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中华眼镜蛇毒神经生长因子的研究 被引量:6
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作者 雷丹青 李晓飚 舒雨雁 《广西科学》 CAS 1997年第1期48-52,56,共6页
采用CM-SepharoseCL-6B和SephosilC8以及HPLC层析方法,自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子(NGF),此NGF经8d鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经HPLC及... 采用CM-SepharoseCL-6B和SephosilC8以及HPLC层析方法,自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子(NGF),此NGF经8d鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经HPLC及聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组成,经SDSPAGE及HPLC测定分子量分别为24.1KD和24.9KD,等电聚焦电泳测得pI为8.2,氨基酸组分分析表明NGF含酸性氨基酸较少,通过125|标记NGF测定出NGF在生物体内主要分布于肾、肺。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇 神经生长因子 电泳
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中华眼镜蛇毒神经生长因子对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响
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作者 李卉 余晓东 +3 位作者 和七一 邓敏 陈夏 林奕心 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期88-91,共4页
目的探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Atra)神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响。方法PC12细胞分为正常对照组和给药组,采用Western blot方法检测各组PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达。结果①nNGF的25、50、100μg.L-1... 目的探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Atra)神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响。方法PC12细胞分为正常对照组和给药组,采用Western blot方法检测各组PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达。结果①nNGF的25、50、100μg.L-13个剂量中,50和100μg.L-1nNGF下调PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达,50μg.L-1剂量组下调最明显(P<0.01),100μg.L-1剂量组下调(P<0.05)。②50μg.L-1nNGF分别处理PC12细胞1、3、5、7、10 d后,其κ阿片受体蛋白质表达呈降低趋势,其中d 5、7下调(P<0.05),d 10下调明显(P<0.01)。③10μmol.L-1吗啡可上调PC12细胞κ阿片受体蛋白表达,而10μmol.L-1纳络酮对其无影响,二者分别都能逆转nNGF的下调效应,但是二者共存时不能逆转nNGF的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化中,可引起PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的下调效应,该效应能被吗啡或纳络酮逆转,但二者共存不能被逆转效应。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇神经生长因子(nngf) PC12细胞 Κ阿片受体
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蛇毒神经生长因子的分离纯化及鉴定 被引量:4
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作者 刘春宇 陈洁 +3 位作者 卢军 刘晓青 向军剑 林剑 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 1997年第3期90-94,共5页
采用SephadexG50、CM-Celulose32柱层析,从中华眼镜蛇中分离出神经生长因子(NerveGrowthFacter,NGF)。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westernbloting法证明所得到的N... 采用SephadexG50、CM-Celulose32柱层析,从中华眼镜蛇中分离出神经生长因子(NerveGrowthFacter,NGF)。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Westernbloting法证明所得到的NGF为单一组分,相对分子质量约为1.3×104.经凝胶等电聚焦电泳测得NGF等电点PI约为7.0左右.经HPLC及电泳图像分析系统测得纯度为98%.此NGF经8d鸡胚背根神经节体外培养证明,具有促进神经纤维生长的活性.将所纯化的NGF免疫大白兔获得抗血清。 展开更多
关键词 神经生长因子 分离 纯化 眼镜蛇 抗体
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中华眼镜蛇短链神经毒素cDNA的克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量:1
4
作者 蔡勤 何志勇 +1 位作者 龚毅 杨胜利 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期1-4,共4页
利用RT-PCR技术从中华眼镜蛇毒腺组织中成功地克隆了短链神经毒素CDNA。测序结果表明,该基因开放阅读框架编码83个氨基酸残基,其中对个为信号肽,成熟肽为62个氨基酸残基。该基因与GenBank报道的相同物种的神经毒素基因有相当的同源... 利用RT-PCR技术从中华眼镜蛇毒腺组织中成功地克隆了短链神经毒素CDNA。测序结果表明,该基因开放阅读框架编码83个氨基酸残基,其中对个为信号肽,成熟肽为62个氨基酸残基。该基因与GenBank报道的相同物种的神经毒素基因有相当的同源性,不同物种之间的信号肽序列十分保守。将短链神经毒素CDNA再经PCR扩增除去信号肽序列,克隆到pT7ZZ表达质粒中,转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导可高效表达分子量为23kDa②左右的融合蛋白。表达产物占菌体总蛋白的25%左右。 展开更多
关键词 神经 表达 中华眼镜蛇 CDNA 克隆
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眼镜蛇毒组分抑制人神经胶质瘤U251细胞增殖及其机制研究 被引量:4
5
作者 卢康荣 孔天翰 董伟华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1309-1314,共6页
目的:探讨眼镜蛇毒组分对人神经胶质瘤U251细胞增殖抑制作用及其机制。方法:采用MTT法比较各种蛇毒组分对U251细胞增殖的抑制效果并筛选出高效组分,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,激光共聚焦显微镜和电子显微镜观察蛇毒组分作用U... 目的:探讨眼镜蛇毒组分对人神经胶质瘤U251细胞增殖抑制作用及其机制。方法:采用MTT法比较各种蛇毒组分对U251细胞增殖的抑制效果并筛选出高效组分,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,激光共聚焦显微镜和电子显微镜观察蛇毒组分作用U251细胞后的形态学变化。结果:11种眼镜蛇毒组分对体外培养的神经胶质瘤细胞U251均有不同程度的生长抑制作用,其中组分KDⅡ-3对肿瘤细f胞的抑制作用呈现剂量和时间依赖性。不同浓度(1、3.75、7.5、15 mg/L)KDⅡ-3作用细胞24 h后,其凋亡率分别为13.3%、17.7%、20.0%、22.4%,且可见到"亚G1期"峰。KDⅡ-3还将U251的细胞周期阻滞在G0/G1期。7.5 mg/L KDⅡ-3作用U251细胞24h后激光共聚焦显微镜观察显示细胞膜皱缩,染色质浓缩、碎裂,透射电镜观察显示细胞核固缩,染色质凝聚。结论:眼镜蛇毒组分KDⅡ-3可抑制神经胶质瘤细胞U251的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇 神经胶质瘤 细胞增殖 凋亡
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眼镜蛇毒NGF通过PI3K/Akt促人肝星状细胞凋亡的机制研究 被引量:7
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作者 蔡凤桃 张学荣 +5 位作者 孙林 王秀男 廖明 班建东 陈缨 农君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期23-27,共5页
目的探讨眼镜蛇毒神经生长因子NGF对肝纤维化关键细胞LX2的作用及机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度NGF和LY294002对LX2细胞增殖的影响,流式法检测NGF对LX2细胞凋亡的影响,Western blot法研究NGF和LY294002单用与联用对p-Akt蛋白水平... 目的探讨眼镜蛇毒神经生长因子NGF对肝纤维化关键细胞LX2的作用及机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度NGF和LY294002对LX2细胞增殖的影响,流式法检测NGF对LX2细胞凋亡的影响,Western blot法研究NGF和LY294002单用与联用对p-Akt蛋白水平表达的影响。结果NGF可降低LX2细胞存活率,最小有效浓度为1 mg·L^(-1);增加LX2细胞凋亡率;降低p-Akt表达水平,而对Akt的表达水平无明显影响。结论 NGF可通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活,促进LX2细胞凋亡,并有一定的浓度依赖性。本研究对阐明肝纤维化的发病机制,为临床上治疗肝纤维化均有重要意义。 展开更多
关键词 肝纤维化 人肝星状细胞 眼镜蛇 神经生长因子 凋亡 PI3K/AKT
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