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人源性抗SARS-CoV-2单链抗体文库的构建及广谱中和抗体的筛选与鉴定
1
作者 尹慧敏 吕海 +3 位作者 迟莹 刘静娴 焦永军 卫平民 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期154-160,共7页
目的构建人源性抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)单链可变片段(scFv)抗体文库,并筛选具有广谱中和活性的抗体,为诊断和治疗制剂的开发提供候选分子。方法从新型冠状病毒感染康复者外周血中分离单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA... 目的构建人源性抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)单链可变片段(scFv)抗体文库,并筛选具有广谱中和活性的抗体,为诊断和治疗制剂的开发提供候选分子。方法从新型冠状病毒感染康复者外周血中分离单个核淋巴细胞(PBMC),提取总RNA,逆转录成cDNA,以此为模板构建人源性抗SARS-CoV-2 scFv抗体文库;利用噬菌体展示技术筛选对SARS-CoV-2 S蛋白具有特异性的scFv抗体。通过序列分析和人源IgG抗体表达,合成IgG全抗体,并评估其对SARS-CoV-2的结合能力及中和活性。结果成功构建了库容量为1.56×10^(7)CFU的SARS-CoV-2人源性scFv抗体文库,筛选出两种特异性scFv抗体;并将scFv抗体表达成IgG形式的全抗体(IgG-A10和IgG-G6),其中IgG-A10对SARS-CoV-2原始株(WT)和奥密克戎亚型变异毒株XBB(XBB)毒株均具有较好中和活性,对奥密克戎BA.2.86变异株的第二代亚分支JN.1(JN.1)毒株中和效果一般。结论本研究从康复者外周血中成功构建了人源性抗SARS-CoV-2 scFv抗体文库,并筛选表达出具有中和活性的抗SARS-CoV-2 IgG抗体,为SARS-CoV-2感染的预防、诊断和治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 单链可变片段(scFv) 噬菌体展示技术 中和抗体
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C1q中和抗体可通过C1q/C3通路改善小鼠的产后抑郁样行为
2
作者 孙一鸣 徐昕冉 +2 位作者 卓雪瑞 蔡慧 王艳 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2111-2117,共7页
目的探究补体系统经典途径的启动因子C1q对产后小鼠抑郁样行为的影响以及C1q中和抗体对产后小鼠抑郁样行为的改善作用及其机制。方法构建产后抑郁小鼠模型,分成对照组及激素模拟妊娠小鼠(HSP)产后抑郁模型组。行为学结果检测小鼠抑郁样... 目的探究补体系统经典途径的启动因子C1q对产后小鼠抑郁样行为的影响以及C1q中和抗体对产后小鼠抑郁样行为的改善作用及其机制。方法构建产后抑郁小鼠模型,分成对照组及激素模拟妊娠小鼠(HSP)产后抑郁模型组。行为学结果检测小鼠抑郁样行为,ELISA试剂盒及Western blotting检测C1q外周血含量及海马脑区表达,免疫荧光检测C1q与小胶质细胞共标情况,RNA测序分析HSP小鼠海马脑区基因表达差异,爱丁堡产后抑郁量表筛选产后抑郁患者,提取患者外周血单个核细胞,WB检测C1q水平。海马脑区立体定位注射C1q中和抗体,分成3组:对照组+IgG(CON+IgG)、模型组+IgG(HSP+IgG)、模型组+C1q Ab(HSP+C1q Ab),检测HSP小鼠抑郁样行为及海马脑区C3表达情况。结果与对照组相比,HSP小鼠表现出抑郁行为,糖水偏好率显著降低(P<0.05),强迫游泳及悬尾不动时间增加(P<0.05),外周血C1q含量(P<0.05)和海马脑区C1q水平表达增加(P<0.05)并伴随海马区Iba1与C1q共标增加(P<0.05);产后抑郁患者外周单个核细胞C1q水平表达增加(P<0.05);海马脑区立体定位注射C1q中和抗体缓解HSP小鼠抑郁样行为,与HSP+IgG组相比,HSP+C1q Ab组糖水偏好率显著增加(P<0.05),强迫游泳及悬尾不动时间减少(P<0.05),海马脑区C3表达降低(P<0.05),外周血促炎因子IL-6、TNF-α含量降低(P<0.05)。结论C1q中和抗体可能通过C1q/C3信号通路改善产后抑郁小鼠抑郁样行为。 展开更多
关键词 补体C1Q 补体C3 中和抗体 小胶质细胞 产后抑郁
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呼吸道合胞病毒疫苗及中和抗体研究进展 被引量：5
3
作者 崔代迅 杨小慧 冯振卿 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第12期1763-1772,共10页
呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)主要引起儿童急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI),而ALRTI是导致全球儿童死亡的主要原因。目前临床上针对RSV主要还是以对症治疗为主,特异性治疗药物相... 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)主要引起儿童急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection,ALRTI),而ALRTI是导致全球儿童死亡的主要原因。目前临床上针对RSV主要还是以对症治疗为主,特异性治疗药物相对较少。因此,RSV疫苗或抗体药物的研发迫切而重要。现阶段,仅有两款RSV疫苗(Abrysvo和Arexvy)和两款RSV单克隆抗体[帕丽珠单抗(Palivizumab)和尼斯维单抗(Nirsevimab)]上市,在特定的人群中均展示出了较好的临床疗效。文章针对近年来RSV主要疫苗类型及中和抗体的研究进展进行综述,希望可为RSV的预防和治疗提供参考。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 减毒活疫苗 亚单位疫苗 中和抗体
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猪瘟病毒中和抗体与E2蛋白抗体相关性分析
4
作者 夏应菊 李琰 +9 位作者 刘俊 徐嫄 李芳韬 邹兴启 李琪 李佳昕 赵俊杰 张乾义 刘业兵 徐璐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4590-4596,共7页
旨在探索猪瘟病毒中和抗体与E2蛋白抗体的关系,本研究对289份猪血清进行中和抗体效价和E2抗体测定,比较分析二者的相关性;同时从中选取15份血清,测定血清对不同猪瘟病毒流行野毒株的中和效价。结果表明,从整体上说E2抗体水平与中和效价... 旨在探索猪瘟病毒中和抗体与E2蛋白抗体的关系,本研究对289份猪血清进行中和抗体效价和E2抗体测定,比较分析二者的相关性;同时从中选取15份血清,测定血清对不同猪瘟病毒流行野毒株的中和效价。结果表明,从整体上说E2抗体水平与中和效价呈正相关。当群体中所有个体E2抗体阻断率均大于60%时,才能保证群体70%以上免疫猪的中和抗体达到保护标准。本研究的结果有助于基层兽医工作者更好地评估临床中猪瘟疫苗的免疫保护状况,降低猪瘟疫情发生风险。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 中和抗体 E2抗体 相关性
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SARS⁃CoV⁃2免疫逃逸NTD中和抗体的分子机制
5
作者 洪琴 徐诗奇 +3 位作者 王艳兴 张超 黄忠 丛尧 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期329-338,共10页
针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)中和抗体的开发,主要针对SARS-CoV-2表面的刺突(Spike,S)蛋白。大多数中和SARS-CoV-2的单克隆抗体(MAbs)可结合S蛋白的受体结合结构域(re... 针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)中和抗体的开发,主要针对SARS-CoV-2表面的刺突(Spike,S)蛋白。大多数中和SARS-CoV-2的单克隆抗体(MAbs)可结合S蛋白的受体结合结构域(receptor-binding domain,RBD),从而阻断病毒与血管紧张素转化酶2(Angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)的相互作用。作者早期通过SARS-CoV-2原型株S蛋白免疫小鼠,筛选得到S2G4,S2H5,S4D4,S5B84株与S蛋白氮末端结构域(N-terminal domain,NTD)不同表位结合的单克隆抗体,其中S2H5活病毒中和能力最强。本研究利用冷冻电镜技术解析了S2H5的抗原结合片段(Fab)结合SARS-CoV-2原型株S蛋白复合体的结构,共获得六种构象,其中S2H5 Fab结合在S蛋白的NTD上,结构模拟完整S2H5抗体结合S蛋白可以空间上阻碍S蛋白与ACE2相互作用,揭示了S2H5中和SARS-CoV-2原型株的结构基础。此外,作者应用假病毒中和实验,分析了上述四种抗体对SARS-CoV-2多种突变株的中和能力,显示了其突变株对NTD抗体的免疫逃逸,并从结构生物学角度对各突变株表现出的免疫逃逸提供了可能的解释。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 刺突蛋白 中和抗体 冷冻电镜
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用于中和抗体评价和进入抑制剂筛选的多变异株SARS-CoV-2假病毒体系构建与评估
6
作者 李静璇 刘峰 +3 位作者 王莹 程军平 肖智勇 周文霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期811-817,共7页
目的:构建一种高滴度SARS-CoV-2假病毒(PsV)体系,用于中和抗体体外评价与病毒进入抑制剂的筛选。方法:共转染慢病毒载体质粒psPAX2、pCDH-Luc与SARS-CoV-2 Spike(S)蛋白表达质粒,收获的假病毒上清感染ACE2-293T细胞。通过测定p24蛋白含... 目的:构建一种高滴度SARS-CoV-2假病毒(PsV)体系,用于中和抗体体外评价与病毒进入抑制剂的筛选。方法:共转染慢病毒载体质粒psPAX2、pCDH-Luc与SARS-CoV-2 Spike(S)蛋白表达质粒,收获的假病毒上清感染ACE2-293T细胞。通过测定p24蛋白含量反映PsV滴度,Western blot检测S蛋白在PsV中的表达。利用原始株、D614G、Gamma、Delta、Omicron PsV亚型对1株S蛋白单克隆抗体的中和能力进行评价。采用两种已报道的病毒进入抑制剂氯喹、角叉菜胶检测对Omicron PsV进入的影响。结果:慢病毒载体成功掺入了S蛋白,Western blot结果显示665Y位突变的S蛋白表现出与野生型全长S蛋白(180 kD)不同的切割形式(90 kD)。三质粒体系包装出的PsV滴度更高,S蛋白表达质粒、转移质粒与包装质粒比例在1∶3∶3时为原始株PsV包装的最佳条件。该条件下包装出的5种PsV滴度均在20 ng/ml以上。PsV可有效感染ACE2-293T细胞,双报告基因GFP与萤火虫荧光素酶表达明显,化学发光数值高达106。基于原始株S蛋白的单克隆抗体可有效中和原始株PsV,对原始株PsV的中和作用是对变异株PsV的10~30倍。病毒进入抑制剂氯喹与ι-角叉菜胶可显著抑制Omicron PsV进入宿主细胞。结论:成功构建了高滴度的SARS-CoV-2 PsV进入体系,该体系以荧光素酶报告基因为指示,包含原始株和D614G、PsV Gamma、Delta、Omicron 4种变异株PsV,可有效评价中和抗体与病毒进入抑制剂活性,区分二者对不同变异株的敏感性差异对抗SARS-CoV-2药物研发有重要意义。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 假病毒 S蛋白 中和抗体 病毒进入抑制剂
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细胞间质上皮转化因子(c-Met)中和抗体的筛选及鉴定
7
作者 蒋明 于丽华 +2 位作者 付敏 毛玉婷 尹衍新 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期777-782,共6页
目的通过抗体的随机突变库和细胞展示技术,对具有中和活性的细胞间质上皮转化因子(c-Met)抗体进行结构和活性优化,获得亲和力高、激动活性低的抗体,并使其保持亲本抗体的中和及内化活性,提高抗体偶联药物(ADC)的成药性。方法构建和筛选c... 目的通过抗体的随机突变库和细胞展示技术,对具有中和活性的细胞间质上皮转化因子(c-Met)抗体进行结构和活性优化,获得亲和力高、激动活性低的抗体,并使其保持亲本抗体的中和及内化活性,提高抗体偶联药物(ADC)的成药性。方法构建和筛选c-Met中和激动型抗体3E1D7的重链互补决定区3(CDR3)随机突变库,获得CDR3区有4个氨基酸突变的候选抗体2G5。通过ELISA检测2G5的中和活性,流式细胞术检测其在A549细胞的内化,CCK-8法检测2G5对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,通过Transwell^(TM)小室检测2G5对A549细胞迁移的影响,通过Western blot法检测2G5对c-Met磷酸化的影响。结果突变抗体2G5与抗原c-Met保持较高的结合能力,半数有效浓度(EC_(50))为41.53 ng/mL,并具有较高的中和活性。在A549细胞中,2G5引起显著的内化效应,但不激活c-Met信号通路和细胞迁移。2G5不能引起HUVEC增殖。结论通过建立抗体随机突变库可优化c-Met抗体的活性,获得成药性更高的突变型抗体。 展开更多
关键词 细胞间质上皮转化因子(c-Met) 中和抗体 流式细胞术
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白B表位诱导中和抗体能力的研究 被引量：13
8
作者 冷超粮 安同庆 +9 位作者 陈家锃 宫大庆 李登云 杨永倩 彭金美 张祎 郭娟娟 吴江 童光志 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期297-300,共4页
为证实GP5蛋白B表位是否具有诱导抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的能力,本实验合成了PRRSV CH-1a株和高致病性PRRSV(HP-PRRSV)HuN4株B表位的短肽,分别免疫家兔制备两份特异性多肽抗血清。此外,将12头PRRSV及其抗体均为阴性的... 为证实GP5蛋白B表位是否具有诱导抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的能力,本实验合成了PRRSV CH-1a株和高致病性PRRSV(HP-PRRSV)HuN4株B表位的短肽,分别免疫家兔制备两份特异性多肽抗血清。此外,将12头PRRSV及其抗体均为阴性的健康仔猪以HP-PRRSV HuN4疫苗毒株(HuN4-F112)进行基础免疫,然后用强毒株(HuN4-F5)进行多次接种,制备猪高免血清。间接免疫荧光检测(IFA)结果显示,两份多肽抗血清均能与PRRSV经典株和变异株发生特异性反应,IFA抗体效价无差异,表明两份血清没有显著差异。病毒中和试验结果表明,两份多肽抗血清均不具有中和PRRSV活性。间接ELISA和病毒中和试验结果表明,猪高免血清中针对B表位肽的ELISA抗体水平与血清抗PRRSV中和抗体之间没有正相关关系,而且B表位肽不能抑制中和抗体。以上结果表明HP-PRRSV B表位不能诱导产生中和抗体。 展开更多
关键词 HP-PRRSV GP5 B表位 中和抗体
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RFFIT和MNT检测抗狂犬病毒中和抗体的比较研究 被引量：9
9
作者 程满荣 徐葛林 +5 位作者 吴杰 唐建蓉 郑新雄 董关木 吴小红 张永振 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期30-33,共4页
目的对RFFIT和MNT两种方法检测抗狂犬病毒中和抗体的相关性,敏感性和重复性进行比较。方法用MNT和RFFIT两种方法来检测已免疫的人血清52份,未免疫的人血清40份。结果显示这两种方法检测已免疫血清的一致性是88.5%,其相关性是r=0.886,MN... 目的对RFFIT和MNT两种方法检测抗狂犬病毒中和抗体的相关性,敏感性和重复性进行比较。方法用MNT和RFFIT两种方法来检测已免疫的人血清52份,未免疫的人血清40份。结果显示这两种方法检测已免疫血清的一致性是88.5%,其相关性是r=0.886,MNT的敏感性和特异性分别是84.9%,100%;RFFIT的灵敏度和特异性分别是100%,89.0%。MNT和RFFIT重复检测一个样品的变异系数(CV)分别是62.3%、13.3%。结论RFFIT与MNT的相关性较好,RFFIT的灵敏度和重复性均比MNT好,因此,RFFIT在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可替代MNT。 展开更多
关键词 狂犬病毒 RFFIT MNT 中和抗体
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生猪伪狂犬病毒gB抗体与中和抗体的相关性分析 被引量：10
10
作者 杨涛涛 刘崇灵 +2 位作者 刘晓波 赵墩 余兴龙 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期303-306,共4页
为探索生猪伪狂犬病毒gB–ELISA抗体水平的高低与中和抗体效价的相关性,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对177份生猪血清进行了伪狂犬病毒gB抗体的检测,同时,用中和试验对上述血清样品进行了伪狂犬病毒中和抗体的测定。试验结果通过生物... 为探索生猪伪狂犬病毒gB–ELISA抗体水平的高低与中和抗体效价的相关性,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对177份生猪血清进行了伪狂犬病毒gB抗体的检测,同时,用中和试验对上述血清样品进行了伪狂犬病毒中和抗体的测定。试验结果通过生物统计学分析,gE抗体阴性血清的g B抗体平均S/P值和中和抗体效价(SN效价)倒数平均值的相关系数为0.926,说明g B免疫抗体S/P值与其中和抗体效价有很好的相关性。中和抗体水平的高低一般与免疫保护力呈正相关,研究结果表明gB–ELISA抗体水平可以用来评估生猪对当前流行PRV毒株的相对免疫保护力。 展开更多
关键词 猪 伪狂犬病毒 gB抗体 中和抗体 酶联免疫吸附测定
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小鹅瘟病毒VP3基因疫苗的构建及其诱导小鼠和鹅中和抗体的初报 被引量：8
11
作者 韩新锋 程安春 +4 位作者 汪铭书 刘晓东 卢菲 黎敏 车茜 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期543-549,共7页
PCR 扩增小鹅瘟病毒(GPV)CHv 株 VP3基因并克隆入 pMD 18-T-Simple 载体,亚克隆正向插入到真核表达质粒 pcDNA3.1(+)CMV 启动子下游多克隆位点,经 PCR 和HindⅢ与 BamH Ⅰ双酶切鉴定表明成功构建了 GPV VP3基因疫苗(pcDNA3.1-GPV-VP3)... PCR 扩增小鹅瘟病毒(GPV)CHv 株 VP3基因并克隆入 pMD 18-T-Simple 载体,亚克隆正向插入到真核表达质粒 pcDNA3.1(+)CMV 启动子下游多克隆位点,经 PCR 和HindⅢ与 BamH Ⅰ双酶切鉴定表明成功构建了 GPV VP3基因疫苗(pcDNA3.1-GPV-VP3)。该疫苗以200μg/只肌注免疫 Balb/c 小鼠和鹅,同时分别设肌注 PBS 和 pcDNA3.1(+)作为对照,于免疫后第30、45、60、75、90、105天应用鸭胚原代成纤维细胞(DEF)进行微量中和试验检测小鼠和鹅血清抗100 TCID50 GPV 的抗体效价。结果表明,pcDNA3.1-GPV-VP3免疫小鼠第30天可检测到抗 GPV 的中和抗体,抗体效价缓慢上升至90天达到高峰(平均1:135.8)后下降,105天仍高于75天;免疫鹅的中和抗体效价呈现与小鼠类似的规律,第90天达到高峰(平均1:98.5)。因此,pcDNA3.1-GPV-VP3具有良好的免疫原性,肌注免疫小鼠和鹅后能够诱发产生抗 GPV 的中和抗体,有进一步开展临床研究和应用的前景。 展开更多
关键词 小鹅瘟病毒 VP3基因 真核表达质粒 基因免疫 中和抗体
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冀、京、吉犬群犬腺病毒中和抗体调查 被引量：7
12
作者 钱方 张守峰 +6 位作者 王述超 刘晔 赵敬慧 米立娟 张菲 王颖 扈荣良 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期155-157,共3页
目的为表达狂犬病病毒糖蛋白的犬2型腺病毒(CAV-2)重组狂犬病口服疫苗的投放工作提供流行病学依据。方法通过病毒中和试验对随机采自河北省,北京市,吉林省等地的387份犬血清进行犬腺病毒中和抗体检测,以确定犬群腺病毒感染率。结果河北... 目的为表达狂犬病病毒糖蛋白的犬2型腺病毒(CAV-2)重组狂犬病口服疫苗的投放工作提供流行病学依据。方法通过病毒中和试验对随机采自河北省,北京市,吉林省等地的387份犬血清进行犬腺病毒中和抗体检测,以确定犬群腺病毒感染率。结果河北、吉林农村流浪犬或家养犬腺病毒中和抗体阳性率较低,阳性率为16%(30/192),而北京市犬腺病毒中和抗体阳性率高达69%(135/195),说明城乡犬只犬腺病毒中和抗体存在明显差异。结论农村流浪犬或家养犬腺病毒中和抗体阳性率较低,适用于CAV-2及其重组疫苗首次免疫、尤其是口服免疫。 展开更多
关键词 狂犬病 犬腺病毒 中和抗体 口服免疫
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猪伪狂犬病毒gB、gC和gD蛋白多抗制备及交叉中和抗体效价测定 被引量：9
13
作者 刘飞 童武 +3 位作者 梁超 杨莘 郑浩 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期73-76,共4页
为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价... 为研究猪伪狂犬病毒（PRv）主要免疫原性基因的抗原变异情况，本研究构建了PRV变异株JS-2012和弱毒疫苗株Bartha—K61的gB、gc和gD基因重组真核表达质粒。通过基因枪途径免疫新西兰大白兔，对制备的兔源多克隆抗体进行交叉中和抗体效价的i／n,4定。结果显示，JS．2012和Bartha．K61株的gC蛋白和gD蛋白多抗对PRVJS．2012变异株、SC经典强毒株和Bartha．K61弱毒疫苗株的交叉中和效价均无显著差异；而两个病毒株的2B蛋白多抗对JS．2012和sc株的中和效价较低，分别为1：29．0～56．7和1：56．2～137．0，对Bartha—K61株以及其他毒力基因缺失弱毒疫苗株的中和效价较高，分别为1：75．0--490．0和1：198．6～986．9，差异显著，推测该结果可能与PRV毒力基因缺失有关。本研究为进一步鉴定PRV流行株的抗原变异奠定基础。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 多克隆抗体 中和抗体效价
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重组α干扰素治疗慢性病毒性肝炎干扰素中和抗体的产生 被引量：7
14
作者 刘定立 张明霞 +1 位作者 冯筱榕 章廉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期14-15,共2页
为探讨重组α干扰素 (IFNα)治疗慢性病毒性肝炎时 ,IFNα中和抗体 (NA)的产生和影响。采用抗病毒生物中和测定法检测 32 1例 IFNα治疗的慢性病毒性肝炎患者中的 NA。结果 :32 1例患者治疗前均未检出NA,治疗后检出 NA共 39例 (1 2 .1 %... 为探讨重组α干扰素 (IFNα)治疗慢性病毒性肝炎时 ,IFNα中和抗体 (NA)的产生和影响。采用抗病毒生物中和测定法检测 32 1例 IFNα治疗的慢性病毒性肝炎患者中的 NA。结果 :32 1例患者治疗前均未检出NA,治疗后检出 NA共 39例 (1 2 .1 % ) ,其中于治疗后 3、4、5和 6个月及 6个月后检出的分别为 2、6、1 1和 1 2例及 8例。NA阳性组病毒反跳率及病毒无应答率均显著高于 NA阴性组 (P<0 .0 1 )。 35例 NA阳性的患者在 NA阳性后换用天然淋巴母细胞干扰素 (IFN- αNl) ,其中病毒反跳组 1 5例中有 1 3例出现病毒阴转 ,病毒无应答组 1 8例中有 8例病毒阴转。结论 :IFNα治疗慢性病毒性肝炎 NA阳性率不高。 NA可以影响 IFNα的疗效。 NA阳性后换用 展开更多
关键词 干扰素 中和抗体 病毒性肝炎 IFNΑ
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西南地区部队官兵55型人腺病毒中和抗体的研究 被引量：4
15
作者 刘媛 王文博 +3 位作者 邹自英 范泉水 冯子良 熊杰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期212-215,共4页
目的探究西南地区部队官兵55型人腺病毒(HAd V55)抗体流行情况,并检测HAd V55抗体的中和活性,为部队预防和控制HAd V55疫情提供参考依据。方法收集西南地区部队官兵血清样本325份,用ELISA法检测血清中HAd V55抗体,通过体外中和实验检测... 目的探究西南地区部队官兵55型人腺病毒(HAd V55)抗体流行情况,并检测HAd V55抗体的中和活性,为部队预防和控制HAd V55疫情提供参考依据。方法收集西南地区部队官兵血清样本325份,用ELISA法检测血清中HAd V55抗体,通过体外中和实验检测抗体阳性血清中和HAd V55感染的活性。结果西南地区部队官兵体内HAd V55抗体的阳性率较低,325份血清中抗体阳性仅有19份,阳性率为5.85%。19份抗体阳性的血清中,14份在人喉癌上皮细胞系Hep-2具有中和活性,中和效价最高为1∶64。结论西南地区官兵体内HAd V55抗体水平较低,抵抗HAd V55感染的能力较弱。因此一旦出现个别感染者,部队应加强对HAd V55感染的预防和控制,以防止感染的扩散。 展开更多
关键词 腺病毒 官兵 中国西南地区 血清 中和抗体
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检测犬源狂犬病毒中和抗体ELISA方法的建立 被引量：4
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作者 傅秋玲 郑佳琳 +5 位作者 林颖仪 张莹 阳佑天 潘姣姣 吴晓薇 郭霄峰 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期561-565,共5页
为了有效监测犬免疫狂犬病疫苗后的保护效力,以狂犬病毒(Rabies virus,RV)糖蛋白的主要优势抗原表位区G3蛋白(RV G3)作为包被抗原,建立了一种检测狂犬病毒中和抗体效价的间接ELISA方法.通过优化反应条件,确定抗原最佳包被量为8 mg/L,血... 为了有效监测犬免疫狂犬病疫苗后的保护效力,以狂犬病毒(Rabies virus,RV)糖蛋白的主要优势抗原表位区G3蛋白(RV G3)作为包被抗原,建立了一种检测狂犬病毒中和抗体效价的间接ELISA方法.通过优化反应条件,确定抗原最佳包被量为8 mg/L,血清的最佳稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶3 000.特异性试验表明,该抗原不与犬瘟热病毒、犬腺病毒、犬细小病毒阳性血清发生交叉反应;批内和批间重复性试验的平均变异系数都小于10%;敏感性达1∶1 280.此方法检测134份血清样品的结果与美国SYNBIOTICS试剂盒相比,总符合率达95.6%. 展开更多
关键词 狂犬病毒 糖蛋白 犬源 中和抗体 间接ELISA
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四川省部分牛病毒性腹泻／粘膜病血清中和抗体检测 被引量：6
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作者 刘亚刚 刘娣琴 +11 位作者 杨晓农 余琼 蒋朝龙 李建 刘斌 骆勇 姜宇 常文棣 吴皎 贾清 于吉锋 冯英阳 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第3期435-436,共2页
应用细胞中和试验对四川黄牛、水牛、奶牛、牦牛共243份血清进行病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)的中和抗体检测,结果显示,水牛阳性率较高,达50.0%(21/42),其次为牦牛,达37.5%(15/40),奶牛达26.6%(38/143),黄牛最低,为22.2%(4/18)。表明该病... 应用细胞中和试验对四川黄牛、水牛、奶牛、牦牛共243份血清进行病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)的中和抗体检测,结果显示,水牛阳性率较高,达50.0%(21/42),其次为牦牛,达37.5%(15/40),奶牛达26.6%(38/143),黄牛最低,为22.2%(4/18)。表明该病有蔓延和扩大的趋势,值得高度重视。 展开更多
关键词 牛 病毒性腹泻/粘膜病 中和抗体 监测
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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5抗体检测ELISA在中和抗体评估中潜在应用的研究 被引量：6
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作者 彭军 郭中坤 +8 位作者 杜以军 李俊 吴家强 于江 赵鹏伟 邹荣凯 柳晓 王金宝 朱瑞良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期774-779,共6页
为评估猪群血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体水平,本研究以原核表达的重组HP-PRRSV GP5蛋白为包被抗原,通过对反应条件进行优化,建立了检测GP5抗体的间接ELISA(r GP5-ELISA)。结果显示该方法与猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪伪... 为评估猪群血清中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体水平,本研究以原核表达的重组HP-PRRSV GP5蛋白为包被抗原,通过对反应条件进行优化,建立了检测GP5抗体的间接ELISA(r GP5-ELISA)。结果显示该方法与猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、细小病毒、日本乙型脑炎病毒阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性。重复性试验结果显示,组内组间变异系数均小于5.3%。应用建立的r GP5-ELISA方法和IDEXX-ELISA对288份临床血清样品进行检测,结果显示两种方法具有较低的相关性(R=0.831)。中和试验(SN)结果显示,r GP5-ELISA检出阳性血清的中和效价显著高于IDEXX-ELISA(p<0.01)。Western blot复检r GP5-ELISA检测呈阴性的65份猪血清样品,其中58份呈阴性、7份为阳性;而IDEXX-ELISA检测则该65份血清全部呈阳性。对比SN和western blot试验,r GP5-ELISA比商品化IDEXX-ELISA具有更高的SN抗体符合率,因而其检测结果能够更好地反映猪群血清中和抗体水平。本研究建立的方法可以用于大规模猪群PRRSV中和抗体水平评估,并为PRRS流行病学调查提供了技术支持。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 囊膜糖蛋白5 间接ELISA 中和抗体水平评估
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狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒中和抗体水平分析 被引量：4
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作者 张磊 张玲 +6 位作者 张天喜 苏克文 谈思维 邵吉 叶海朋 曹承建 黄春萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期898-902,共5页
目的通过分析狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒RABV中和抗体特征,为狂犬病防控提供依据。方法收集2019-2020年杭州市职业病防治院犬伤后暴露预防接种门诊抗体检测者信息,经筛选后确定157例RABV中和抗体检测者作为研究对象,采用快速荧光... 目的通过分析狂犬病疫苗接种人群中狂犬病病毒RABV中和抗体特征,为狂犬病防控提供依据。方法收集2019-2020年杭州市职业病防治院犬伤后暴露预防接种门诊抗体检测者信息,经筛选后确定157例RABV中和抗体检测者作为研究对象,采用快速荧光灶抑制试验检测狂犬病毒中和抗体,利用横断面研究方法对狂犬病毒中和抗体水平进行人群特征分析。结果研究对象中,初种者98人,复种者59人,复种者中2-1-1程序比5针法产生的抗体水平更高,其余特征均无统计学差异(P>0.05)。除1例初种者中和抗体效价低于0.5 IU/mL,其余检测者中和抗体效价均高于0.5 IU/mL。狂犬病毒中和抗体水平时间趋势分析显示,狂犬病毒中和抗体水平与时间呈负相关,回归方程为(F=4.974,P=0.031),标准化回归系数为-0.322(t=-2.230,P=0.031)。结论复种者狂犬病毒中和抗体水平与免疫程序有关,2-1-1程序对人体再次免疫应答的效果优于5针法。接种疫苗2年后部分个体出现失保护状态,再次暴露有必要全程接种狂犬病疫苗。 展开更多
关键词 狂犬病 中和抗体 快速荧光灶抑制试验 人群特征
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一种筛选对虾白斑综合症病毒中和抗体的新方法 被引量：3
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作者 高宏 袁必锋 +2 位作者 袁丽 赵新颜 戴和平 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期259-263,共5页
用对虾淋巴组织的原代培养细胞与对虾白斑综合症病毒进行相互作用,洗去不能结合的病毒,然后用甲醛固定,再用ELISA法检测所吸附的病毒。当病毒与抗血清保温后,抑制病毒与细胞的吸附能力的抗血清中应含有中和抗体。此方法可以在缺少细胞... 用对虾淋巴组织的原代培养细胞与对虾白斑综合症病毒进行相互作用,洗去不能结合的病毒,然后用甲醛固定,再用ELISA法检测所吸附的病毒。当病毒与抗血清保温后,抑制病毒与细胞的吸附能力的抗血清中应含有中和抗体。此方法可以在缺少细胞系的情况下,简便地筛选到中和抗体。 展开更多
关键词 细胞原代培养 对虾 白斑综合病毒 中和抗体
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