丝状支原体丝状亚种SC生物型PCR检测方法的建议 被引量：3

1

作者 辛九庆 高玉龙 +1 位作者 杨婉容 王砚范 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期453-455,共3页

建立了一个可以识别丝状支原体丝状亚种SC生物型 (MmmSC)的PCR方法。根据丝状支原体丝状亚种SC生物型(MmmSC)相关核苷酸序列 ,设计合成了MC1、MC2和SC1、SC2两对引物。MC1、MC2是一对簇特异性引物 ,用于鉴别丝状支原体族 6个成员 ,对Mm... 建立了一个可以识别丝状支原体丝状亚种SC生物型 (MmmSC)的PCR方法。根据丝状支原体丝状亚种SC生物型(MmmSC)相关核苷酸序列 ,设计合成了MC1、MC2和SC1、SC2两对引物。MC1、MC2是一对簇特异性引物 ,用于鉴别丝状支原体族 6个成员 ,对MmmSC、MmmLC扩增出与预期结果相符的 4 6 2bp片段 ;而SC1、SC2是针对MmmSC的一对特异性引物 ,只能对MmmSC扩增出 2 77bp的片段 ,经过VspI、Bsp14 3I和Dral三种限制性内切酶鉴定与预期结果相符 ,而不能扩增出MmmLC型Y_goat代表株 ,说明具有非常好的特异性。对MmmSC进行的敏感性试验显示SC1、SC2引物能够检测到 10 0个CFU ,具有非常高的敏感性。 展开更多

关键词 丝状支原体丝状亚种sc生物型 PCR检测方法 牛 传染性胸膜肺炎 病原 鉴别诊断

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丝状支原体丝状亚种SC型中国不同地区分离株脂蛋白Q基因的分子特征 被引量：2

2

作者 高玉龙 辛九庆 +1 位作者 李媛 王砚范 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期142-146,共5页

根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)脂蛋白Q(LppQ)基因序列设计并合成一对引物,利用PCR扩增方法,从我国不同省区的MmmSC分离株HVRI-Ⅹ、BenⅠ、QingⅠ、MuⅠ和模式株PG1中获得了LppQ基因1303bp的片段,将该片段克隆到PMD18-T载体... 根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)脂蛋白Q(LppQ)基因序列设计并合成一对引物,利用PCR扩增方法,从我国不同省区的MmmSC分离株HVRI-Ⅹ、BenⅠ、QingⅠ、MuⅠ和模式株PG1中获得了LppQ基因1303bp的片段,将该片段克隆到PMD18-T载体上,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒。采用Sanger's双脱氧末端终止法对插入片段进行核苷酸序列测定,获得了HVRI-Ⅹ、BenⅠ、QingⅠ、MuⅠ株和模式株PG1LppQ基因核苷酸序列。核苷酸序列比较结果显示,国内4个MmmSC分离株与GenBank公布的LppQ基因核苷酸序列同源性均在99.7%以上,氨基酸序列同源性均在99%以上;与模式株PG1的核苷酸序列同源性在99.7%以上,氨基酸序列同源性均在99.3%以上。国内4个MmmSC分离株之间的核苷酸序列同源性均在99.7%以上,氨基酸序列同源性均在99.3%以上。对HVRIⅩ株LppQ基因氨基酸亲水性和蛋白表面可能性进行了分析,证实LppQN末端富含亲水氨基酸,比C末端更有可能定位在蛋白表面。 展开更多

关键词 牛传染性胸膜肺炎 丝状史原体丝状亚种sc型 脂蛋白 LppQ 分子特征

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丝状支原体丝状亚种SC型中国分离株LppB基因的克隆与序列分析 被引量：3

3

作者 李媛 辛九庆觹 +1 位作者 高玉龙 王砚范 《畜牧兽医科技信息》 2005年第9期48-50,共3页

关键词 丝状支原体 中国分离株 序列分析 B基因 LPP sc型 牛传染性胸膜肺炎 20世纪上半叶 克隆

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丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白Q的N末端定点突变及表达载体的构建

4

作者 高玉龙 辛九庆 +1 位作者 李媛 王砚范 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期95-99,共5页

根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppQ基因序列设计引物,从MmmSC HVRI X株中扩增出了LppQ N末端基因,并将其分别克隆到pUC18和pUC19上,利用一步重叠延伸PCR突变方法将其66位的TGA突变为TGG,经克隆与序列测定证实突变成功后,... 根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppQ基因序列设计引物,从MmmSC HVRI X株中扩增出了LppQ N末端基因,并将其分别克隆到pUC18和pUC19上,利用一步重叠延伸PCR突变方法将其66位的TGA突变为TGG,经克隆与序列测定证实突变成功后,将已突变的LppQ N末端基因插入原核表达载体pET32a的多克隆位点,成功地构建了LppQ N末端基因原核表达载体pET32a-LppQ,为其下一步体外表达奠定了基础。 展开更多

关键词 牛传染性胸膜肺炎 丝状支原体丝状亚种sc型 脂蛋白 LppQ 定点突变

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丝状支原体丝状亚种SC型LppC基因的表达纯化

5

作者 李媛 乔祖健 +2 位作者 王亮 张建华 辛九庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期90-93,共4页

丝状支原体丝状亚种SC型是A类烈性传染病牛传染性胸膜肺炎的病原体。脂蛋白LppC是重要的免疫优势抗原,LppC基因是MmmSC的特异性基因。本研究通过PCR方法,扩增MmmSC标准株PG1的LppCN末端基因。将该序列克隆到pMDT-18载体上并测序,用pET32... 丝状支原体丝状亚种SC型是A类烈性传染病牛传染性胸膜肺炎的病原体。脂蛋白LppC是重要的免疫优势抗原,LppC基因是MmmSC的特异性基因。本研究通过PCR方法,扩增MmmSC标准株PG1的LppCN末端基因。将该序列克隆到pMDT-18载体上并测序,用pET32a为载体构建重组质粒进行诱导表达。LppCN末端基因长度为644bp,将其与NCBI上发布的Afade株、欧洲群代表株L2比较,它的核酸序列同源性为100%,表明LppC基因在种内高度保守。原核表达结果得到大小为45ku的目的蛋白,用Ni-NTA系统进行纯化得到高纯度的蛋白,Westernblot结果表明,重组蛋白能与牛传染性胸膜肺炎阳性血清反应,具有免疫学活性,为进一步与LppQ融合表达奠定基础。 展开更多

关键词 牛传染性胸膜肺炎(CBPP) 丝状支原体丝状亚种sc(Mmmsc) LppC

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丝状支原体山羊亚种特异性蛋白基因Mmc-3740生物信息学分析 被引量：1

6

作者 张靖鹏 江锦秀 +2 位作者 林裕胜 游伟 胡奇林 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第9期883-887,共5页

为研究丝状支原体山羊亚种Mmc-3740基因编码蛋白的结构与功能,运用生物信息学软件,对该基因编码蛋白的二级结构、跨膜区域、信号肽等生物信息进行预测及分析。结果显示,该基因编码蛋白拥有α螺旋、延伸链、随机卷曲结构;有信号肽,亚细... 为研究丝状支原体山羊亚种Mmc-3740基因编码蛋白的结构与功能,运用生物信息学软件,对该基因编码蛋白的二级结构、跨膜区域、信号肽等生物信息进行预测及分析。结果显示,该基因编码蛋白拥有α螺旋、延伸链、随机卷曲结构;有信号肽,亚细胞定位在细胞外或者细胞质内,可能为分泌蛋白,具有较高的免疫原性,抗原表位偏高的区域主要集中在氨基酸序列的第28~51、60~67、80~130位处;蛋白分子式为C607H1000N184O261S5,分子量15.21kD,等电点(PI值)为4.42,在微生物体内半衰期较短,为不稳定蛋白。该结果为Mmc-3740编码蛋白的进一步研究提供基础数据。 展开更多

关键词 丝状支原体山羊亚种 特异性基因 生物信息学

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牛支原体双重PCR检测方法的建立 被引量：10

7

作者 刘洋 李媛 +4 位作者 董惠 张美晶 姜海芳 陈维 辛九庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期599-602,共4页

为鉴别牛支原体(Mycoplasma bovis)与丝状支原体丝状亚种SC(M.mycoides subsp.mycoides SC),本实验通过优化M.bovis特异性引物pMB81-1/pMB81-2s和MmmSC特异性引物SC1/SC2的退火温度,建立了鉴别M.bovis和MmmSC的双重PCR检测方法。该方法... 为鉴别牛支原体(Mycoplasma bovis)与丝状支原体丝状亚种SC(M.mycoides subsp.mycoides SC),本实验通过优化M.bovis特异性引物pMB81-1/pMB81-2s和MmmSC特异性引物SC1/SC2的退火温度,建立了鉴别M.bovis和MmmSC的双重PCR检测方法。该方法能够分别由M.bovis和MmmSC扩增得到528bp和270bp片段。敏感性试验结果显示该方法检测M.bovis和MmmSC培养物的最低浓度分别为106cfu/mL和105cfu/mL。特异性试验结果显示,该方法对无乳支原体代表株PG2、丝状支原体丝状亚种LC型代表株Y-goat、山羊支原体山羊肺炎亚种Mccp、绵羊支原体Y-98、猪鼻支原体BST-7、巴氏杆菌以及结核分枝杆菌扩增结果均为阴性。应用该方法对临床病料的检测结果与培养鉴定结果的符合率为100%,表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于临床检测。 展开更多

关键词 牛支原体 丝状支原体丝状亚种sc 双重PCR

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畜禽几种支原体及相关膜蛋白的研究进展 被引量：2

8

作者 吴昀卓 申开梅 张映 《畜禽业》 2006年第9期22-25,共4页

支原体是一种无细胞壁、介于细菌和病毒之间的最简单的能够自行复制的原核生物,致病性支原体的感染可造成非常广泛的危害,引起人、动物、植物和昆虫等多种疾病,受到人们的重视。本文介绍了常见的几种畜禽支原体,并从膜蛋白着手阐述其致... 支原体是一种无细胞壁、介于细菌和病毒之间的最简单的能够自行复制的原核生物,致病性支原体的感染可造成非常广泛的危害,引起人、动物、植物和昆虫等多种疾病,受到人们的重视。本文介绍了常见的几种畜禽支原体,并从膜蛋白着手阐述其致病机理的研究进展。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 鸡毒支原体 绵羊肺炎支原体 丝状支原体丝 状亚种sc生物型 膜蛋白

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牛传染性胸膜肺炎研究进展 被引量：6

9

作者 沈青春 韩明远 +1 位作者 王芳 宁宜宝 《中国奶牛》 2010年第8期48-51,共4页

牛传染性胸膜肺炎（CBPP）又称牛肺疫,是一种由丝状支原体丝状亚种小菌落生物型（Mycoplasma mycoides subsp.Mycoides Small-colony type,SC型）引起的牛传染病,发病率高、死亡率中度,病程为亚急性或慢性,其病理特征表现为纤维素性肺... 牛传染性胸膜肺炎（CBPP）又称牛肺疫,是一种由丝状支原体丝状亚种小菌落生物型（Mycoplasma mycoides subsp.Mycoides Small-colony type,SC型）引起的牛传染病,发病率高、死亡率中度,病程为亚急性或慢性,其病理特征表现为纤维素性肺炎和胸膜炎症状。 展开更多

关键词 牛传染性胸膜肺炎 丝状支原体 纤维素性 牛肺疫 生物型 传染病 sc型 发病率

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我国部分省区牛传染性胸膜肺炎流行病学调查 被引量：7

10

作者 辛九庆 李媛 +1 位作者 高玉龙 王砚范 《畜牧兽医科技信息》 2005年第9期38-40,共3页

关键词 牛传染性胸膜肺炎 流行病学调查 世界动物卫生组织 接触性传染病 丝状支原体 纤维素性 20世纪 流行历史 生物型

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中国预防兽医学报2006年第28卷总目次

11

《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期732-736,共5页

关键词 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 法氏囊病病毒 猪瘟病毒石门株 传染性支气管炎病毒 柔嫩艾美耳球虫 艾美尔属 预防兽医学 重组鸡痘病毒 猪附红细胞体 猪血虫体 传染性喉气管炎 新城疫病毒 圆环病毒 蔡雪辉 鸭瘟病毒 鸭疱疹病毒1型 鸭疫里默氏菌 禽流感病毒 流感病毒群 丝状支原体丝状亚种 猪繁殖与呼吸综合征病毒 目次 中华人民共和国

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山羊传染性胸膜肺炎诊治

12

作者 黄太琴 夏党荣 《四川畜牧兽医》 2014年第8期47-47,共1页

1病原 引起本病的病原主要有丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊肺炎亚种、丝状支原体丝状亚种和绵羊肺炎支原体。该类支原体均为细小的多形性微生物，革兰氏染色呈阴性，用姬姆萨氏法、卡斯坦奈达氏法或美蓝染色法着色良好。

关键词 山羊支原体山羊肺炎亚种 传染性胸膜肺炎 丝状支原体 诊治 肺炎支原体 革兰氏染色 微生物 多形性

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