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题名两步串联层析法纯化抗TNF-α单克隆抗体
被引量：1
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作者
杨辉
杨彬
马旭通
孙文正
林小鹊
谭世杰
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机构
广东东阳光药业有限公司
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期75-80,共6页
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基金
广东省引进创新科研团队计划(201101Y0104990178)
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文摘
旨在建立从重组CHO细胞发酵培养液中纯化抗TNF-α单克隆抗体的两步串联层析法。将含有抗TNF-α单克隆抗体的料液经两次离心、一步过滤的预处理后,用protein A填料捕获,阳离子填料Sourec30精细纯化。精细纯化过程中利用Do E的方法,采用CCF(Central composite face)设计,探讨了洗脱p H值及盐浓度对纯化的影响。纯化后的抗TNF-α单克隆抗体经HPLC以及毛细管电泳,检测其浓度、纯度以及多聚体含量。结果显示,亲和层析的最佳洗脱条件为p H4.0。通过DOE优化,为达到质量目标(回收率90%以上,纯度97%以上,多聚体0.3%),筛选出最佳洗脱范围为0.05-0.13 mol/L Na Cl以及p H5.7-6.0,选定p H6.0与0.10mol/L Na Cl作为Source洗脱条件,此时回收率94.3%,纯度97.3%,多聚体0.3%,其质量与参比制剂接近。
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关键词
两步抗体纯化平台
抗TNF-Α单克隆抗体
亲和层析
阳离子交换层析
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Keywords
two-step chromatography antibody purification platform
anti-TNF-α monoclonal antibody
affinity chromatography
cation exchange chromatography
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分类号
Q813.2
[生物学—生物工程]
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