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甘蔗丙二烯氧化物环化酶基因(ScAOC)的克隆与表达分析 被引量:3
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作者 薛耀威 陈丽兰 +2 位作者 王亚如 高三基 王锦达 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期1245-1251,共7页
丙二烯氧化物环化酶(allene oxide cyclase,AOC)是茉莉酸合成途径的一个关键酶,在植物防御反应中起着重要的作用。本研究基于甘蔗转录组数据库克隆到一个AOC基因,命名为ScAOC,并对其进行生物学分析、组织特异性分析和逆境胁迫下的表达分... 丙二烯氧化物环化酶(allene oxide cyclase,AOC)是茉莉酸合成途径的一个关键酶,在植物防御反应中起着重要的作用。本研究基于甘蔗转录组数据库克隆到一个AOC基因,命名为ScAOC,并对其进行生物学分析、组织特异性分析和逆境胁迫下的表达分析,以初步了解该基因的功能。甘蔗ScAOC基因的开放阅读框(ORF)为744 bp,编码244个氨基酸,其蛋白分子质量是26.37 kDa。生物信息学分析结果显示,ScAOC蛋白属于不稳定碱性亲水蛋白,含有1个Allene_ox_cyc Superfamily的PLN02343 domain的保守结构域;构建系统进化树,结果显示ScAOC蛋白与高粱的蛋白具有较高的同源性。荧光定量PCR结果显示,ScAOC基因在甘蔗的根、茎、叶中均有表达,表达量从高到低依次是叶、根、茎。在PEG、NaCl及外源MeJA胁迫下,ScAOC基因相对表达量都是先上升后下降,而ABA对ScAOC的表达有一定的抑制作用。在病原菌和粘虫取食的胁迫下,ScAOC基因相对表达量显著上升。结果显示ScAOC可能参与甘蔗对生物或非生物胁迫的防御反应。 展开更多
关键词 甘蔗 丙二烯氧化物环化酶 茉莉酸 生物信息学分析
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青稞茉莉酸合成途径关键基因HvnAOC克隆、生物信息学和表达模式研究
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作者 王子傲 田瑞 +4 位作者 崔永梅 白羿雄 李凤敏 安立昆 吴昆仑 《湖南农业科学》 2025年第1期1-8,共8页
研究从青稞‘昆仑18’中克隆得到丙二烯氧化物环化酶基因HvnAOC并进行了生物信息学分析和表达模式研究。结果表明:HvnAOC启动子区域有大量与生长发育、逆境和激素响应相关的顺式作用元件;HvnAOC蛋白由238个氨基酸组成,分子量为25701.27 ... 研究从青稞‘昆仑18’中克隆得到丙二烯氧化物环化酶基因HvnAOC并进行了生物信息学分析和表达模式研究。结果表明:HvnAOC启动子区域有大量与生长发育、逆境和激素响应相关的顺式作用元件;HvnAOC蛋白由238个氨基酸组成,分子量为25701.27 Da,总原子数为3612个,亲水系数为-0.18,理论等电点为8.82,不稳定指数为49.94,脂溶性指数为81.55,为亲水性不稳定蛋白且不含有信号肽和跨膜结构;HvnAOC以三聚体形式存在,其中α-螺旋、β-折叠分别占比6.72%、37.39%,延长链和无规则卷曲占比55.89%;同源进化分析表明,青稞HvnAOC与小麦TaAOC亲缘关系最近;表达模式研究发现,与其他组织相比,HvnAOC基因在青稞籽粒中表达量最高,且3叶期青稞叶片中的HvnAOC受外源MeJA、ABA和GA诱导表达。 展开更多
关键词 青稞 丙二烯氧化物环化酶 HvnAOC基因 生物信息学分析
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普通烟草茉莉酸生物合成途径3个基因的分子克隆、表征和表达分析
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作者 武兆云 孙聚涛 +2 位作者 张智强 薛刚 杨铁钊 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第18期75-81,共7页
以普通烟草(Nicotiana tabacum L.)为材料,同源克隆烟草NtLOX、NtAOS和NtAOC基因,对其序列进行分析,构建过表达载体和进行低钾胁迫表达分析。蛋白质序列比对和进化树分析结果表明,NtLOX、NtAOS分别属于植物脂氧合酶(IPR001246)、细胞色... 以普通烟草(Nicotiana tabacum L.)为材料,同源克隆烟草NtLOX、NtAOS和NtAOC基因,对其序列进行分析,构建过表达载体和进行低钾胁迫表达分析。蛋白质序列比对和进化树分析结果表明,NtLOX、NtAOS分别属于植物脂氧合酶(IPR001246)、细胞色素P450(IPR002403)家族,其中NtAOC具有异构酶活性(GO:0016853)。根据氨基酸序列预测结果,NtAOS、NtAOC定位于叶绿体,而NtLOX定位于细胞质。为了对基因功能进行研究,构建3个基因的过表达载体。qRT-PCR分析结果表明,在缺钾条件下,与低钾不耐受(敏感)基因型烟草品种相比,耐低钾基因型中NtLOX在转录物水平升高得更早且持续时间更长。因此,NtLOX的表达水平可能与烟草植物对低钾胁迫的抗性密切相关。研究结果为揭示NtLOX、NtAOS和NtAOC在低钾胁迫中的分子机制奠定了研究基础。 展开更多
关键词 普通烟草 脂氧合酶 氧化物合酶 丙二烯氧化物环化酶 分子克隆 生物信息学分析 表达分析
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GmAOC3基因转化载体构建及转化大豆的初步研究 被引量:3
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作者 宁爱玲 杜海平 +1 位作者 喻德跃 王慧 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期588-596,共9页
选用内切酶SacⅠ和MluⅠ切割目标基因和载体,构建了携带bar基因的重组载体p BA002-Gm AOC3,选用2个大豆品种(Jack和南农88-1)和2种外植体(子叶节和整个子叶节),研究大豆品种和外植体对根癌农杆菌介导的子叶节转化Gm AOC3基因的影响。结... 选用内切酶SacⅠ和MluⅠ切割目标基因和载体,构建了携带bar基因的重组载体p BA002-Gm AOC3,选用2个大豆品种(Jack和南农88-1)和2种外植体(子叶节和整个子叶节),研究大豆品种和外植体对根癌农杆菌介导的子叶节转化Gm AOC3基因的影响。结果表明:外植体为整个子叶节的大豆品种Jack的出芽率和转化率最高,分别为79.5%和2.27%。经Quick Stix PAT/bar基因试纸条检测、目标基因的分子检测和草丁膦抗性鉴定,共得到转Gm AOC3基因的T0代阳性株系3株,T1代阳性转基因大豆6株,其中5株以Jack品种为受体的转基因大豆Gm AOC3基因的表达量均显著高于非转基因植株,荧光定量拷贝数检测结果显示,4株转基因单株为单拷贝,2株为双拷贝。 展开更多
关键词 大豆 丙二烯氧化物环化酶 载体构建 遗传转化 分子检测
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