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TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变 被引量:15
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作者 徐国萍 徐璟达 +4 位作者 李海霞 陈琦 赵仲华 刁自强 许祖德 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期223-227,共5页
目的检测转化生长因子(TGF-β1)能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变(epithelial-mes-enchymal transition,EMT)及其相应的信号转导机制。方法在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞(RLE-6TN)中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分... 目的检测转化生长因子(TGF-β1)能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变(epithelial-mes-enchymal transition,EMT)及其相应的信号转导机制。方法在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞(RLE-6TN)中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分别采用Real-time PCR及Western blot检测上皮及间质细胞标志物表达的改变;Western blot检测TGF-β1对RLE-6TN细胞p-Smad2/3表达的影响;TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞形态学的改变采用倒置相差显微镜观察,超微结构的改变采用透射电子显微镜观察。结果加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其间质细胞标志物表达上调,上皮细胞标志物的表达下调;加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其p-Smad2/3的表达明显上调;形态学上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞向成肌纤维细胞样细胞转变;超微结构上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞特有的嗜锇性板层小体发生变性、肿胀并随TGF-β1作用时间延长最终完全消失。结论TGF-β1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 肺泡Ⅱ型上皮细胞 上皮细胞-细胞转变
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肺癌上皮-间质转变现象的研究进展 被引量:3
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作者 叶挺 蒋伟 +1 位作者 逄旭光 王群 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期372-375,共4页
近几年来对于恶性肿瘤上皮-间质转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)现象的研究成为了防治恶性肿瘤的研究热点。国内外的研究发现恶性肿瘤如卵巢癌、前列腺癌、胃癌等中EMT现象参与恶性肿瘤局部淋巴结及远处脏器的转移,并发现... 近几年来对于恶性肿瘤上皮-间质转变(epithelial-mesenchymal transition,EMT)现象的研究成为了防治恶性肿瘤的研究热点。国内外的研究发现恶性肿瘤如卵巢癌、前列腺癌、胃癌等中EMT现象参与恶性肿瘤局部淋巴结及远处脏器的转移,并发现EMT现象中主要的分子蛋白及信号通路。对于死亡率最高的恶性肿瘤肺癌中EMT现象的研究也取得了一定的成果。本文对于肺癌EMT现象中相关诱导分子及信号通路等方面的研究成果作一综述,希望通过总结分析,明确以后的研究方向,进一步探索肺癌等恶性肿瘤的分子靶向治疗方式。 展开更多
关键词 肺癌 上皮-转变 信号通路
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miR-149促进鼻咽癌细胞侵袭和上皮-间质转变(英文) 被引量:6
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作者 罗朝辉 张李洋 +7 位作者 李征 江琛 代亚飞 刘晓萍 郑瑛 俞海波 向娟娟 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期604-609,共6页
目的:探讨miR-149在鼻咽癌中的功能和机制。方法:Real-time PCR和2-△△Ct计算方法验证miR-149在鼻咽癌细胞系中的表达,分别应用MTT实验、划痕实验和transwell迁移实验分析miR-149对鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭功能的影响。Western印... 目的:探讨miR-149在鼻咽癌中的功能和机制。方法:Real-time PCR和2-△△Ct计算方法验证miR-149在鼻咽癌细胞系中的表达,分别应用MTT实验、划痕实验和transwell迁移实验分析miR-149对鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭功能的影响。Western印迹检测E-cadherin的变化。结果:相对于正常鼻咽上皮细胞NP69,miR-149在5-8F和6-10B鼻咽癌细胞系中表达增高。MTT实验、划痕实验和transwell实验显示miR-149能够促进鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭。Western印迹证实miR-149能够降低E-cadherin的表达;反之,抑制miR-149能抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭转移能力。结论:miR-149通过调节细胞上皮-间质转变在鼻咽癌的侵袭转移中发挥重要作用。 展开更多
关键词 miR-149 鼻咽癌 迁移 侵袭转移 上皮-转变
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肿瘤相关中性粒细胞诱导人粘液表皮样癌细胞上皮-间质转变和侵袭转移的功能及机制研究 被引量:3
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作者 黎哲昊 卜歆 +3 位作者 封琳 胡君璧 申亮亮 关键 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期5-9,共5页
目的:研究肿瘤相关中性粒细胞对人粘液表皮样癌MC3细胞上皮-间质转变(EMT)和侵袭转移过程调控的功能及机制。方法:分离培养C57小鼠骨髓中性粒细胞,Transwell检测肿瘤相关中性粒细胞对MC3侵袭和迁移的影响;Western印迹和Real-time PCR检... 目的:研究肿瘤相关中性粒细胞对人粘液表皮样癌MC3细胞上皮-间质转变(EMT)和侵袭转移过程调控的功能及机制。方法:分离培养C57小鼠骨髓中性粒细胞,Transwell检测肿瘤相关中性粒细胞对MC3侵袭和迁移的影响;Western印迹和Real-time PCR检测Vimentin等mRNA和蛋白表达;免疫荧光等检测Vimentin表达。结果:肿瘤相关中性粒细胞中TGF-β表达增加;MC3细胞与中性粒细胞共培养后Vimentin和Snail表达增加;裸鼠体内实验表明中性粒细胞浸润程度与Vimentin表达相关。结论:肿瘤相关中性粒细胞通过TGF-β诱导MC3细胞中Snail表达,并促进肿瘤侵袭和转移。 展开更多
关键词 人粘液表皮样癌 肿瘤相关中性粒细胞 上皮-转变
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microRNA-7对人肝癌细胞MHCC-97H上皮间质转化的影响及作用机制 被引量:3
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作者 张传海 桂阳 +2 位作者 郭凤林 马金良 余继海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第1期29-34,共6页
目的探讨microRNA-7(miR-7)对肝癌细胞株MHCC-97H上皮-间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法将构建的miR-7真核载体单独及分别联合野生型或突变型EGFR 3’-UTR真核载体共转染MHCC-97H细胞,采用Realtime PCR、Western blot检测EMT标识蛋... 目的探讨microRNA-7(miR-7)对肝癌细胞株MHCC-97H上皮-间质转化(EMT)的影响及作用机制。方法将构建的miR-7真核载体单独及分别联合野生型或突变型EGFR 3’-UTR真核载体共转染MHCC-97H细胞,采用Realtime PCR、Western blot检测EMT标识蛋白E-cadherin、β-catenin、N-cadherin和Vimentin的表达;细胞划痕、Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化;双荧光素酶实验分析miR-7对EGFR的调控作用。结果与正常组相比,转染miR-7真核载体组细胞E-cadherin、β-catenin表达均显著升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin表达则明显降低(P<0.01);同时,细胞的侵袭、迁移能力均明显减弱(P<0.01);分别与转染GV272+EGFR 3’-UTR野生型和转染GV272/miR-7+EGFR 3’-UTR突变型相比,转染GV272/miR-7+EGFR 3’-UTR野生型组萤火虫荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。结论 miR-7可通过与EGFR 3’-UTR结合而抑制EGFR信号通路,降低MHCC-97H细胞侵袭、迁移能力,进而抑制MHCC-97H细胞EMT。 展开更多
关键词 microRNA-7 MHCC-97细胞 上皮转变 EGFR
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CD133^+A549肺癌细胞的分选及其肿瘤干细胞和间质化相关基因的表达 被引量:5
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作者 任涟萍 王佳 郭雪君 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期736-740,共5页
目的分离CD133+A549细胞并对其肿瘤干细胞和上皮间质转变(EMT)特性进行初步研究。方法采用免疫磁珠法分离并鉴定A549细胞,Real-Time PCR法和Western blotting法鉴定分离的细胞。Real-Time PCR法测定CD133+A549和CD133-A549细胞中肿瘤干... 目的分离CD133+A549细胞并对其肿瘤干细胞和上皮间质转变(EMT)特性进行初步研究。方法采用免疫磁珠法分离并鉴定A549细胞,Real-Time PCR法和Western blotting法鉴定分离的细胞。Real-Time PCR法测定CD133+A549和CD133-A549细胞中肿瘤干细胞标志物(CXCR4、Oct4、CD44、Bmi1、EpCam)和EMT标志物(E-Cadherin和Zeb1)mRNA的表达。分选后的CD133+A549和CD133-A549细胞经不同浓度(0、0.25、0.5、1.0μg/mL)阿霉素处理72 h,采用细胞增殖实验检测细胞的相对存活率。结果经CD133微小磁珠分离后,成功获得CD133+A549和CD133-A549细胞,CD133+A549细胞的CD133表达明显高于CD133-A549细胞。Real-Time PCR检测结果显示,CD133+A549细胞中Oct4、CD44、Bmi1、EpCam mRNA的相对表达量均显著高于CD133-A549细胞[(1±0.16)vs(0.66±0.12)、(1±0.07)vs(0.48±0.04)、(1±0.03)vs(0.49±0.06)以及(1±0.14)vs(0.38±0.12)(P<0.05)],但CXCR4 mRNA的相对表达量比较差异无统计学意义[(1±0.13)vs(0.73±0.14),P>0.05];CD133+A549细胞中Zeb1 mRNA的相对表达量显著高于CD133-A549细胞[(1±0.09)vs(0.39±0.05),P<0.05],但E-Cadherin mRNA的相对表达量显著低于CD133-A549细胞[(1±0.02)vs(4.98±0.04),P<0.05]。细胞增殖实验结果显示,采用0.5和1.0μg/mL阿霉素处理后,CD133+A549细胞的相对存活率均显著高于CD133-A549细胞,差异有统计学意义[(85±9.4)%vs(67±13.1)%,P<0.05;(80±14.9)%vs(56±6.3)%,P<0.01]。结论采用免疫磁珠分离法可成功分离CD133+A549和CD133-A549细胞;CD133+A549细胞中有其他肿瘤干细胞标志物的表达,并表现出EMT特性。CD133可能是肺癌肿瘤干细胞和EMT特征的标志物。 展开更多
关键词 CD133 肿瘤干细胞 上皮间质转变 肺癌
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miR-7与肝细胞性肝癌EMT及临床病理特征之间的相关性研究 被引量:8
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作者 张传海 张鹤松 +3 位作者 桂阳 郭凤林 马金良 余继海 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第3期429-432,共4页
目的探讨微小RNA-7(miR-7)与肝细胞性肝癌(HCC)临床病理特征及上皮间质化转变(EMT)之间的相关性。方法收集30组HCC(包括癌组织及对应癌旁组织)临床标本及临床相关病理资料,分别检测miR-7及EMT标志物N-钙粘蛋白(N-cadherin)、E-钙粘蛋白(... 目的探讨微小RNA-7(miR-7)与肝细胞性肝癌(HCC)临床病理特征及上皮间质化转变(EMT)之间的相关性。方法收集30组HCC(包括癌组织及对应癌旁组织)临床标本及临床相关病理资料,分别检测miR-7及EMT标志物N-钙粘蛋白(N-cadherin)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,分析miR-7与HCC临床病理特征之间的相关性及miR-7与EMT之间的相关性。结果 miR-7、E-cadherin在癌组织的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01),而N-cadherin的表达则相反。相关性分析表明,miR-7与E-cadherin呈正相关性,与N-cadherin呈负相关性。miR-7在HCC的表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、是否伴随肝炎病毒感染无相关性,而与TNM分级、分化程度和血管侵犯密切相关。结论 miR-7的表达水平与EMT程度呈负相关性,检测miR-7的表达对HCC的临床诊断、治疗及预后判断具有潜在的重要意义。 展开更多
关键词 miR-7 肝细胞性肝癌 上皮转变
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