RUNX1对奶牛乳腺上皮细胞间质转化的调节作用

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作者 王宽 杨博文 +8 位作者 王菊玉 邓健明 许慧 杨阳 陈洪剑 代飞燕 顾小龙 曲伟杰 张立梅 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期500-512,共13页

[目的]探究Runt相关转录因子1(RUNX1)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)发生上皮细胞间质转化(EMT)的作用及机制。[方法]通过CCK-8法检测不同感染复数的热灭活金黄色葡萄球菌处理后对MAC-... [目的]探究Runt相关转录因子1(RUNX1)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)诱导的奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)发生上皮细胞间质转化(EMT)的作用及机制。[方法]通过CCK-8法检测不同感染复数的热灭活金黄色葡萄球菌处理后对MAC-T细胞活力的影响;通过倒置显微镜观察经金黄色葡萄球菌处理后MAC-T细胞的形态变化。通过实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞后,细胞中EMT标志分子(E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、α平滑肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin))、TGF/Smad通路信号分子(TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4)和RUNX1的表达量变化情况;并比较了分别使用RUNX1和TGF-β特异性抑制剂前后细胞EMT标志分子、TGF/Smad通路信号分子和RUNX1的表达水平变化。[结果]不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理72 h后,MAC-T细胞活力较24和48 h组均极显著下降(P<0.01),通过显微镜观察发现此时细胞出现漂浮死亡现象。因此后续观察细胞形态变化时设置时间为12、24、36和48 h。当用感染复数(MOI)为100热灭活金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞48 h后,细胞形态由上皮细胞典型的“鹅卵石”样转变为间质细胞的“长梭状”;实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果发现,与正常细胞相比,EMT标志分子E-cadherin mRNA表达量极显著下调(P<0.01),Vimentin、α-SMA、N-cadherin、TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4和RUNX1 mRNA表达量显著或极显著上调(P<0.01);且Vimentin、α-SMA、P-Smad2和RUNX1蛋白表达量明显上调。经LY2109761抑制剂处理后,与感染组相比,2个抑制剂组MAC-T细胞中Smad2、Smad3、Smad4、N-cadherin、Vimentin、α-SMA和RUNX1的mRNA表达量均极显著下调(P<0.01),E-cadherin mRNA表达量极显著上调(P<0.01);经抑制剂Ro5-3335处理后,MAC-T细胞形态未出现显著的间质细胞样变化;与感染组相比,2个抑制剂Ro5-3335组细胞中E-cadherin的mRNA表达量极显著上调(P<0.01),N-cadherin、Vimentin、α-SMA(除10μmol/L Ro5-3335抑制剂组α-SMA外)、TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad4的mRNA表达水平均极显著降低(P<0.01)。[结论]热灭活金黄色葡萄球菌处理MAC-T细胞48 h可激活TGF/Smad通路诱导MAC-T细胞发生EMT变化;RUNX1可通过介导TGF/Smad通路调节金黄色葡萄球菌诱导的MAC-T细胞EMT过程。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 上皮细胞间质转化(EMT) Runt相关转录因子1(RUNX1)

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养血安胎方调节自噬改善复发性自然流产小鼠子宫内膜上皮细胞间质转化及蜕膜化的作用研究

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作者 姚伟洁 闫仕祺 +2 位作者 袁偲偲 贡磊磊 冯欣 《中国药物警戒》 2024年第5期547-552,共6页

目的探讨养血安胎方调节自噬改善复发性自然流产(RSA)小鼠子宫内膜上皮细胞-间质转化(EMT)及蜕膜化的作用。方法构建肾虚血瘀型RSA小鼠以及正常妊娠小鼠,正常妊娠小鼠分别腹腔注射2 mg·kg^(-1)雷帕霉素(Rapa)溶液或15 mg·kg^(... 目的探讨养血安胎方调节自噬改善复发性自然流产(RSA)小鼠子宫内膜上皮细胞-间质转化(EMT)及蜕膜化的作用。方法构建肾虚血瘀型RSA小鼠以及正常妊娠小鼠,正常妊娠小鼠分别腹腔注射2 mg·kg^(-1)雷帕霉素(Rapa)溶液或15 mg·kg^(-1)3-甲基腺嘌呤(3-MA)溶液进行干预;另设置相同方法处理的RSA小鼠、Rapa及3-MA干预的小鼠组,并同时灌胃给药浓度为28.08 g·kg^(-1)的养血安胎溶液进行干预,收集小鼠子宫内膜。通过Western blot法测定小鼠子宫内膜EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和Fibronectin的表达,以及蜕膜化相关蛋白BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的表达。结果与正常妊娠组比较,RSA组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著增加,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著降低;Rapa组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著增加,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著降低;3-MA组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,HOXA10的蛋白表达显著增加。与RSA组比较,RSA+养血安胎组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著增加。与Rapa组比较,Rapa+养血安胎组小鼠子宫内膜中E-cadherin的蛋白表达显著降低,Vimentin、N-cadherin、Fibronectin、BMP2、HOXA10、PRL和IGFBP1的蛋白表达均显著增加。结论养血安胎方能够抑制自噬,从而促进妊娠小鼠子宫内膜的EMT及蜕膜化过程,降低流产率。 展开更多

关键词 养血安胎方 雷帕霉素 3-甲基腺嘌呤 复发性自然流产 自噬 胚胎植入 上皮细胞-间质转化 蜕膜化 中药复方 小鼠

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参七虫草胶囊对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺泡上皮细胞间质转化的影响 被引量：8

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作者 纪娟 陈炜 +1 位作者 董梅 张念志 《安徽中医药大学学报》 2017年第5期66-72,共7页

目的从肺泡上皮细胞间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)角度探讨参七虫草胶囊治疗肺纤维化的作用机制。方法将128只SD大鼠随机分为正常组、模型组、参七虫草组和泼尼松组。采用气管内滴入博莱霉素的方法复制肺纤维化模型... 目的从肺泡上皮细胞间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)角度探讨参七虫草胶囊治疗肺纤维化的作用机制。方法将128只SD大鼠随机分为正常组、模型组、参七虫草组和泼尼松组。采用气管内滴入博莱霉素的方法复制肺纤维化模型。采用苏木精-伊红染色检测大鼠肺组织形态学改变,采用Masson染色观察肺组织胶原沉积情况,采用免疫组织化学法检测肺组织中上皮细胞钙粘素(E-cadherin,E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)的表达水平。结果参七虫草组大鼠肺组织炎性反应及胶原沉积较模型组明显减轻。第7、14、21、28天,模型组E-cad表达水平显著低于正常组(P<0.05),α-SMA和Vimentin表达水平显著高于正常组(P<0.05);参七虫草组和泼尼松组E-cad表达水平显著高于模型组(P<0.05),α-SMA和Vimentin表达水平显著低于模型组(P<0.05);参七虫草组和泼尼松组E-cad和Vimentin表达水平相近(P>0.05)。第28天,参七虫草组α-SMA表达水平显著低于泼尼松组(P<0.05)。正常组4个时点肺组织中E-cad、α-SMA和Vimentin表达水平无明显变化(P>0.05),模型组、参七虫草组和泼尼松组第14、21和28天肺组织E-cad表达水平逐渐降低,α-SMA和Vimentin表达水平逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论参七虫草胶囊通过调节肺组织E-cad、α-SMA和Vimentin表达水平而抑制EMT的发生。 展开更多

关键词 肺纤维化 参七虫草胶囊 上皮细胞间质转化

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肺癌组织中14-3-3ζ的表达与上皮细胞间质转化的相关性研究 被引量：4

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作者 王琳琳 于洪升 蒋捍东 《山东医药》 CAS 2012年第13期28-30,共3页

目的探讨14-3-3ζ在肺癌组织的表达及其与上皮细胞间质转化的关系。方法采用免疫组织化学技术检测60份肺癌组织和35份正常肺组织14-3-3ζ、c-raf、上皮性钙黏附素(E-cad)、波形蛋白(vimentin)的表达,分析14-3-3ζ与肺癌临床病理特征之... 目的探讨14-3-3ζ在肺癌组织的表达及其与上皮细胞间质转化的关系。方法采用免疫组织化学技术检测60份肺癌组织和35份正常肺组织14-3-3ζ、c-raf、上皮性钙黏附素(E-cad)、波形蛋白(vimentin)的表达,分析14-3-3ζ与肺癌临床病理特征之间以及四种蛋白之间的相关性。结果与正常肺组织比较,肺癌组织中14-3-3ζ、c-raf、vimentin的表达明显升高,E-cad明显降低(P均<0.01);14-3-3ζ、E-cad、vimentin在肺癌组织的异常表达与淋巴结转移、分化程度相关(P<0.01);14-3-3ζ、c-raf在肺癌组织中的表达与上皮细胞间质转化成正相关(P均<0.01);肺癌组织中14-3-3ζ的表达与c-raf成正相关(P<0.01)。结论 14-3-3ζ可能参与了上皮细胞间质转化的过程,是其重要标志物,在肺癌淋巴结转移中起重要作用。 展开更多

关键词 肺肿瘤 上皮细胞间质转化 14—3—3ζ 上皮性钙黏附素 波形蛋白

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Dickkopf相关蛋白3调控上皮细胞间质转化相关蛋白表达对前列腺癌PC3细胞凋亡、迁移和侵袭的影响 被引量：2

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作者 蒋焜 杜洋 +1 位作者 许立哲 宁金卓 《皖南医学院学报》 CAS 2022年第6期524-527,共4页

目的:探讨Dickkopf相关蛋白3(DKK3)通过调控上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白表达对人前列腺癌PC3细胞凋亡、迁移和侵袭作用的影响。方法:选取2019年6月~2020年6月武汉大学人民医院确诊并进行前列腺癌根治手术的患者标本24例为研究对象,... 目的:探讨Dickkopf相关蛋白3(DKK3)通过调控上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白表达对人前列腺癌PC3细胞凋亡、迁移和侵袭作用的影响。方法:选取2019年6月~2020年6月武汉大学人民医院确诊并进行前列腺癌根治手术的患者标本24例为研究对象,选择同期因良性前列腺增生行电切手术的患者标本24例为对照组,免疫组化法检测组织中DKK3表达情况。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测DKK3的mRNA表达水平,流式细胞术、MTT实验及Transwell实验测定过表达DKK3对前列腺癌细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响。Western blot法和qRT-PCR法测定过表达DKK3后EMT相关蛋白的表达变化。结果:前列腺癌组织较前列腺增生组织中DKK3表达明显降低。与正常前列腺上皮细胞系相比,前列腺癌PC3细胞中DKK3表达明显减少。与ctrl和NC组相比,ov-DKK3组细胞凋亡率显著升高,细胞增殖、细胞迁移和侵袭能力显著降低。ov-DKK3组中E-cadherin表达水平与ctrl和NC组相比表达升高,Vimentin和N-cadherin的表达水平较ctrl和NC组表达下降。结论:DKK3可以通过调控EMT相关蛋白的表达来影响前列腺癌PC3细胞的细胞凋亡及其迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 前列腺癌 Dickkopf相关蛋白3 上皮细胞间质转化 凋亡 迁移 侵袭

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脂氧素A4对Ⅱ型肺泡上皮细胞-间质转化的抑制作用及其机制 被引量：1

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作者 王贵佐 杨淑梅 刘璐 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第2期157-163,共7页

目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming grow... 目的 探讨脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)对Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅡcell, ATⅡ)间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响及可能机制。方法 将A549细胞分为对照组、转化生长因子β1(transforming growth factor, TGF-β1)组、空质粒+TGF-β1组、pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组及LXA4+TGF-β1组。TGF-β1组以5 ng/mL TGF-β1干预A549细胞48 h;空质粒+TGF-β1组和pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞先分别转染空质粒或Nrf2过表达质粒,再以5 ng/mL TGF-β1干预48 h;LXA4+TGF-β1组A549细胞先用100 nmol/L LXA4预处理6 h再给予5 ng/mL TGF-β1干预48 h。光镜观察细胞形态变化,免疫印迹及免疫荧光法检测上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)表达;免疫印迹法检测核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)蛋白水平。结果 与对照组相比,TGF-β1组光镜下可见部分A549细胞形态从鹅卵石状变成细长不规则状,呈间质性改变,E-cadherin表达减少(P<0.05)、α-SMA表达增多(P<0.01),Nrf2蛋白水平下调(P<0.05)。与TGF-β1组相比,pcDNA3.1-Nrf2+TGF-β1组A549细胞E-cadherin表达增多(P<0.05)、α-SMA表达减少(P<0.01);LXA4+TGF-β1组A549细胞E-cadherin上调、α-SMA下调以及Nrf2蛋白水平增多(P<0.05)。结论 LXA4可抑制A549细胞发生EMT,其机制与上调Nrf2表达相关。 展开更多

关键词 肺纤维化 Ⅱ型肺泡上皮细胞 上皮细胞-间质转化 脂氧素A4 NRF2

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miRNA-491调节胶质母细胞瘤细胞凋亡和上皮间质转化的研究 被引量：3

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作者 郭小叶 王佳 +4 位作者 冒平 李奇 廉海平 白晓斌 宋锦宁 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第10期1329-1336,共8页

目的研究miRNA-491(miR-491)对胶质母细胞瘤细胞上皮间质转化和凋亡的调控作用和机制。方法收集新鲜胶质瘤(glioblastoma multiforme,GBM)13例和对应的癌旁组织(nontumorous tissues,NT)13例。体外培养神经胶质细胞(normal human astroc... 目的研究miRNA-491(miR-491)对胶质母细胞瘤细胞上皮间质转化和凋亡的调控作用和机制。方法收集新鲜胶质瘤(glioblastoma multiforme,GBM)13例和对应的癌旁组织(nontumorous tissues,NT)13例。体外培养神经胶质细胞(normal human astrocytes,NHA)和神经胶质母细胞瘤细胞U-87 MG和U-118 MG。将U-118MG细胞分为无处理组(control)、miR-491的拟似物转染组(mimic)、mimic阴性对照组(mimic-NC)和mimic联合表达αB-crystallin组(mimic+αB-crystallin)。CCK-8法评估细胞增殖,RT-qPCR和或Western blot检测miR-491、αB-crystallin、Twist1、E-cadherin、N-cadherin、Bax、Bcl-2的表达。荧光素酶报告基因验证miR-491和αB-crystallin基因3′UTR区的结合。结果GBM组织与NT组织比较,U-87 MG和U-118 MG分别与NHA比较,miR-491显著降低(P<0.05)。与control组比较,mimic组αB-crystallin、N-cadherin、Twist1的表达水平下调,细胞凋亡率上调(P<0.05),E-cadherin的水平上调(P<0.05)。荧光素酶报告结果证实miR-491与αB-crystallin基因3′UTR区的结合。mimic+αB-crystallin组部分逆转mimic对于凋亡标记物和上皮间质转化标记物的表达(P<0.05)。结论miR-491抑制胶质母细胞瘤细胞的上皮间质转化且促进细胞凋亡,miR-491负调控αB-crystallin是其关键分子机制之一。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 细胞上皮间质转化 细胞凋亡 miRNA-491 αB-crystallin

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间质上皮细胞转化因子扩增非小细胞肺癌患者的临床病理特征与预后分析

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作者 赵晓光 李慧 +2 位作者 程瑞瑞 陈会会 张国俊 《河南医学研究》 CAS 2021年第6期970-973,共4页

目的分析间质上皮细胞转化因子(MET)扩增非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床病理特征及其与预后的关系。方法纳入郑州大学第一附属医院在2016年1月至2018年1月收治且均行二代基因测序(NGS)的NSCLC患者350例,探究MET扩增NSCLC患者的临床病理... 目的分析间质上皮细胞转化因子(MET)扩增非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床病理特征及其与预后的关系。方法纳入郑州大学第一附属医院在2016年1月至2018年1月收治且均行二代基因测序(NGS)的NSCLC患者350例,探究MET扩增NSCLC患者的临床病理特征及程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)的表达,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。结果350例NSCLC患者中共有MET扩增患者30例,发生率为8.57%,MET未扩增患者320例。对于伴有淋巴结转移、TTF-1阳性、PD-L1阳性、Ⅲ~Ⅳ期的NSCLC患者MET扩增率高于不伴淋巴结转移、TTF-1阴性、PD-L1阴性、Ⅰ~Ⅱ期者(P<0.05)。而MET扩增组较未扩增组在性别、年龄、肿瘤家族史、吸烟史、病理类型、骨转移、脑转移方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MET扩增NSCLC患者中位总生存时间为12.0个月,低于MET扩增阴性患者的20.8个月,差异具有统计学意义(P<0.05)。对于MET扩增NSCLC患者,治疗组的中位总生存时间13.0个月长于未治疗组的2.5个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论与非MET扩增的NSCLC患者相比,MET扩增多见于临床分期处于中晚期伴淋巴结转移的患者,且TTF-1、PD-L1的阳性率更高,预后较差。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 间质上皮细胞转化因子扩增 程序性死亡蛋白配体1

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miR-375、miR-92b靶向NLK对非小细胞肺癌细胞生物学功能及上皮间质转化的影响 被引量：2

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作者 王擎实 任宏 +2 位作者 王华 蒙锦莹 李高峰 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第8期915-921,共7页

目的探讨miR-375、miR-92b靶向Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人NSCLC细胞A549为实验... 目的探讨miR-375、miR-92b靶向Nemo样激酶(Nemo-like kinase,NLK)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法以人NSCLC细胞A549为实验细胞,分为7组:正常对照组、miR-375阴性对照组、miR-92b阴性对照组、miR-375+miR92b阴性对照组、miR-375抑制组、miR-92b抑制组和miR-375+miR-92b抑制组。采用双荧光素酶报告法观察miR-375、miR-92b与NLK之间的靶向关系。培养72 h时采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-375、miR-92b、NLK mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖(OD值),划痕实验法(wound healing)检测细胞迁移,Transwell实验法检测各组细胞侵袭,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测EMT标记蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达差异。结果miR-375、miR-92b与NLK存在靶向结合位点且在A549细胞中存在靶向关系。细胞培养72 h,miR-375抑制组、miR-92b抑制组、miR-375+miR-92b抑制组与相应的阴性对照组和正常对照组比较,NLK mRNA表达、OD值、迁移距离、侵袭细胞数降低(均P<0.05)。miR-375阴性对照组、miR-92b阴性对照组、miR-375+miR-92b阴性对照组与正常对照组比较,E-cadherin、vimentin表达差异不具有统计学意义(P>0.05);与相应的阴性对照组和正常对照组比较,miR-375抑制组、miR-92b抑制组、miR-375+miR-92b抑制组E-cadherin蛋白表达均增高,vimentin蛋白表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论miR-375、miR-92b靶向NLK对NSCLC的生物学功能和EMT具有抑制作用,NLK表达调控可能是NSCLC的预后生物标志物和治疗靶点。 展开更多

关键词 miR-375 miR-92b Nemo样激酶 非小细胞肺癌 上皮细胞-间质转化

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胃上皮细胞经亚硝基化合物MNNG短时刺激后细胞形态、功能特性的变化 被引量：3

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作者 蔡洁 王梅 《山东医药》 CAS 2018年第18期26-29,共4页

目的观察胃上皮细胞GES-1经亚硝基化合物N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)短时间刺激后细胞所发生形态和功能特性的变化。方法将MNNG刺激GES-1细胞0、4、8、12 h后,应用显微镜观察细胞形态学变化,平板克隆形成实验观察细胞增殖能力,... 目的观察胃上皮细胞GES-1经亚硝基化合物N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)短时间刺激后细胞所发生形态和功能特性的变化。方法将MNNG刺激GES-1细胞0、4、8、12 h后,应用显微镜观察细胞形态学变化,平板克隆形成实验观察细胞增殖能力,Transwell迁移实验观察细胞迁移能力(穿膜细胞数),Western blotting法检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin和N-cadherin。结果 GES-1细胞随着MNNG刺激时间延长,细胞边缘变得不清晰,细胞变细长、变大。GES-1细胞经MNNG刺激0、4、8、12 h时,其细胞克隆数分别为(82.00±1.16)、(89.67±3.28)、(81.33±1.76)、(85.67±1.45)个,各时点GES-1细胞克隆数比较差异无统计学意义;穿膜细胞数分别为(83.00±2.89)、(149.00±5.20)、(265.70±6.06)、(491.00±8.74)个,刺激时间越长穿膜细胞数越多(P均<0.05);随着MNNG刺激时间延长,GES-1细胞E-cadherin表达逐渐降低而N-cadherin表达逐渐升高(P均<0.05)。结论以亚硝基化合物MNNG短时刺激能使胃上皮细胞的形态和迁移能力发生一定变化,并且促使胃上皮细胞发生EMT。 展开更多

关键词 胃上皮细胞 亚硝基化合物 N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间质转化

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上皮性卵巢癌组织中TGF-β_1、FOXQ1、VEGF、E-cad、N-cad的表达及意义 被引量：12

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作者 李红雨 余亚南 +3 位作者 胡晓静 刘琰 刘星烁 张敏 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第2期91-94,共4页

目的观察转化生长因子β_1(TGF-β_1)、叉头框蛋白Q1(Fox Q1)、E-钙黏蛋白(E-cad)和N-钙黏蛋白(N-cad)、血管内皮生长因子(VEGF)在上皮性卵巢癌卵巢上皮组织中的表达,并探讨其意义。方法上皮性卵巢癌40例(恶性组)、良性上皮性卵巢肿瘤39... 目的观察转化生长因子β_1(TGF-β_1)、叉头框蛋白Q1(Fox Q1)、E-钙黏蛋白(E-cad)和N-钙黏蛋白(N-cad)、血管内皮生长因子(VEGF)在上皮性卵巢癌卵巢上皮组织中的表达,并探讨其意义。方法上皮性卵巢癌40例(恶性组)、良性上皮性卵巢肿瘤39例(良性组)、正常卵巢38例(正常组),手术切取卵巢上皮组织,采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学法分别检测各组卵巢上皮组织中TGF-β_1、FOXQ1、E-cad、N-cad、VEGF的mRNA和蛋白表达。采用Spearman相关分析法分析上述各指标之间的相关性。结果恶性组TGF-β_1、FOXQ1、N-cad、VEGF mRNA、蛋白表达高于正常组和良性组,E-cadmRNA、蛋白表达低于正常组、良性组(P均<0.05)。上皮性卵巢癌中TGF-β_1、FOXQ1、E-cad、N-cad、VEGF表达与FIGO分期、淋巴结转移有关。上皮性卵巢癌中TGF-β_1与FOXQ1、E-cad、N-cad呈正相关(r分别为0.335、0.123、0.411,P分别为0.003、0.002、0.000);FOXQ1与E-cad呈正相关(r=0.321,P=0.000);E-cad与N-cad、VEGF呈正相关(r分别为0.433、0.283,P分别为0.000、0.010)。结论上皮性卵巢癌卵巢上皮组织中TGF-β_1、FOXQ1、VEGF、N-cad表达升高,E-cad表达降低,共同参与上皮性卵巢癌的发生发展、侵袭及转移。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 上皮性卵巢癌 上皮细胞间质转化 E-钙黏蛋白 N-钙黏蛋白 转化生长因子β1 叉头框蛋白Q1 血管内皮生长因子

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单核细胞趋化蛋白-1对人卵巢癌CaOV3细胞黏附、侵袭能力的影响及其机制 被引量：3

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作者 李静 龚成 曾锋 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第32期25-27,共3页

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对人卵巢癌Ca OV3细胞黏附、侵袭能力的影响及其机制。方法将对数生长期的人卵巢癌Ca OV3细胞随机分为观察组和对照组,观察组经MCP-1(20μg/m L)预处理,对照组不予处理。两组行体外黏附试验,记录黏附F... 目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对人卵巢癌Ca OV3细胞黏附、侵袭能力的影响及其机制。方法将对数生长期的人卵巢癌Ca OV3细胞随机分为观察组和对照组,观察组经MCP-1(20μg/m L)预处理,对照组不予处理。两组行体外黏附试验,记录黏附Fibronectin、Collagen及Laminin蛋白的细胞数;行体内黏附试验,记录黏附的细胞球体数目、体积及部位;行细胞侵袭试验,记录穿膜细胞数。采用Western blotting法检测两组上皮-间质转化指标(上皮指标E-cadherin,间质指标Vimentin、N-cadherin)的表达。结果观察组黏附Fibronectin、Collagen及Laminin蛋白的细胞数及穿膜细胞数均高于对照组,P均<0.01。两组肿瘤细胞以细胞球体形式黏附在小鼠大网膜脂肪细胞部位,并且观察组黏附的细胞球体数目更多、球体更大。观察组E-cadherin低于对照组,Vimentin、Ncadherin均高于对照组,P均<0.01。结论 MCP-1可提高人卵巢癌Ca OV3细胞的黏附、侵袭能力,可能与其促进上皮细胞间质转化有关。 展开更多

关键词 卵巢癌 单核细胞趋化蛋白-1 黏附 侵袭 上皮细胞间质转化

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大鼠视网膜Müller细胞在高糖、氧化应激、缺氧中的表现 被引量：1

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作者 李春花 冯朝晖 +4 位作者 张雪 田冰玉 雷晓琴 周婷洁 马为梅 《中国医药导报》 CAS 2019年第15期18-20,40,F0003,F0004,共6页

目的观察Sprague-Dawley(SD)大鼠视网膜Müller细胞在高糖、氧化应激、缺氧三种病理环境下的特征,为糖尿病视网膜病变的防治提供新的研究依据。方法体外培养SD大鼠视网膜Müller细胞,并用谷氨酰胺合成酶(GS)鉴定。将传2代的细... 目的观察Sprague-Dawley(SD)大鼠视网膜Müller细胞在高糖、氧化应激、缺氧三种病理环境下的特征,为糖尿病视网膜病变的防治提供新的研究依据。方法体外培养SD大鼠视网膜Müller细胞,并用谷氨酰胺合成酶(GS)鉴定。将传2代的细胞随机分为四组:对照组、高糖组、氧化应激组、缺氧组。倒置显微镜观察细胞形态学改变,免疫荧光染色法观察细胞GS和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化,Transwell小室观察细胞迁移能力。结果体外成功培养并鉴定鼠Müller细胞,四组Müller细胞功能均受损,氧化应激组以及缺氧组结构受损明显,失去正常形态。缺氧组中α-SMA的表达呈阳性,并且在Transwell小室中发生迁移的细胞数明显多于其他组,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论高糖、氧化应激、缺氧均可导致Müller细胞功能受损,缺氧可诱导Müller细胞转化为具有迁移能力的肌纤维样细胞,提示Müller细胞参与了增生性糖尿病视网膜病变的发病过程。 展开更多

关键词 SD大鼠 视网膜MÜLLER细胞 糖尿病视网膜病变 上皮细胞间质转化 Transwell小室

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低糖下调HSF1抑制肝癌细胞EMT及相关转移 被引量：2

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作者 刘登荷 秦雪 +2 位作者 郭坤 刘银坤 李山 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第6期462-466,共5页

目的分析低糖(LG)对肝癌细胞上皮间质转化(EMT)相关转移的影响以及热休克因子1(HSF1)在其中的作用。方法分别用LG和对照高糖(Control)培养基培养肝癌细胞;用Transwell迁移试验检测细胞的迁移能力;利用shRNA干扰HSF1,并采用HSF1基因回补(... 目的分析低糖(LG)对肝癌细胞上皮间质转化(EMT)相关转移的影响以及热休克因子1(HSF1)在其中的作用。方法分别用LG和对照高糖(Control)培养基培养肝癌细胞;用Transwell迁移试验检测细胞的迁移能力;利用shRNA干扰HSF1,并采用HSF1基因回补(shRES)策略,检测HSF1在低糖抑制肝癌细胞EMT及转移中的作用。结果 LG抑制肝癌细胞的EMT样的形态学改变,抑制其"钙黏着蛋白转换"和迁移能力;此外,葡萄糖限制还可引起HSF1下调,导致E-钙黏蛋白(ECadherin)表达增高,N-钙黏蛋白(N-Cadherin)表达降低;LG培养时,敲减HSF1后肝癌细胞的迁移能力增强(P<0.05),ECadherin降低,N-Cadherin增高,EMT作用增强,而Control培养时无此现象;HSF1基因回补(shRES)后肝癌细胞EMT及迁移能力再次被抑制。结论 LG可下调HSF1,抑制肝癌细胞的EMT及迁移能力,为肝癌治疗提供新的策略。 展开更多

关键词 肝癌 上皮细胞间质转化 迁移 热休克转录因子1 葡萄糖限制

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Gli1对人肝癌细胞中Twist1蛋白表达及细胞迁移的影响 被引量：4

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作者 甘鲁慧 吕沐瀚 邓明明 《山东医药》 CAS 2018年第9期1-4,共4页

目的探讨Hedgehog信号通路关键蛋白Gli1对人肝癌细胞中Twist1蛋白表达和细胞迁移的影响。方法应用蛋白免疫印迹技术在Huh7、Hep G2、PLC、SMMC-7721、Bel-7404五种人肝癌细胞中筛选Gli1高表达细胞系,根据Gen Bank数据库设计并合成3条Gli... 目的探讨Hedgehog信号通路关键蛋白Gli1对人肝癌细胞中Twist1蛋白表达和细胞迁移的影响。方法应用蛋白免疫印迹技术在Huh7、Hep G2、PLC、SMMC-7721、Bel-7404五种人肝癌细胞中筛选Gli1高表达细胞系,根据Gen Bank数据库设计并合成3条Gli1-siRNA经质粒转染到已筛选出Gli1高表达的人肝癌细胞中,分别为p GCsi-U6-GLi1siRNA-1(siRNA-1组)、p GCsi-U6-GLi1siRNA-2(siRNA-2组)、p GCsi-U6-GLi1siRNA-3(siRNA-3组),而空白对照组(N组)不转染任何序列,阴性对照组转染阴性对照序列(NC组)。转染48 h后分别使用实时荧光定量PCR和Western blotting法检测各组Gli1mRNA和蛋白表达,筛选出最佳siRNA序列。对筛选出的最佳siRNA序列组的细胞,采用细胞划痕实验观察其迁移能力,用Western blotting检测该组细胞中Twist1、E-Cadherin蛋白表达。结果Western blotting检测结果提示,与另外4种人肝癌细胞比较,Bel-7404细胞株中Gli1表达量增加(P均<0.05);与其他组比较,siRNA-2组中的Gli1表达量最低(P均<0.05);与N组比较,siRNA-2组中的Twist1蛋白表达下调,E-cadherin表达上调,N-Cadherin和Vimentin表达下调,迁移能力下降(P均<0.05)。结论 Gli1可上调肝癌Bel-7404细胞中Twist1蛋白表达,促进人上皮-间质细胞转化及迁移。 展开更多

关键词 肝癌 GLI1蛋白 Twist1蛋白 上皮-间质细胞转化 细胞迁移

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人OC细胞系细胞miR-211-5p表达、转染miR-211-5p模拟物后的增殖及迁移侵袭和EMT观察

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作者 杨立芬 何建清 尹立新 《山东医药》 CAS 2023年第36期5-9,共5页

目的观察人卵巢癌(OC)细胞系细胞微小RNA-211-5p(miR-211-5p)表达、转染miR-211-5p模拟物(miR-211-5p mimics)后的增殖及迁移侵袭和上皮间质转化(EMT)。方法体外培养人OC细胞系(SKOV3、A2780、HO8910细胞)及人正常卵巢上皮IOSE80细胞,采... 目的观察人卵巢癌(OC)细胞系细胞微小RNA-211-5p(miR-211-5p)表达、转染miR-211-5p模拟物(miR-211-5p mimics)后的增殖及迁移侵袭和上皮间质转化(EMT)。方法体外培养人OC细胞系(SKOV3、A2780、HO8910细胞)及人正常卵巢上皮IOSE80细胞,采用qRT-PCR法检测上述细胞miR-211-5p。取对数生长期的SKOV3细胞,并随机分为两组,高表达组转染miR-211-5p mimics,对照组转染miR-NC,采用CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验、Western blotting法分别测算两组细胞OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、EMT相关蛋白及壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)蛋白灰度值比值。将miR-211-5p mimics或miR-NC与CHI3L1野生型双荧光素酶报告载体CHI3L1-wt或CHI3L1突变型双荧光素酶报告载体CHI3L1-mut共转染入SKOV3细胞中,分为记为miR-211-5p mimics+CHI3L1-wt组、miR-NC+CHI3L1-wt组、miR-211-5p mimics+CHI3L1-mut组、miR-NC+CHI3L1-mut组,转染24 h后收集并裂解细胞,应用荧光素酶试剂盒检测各组细胞的荧光素酶活性。结果与IOSE80细胞比较,SKOV3、A2780、HO8910细胞miR-211-5p相对表达量降低(P均<0.05)。与对照组比较,高表达组OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、N-Cadherin和Fibronectin蛋白灰度值比值降低,E-Cadherin蛋白灰度值比值升高(P均<0.05)。与对照组比较,高表达组CHI3L1蛋白灰度值比值降低(P<0.05)。与miR-NC+CHI3L1-wt组比较,miR-211-5p mimics+CHI3L1-wt组细胞相对荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论miR-211-5p在OC各细胞系中表达降低;转染miR-211-5p mimics可抑制SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及EMT,机制是通过负向调控CHI3L1表达实现的。 展开更多

关键词 微小核糖核酸-211-5p 卵巢癌 SKOV3细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 细胞上皮间质转化 壳多糖酶3样蛋白1

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EMT标记蛋白在胰腺癌组织中的表达和意义

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作者 谭永刚 许乐 王颖 《中国医学工程》 2011年第5期56-58,共3页

目的探索EMT相关蛋白E-cadherin,Vimentin,α-SMA在胰腺癌组织中的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测46例胰腺癌患者手术切除的正常胰腺组织和胰腺癌组织中的E-cadherin,Vimen-tin,α-SMA的表达情况,并对不同病理分级和临床分期... 目的探索EMT相关蛋白E-cadherin,Vimentin,α-SMA在胰腺癌组织中的表达情况。方法采用免疫组织化学方法检测46例胰腺癌患者手术切除的正常胰腺组织和胰腺癌组织中的E-cadherin,Vimen-tin,α-SMA的表达情况,并对不同病理分级和临床分期的标本作对比分析。结果胰腺癌与正常组织之间E-cadherin阳性表达率有显著性差异(P<0.05),正常组织显著高于胰腺癌组织;胰腺癌与正常组织之间Vim-entin,a-SMA阳性表达率有显著性差异(P<0.05),胰腺癌组织显著高于正常组织。三种蛋白的表达与胰腺癌的组织分化程度、临床分期密切相关(P<0.05)。结论 EMT现象是人体内胰腺腺癌恶性进展的重要原因。这种细胞属性的变化现象与肿瘤的侵袭和预后密切相关。 展开更多

关键词 上皮细胞间质转化态 胰腺癌 E-钙粘素 波形蛋白 a-平滑肌动蛋白

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翼状胬肉相关致病因子的研究进展 被引量：8

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作者 陈杨 魏超群 +1 位作者 弥禹 葛红岩 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2022年第7期1133-1136,共4页

翼状胬肉(ptergium)是在多种因素和因子的共同作用下形成的眼表疾病,主要的发病机制与紫外线照射及辐射后所引起的一系列改变有关,具体过程至今仍不明确。血管内皮生长因子(VEGF)升高、炎症反应加重、新生血管的产生、氧化应激反应、上... 翼状胬肉(ptergium)是在多种因素和因子的共同作用下形成的眼表疾病,主要的发病机制与紫外线照射及辐射后所引起的一系列改变有关,具体过程至今仍不明确。血管内皮生长因子(VEGF)升高、炎症反应加重、新生血管的产生、氧化应激反应、上皮-间质细胞转化(EMT)、抑癌基因失活等是目前公认的翼状胬肉发病的原因,但各个因素及因子的具体作用过程仍有待研究。探究其具体相关因素及其在翼状胬肉发病过程中的作用,有助于为临床诊治提供靶向治疗方案及有效预防措施。 展开更多

关键词 翼状胬肉 上皮-间质细胞转化 血管内皮生长因子 转化生长因子-Β P53

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特发性肺纤维化发病机制的研究进展 被引量：8

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作者 李小龙 王荣丽 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第32期110-112,共3页

特发性肺纤维化(IPF)是一种以渐进性肺间质纤维化为主要特征的疾病,其病理改变为肺泡上皮细胞损伤、成纤维细胞大量聚集及细胞外基质沉积。肺泡上皮反复损伤与修复是IPF的起始,反复损伤的肺泡上皮细胞一方面分泌大量的转化生长因子β1(T... 特发性肺纤维化(IPF)是一种以渐进性肺间质纤维化为主要特征的疾病,其病理改变为肺泡上皮细胞损伤、成纤维细胞大量聚集及细胞外基质沉积。肺泡上皮反复损伤与修复是IPF的起始,反复损伤的肺泡上皮细胞一方面分泌大量的转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板源性生长因子等细胞因子,诱导成纤维细胞聚集及肌成纤维细胞灶的形成,另一方面发生上皮细胞间质转化(EMT),通过以TGF-β1为主的多种复杂途径调控IPF的发生、发展。IPF的发病机制涉及多种学说,包括损伤修复学说、EMT学说、自噬不足、端粒缩短及表观遗传学改变(DNA甲基化、组蛋白去乙酰化)等。 展开更多

关键词 特发性肺纤维化 损伤修复学说 上皮细胞间质转化学说 自噬不足 端粒缩短 表观遗传学改变

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整合素连接激酶与肺纤维化的研究进展

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作者 何坤 张秀峰 《中国实用医药》 2011年第25期243-244,共2页

肺间质纤维化（pulmonary interstitial fibrosis，PF）是一种原因不明、发病机制尚不清楚并且缺乏确实有效治疗手段的致命性弥漫性肺间质疾病。其病理过程包括肺组织的炎性损伤、组织结构破坏及随后发生肺间质细胞积聚的组织修复过程... 肺间质纤维化（pulmonary interstitial fibrosis，PF）是一种原因不明、发病机制尚不清楚并且缺乏确实有效治疗手段的致命性弥漫性肺间质疾病。其病理过程包括肺组织的炎性损伤、组织结构破坏及随后发生肺间质细胞积聚的组织修复过程。在这一过程中，肺炎症细胞、肺泡上皮细胞、和肺间质细胞都可以分泌细胞因子、炎性介质等生物活性物质，从而促进成纤维细胞的迁移和增生以及间质胶原的增生，亦可以增加肺上皮细胞间质转化（（epithelial—mesenchymal transition，EMT）的形成和积累。 展开更多

关键词 肺纤维化 整合素连接激酶 弥漫性肺间质疾病 上皮细胞间质转化 肺间质纤维化 肺泡上皮细胞 分泌细胞因子 生物活性物质

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