力检验。对4周龄SPF鸡(公鸡)进行3次免疫,首次用H120株种毒滴鼻免疫,21d用含M41毒株的新支系列灭活苗进行二免,再过21d用相同灭活疫苗进行三免。三免后28d,采集所有鸡的心脏血,经静置自然分离、离心、过滤处理,收获的血清混合分装后冻干。对冻干血清进行无菌、支原体、外源病毒、中和效价等项目检验,结果显示冻干血清中和抗体效价为1:1 212(标准≥1:200);本次制备的IB阳性血清特异性高,细菌、支原体和外源病毒三项检验均符合《中华人民共和国兽药典》(2020年版三部)相关标准。本研究通过对免疫前隔离器消毒验证、环境消毒验证、动物筛选、人员进出控制、动物饲养密度调控等措施,确保了试验顺利完成,同时建立了血清制备和检定方法,为后续相关毒种的新兽药研发或产品检验等血清制备积累了方法。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎病毒 特异性阳性血清 检验 中和效价 制备方法

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抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：5

8

作者 刘运超 陈玉梅 +4 位作者 冯丽丽 汪磊 王聚财 陆东峰 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2019年第12期114-120,共7页

为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获... 为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获得5D1、8H7、9A1和13B2共4株能够稳定分泌抗CSFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。4株单克隆抗体轻链均属于κ型,其中5D1、8H7、13B2为IgG1亚型,9A1为IgG2c亚型。间接ELISA检测结果显示,4株单克隆抗体的腹水效价在2.56×10^5~1.02×10^6;IPMA效价分别为6.40×10^4、1.28×10^5、2.56×10^5、1.28×10^5;SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,4株单克隆抗体均能与经原核表达系统及杆状病毒表达系统获得的CSFV E2蛋白发生特异性反应;IPMA检测结果显示,4株单克隆抗体均能与CSFV发生特异性反应,而与牛流行性腹泻病毒(BVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒(PCV2)均无交叉反应。病毒中和试验证实,单克隆抗体13B2具有中和活性,其中和效价为1.28×10^4。综上,成功筛选出4株能够分泌抗CSFV特异性抗体的杂交瘤细胞株,其中单克隆抗体13B2具有中和CSFV感染活性。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 中和性单克隆抗体 抗体中和效价 免疫过氧化物酶单层细胞试验

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广东省部分城市犬和猫狂犬病病毒血清中和抗体的调查分析 被引量：2

9

作者 高咏露 张洪韧 +4 位作者 杜艺彤 杨国强 罗霖霜 齐德重 吕宗吉 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期114-118,共5页

通过对广东省部分城市宠物犬和猫狂犬病病毒中和抗体效价现状进行调查分析,探讨其风险点及改善点,为狂犬病的防控及公共卫生安全提供参考。调查于2020-2021年期间在广东省佛山市、深圳市、东莞市、云浮市、江门市等地城区采集宠物犬、... 通过对广东省部分城市宠物犬和猫狂犬病病毒中和抗体效价现状进行调查分析,探讨其风险点及改善点,为狂犬病的防控及公共卫生安全提供参考。调查于2020-2021年期间在广东省佛山市、深圳市、东莞市、云浮市、江门市等地城区采集宠物犬、猫血清735份,并对相关个体信息进行收集,采用荧光抗体病毒中和试验(FAVN)对所有血清样本进行了狂犬病中和抗体效价的测定和分析。结果显示,所有样本狂犬病抗体保护水平阳性率为46.9%,低于世界卫生组织推荐的70%保护水平阳性率;深圳市血清样本抗体保护水平阳性率为55.4%,为采样城市中保护水平阳性率最高;家养猫的保护水平阳性率比家养犬的阳性率低15.5%;犬养殖场样本阳性率比家庭饲养犬样本阳性率低20.8%;流浪动物的保护水平阳性率仅有8.1%。说明广东省部分城市犬、猫狂犬病免疫阳性率偏低,尚无法形成抵御狂犬病侵袭的有效屏障,需在流浪动物管理、猫饲养管理、犬猫饲养场管理等几个方面加强狂犬病的预防管制措施,加强政策引导工作,以提升狂犬病的综合防控能力。 展开更多

关键词 犬猫 狂犬病毒 中和抗体效价 免疫效果

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DHAV-3结构蛋白(VP0、VP3、VP1)免疫原性及免疫保护性比较

10

作者 张亚如 门嘉琪 +7 位作者 于李丹依 常蕊 李洪涛 张文龙 高明春 曹永生 马波 王君伟 《东北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期181-189,共9页

为比较DHAV-3结构蛋白免疫保护性差异,利用原核表达系统表达重组蛋白,制备鸭抗DHAV-3-VP0、-VP3、-VP1多克隆抗体,并测定其中和效价;以制备的r-DHAV-3结构蛋白为免疫原免疫SPF鸭后攻毒,通过保护率、组织病理学分析及病毒载量,评价DHAV-3... 为比较DHAV-3结构蛋白免疫保护性差异,利用原核表达系统表达重组蛋白,制备鸭抗DHAV-3-VP0、-VP3、-VP1多克隆抗体,并测定其中和效价;以制备的r-DHAV-3结构蛋白为免疫原免疫SPF鸭后攻毒,通过保护率、组织病理学分析及病毒载量,评价DHAV-3的3种结构蛋白免疫原性及免疫保护性差异。结果表明:鸭抗DHAV-3-VP0、-VP3、-VP1多克隆抗体ELISA效价分别为1:102 400、1:51 200、1:204 800;中和效价以鸭抗DHAV-3-VP1多克隆抗体最高为1:178,VP3次之为1:149,VP0中和效价最低为1:53;rDHAV-3-optiVP1免疫组保护率为60%;r-DHAV-3-VP0、r-DHAV-3-VP3免疫组保护率为40%。所有免疫组肝脏组织病理损伤程度及肝脏、脾脏病毒载量均显著低于对照组。DHAV-3的3种结构蛋白免疫保护性以VP1最强,VP3、VP0次之。 展开更多

关键词 DHAV-3 结构蛋白 多克隆抗体 中和效价 免疫保护

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口服卵黄抗体对杂交鳢弹状病毒(HSHRV)感染的免疫保护效果

11

作者 刘田 李硕 +4 位作者 汪铭书 赵立宁 黄锦炉 吴艺琳 贾爱卿 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期10-16,共7页

为了研究抗杂交鳢弹状病毒(hybrid snakehead rhabdovirus,HSHRV)卵黄抗体的制备方法并评价其免疫保护效果,将杂交鳢弹状病毒经白油乳化制备疫苗,免疫蛋鸡收集高免蛋,采用喷雾干燥方法制备成卵黄抗体粉,以细胞中和试验评估卵黄抗体中和... 为了研究抗杂交鳢弹状病毒(hybrid snakehead rhabdovirus,HSHRV)卵黄抗体的制备方法并评价其免疫保护效果,将杂交鳢弹状病毒经白油乳化制备疫苗,免疫蛋鸡收集高免蛋,采用喷雾干燥方法制备成卵黄抗体粉,以细胞中和试验评估卵黄抗体中和病毒的效果。按照每kg鱼投喂卵黄抗体0.25 g、0.40 g、0.60 g的比例制备低、中、高3种添加剂量的饲料,持续投喂杂交鳢10 d,在口服免疫第4天时以104 TCID50/0.1mL的杂交鳢弹状病毒江门I株(HSHRV-JMI)病毒经腹腔注射对杂交鳢进行攻毒,并记录6 d内各组死亡情况。结果显示,四次免疫后卵黄抗体中和效价达到高峰,为1∶46.8,抗体维持时间为60d。高中低剂量组的存活率分别为64.4%、70.6%、78.5%;相对保护率分别为61.1%、67.9%、76.5%,三者均显著高于非特异性卵黄抗体对照组(P<0.001)。表明杂交鳢弹状病毒能有效刺激卵黄抗体产生,高效价卵黄抗体经口服免疫后可以有效抑制杂交鳢弹状病毒的侵染,显著提高杂交鳢存活率和相对保护率。 展开更多

关键词 杂交鳢弹状病毒(HSHRV) 卵黄抗体 口服免疫 中和效价 免疫保护效果

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Beagle犬免疫血清犬瘟热抗体检测 被引量：3

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作者 李秋波 康纪平 +1 位作者 冯晓科 杨杰 《四川动物》 CSCD 北大核心 2010年第3期475-477,共3页

采用琼脂扩散法测定血清抗体效价,同时采用微量细胞中和实验测定中和效价,检测60份Beagle犬免疫血清犬瘟热(CD)抗体。结果表明25日龄仔犬血清母源抗体维持在较高的水平,以后逐渐下降,至35日龄(首免日)血清母源抗体水平下降1～2个滴度,... 采用琼脂扩散法测定血清抗体效价,同时采用微量细胞中和实验测定中和效价,检测60份Beagle犬免疫血清犬瘟热(CD)抗体。结果表明25日龄仔犬血清母源抗体维持在较高的水平,以后逐渐下降,至35日龄(首免日)血清母源抗体水平下降1～2个滴度,首免后1个月、3个月、6个月免疫抗体水平逐渐上升。根据抗体水平应选择35日龄首免。本试验为Beagle犬瘟热病预防选择疫苗和制定合适的免疫程序提供参考,实验设定的两种免疫程序在临床上都可以使用。 展开更多

关键词 BEAGLE犬 犬瘟热 琼脂扩散法 中和效价

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复合HA-2氨基多肽可增强chitosan-DNA疫苗的免疫保护效果

13

作者 徐薇 沈燕 +2 位作者 陈瑞珍 王缨 熊思东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期93-98,共6页

目的 :以具有促黏膜黏附吸收功能的脱乙酰多糖chitosan包裹质粒DNApcDNA3-VP1构建的新型chitosan-DNA疫苗 ,已证实可诱生CVB3特异性黏膜IgA和抗CVB3保护力 ,在此基础上 ,引入具有内体破坏功能的流感病毒HA 2氨基多肽(融内体多肽 ) ,构建... 目的 :以具有促黏膜黏附吸收功能的脱乙酰多糖chitosan包裹质粒DNApcDNA3-VP1构建的新型chitosan-DNA疫苗 ,已证实可诱生CVB3特异性黏膜IgA和抗CVB3保护力 ,在此基础上 ,引入具有内体破坏功能的流感病毒HA 2氨基多肽(融内体多肽 ) ,构建chitosan-DNA HApLys16疫苗 ,以期增强chitosan-DNA疫苗的免疫保护效果。方法 :将融内体多肽与多聚赖氨酸顺序合成为“载体多肽”HA pLys16 ,将其与DNA、chitosan依次复合形成chitosan DNA HApLys16疫苗。以 5 0 μgDNA剂量的chitosan-DNA疫苗滴鼻免疫BALB c小鼠 4次 ,检测CVB3特异性体液和细胞免疫应答 ;隔 4周以致死性 5×LD50 CVB3攻击小鼠 ,观察攻击后存活情况。以免疫组化法检测了小鼠心肌内CVB3载量 ;并检测了黏膜IgA中和效价的改变。结果 :chitosan DNA-HApLys16疫苗滴鼻免疫不仅诱生了高水平的IgG ,而且诱生了高水平的黏膜IgA抗体。其诱生的IgG水平以及特异性CTL杀伤活性与chitosan DNA疫苗无统计差别 ,而其IgA水平显著高于chitosan DNA疫苗。CVB3攻击后 ,chitosan DNA HAp Lys16可保护 5 0 .0 %小鼠长期存活 ,高于chitosan DNA组 4 2. 9%的免疫保护率。病理学研究显示 :chitosan-DNA HApLys16免疫小鼠心肌炎症状况好于chitosan-DNA免疫小鼠。 展开更多

关键词 CVB3 clritosan-DNA HApLysl6 滴鼻 免疫保护 中和效价

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重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫效力评价 被引量：3

14

作者 赵晓军 王美玲 +4 位作者 段跃强 谭美玲 石悦萌 陈千林 郭庆勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期429-433,共5页

为探究重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫保护效力,本研究构建了含产气荚膜梭菌α毒素基因的重组质粒pVL1393-CPA,并通过BD BaculoGoldTM转染试剂盒转染Sf9细胞后,经噬斑纯化获得单克隆重组病毒,将其感染High 5细胞进行表达,... 为探究重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫保护效力,本研究构建了含产气荚膜梭菌α毒素基因的重组质粒pVL1393-CPA,并通过BD BaculoGoldTM转染试剂盒转染Sf9细胞后,经噬斑纯化获得单克隆重组病毒,将其感染High 5细胞进行表达,表达的重组蛋白经SDS-PAGE和western blot检测,结果显示均获得了45 ku的目的蛋白,即为重组α毒素。将重组α毒素用0.1%甲醛溶液灭活脱毒后与ISA 206 VG佐剂乳化制备亚单位疫苗(抗原含量为20μg/mL),以40μg/只肌肉注射体质量1.5 kg~2.0 kg的家兔,同时设PBS对照组,注射后连续观察7 d,结果显示实验兔临床观察无异常,该疫苗对家兔的安全性良好。随后以20μg/只肌肉注射家兔,免疫21 d后以相同剂量加强免疫一次,同时设佐剂对照组和α毒素对照组,首免21 d、二免14 d时采血分离血清,采用ELISA方法检测免疫兔血清IgG抗体效价,同时进行二免血清小鼠体内毒素中和试验以及家兔攻毒免疫保护试验,以评价该疫苗对家兔的免疫保护效力。结果显示,疫苗免疫组家兔血清IgG抗体效价比佐剂对照组和毒素对照组均极显著增高(P<0.001),二免血清对A型产气荚膜梭菌毒素小鼠体内的中和效价为32,疫苗免疫组家兔攻毒后均健活,攻毒保护率达100%,佐剂对照组和毒素对照组家兔攻毒后死亡率则为100%。上述结果表明制备的重组产气荚膜梭菌α毒素疫苗对家兔具有良好的安全性和免疫保护效力,本研究为开发其他各型梭菌亚单位疫苗提供了重要借鉴。 展开更多

关键词 产气荚膜梭菌 Α毒素 疫苗 中和效价 攻毒保护

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一种鸡抗猪丁型冠状病毒阳性血清的制备方法 被引量：2

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作者 李晶梅 张飞雁 +10 位作者 王焕君 柏娇 于义娟 王碧群 朱薇 郑良益 李婷婷 冯钊 石宝兰 漆世华 谢红玲 《中国兽药杂志》 2022年第9期22-28,共7页

为研究用鸡制备猪丁型冠状病毒(PDCoV)阳性血清,将PDCoV用二乙烯亚胺(BEI)灭活,加矿物油佐剂乳化制成疫苗,多次免疫SPF鸡,采集血清,检测血清中和效价并用间接免疫荧光法(IFA)检测PDCoV。结果显示,血清中和效价随免疫次数增加逐渐增高,4... 为研究用鸡制备猪丁型冠状病毒(PDCoV)阳性血清,将PDCoV用二乙烯亚胺(BEI)灭活,加矿物油佐剂乳化制成疫苗,多次免疫SPF鸡,采集血清,检测血清中和效价并用间接免疫荧光法(IFA)检测PDCoV。结果显示,血清中和效价随免疫次数增加逐渐增高,4免后14 d的中和效价平均值为1314;制备的阳性血清可用于IFA检测PDCoV,其不与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)反应,特异性良好。本研究用鸡成功制备PDCoV阳性血清,为利用鸡制备其他猪病阳性血清奠定基础。 展开更多

关键词 猪丁型冠状病毒 阳性血清 中和效价 IFA

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鸭坦布苏病毒高免卵黄抗体的研制 被引量：3

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作者 邹晓娟 《山东畜牧兽医》 2013年第11期15-16,共2页

将鸭坦布苏病毒浓缩后制备灭活苗,免疫试验鸡制备卵黄抗体,鸡胚中和试验表明,第3次免疫后15d,卵黄抗体中和效价为1:103.5,雏鸭攻毒保护试验结果表明,预防组和治疗组的保护率分别达到90%和78%,说明本试验制备的卵黄抗体对鸭坦布苏病毒病... 将鸭坦布苏病毒浓缩后制备灭活苗,免疫试验鸡制备卵黄抗体,鸡胚中和试验表明,第3次免疫后15d,卵黄抗体中和效价为1:103.5,雏鸭攻毒保护试验结果表明,预防组和治疗组的保护率分别达到90%和78%,说明本试验制备的卵黄抗体对鸭坦布苏病毒病有着显著的预防和治疗作用。 展开更多

关键词 鸭坦布苏病毒 卵黄抗体 中和效价 预防与治疗

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一种猪流行性腹泻病毒阳性血清的制备方法

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作者 姚尧 《福建畜牧兽医》 2020年第3期29-31,共3页

本文所阐述的方法用猪流行性腹泻病毒活抗原和灭活抗原及其佐剂,分别免疫实验动物-大兔来制备猪流行性腹泻病毒高免血清。将多次免疫该病毒后无菌收获的兔血清用细胞中和抗体效价检测法测定,当血清中和抗体效价在1:256以上时(新兽药的... 本文所阐述的方法用猪流行性腹泻病毒活抗原和灭活抗原及其佐剂,分别免疫实验动物-大兔来制备猪流行性腹泻病毒高免血清。将多次免疫该病毒后无菌收获的兔血清用细胞中和抗体效价检测法测定,当血清中和抗体效价在1:256以上时(新兽药的规定标准为1:64),即对收获的该血清全部进行物理性状检验、无菌检验、支原体检验、特异性检验、外源病毒及其抗体的检测,检测结果均符合要求者才是合格的高免阳性血清。该血清可最终用于该类疫苗的鉴别检验、效力检验和该类疾病的诊疗过程。本方法大大降低了因用本体动物-猪来制备阳性血清而引发的同源动物其他外源病毒污染的风险。该高免阳性血清的成功制备,对猪流行性腹泻疫苗的研究提供了基础保障。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻 阳性血清 兔 中和效价测定

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马病毒性动脉炎的研究进展 被引量：1

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作者 黄从平 梁成珠 朱来华 《河南畜牧兽医（综合版）》 1999年第5期25-27,共3页

关键词 马病毒性动脉炎病毒 病毒分离 临床症状 血凝试验 细胞病变效应(CPE) 中和抗体效价 动植物检疫 精液 流产胎儿 急性传染病

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犊牛病毒性腹泻的预防

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《中国牛业科学》 2015年第1期16-16,共1页

预防的关键在于加强饲养管理。及时的饲喂初乳,这对新生犊牛是极其重要的。因为抵抗冠状病毒的保护机制,位于犊牛的肠道中、血液中。免疫球蛋白不能给犊牛提供保护力。试验证明,出生正常的犊牛,饲喂初乳后,冠状病毒血清中和抗体效价的... 预防的关键在于加强饲养管理。及时的饲喂初乳,这对新生犊牛是极其重要的。因为抵抗冠状病毒的保护机制,位于犊牛的肠道中、血液中。免疫球蛋白不能给犊牛提供保护力。试验证明,出生正常的犊牛,饲喂初乳后,冠状病毒血清中和抗体效价的范围为324-537,当它们接种该病毒后4-5日龄时,腹泻发生,但精神体况良好,小肠前部绒毛很少或完全未见萎缩,小肠后部则有严重的绒毛萎缩,在12日龄时才被接种的犊牛，产生了腹泻，小肠全部出现绒毛萎缩。 展开更多

关键词 犊牛病毒性腹泻 中和抗体效价 精神体 免疫球蛋白 饲养管理 犊牛舍

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德研制成BVDVⅠ型和Ⅱ型灭活疫苗

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作者 李秉鸿 《畜牧兽医科技信息》 2001年第11期13-14,共2页

德国学者Beer.M等研制了一种新的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）灭活苗,它选自BVDV—Ⅰ的PTS10株和BVDV—Ⅱ的890株。免疫试验使用不同佐剂和抗原剂量对6头健康牛进行攻击,每头牛接种两次,一次为低剂量10^6.6TCID<s... 德国学者Beer.M等研制了一种新的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）灭活苗,它选自BVDV—Ⅰ的PTS10株和BVDV—Ⅱ的890株。免疫试验使用不同佐剂和抗原剂量对6头健康牛进行攻击,每头牛接种两次,一次为低剂量10^6.6TCID₅₀PT810株和10^7.2TCID₅₀890株,佐剂为BayR1005。第二次为高剂量,10^7.8TCID₅₀PT810株和10^8.2TCID₅₀890株,用两种不同佐剂,Bay R1005或Polygen。第二次接种后38天,免疫组和对照组均用10⁶TCID₅₀ 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻病毒 BVDV 白细胞减少 抗原剂量 低剂量 免疫试验 佐剂 灭活疫苗 灭活苗 中和抗体效价

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