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Wnt-7a蛋白通过wnt/β-catenin通路抑制单侧输尿管梗阻小鼠肾脏上皮细胞-间充质细胞转分化 被引量：3
1
作者 王国勤 包佩玲 +3 位作者 芮宏亮 杨敏 程虹 谌贻璞 《中国中西医结合肾病杂志》 2015年第7期579-582,I0002,共5页
目的:观察Wnt-7a蛋白对单侧输尿管梗阻模型小鼠肾脏纤维化的拮抗作用及其可能机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、UUO模型组和Wnt-7a蛋白治疗组,术后7 d行Masson染色观察肾间质纤维化程度,免疫组化染色检测肾组织E-钙黏素、α... 目的:观察Wnt-7a蛋白对单侧输尿管梗阻模型小鼠肾脏纤维化的拮抗作用及其可能机制。方法:雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、UUO模型组和Wnt-7a蛋白治疗组,术后7 d行Masson染色观察肾间质纤维化程度,免疫组化染色检测肾组织E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白的表达,免疫印迹法测定肾皮质中E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白及β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白质表达。结果:与模型组相比,治疗组肾组织间质纤维化相对面积显著减少,α-平滑肌肌动蛋白及波形蛋白的表达显著减少,E-钙黏素表达显著增多(P<0.05)。同时,治疗组肾组织中β-catenin表达较模型组显著减少(P<0.05)。结论:Wnt-7a蛋白可以抑制肾脏上皮细胞-间充质细胞转分化的发生而减轻肾脏纤维化,其可能是通过抑制经典的wnt/β-catenin通路。 展开更多
关键词 Wnt-7a 单侧输尿管梗阻模型 上皮细胞-间充质细胞转分化 肾间质纤维化
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Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化的影响 被引量：4
2
作者 韦建辉 廖兰 +1 位作者 关玉珍 余坤 《中国血液净化》 2017年第6期407-412,共6页
目的观察Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响并探讨其可能机制。方法用Apelin-13(10^(-8)、10^(-7)和10^(-6)mol/L)预处理HK-2细胞30 min后,用含D-葡萄糖(30 mmol/L)的... 目的观察Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响并探讨其可能机制。方法用Apelin-13(10^(-8)、10^(-7)和10^(-6)mol/L)预处理HK-2细胞30 min后,用含D-葡萄糖(30 mmol/L)的培养基培养HK-2细胞48 h。免疫荧光检测HK-2细胞中间充质细胞的标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,透射电镜观察HK-2细胞的超微结构,Western-Blot检测上皮细胞的标志物E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α-SMA及自噬相关蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组的细胞呈现长梭形,细胞间隙明显增宽,E-cadherin蛋白表达显著性下调(t=4.751,P=0.011),而α-SMA蛋白表达显著上调(t=3.846,P=0.016),自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(t_1=5.271,t_2=4.695,t_3=6.753,P_1=0.009,P_2=0.012,P3=0.002),p62表达显著降低(t=4.562,P=0.012)。与高糖组比较,Apelin-13(10^(-7)和10^(-6)mol/L)+高糖与高糖组比较,明显抑制了细胞形态的变化,细胞形态大多数呈椭圆型,E-cadherin蛋白表达显著上调(t_1=3.495,t_2=4.124,P_1=0.019,P_2=0.013),而α-SMA蛋白表达显著下调(t_1=4.014,t_2=4.283,P_1=0.014,P_2=0.012),自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(t_1=3.487,t_2=4.059,t_3=5.342,t_4=4.271,t_5=5.360,t_6=5.851,P_1=0.018,P_2=0.014,P_3=0.009,P_4=0.011,P_5=0.005,P_6=0.004),p62表达显著降低(t_1=4.342,t_2=3.557,P_1=0.012,P_2=0.019)。结论 Apelin-13抑制了高糖诱导的肾小管EMT,其机制可能与Apelin-13诱导肾小管上皮细胞自噬有关。 展开更多
关键词 APELIN-13 高糖 上皮细胞-间充质细胞转分化 自噬 自噬相关蛋白
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虫草素对氯化镉诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化及其TGF-β;/Smad信号通路的影响 被引量：3
3
作者 蒋茜 周蓉 +2 位作者 冯雪芳 关雪晶 陈闽东 《中国中西医结合肾病杂志》 2021年第10期903-907,I0004,共6页
目的:探讨虫草素对氯化镉所致肾小管上皮细胞NRK-52E转分化及肾间质纤维化中的影响。方法:(1)体外培养NRK-52E细胞;(2)不同浓度氯化镉(5、10、50、100μmol/L)作用于NRK-52E细胞72 h;(3)不同浓度虫草素(5、20、80μg/ml)+10μmol/L氯化... 目的:探讨虫草素对氯化镉所致肾小管上皮细胞NRK-52E转分化及肾间质纤维化中的影响。方法:(1)体外培养NRK-52E细胞;(2)不同浓度氯化镉(5、10、50、100μmol/L)作用于NRK-52E细胞72 h;(3)不同浓度虫草素(5、20、80μg/ml)+10μmol/L氯化镉溶液共同作用于NRK-52E细胞72 h。通过CCK8检测细胞活力,Western blot方法检测NRK-52E细胞纤维化相关因子TGF-β;和CTGF、α-SMA以及肾小管上皮细胞表面主要标记蛋白E-cadherin、细胞信号转导因子Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达情况。结果:与对照组相比,持续的镉作用会影响大鼠肾小管上皮细胞的生长状态,且浓度越高,细胞活性下降明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,氯化镉组中NRK-52E细胞纤维化相关因子TGF-β;和CTGF、α-SMA表达增加,E-cadherin表达下降,细胞信号转导因子Smad2/3、p-Smad2/3表达均升高。随着虫草素加入的量的升高,TGF-β;和CTGF、α-SMA表达逐渐下降,E-cadherin表达升高,细胞信号转导因子p-Smad2/3、Smad2/3表达均逐渐下降,虫草素与TGF-β;键合良好。结论:本实验证实镉对肾小管上皮细胞生长状态的抑制作用,可能通过TGF-β;/Smad信号通路启动并调节肾小管上皮细胞转分化。而虫草素能够抑制这一过程,从而抑制肾小管间质纤维化。 展开更多
关键词 虫草素 氯化镉 肾小管上皮细胞转分化 肾间质纤维化 TGF-Β 分子对接
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足细胞上皮-间充质转分化的分子机制及中药干预的研究进展 被引量：7
4
作者 赵敬 赵宗江 《中国中西医结合肾病杂志》 2014年第12期1119-1122,共4页
上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）指上皮组织在发生局部损伤后诱发的上皮细胞向间质细胞表型的转化。近几年,EMT被认为是受损肾脏产生肌成纤维细胞的关键,可能是导致肾间质纤维化发生的最重要的机制之一。蛋白... 上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）指上皮组织在发生局部损伤后诱发的上皮细胞向间质细胞表型的转化。近几年,EMT被认为是受损肾脏产生肌成纤维细胞的关键,可能是导致肾间质纤维化发生的最重要的机制之一。蛋白尿是肾小球滤过功能缺陷的临床表现,是大量肾小球疾病进展至终末期肾衰竭的早期标志。 展开更多
关键词 转分化 肾小球滤过功能 间充质 中药干预 肾脏疾病 肾间质纤维化 细胞功能障碍 间质细胞 早期标志 信号通路
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LncRNA OIP5-AS1在高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞上皮-间质转分化中的作用
5
作者 陈璐 陈中腾 +1 位作者 杨佩浓 王莎莎 《中国中西医结合肾病杂志》 2024年第9期764-767,I0001,I0002,共6页
目的:腹膜纤维化是终末期肾病患者腹膜透析治疗引起的一种严重并发症。上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)是早期腹膜纤维化的一个促成因素。本研究旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)OIP5-AS1在高糖培养的大鼠腹膜... 目的:腹膜纤维化是终末期肾病患者腹膜透析治疗引起的一种严重并发症。上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)是早期腹膜纤维化的一个促成因素。本研究旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)OIP5-AS1在高糖培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)中的作用及相关机制。方法:用OIP5-AS1 siRNA转染RPMC,然后用高糖(high glucose,HG)孵育。应用Transwell法测定RPMC的迁移能力。通过免疫荧光和α-SMA抗体评估RPMC的转分化能力。应用RT-qPCR分析OIP5-AS1、α-SMA、波形蛋白、E-钙黏蛋白、TGF-β_(1)、CTGF和Ⅰ型胶原的基因表达。结果:在HG孵育的RPMC中OIP5-AS1的表达升高。OIP5-AS1沉默降低了HG处理后RPMC的迁移能力,减弱了HG诱导的EMT和转分化。此外,OIP5-AS1沉默降低RPMC分泌的TGF-β_(1),并抑制TGF-β_(1)、CTGF和Ⅰ型胶原的mRNA表达。结论:LncRNA OIP5-AS1通过TGF-β_(1)途径调节EMT、转分化以及迁移。OIP5-AS1是一种新发现的LncRNA,可能与腹膜纤维化的EMT过程有关。 展开更多
关键词 腹膜纤维化 腹膜间皮细胞 LncRNA OIP5-AS1 TGF-β_(1) 上皮-间质转化
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DRP1调控线粒体稳态对人视网膜色素上皮细胞上皮-间充质转化的影响
6
作者 汤中 唐云骢 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第6期443-448,共6页
目的探讨线粒体动力相关蛋白(DRP1)对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响。方法构建H_(2)O_(2)干预ARPE-19细胞模型,将ARPE-19细胞分为3组,NG组:采用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养细胞6 h;H_(2)... 目的探讨线粒体动力相关蛋白(DRP1)对人视网膜色素上皮(ARPE-19)细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响。方法构建H_(2)O_(2)干预ARPE-19细胞模型,将ARPE-19细胞分为3组,NG组:采用含体积分数10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养细胞6 h;H_(2)O_(2)组:先采用650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预细胞,此后培养方式及时间与NG组相同;H_(2)O_(2)+Mdivi-1组:先采用10μmol·L^(-1)Mdivi-1处理ARPE-19细胞2 h,再给予650μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预,此后培养方式及时间与NG组相同。Western blot检测各组细胞p-DRP-1/DRP1、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波型蛋白(Vimintin)及紧密连接蛋白(ZO-1)表达水平;线粒体红色荧光探针检测各组细胞线粒体形态;线粒体超氧化物红色荧光探针检测各组细胞线粒体活性氧(ROS)水平;JC-1染色试剂盒检测各组细胞线粒体膜电位;免疫荧光检测各组细胞中ZO-1表达水平。结果H_(2)O_(2)组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值高于NG组,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞p-DRP-1/DRP1蛋白表达比值低于H_(2)O_(2)组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞较H_(2)O_(2)组线粒体碎片化程度得到改善。H_(2)O_(2)组细胞线粒体ROS水平(4.42±0.29)与NG组(1.00±0.17)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(2.15±0.18)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞红/绿荧光强度比值(0.16±0.12)与NG组(1.00±0.09)及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组(0.42±0.05)比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。H_(2)O_(2)组细胞上皮样标志物表达下降,间质样标志物表达上升,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组细胞上皮样标志物表达上升,间质样标志物表达下降。各组细胞α-SMA、N-钙黏蛋白、E-钙黏蛋白、Vimintin及ZO-1相对表达量比较,H_(2)O_(2)组与NG组及H_(2)O_(2)+Mdivi-1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ZO-1免疫荧光染色实验显示,H_(2)O_(2)+Mdivi-1组的细胞连接紧密程度优于H_(2)O_(2)组。结论DRP1可调控线粒体动态平衡,靶向DRP1可改善线粒体功能并抑制EMT进展,从而减轻H_(2)O_(2)诱导的RPE细胞功能障碍。 展开更多
关键词 线粒体动力相关蛋白 线粒体功能 人视网膜色素上皮细胞 上皮-间充质转化 年龄相关性黄斑变性
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黄芪甲苷对TGF-β1诱导下肾小管上皮细胞间充质转分化的保护作用及机制 被引量：7
7
作者 刘新辉 宋高峰 +1 位作者 韦弦 李顺民 《江西中医药》 2018年第2期61-63,共3页
目的:探讨黄芪甲苷(AS-IV)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)的保护作用及可能机制。方法:将大鼠近端肾小管上皮细胞分为三组:正常对照组、TGF-β1刺激组(5 ng/ml,48h)及AS-IV干预组(TGF-β1刺激的同... 目的:探讨黄芪甲苷(AS-IV)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)的保护作用及可能机制。方法:将大鼠近端肾小管上皮细胞分为三组:正常对照组、TGF-β1刺激组(5 ng/ml,48h)及AS-IV干预组(TGF-β1刺激的同时加用AS-IV 100 μmol/l)。采用萤火虫荧光素酶法检测细胞内三磷酸腺苷(ATP)含量以评价线粒体功能。采用Western Blot法检测线粒体生物合成及EMT相关指标的表达。结果:TGF-β1刺激下肾小管上皮细胞ATP合成减少,线粒体生物合成相关蛋白下调(P<0.05)。TGF-β1刺激可诱导EMT,表现为纤连蛋白及I型胶原蛋白表达增加、E-钙粘素表达减少(P<0.05)。而AS-IV干预后可显著提高细胞ATP含量、增加线粒体生物合成并改善EMT(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可保护TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间充质转分化,其机制可能与增加线粒体生物合成有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 转化生长因子-Β1 上皮细胞间充质转分化 线粒体生物合成
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桑黄不同提取物对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞-间充质转分化的影响 被引量：2
8
作者 万凤 杨汝春 +1 位作者 时延朋 张华琴 《浙江临床医学》 2018年第10期1637-1639,共3页
目的 探讨桑黄不同提取物对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)表型转分化(EMT)的影响.方法 体外培养NRK-52E细胞,分别添加不同浓度(1.562、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200和400μg/ml)的桑黄醇提物(PA)... 目的 探讨桑黄不同提取物对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)表型转分化(EMT)的影响.方法 体外培养NRK-52E细胞,分别添加不同浓度(1.562、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200和400μg/ml)的桑黄醇提物(PA)、水提物(PW)和多糖(PP)刺激,CCK-8法检测桑黄不同提取物对NRK-52E细胞活力的影响.随后将NRK-52E细胞随机分为正常组、TGF-β1诱导组(10ng/ml TGF-β1)、PA干预组(10ng/ml TGF-β1+100μg/ml PA)、PW干预组(10ng/ml TGF-β1+200μg/ml PW)和PP干预组(10ng/ml TGF-β1+200μg/ml PP).采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测NRK-52E中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌蛋白(α-SMA)和骨架蛋白desmin mRNA表达水平的变化.结果 与正常组相比,TGF-β1诱导组中E-cadherin的表达显著下调(P<0.01),α-SMA和desmin的表达显著上调(P<0.01).与TGF-β1组比较,PA、PW和PP干预组中E-cadherin的表达明显增强(P<0.01或P<0.05),而α-SMA和desmin的表达则明显减弱(P<0.01或P<0.05).结论 PA、PW和PP均可抑制TGF-β1诱导的EMT的发生,提示桑黄可能对肾小管上皮细胞起保护作用. 展开更多
关键词 桑黄提取物 转化生长因子-Β1 肾小管上皮细胞 上皮-间质转分化
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转化生长因子-β_2(TGF-β_2)诱导人视网膜色素上皮层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达及意义 被引量：4
9
作者 刘亚军 闫峰 +2 位作者 叶巍 朱欣悦 黄振平 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第11期1001-1005,共5页
目的探究转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达变化及意义。方法使用不同浓度TGF-β2刺激RPE细胞上皮-间质转分化后... 目的探究转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达变化及意义。方法使用不同浓度TGF-β2刺激RPE细胞上皮-间质转分化后,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Western blot、RT-PCR检测成纤维化相关分子纤维连接蛋白(fibronection,FN)、神经钙粘连蛋白(nerve calcium adhesion protein,N-Cadherin)的表达。采用RT-PCR检测不同浓度TGF-β2及不同时间TGF-β2(5μg·L^(-1))刺激RPE细胞后miRNA-29b的表达。结果 TGF-β2刺激后的RPE细胞形态呈纤维化改变。在一定浓度范围内(1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)),随着TGF-β2浓度的增加FN、N-Cadherin及相应mRNA随之增加,1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)组与对照组(0μg·L^(-1))相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。TGF-β2在一定浓度范围内(0μg·L^(-1)、1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1))以剂量依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b表达的降低,1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)组与对照组(0μg·L^(-1))相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01),在TGF-β2浓度为5μg·L^(-1)时miRNA-29b表达量最低。TGF-β2在一定时间范围内(0 h、3 h、6 h、12 h)以时间依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b表达的降低,3 h、6 h、12 h、24 h、48 h组与0 h相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论一定范围内TGF-β2以剂量和时间依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b的表达,为进一步研究miRNA-29b与TGF-β2在RPE细胞上皮-间质转分化过程中的相互作用提供理论基础。 展开更多
关键词 人视网膜色素上皮层细胞 上皮-间质转分化 转化生长因子-Β2 miRNA-29b 增生性玻璃体视网膜病变
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miRNA-184在TGF-β_2诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化中的表达 被引量：2
10
作者 丁芝祥 陈阳 +1 位作者 秦贤杰 姚微微 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第12期1116-1120,共5页
目的研究miRNA-184(miR-184)在转化生长因子β_2(transforming growth factor β_2,TGF-β_2)诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达及意义。方法应用不同浓度(0μg·L^(-1)、1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg... 目的研究miRNA-184(miR-184)在转化生长因子β_2(transforming growth factor β_2,TGF-β_2)诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达及意义。方法应用不同浓度(0μg·L^(-1)、1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)、15μg·L^(-1))TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化,细胞免疫荧光和Western blot方法观察转分化相关分子波形蛋白(Vimentin)、钙黏附蛋白E(E-Cadherin)的表达;应用qRT-PCR检测miR-184在不同浓度(0μg·L^(-1)、1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)、15μg·L^(-1))TGF-β_2、不同作用时间(0 h、6 h、12 h、24 h、48 h)TGF-β_2(10μg·L^(-1))诱导人晶状体上皮细胞转分化中的表达变化。结果随着TGF-β_2浓度的增加,细胞胞浆中Vimentin荧光强度增强;E-Cadherin蛋白表达逐渐减少,各组细胞间E-Cadherin表达量差异有统计学意义(F=87.617,P<0.01);Vimentin蛋白表达逐渐增加,各组细胞间Vimentin表达量差异有统计学意义(F=68.923,P<0.01)。随着TGF-β_2浓度的增加,细胞中miR-184相对表达量增多,在10μg·L^(-1) TGF-β_2诱导组达到峰值;随着TGF-β_2诱导时间的延长,细胞中miR-184相对表达量增加,在24 h表达达到峰值。结论 TGF-β_2诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化时细胞内miR-184表达增加,并与诱导浓度和时间有关,为进一步研究miR-184在人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化中的作用及机制提供实验基础。 展开更多
关键词 转化生长因子-β_2 人晶状体上皮细胞 miRNA-184 上皮-间质转分化
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中药抗肾小管上皮细胞间充质转分化的研究进展 被引量：4
11
作者 张瑞芳 万建新 许艳芳 《中国中西医结合肾病杂志》 2011年第4期368-371,共4页
肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis,RIF）是各种慢性肾脏疾病发展到终末期肾衰竭的共同途径,以细胞外基质（extracellular matrix,ECM）在肾间质的过度积聚与沉积,以及成纤维细胞的增生为特征,是多种细胞、生长因子、细胞因子... 肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis,RIF）是各种慢性肾脏疾病发展到终末期肾衰竭的共同途径,以细胞外基质（extracellular matrix,ECM）在肾间质的过度积聚与沉积,以及成纤维细胞的增生为特征,是多种细胞、生长因子、细胞因子,共同参与、相互作用，最终导致ECM合成增多，降解减少，过度沉积的结果。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 转分化 间充质 肾间质纤维化 中药 终末期肾衰竭 matrix 细胞外基质
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红景天苷预处理对高糖诱导的ARPE-19细胞上皮-间充质转化的作用与机制研究
12
作者 韩淼 隋海娟 庞东渤 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第8期607-612,共6页
目的探讨红景天苷(SAL)对高糖诱导的ARPE-19细胞的上皮-间充质转化的作用及机制。方法采用MTT法筛选刺激ARPE-19细胞增殖的合适的葡萄糖浓度,确定为50 mmol·L^(-1)。将ARPE-19细胞分为正常对照组(Control组)(5 mmol·L^(-1)的D... 目的探讨红景天苷(SAL)对高糖诱导的ARPE-19细胞的上皮-间充质转化的作用及机制。方法采用MTT法筛选刺激ARPE-19细胞增殖的合适的葡萄糖浓度,确定为50 mmol·L^(-1)。将ARPE-19细胞分为正常对照组(Control组)(5 mmol·L^(-1)的D-葡萄糖和45 mmol·L^(-1)甘露醇培养)、高糖组(HG组)(50 mmol·L^(-1)葡萄糖培养)、HG+低SAL组、HG+中SAL组、HG+高SAL组,低、中、高SAL浓度分别为20μmol·L^(-1)、80μmol·L^(-1)、320μmol·L^(-1),SAL预处理4 h后,加50 mmol·L^(-1)葡萄糖,作用48 h。采用MTT法观察细胞增殖率;划痕实验观察细胞迁移活性;免疫荧光检测细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的表达;Western blot法检测细胞中α-SMA、Vimentin、纤维粘连素(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col I)、钙黏附蛋白E(E-Cadherin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、p-Smad2及p-Smad3蛋白的表达水平。结果与Control组相比,HG组ARPE-19细胞增殖率与伤口愈合百分比均增加,细胞内a-SMA、Vimentin、FN、Col I蛋白相对表达量均增加,E-cadherin蛋白相对表达量降低,细胞内TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3蛋白相对表达量均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.01);与HG组相比,HG+低SAL组、HG+中SAL组及HG+高SAL组ARPE-19细胞增殖率与伤口愈合百分比均降低,细胞内a-SMA、Vimentin、FN、Col I、TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3蛋白相对表达量均呈浓度依赖性降低,E-cadherin蛋白相对表达量呈浓度依赖性增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论SAL能够降低高糖诱导的ARPE-19细胞的增殖、迁移能力,以及干预其上皮-间充质转化进程,这可能与SAL抑制了ARPE-19细胞的TGF-β/Smads信号通路有关。 展开更多
关键词 红景天苷 高糖 人视网膜色素上皮细胞 上皮-间充质转化 转化生长因子-Β1
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脂氧素A4对Ⅱ型肺泡上皮细胞-间质转化的抑制作用及其机制 被引量：1
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作者 王贵佐 杨淑梅 刘璐 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第2期157-163,共7页
目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming grow... 目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming growth factor, TGF-β1)组、空质粒+TGF-β1组、pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组及LXA4+TGF-β1组。TGF-β1组以5 ng/mL TGF-β1干预A549细胞48 h;空质粒+TGF-β1组和pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞先分别转染空质粒或Nrf2过表达质粒,再以5 ng/mL TGF-β1干预48 h;LXA4+TGF-β1组A549细胞先用100 nmol/L LXA4预处理6 h再给予5 ng/mL TGF-β1干预48 h。光镜观察细胞形态变化,免疫印迹及免疫荧光法检测上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)表达;免疫印迹法检测核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)蛋白水平。结果 与对照组相比,TGF-β1组光镜下可见部分A549细胞形态从鹅卵石状变成细长不规则状,呈间质性改变,E-cadherin表达减少(P<0.05)、α-SMA表达增多(P<0.01),Nrf2蛋白水平下调(P<0.05)。与TGF-β1组相比,pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞E-cadherin表达增多(P<0.05)、α-SMA表达减少(P<0.01);LXA4+TGF-β1组A549细胞E-cadherin上调、α-SMA下调以及Nrf2蛋白水平增多(P<0.05)。结论 LXA4可抑制A549细胞发生EMT,其机制与上调Nrf2表达相关。 展开更多
关键词 肺纤维化 Ⅱ型肺泡上皮细胞 上皮细胞-间质转化 脂氧素A4 NRF2
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非小细胞肺癌组织中miR-363-3p、SOX4 mRNA表达及对上皮间质转化进程的影响 被引量：1
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作者 吴会丽 柴静 +2 位作者 李应龙 封敏 霍怡杉 《山东医药》 CAS 2024年第22期1-4,共4页
目的探讨非小细胞肺癌组织中微小RNA-363-3p(miR-363-3p)、性别决定区Y框蛋白4(SOX4)表达及对上皮间质转化(EMT)进程的影响。方法收集行手术切除的84例非小细胞肺癌患者的癌及其癌旁组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌及癌旁组织... 目的探讨非小细胞肺癌组织中微小RNA-363-3p(miR-363-3p)、性别决定区Y框蛋白4(SOX4)表达及对上皮间质转化(EMT)进程的影响。方法收集行手术切除的84例非小细胞肺癌患者的癌及其癌旁组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌及癌旁组织miR-363-3p、SOX4 mRNA表达,免疫组化SP法检测癌及癌旁组织中E-cadherin、Vimentin表达。比较不同病理特征患者癌组织中miR-363-3p、SOX4 mRNA表达,采用Spearman秩相关分析癌组织miR-363-3p、SOX4 mRNA表达与E-cadherin、Vimentin相关性。使用相对超危险度比(RERI)、归因比(AP)、交互作用指数(SI)分析miR-363-3p、SOX4参与EMT进程的交互作用。结果癌组织中miR-363-3p表达低于癌旁组织,SOX4 mRNA表达高于癌旁组织(P均<0.05);癌组织中miR-363-3p、SOX4 mRNA表达与性别、年龄、吸烟史、肿瘤最大径无关(P均>0.05),与分化程度、TNM分期有关(P均<0.05);癌组织E-cadherin阳性表达率低于癌旁组织,Vimentin阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05);癌组织miR-363-3p与E-cadherin表达呈正相关(r=0.491,P<0.05),与Vimentin表达呈负相关(r=-0.506,P<0.05);癌组织SOX4 mRNA与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.527,P<0.05),与Vimentin表达呈正相关(r=0.463,P<0.05)。癌组织miR-363-3p、SOX4对EMT进程存在负向交互作用(RERI=29.639,AP=70.91,SI=3.656)。结论非小细胞肺癌组织中miR-363-3p、SOX4异常表达与EMT有关,且二者对EMT进程存在负向交互作用。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-363-3p 性别决定区Y框蛋白4 上皮间质转化
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转化生长因子-RhoGTP酶/Rho激酶系统信号通路在低氧诱导大鼠肾小球内皮细胞-间充质细胞转分化中的作用及机制研究 被引量：2
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作者 马金兰 孙雪 +2 位作者 张志强 王燕 梅峰 《中国血液净化》 CSCD 2020年第10期683-687,共5页
目的低氧对大鼠肾小球内皮细胞(rat glomerular endothelial cells,rGECs)转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1的表达和转分化相关蛋白表达的影响及机制研究。方法低氧培养箱培养rGECs,根据低氧培养时间将细胞随机分为5组... 目的低氧对大鼠肾小球内皮细胞(rat glomerular endothelial cells,rGECs)转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1的表达和转分化相关蛋白表达的影响及机制研究。方法低氧培养箱培养rGECs,根据低氧培养时间将细胞随机分为5组,检测细胞增殖活性、TGF-β1及转分化相关蛋白表达情况;在低氧培养细胞中在合适的时间分别加入RhoA/ROCK阻滞剂和TGF-β1受体阻滞剂,分别再次测定:①细胞培养液中TGF-β1表达;②转分化相关蛋白表达;③RhoA/ROCK活性变化。结果①随着低氧培养时间的延长,rGECs增殖活性增加,72h活性最大(F=546.63,P<0.001);②与常氧组比较,低氧组的TGF-β1(F=16.320,P<0.001)和α-SMA(F=5.032,P=0.009)表达升高,而CD-31(F=9.882,P<0.001)表达降低;③经RhoA/ROCK阻滞剂和TGF-β1受体阻滞剂阻滞后α-SMA蛋白表达下降(相对表达量由1.423分别下降至0.750、0.434),CD-31蛋白表达升高(相对表达量由0.741分别上升至0.779、0.934)。结论研究发现低氧可致rGECs增殖活性增加,促进rGECs向间质细胞转分化。并通过细胞信号阻滞剂研究发现低氧可能通过TGF-β1-RhoA/ROCK信号通路促进rGECs向间质细胞转分化。 展开更多
关键词 低氧 大鼠肾小球内皮细胞 内皮细胞-间充质细胞转分化 转化生长因子-RhoA/ROCK信号通路
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糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的作用研究 被引量：1
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作者 崔方强 高彦彬 +5 位作者 王悦芬 孟元 蔡朕 刘志强 江心灿 赵文景 《环球中医药》 CAS 2020年第6期953-957,共5页
目的探讨糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的影响。方法采用KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病小鼠模型,随机分为模型组、糖肾宁组及缬沙坦组,每组10只,并将10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。各组小鼠干预给药12周后处死,心尖取血、摘取双... 目的探讨糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的影响。方法采用KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病小鼠模型,随机分为模型组、糖肾宁组及缬沙坦组,每组10只,并将10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。各组小鼠干预给药12周后处死,心尖取血、摘取双侧肾脏,进行相应指标检测。使用酶联免疫法检测血清肌酐及尿素氮水平,PAS染色观察各组小鼠肾组织细胞外基质增生情况,免疫组化检测各组小鼠肾组织Collagen I及FN蛋白表达,WB及RT-PCR检测各组小鼠足细胞P-cadherin和FSP-1的蛋白及mRNA表达。结果(1)与正常对照组相比,模型组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P<0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显降低(P<0.05)。(2)与正常对照组相比,模型组小鼠肾小球细胞外基质明显增生,基质蛋白Collagen I及FN表达上调(P<0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾小球细胞外基质增生减轻,基质蛋白Collagen I及FN表达明显下调(P<0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05)。结论糖肾宁能够抑制糖尿病肾病小鼠足细胞上皮间质转分化,可能是其减轻肾小球细胞外基质增生、延缓疾病进展的分子机制。 展开更多
关键词 糖肾宁 糖尿病肾病 细胞外基质 足细胞 上皮间质转分化
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Hedgehog信号通路通过上皮细胞间质转分化调控乳腺癌细胞侵袭 被引量：8
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作者 任徽 郭华 +3 位作者 陈明伟 魏光兵 樊林 李徐奇 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-52,共5页
目的研究Hedgehog信号通路对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法通过Western blot和Real-time RT-PCR,检测人乳腺癌细胞MDA-231和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中SHH、SMO和Gli-1蛋白和mRNA表达。通过小干扰RNA转染MDA-231,以未... 目的研究Hedgehog信号通路对乳腺癌细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法通过Western blot和Real-time RT-PCR,检测人乳腺癌细胞MDA-231和人正常乳腺上皮细胞MCF-10A中SHH、SMO和Gli-1蛋白和mRNA表达。通过小干扰RNA转染MDA-231,以未转染细胞为正常对照组,转染siRNA Control为阴性对照组,Western blot和RT-PCR法检测靶向沉默SMO基因的效果,Transwell小室侵袭试验检测各组MDA-231细胞的侵袭能力,Western blot检测Gli-1、Snail、MMP-9、E-cadherin和Vimentin的表达变化。结果人乳腺癌细胞MDA-231高表达SHH、SMO和Gli-1。通过RNA干扰技术靶向沉默MDA-231细胞SMO基因,其细胞侵袭能力显著下调,其Gli-1、Snail、MMP-9、Vimentin表达下调,E-cadherin表达增强。结论 Hedgehog通路的异常激活与乳腺癌细胞侵袭相关,其机制可能与诱导乳腺癌上皮细胞间质转分化有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 侵袭 肿瘤 HEDGEHOG通路 上皮细胞间质转分化
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大鼠骨髓间充质干细胞体外可诱导分化为角膜上皮细胞 被引量：21
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作者 姜廷帅 蔡莉 +1 位作者 惠延年 闫峰 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第2期339-341,共3页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)分化为角膜上皮细胞的可塑性及其重建角膜上皮的可能性。方法:用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSC,经体外与角膜基质细胞共培养诱导分化,免疫荧光法检测角膜上皮... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)分化为角膜上皮细胞的可塑性及其重建角膜上皮的可能性。方法:用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSC,经体外与角膜基质细胞共培养诱导分化,免疫荧光法检测角膜上皮细胞特异标志物K12的表达。结果:体外培养的大鼠骨髓MSC表现出很强的增殖潜能,原代培养的骨髓MSCCD29免疫荧光染色阳性,CD34和CD45为阴性,符合骨髓MSC的特征。MSC与角膜基质细胞共培养1wk后大部分细胞分化为间质细胞,少部分细胞形态上相对偏小,免疫荧光检测这部分细胞表达角膜上皮细胞特异性标志角蛋白K12。结论:体外培养的MSC在角膜基质细胞的诱导下可横向分化为角膜上皮细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 角膜上皮 细胞分化 可塑性
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体外非接触共培养诱导骨髓间充质干细胞向肺泡上皮细胞的分化 被引量：4
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作者 王艳 杨志军 +1 位作者 何玺玉 封志纯 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期54-58,105,共6页
目的建立体外非接触共培养模型,诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向肺泡上皮细胞的分化。方法分三组,每组6例。对照组:小鼠MSCs单独培养组;实验组A:正常肺组织单细胞悬液+MSCs;实验组B:损伤肺组织单细胞悬液+MSCs。共同培养8 d,激光共聚... 目的建立体外非接触共培养模型,诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向肺泡上皮细胞的分化。方法分三组,每组6例。对照组:小鼠MSCs单独培养组;实验组A:正常肺组织单细胞悬液+MSCs;实验组B:损伤肺组织单细胞悬液+MSCs。共同培养8 d,激光共聚焦和RT-PCR检测共培养体系下室中的SP-C和AQP5的表达情况。结果对照组和实验组A都只检测到AQP5;而实验组B可同时检测到AQP5和SP-C。实验组B的AQP5 mRNA的表达量较对照组明显增多(P<0.01),而与实验组A比较,其AQP5 mRNA的表达量也有统计学差异(P<0.01)。但是,实验组A与对照组比较则无明显统计学差异(P>0.05)。结论本实验室成功建立了体外非接触诱导小鼠MSCs分化为肺泡上皮细胞的实验模型。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 肺泡上皮细胞 激光共聚焦
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二甲双胍对转化生长因子-β_(2)(TGF-β_(2))诱导的人晶状体上皮细胞增殖、迁移及上皮间质转化的影响
20
作者 张昀昀 郑柳 +2 位作者 王舒 杨彬彬 丁芝祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第9期692-696,共5页
目的研究二甲双胍对转化生长因子-β_(2)(TGF-β_(2))诱导的人晶状体上皮细胞(LEC)增殖、迁移及上皮间质转化的影响。方法选择永生化人LEC(HLEB-3细胞)作为细胞来源;将细胞融合度80%的人LEC置于含10 mg·L^(-1)TGF-β_(2)的DMEM低... 目的研究二甲双胍对转化生长因子-β_(2)(TGF-β_(2))诱导的人晶状体上皮细胞(LEC)增殖、迁移及上皮间质转化的影响。方法选择永生化人LEC(HLEB-3细胞)作为细胞来源;将细胞融合度80%的人LEC置于含10 mg·L^(-1)TGF-β_(2)的DMEM低糖培养基中培养24 h作为对照组,经TGF-β_(2)处理再加入不同浓度二甲双胍进一步作用后的细胞作为实验组。处理后在倒置显微镜下观察各组细胞的形态变化。采用CCK-8实验检测细胞毒性,计算细胞存活率,Western blot法检测细胞中辅助激活因子Yes相关蛋白1(YAP1)、大肿瘤抑制因子1(LATS1)、波型蛋白(Vimentin)的表达,实时荧光定量PCR检测YAP1、LATS1、哺乳动物STE20样激酶1(MST1)、Vimentin、E-钙黏蛋白mRNA的表达。结果二甲双胍细胞毒性检测结果显示,当二甲双胍浓度大于15.0 mmol·L^(-1)时,人LEC的存活率明显降低,表明二甲双胍浓度对LEC存活影响较大,因此选择15.0 mmol·L^(-1)进行后续实验。二甲双胍对TGF-β_(2)诱导的人LEC增殖有显著的抑制作用,且呈明显的剂量依赖性(均为P<0.001)。15.0 mmol·L^(-1)二甲双胍作用于人LEC 24 h后细胞中YAP1和Vimentin蛋白相对表达量均低于对照组(均为P<0.05);LATS1蛋白相对表达量高于对照组(P<0.05)。15.0 mmol·L^(-1)二甲双胍作用于人LEC 24 h后细胞中YAP1和Vimentin mRNA相对表达量均低于对照组,LATS1、MST1、E-钙黏蛋白mRNA相对表达量均高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论二甲双胍在体外能够对TGF-β_(2)诱导的人LEC增殖、迁移及上皮间质转化产生抑制作用,同时可下调YAP1和Vimentin mRNA的表达,上调LATS1、MST1、E-钙黏蛋白mRNA的表达;该作用机制可能与其激活Hippo信号通路有关。 展开更多
关键词 二甲双胍 转化生长因子-β_(2) 细胞增殖 细胞迁移 上皮间质转化
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