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丙型肝炎病毒核心蛋白抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定 被引量:5
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作者 钟彦伟 成军 +5 位作者 王刚 洪源 王琳 李莉 张玲霞 陈菊梅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期28-30,共3页
为制备抗丙型肝炎病毒核心蛋白的抗独特型单链可变区抗体 (抗 IdscFv) ,采用噬菌体表面展示技术 ,将抗 HCV核心蛋白的单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗体库中经过 5轮“吸附 洗脱 扩增”筛选过程 ,获得可与HCV核心蛋... 为制备抗丙型肝炎病毒核心蛋白的抗独特型单链可变区抗体 (抗 IdscFv) ,采用噬菌体表面展示技术 ,将抗 HCV核心蛋白的单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗体库中经过 5轮“吸附 洗脱 扩增”筛选过程 ,获得可与HCV核心蛋白单克隆抗体结合的抗独特型人源单链可变区抗体的噬菌体集落。随机挑选 6 0个克隆 ,利用酶联免疫吸附法 (ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验 ,对其进行免疫学检测和鉴定。获得与HCV核心蛋白单克隆抗体结合活性较强的抗 IdscFv阳性克隆 ,并对HCV核心蛋白特异性抗 IdscFv的编码序列进行测定分析。结果经过 5轮“吸附 洗脱 扩增”筛选 ,在随机挑选的 6 0个克隆中 ,有 2 0株克隆ELISA的吸光度(A4 5 0nm)值较高 ,这些噬菌体上清与牛血清白蛋白 (BSA)进行交叉反应后 ,确定了其中有 6株交叉反应较弱 ,结合 2次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果 ,最后确定 1株阳性克隆 ,提取质粒 ,进行DNA序列测定 ,DNA大小为 76 8bp。本实验结果提示用噬菌体抗体库技术能够成功地获得抗 HCV核心蛋白的抗 IdscFv ,为开展用抗 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 核心蛋白 独特型人源单链可变区抗体 筛选 鉴定
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丙型肝炎病毒NS4A抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定 被引量:4
2
作者 钟彦伟 成军 +5 位作者 王刚 洪源 王琳 李莉 张玲霞 陈菊梅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期37-39,共3页
为探索新型治疗方法 ,制备抗丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS4A的抗独特型人源单链可变区抗体 (抗 IdscFv) ,采用噬菌体表面展示技术 ,将抗HCVNS4A单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,应用半合成的人源单链可变区抗体文库技术 ,从噬菌体单链可... 为探索新型治疗方法 ,制备抗丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS4A的抗独特型人源单链可变区抗体 (抗 IdscFv) ,采用噬菌体表面展示技术 ,将抗HCVNS4A单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,应用半合成的人源单链可变区抗体文库技术 ,从噬菌体单链可变区抗体库中经过 5轮“吸附 洗脱 扩增”筛选过程 ,随机挑选 82个克隆 ,利用酶联免疫吸附法 (ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验 ,对其进行免疫学检测和鉴定 ,获得与HCVNS4A单克隆抗体结合活性较强的抗 IdscFv阳性克隆 ,并对HCVNS4A特异性抗 IdscFv的编码基因进行序列测定分析。结果 ,经过筛选 82个克隆中有 4 0株克隆ELISA的吸光度 (A4 5 0nm)值较高 ,将这些噬菌体上清与牛血清白蛋白 (BSA)进行交叉反应 ,确定其中有 7株交叉反应较弱 ,结合 2次ELISA重复实验的A值及竞争抑制实验结果 ,最后确定 1株阳性克隆。提取质粒 ,进行DNA序列测定 ,DNA为 789bp。本实验结果提示 ,用噬菌体抗体库技术能够成功地获得抗HCVNS4A的抗 IdscFv,为开展用抗 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 NS4A 独特型人源单链可变区抗体 筛选 鉴定
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115463例住院及门诊患者丙型肝炎病毒抗体检测结果分析 被引量:4
3
作者 卢珍 杨金军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第16期2757-2758,共2页
丙型肝炎是一种主要经血液传播,性传播,母婴传播的疾病[1]。可导致急慢性肝炎、肝硬化和肝癌。我国一般人群丙型肝炎感染率为3.2%[2],全球约有1.7亿人感染HCV,每年新发丙型肝炎病例约3.5万例[3],为了解杭州地区医院就诊患者HC... 丙型肝炎是一种主要经血液传播,性传播,母婴传播的疾病[1]。可导致急慢性肝炎、肝硬化和肝癌。我国一般人群丙型肝炎感染率为3.2%[2],全球约有1.7亿人感染HCV,每年新发丙型肝炎病例约3.5万例[3],为了解杭州地区医院就诊患者HCV感染状况,回顾性分析2010—2012年间来本院就诊的115463例住院及门诊患者的血清标本抗HCV检测结果,现报告如下。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒抗体 检测结果 门诊患者 住院 HCV 血液传播 就诊患者 急慢性肝炎
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丙型肝炎病毒IgG抗体阳性患者血清抗HCV IgM、ALT及HCV RNA的对比分析 被引量:3
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作者 夏勇 唐希才 李德华 《实用医学杂志》 CAS 2005年第7期745-746,共2页
目的:探讨丙型肝炎(H C V)IgG阳性患者的血清抗-H C V IgM、丙氨酸转移酶(A LT)水平与H C V R N A之间的关系。方法:通过第三代E IA试剂盒检测抗-H C V IgG、抗-H C V IgM,全自动生化分析仪检测丙型肝炎患者A LT水平,荧光定量逆转录聚... 目的:探讨丙型肝炎(H C V)IgG阳性患者的血清抗-H C V IgM、丙氨酸转移酶(A LT)水平与H C V R N A之间的关系。方法:通过第三代E IA试剂盒检测抗-H C V IgG、抗-H C V IgM,全自动生化分析仪检测丙型肝炎患者A LT水平,荧光定量逆转录聚合酶链反应(R T-PC R)方法检测H C V R N A,并进行比较。结果:在丙型肝炎IgG阳性患者中,抗-H C V IgM阳性率为8.3%,H C V R N A阳性率为41.7%。H C V R N A的检出在A LT异常情况下较正常明显高(P<0.05),但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性(r=0.346,P>0.05)。结论:抗-H C V IgM不能反映病毒复制,A LT异常情况下H C V R N A检出率高,但A LT水平与H C V R N A含量无线性相关性,H C V R N A仍是反映H C V复制的可靠指标。 展开更多
关键词 阳性患者 丙型肝炎病毒 IgG抗体 荧光定量逆转录聚合酶链反应 HCV 对比分析 HCVRNA -hcvIgM ALT水平 血清-hcv RNA含量 丙氨酸转移酶 丙型肝炎患者 异常情况 试剂盒检测 分析仪检测 HCV复制 病毒复制 阳性率 相关性
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重组表达丙型肝炎病毒非结构蛋白2(NS2)及其血清抗NS2抗体检测方法的建立与评价 被引量:1
5
作者 余雨 成军 +1 位作者 戴玉柱 梅传忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期361-367,共7页
目的重组表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2),建立并评价基于化学发光法的血清抗NS2抗体的检测方法。方法以HCV 1b基因型的NS2核苷酸序列质粒(PUC-NS2)为模板,构建包含NS2全序列的重组质粒(pGEX-KG-NS2);诱导NS2蛋白原核表达,将纯... 目的重组表达丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白2(NS2),建立并评价基于化学发光法的血清抗NS2抗体的检测方法。方法以HCV 1b基因型的NS2核苷酸序列质粒(PUC-NS2)为模板,构建包含NS2全序列的重组质粒(pGEX-KG-NS2);诱导NS2蛋白原核表达,将纯化后的NS2融合蛋白包被于微孔板,基于化学发光法制备抗NS2抗体检测试剂盒,并对其方法学指标进行评价。结果成功诱导获得相对分子质量(M_(r))约51000的NS2融合蛋白;并制备血清抗NS2抗体检测试剂盒,试剂盒方法学评价:精密度试验(批内变异系数4.60%~9.17%,批间变异系数6.62%~10.09%)结果良好,空白限和检出限的相对发光强度比值(RLIR)分别为1.57、4.80(r=0.9870),分析测量范围(AMR)为1.63~44.50 RLIR;准确度试验:平均回收率为99.4%,类风湿因子等阳性血清标本对本试验无交叉反应,试剂盒15个月内稳定,45例HCV感染者血清抗NS2抗体阳性率为20%(9/45)。结论获得了原核表达的HCV NS2并制备了检测血清抗NS2抗体的试剂盒。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒(HCV) 非结构蛋白2(NS2) NS2抗体
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长春市职业献血员丙型肝炎病毒感染状况的调查
6
作者 易世红 赵春燕 +1 位作者 龚云伟 李凡 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期64-64,共1页
为了解长春市职业献血员丙型肝炎病毒感染状况 ,对该群体进行了抗 HCV调查。结果表明 ,长春市职业献血员抗 HCV阳性率为 9% ,显著高于对照人群 ;献浆者抗 HCV阳性率显著高于献全血和非献血人群 ,而且随着献血年限、次数的增加 。
关键词 职业献血员 -hcv 危险因素 丙型肝炎病毒感染 调查
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126例丙型肝炎病者临床病毒血清学分析
7
作者 高志良 姚集鲁 吕凌 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 1993年第3期180-182,共3页
分析126例丙型肝炎病者的临床资料,丙型肝炎病毒血清抗体(抗-HCV)滴度及丙型肝炎核酸(HCV-RNA)。发现有明确输血(浆)史者103例,该病史中发现输血后2个月内有肝损者87例占84.4%。抗-HCV检出率为91.3%,其中急性病者检出率82.6%,慢性者9... 分析126例丙型肝炎病者的临床资料,丙型肝炎病毒血清抗体(抗-HCV)滴度及丙型肝炎核酸(HCV-RNA)。发现有明确输血(浆)史者103例,该病史中发现输血后2个月内有肝损者87例占84.4%。抗-HCV检出率为91.3%,其中急性病者检出率82.6%,慢性者95.8%。抗-HCV强阳性者(OD>1.0),HCV-RNA的检出率48.1%,明显高过OD<1.0的低阳性者。抗-HCV阴性者中有18·18%(2/11)检出HCV-RNA。另外,HCV-RNA的检出与谷-丙转氨酶(ALT)水平有一定关系,有肝损者比ALT正常者HCV-RNA检出率明显高。提示HCV-RNA的检出与活动性肝病有关系。 展开更多
关键词 HCV-RNA 检出率 -hcv 丙型肝炎 血清学分析 ALT 临床 核酸 发现 病毒
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器官移植术后丙型肝炎病毒感染诊疗规范(2019版) 被引量:4
8
作者 李钢 药晨 +2 位作者 石炳毅 孙丽莹 中华医学会器官移植学分会 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期249-252,共4页
为了进一步规范实体器官移植(SOT)术后丙型肝炎病毒(HCV)感染的诊断和治疗,中华医学会器官移植学分会组织器官移植专家和感染病学专家,从流行病学、SOT术后HCV感染的诊断、SOT术后HCV感染的预防和治疗等方面,制订本规范,以帮助器官移植... 为了进一步规范实体器官移植(SOT)术后丙型肝炎病毒(HCV)感染的诊断和治疗,中华医学会器官移植学分会组织器官移植专家和感染病学专家,从流行病学、SOT术后HCV感染的诊断、SOT术后HCV感染的预防和治疗等方面,制订本规范,以帮助器官移植工作者规范和优化HCV感染的诊断和治疗。 展开更多
关键词 器官移植 丙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒抗体(-hcv) 丙型肝炎病毒RNA(HCVRNA) 持续病毒学应答(SVR) 直接病毒药物(DAAs) 索非布韦 雷迪帕韦
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α干扰素治疗丙型肝炎致口腔广泛糜烂性溃疡一例
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作者 涂燕云 丘海先 《临床肝胆病杂志》 CAS 2005年第6期376-376,共1页
患者,男,30岁,因"体检发现抗-HCV阳性"于2003年7月30日来我院就诊查抗-HCV阳性,HCVRNA4.5×105copies/ml,ALT 64U/L,AST 78.6U/L,血常规正常,B超示肝光点稍粗.患者除有乏力、肝区叩痛外,余无异常.于2003年8月1日以重组人... 患者,男,30岁,因"体检发现抗-HCV阳性"于2003年7月30日来我院就诊查抗-HCV阳性,HCVRNA4.5×105copies/ml,ALT 64U/L,AST 78.6U/L,血常规正常,B超示肝光点稍粗.患者除有乏力、肝区叩痛外,余无异常.于2003年8月1日以重组人α1b干扰素(赛诺金,深圳科兴生物制品有限公司)抗病毒治疗,500万U肌肉注射,每日一次,连用15天后改为隔日一次,并联合利巴韦林片剂口服,1200mg/d. 展开更多
关键词 丙型肝炎 糜烂性溃疡 干扰素治疗 -hcv阳性 口腔 Α1B干扰素 病毒治疗 生物制品 肌肉注射 每日一次
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新生儿感染丙肝误诊1例 被引量:1
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作者 肖传宇 侯文华 李雪莲 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第21期3847-3847,共1页
患儿男,出生5d,其母亲为丙肝病毒感染者(15年前因大出血曾输过血),抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性,主治医生考虑到丙肝病毒除了血液、性接触传播外,母婴传播也是一种主要的传播方式,对新生儿进行了HCV抗体检测.结果HCV抗体阳性.
关键词 丙肝病毒感染者 新生儿感染 丙型肝炎病毒 误诊 抗体阳性 性接触传播 主治医生 传播方式
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美国CDC 2020版医务人员潜在性暴露于HCV的检测与临床管理指南 被引量:3
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作者 谭彩霞 伍玉琪(译) +3 位作者 吴安华(校) Moorman AC de Perio MA Goldschmidt R 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期848-850,共3页
暴露于丙型肝炎病毒(HCV)是公认的医务人员(HCP)职业风险。在暴露后应尽快(最好48 h内)对源患者和HCP进行病毒标志物的基线检测。对于源患者,推荐首选检测HCV RNA,尤其对已知或怀疑近期有增加HCV感染风险的行为,或无法评估其感染风险的... 暴露于丙型肝炎病毒(HCV)是公认的医务人员(HCP)职业风险。在暴露后应尽快(最好48 h内)对源患者和HCP进行病毒标志物的基线检测。对于源患者,推荐首选检测HCV RNA,尤其对已知或怀疑近期有增加HCV感染风险的行为,或无法评估其感染风险的源患者。推荐次选先筛查丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV),抗体阳性时再检测HCV RNA。如果HCP的抗-HCV阳性,HCP可以与源患者的检测同步进行,或应在暴露后尽快(48 h内)用同一样本进行HCV RNA的核酸检测。根据源患者的状态确定HCP暴露后的追踪检测方案。如果源患者HCV RNA为阳性,或抗-HCV阳性但不能进行HCV RNA检测,或HCV感染状态未知,则HCP应在暴露后3~6周进行HCV RNA检测。如果HCP暴露后3~6周HCV RNA的检测结果为阴性,应在暴露后4~6个月进行抗-HCV的最终检测。不推荐对职业暴露于血液和其他体液的HCP预防性使用直接作用抗病毒药物。发现HCV RNA阳性的患者或HCP时应及时治疗。 展开更多
关键词 职业暴露 血源性病原体 丙型肝炎病毒(HCV) 丙型肝炎病毒抗体(-hcv) 丙型肝炎病毒RNA(HCV RNA) 医务人员(HCP)
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