腺苷A2a受体对肺泡上皮细胞钠离子通道α亚基的上调作用 被引量：1

1

作者 邓旺 李长毅 王导新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1293-1295,共3页

目的研究腺苷A2a受体对肺泡上皮A549细胞钠离子通道α亚基(epithelial sodium channelα-subunit,α-ENaC)表达变化的影响,探讨其在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中的作用。方法不同剂量(0、0.1、1、10、100μmol/L)和不同时间(0、1、4... 目的研究腺苷A2a受体对肺泡上皮A549细胞钠离子通道α亚基(epithelial sodium channelα-subunit,α-ENaC)表达变化的影响,探讨其在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中的作用。方法不同剂量(0、0.1、1、10、100μmol/L)和不同时间(0、1、4、8、24、48h)的腺苷A2a受体激动剂CGS-21680干预A549细胞,分别用RT-PCR和Western blot检测α-ENaC mRNA和蛋白表达情况。结果①不同剂量CGS-21680作用A549细胞8h后,α-ENaC mRNA和蛋白表达水平从0.1μmol/L开始增加,并与CGS-21680剂量呈正相关(mRNA表达:r=0.959,P<0.01;蛋白表达:r=0.988,P<0.01),与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。②100μmol/LCGS-21680作用A549细胞1h后,α-ENaC mRNA和蛋白表达水平开始增加,4h后与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论激动腺苷A2a受体能上调α-ENaC的表达,有益于急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的预后。 展开更多

关键词 腺苷A2A受体 上皮细胞钠离子通道α亚基 成人呼吸窘迫综合征

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白细胞介素-4对肺泡上皮细胞钠离子通道β亚基调控研究 被引量：1

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作者 张维 王导新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期1367-1369,共3页

目的研究不同时间不同剂量白细胞介素-4(IL-4)作用下A549细胞钠离子通道β亚基(β-ENaC)的变化情况。方法以A549细胞为模型,在含IL-4培养基不同时间不同剂量培养下,分别用免疫印迹法以及RT-PCR法测定β-ENaC蛋白表达以及mRNA变化转录情... 目的研究不同时间不同剂量白细胞介素-4(IL-4)作用下A549细胞钠离子通道β亚基(β-ENaC)的变化情况。方法以A549细胞为模型,在含IL-4培养基不同时间不同剂量培养下,分别用免疫印迹法以及RT-PCR法测定β-ENaC蛋白表达以及mRNA变化转录情况。结果IL-4可以呈剂量、时间依赖性的下调β-ENaC的表达,这种蛋白表达的下调作用是通过基因调控起作用的。IL-4(1 ng/ml)培养A549细胞3 h,β-ENaC蛋白及mRNA开始下降,在6 h后出现显著差异(P<0.05),不同剂量的IL-4(0.1、10、100 ng/ml)培养A549细胞12 h在0.1 ng/ml时即出现显著的差异(P<0.05)。结论IL-4可通过下调β-ENaC的表达抑制肺泡水肿液清除能力,从而不利于急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的预后。 展开更多

关键词 白细胞介素-4 钠离子通道β亚基 急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征

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上皮钠离子通道对大鼠破骨细胞分化和骨吸收功能的影响 被引量：6

3

作者 虎松艳 金小冬 +7 位作者 张豪 陈珺 杨国柱 王晓东 唐璐 陆幸妍 卢丽 李青南 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1148-1152,共5页

目的本文探讨上皮钠离子通道(ENa C)对破骨细胞功能和活性的影响。方法采用大鼠巨噬细胞集落刺激因子和核转录因子-κB受体活化因子配体诱导大鼠骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞。以1.5×104密度接种到12孔板,查随机表分3孔为1组,分... 目的本文探讨上皮钠离子通道(ENa C)对破骨细胞功能和活性的影响。方法采用大鼠巨噬细胞集落刺激因子和核转录因子-κB受体活化因子配体诱导大鼠骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞。以1.5×104密度接种到12孔板,查随机表分3孔为1组,分为4组:Control组和不同浓度阿米洛利(Ami,ENa C的抑制剂)组。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色进行阳性破骨细胞鉴定;将破骨细胞和骨片共同培养,测定骨吸收陷窝的数目;用RT-PCR技术分析破骨细胞标志酶基因组织蛋白酶K(CK)的表达。结果不同浓度的Ami处理破骨细胞后,TRAP染色阳性破骨细胞减少,抑制破骨细胞的形成和骨吸收,而且降低破骨细胞特异性基因CK的表达。结论本次实验在细胞水平证明ENa C在破骨细胞上的表达并且调控破骨细胞的分化和骨吸收,说明ENa C可能参与破骨细胞的功能调节,提示破骨细胞可能存在一个与ENa C相关调节的新途径,为骨代谢的研究提供了一个新思路。 展开更多

关键词 破骨细胞 上皮钠离子通道 阿米洛利 免疫荧光

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成骨细胞上皮钠离子通道研究进展 被引量：2

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作者 陈珺 卢丽 李青南 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2010年第6期459-462,458,共5页

骨质疏松是一种最为常见的代谢性骨病,其发病机制比较复杂,且与成骨细胞的功能息息相关。上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)蛋白是细胞膜上的一种糖基化大分子蛋白,现已发现其结构、功能异常与许多疾病的发生和发展有关... 骨质疏松是一种最为常见的代谢性骨病,其发病机制比较复杂,且与成骨细胞的功能息息相关。上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)蛋白是细胞膜上的一种糖基化大分子蛋白,现已发现其结构、功能异常与许多疾病的发生和发展有关。骨骼中的钠离子占体内总钠量的一半,钠离子的平衡受上皮钠离子通道(ENaC)调节。研究表明,成骨细胞上有ENaC的表达,其对成骨细胞的增殖、分化及功能均有影响,可能与骨质疏松发病机理有关。本文综述了近年来成骨细胞上皮钠离子通道的相关研究进展。 展开更多

关键词 上皮钠离子通道 成骨细胞 骨质疏松

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Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p调控上皮钠离子通道减轻高氧性急性肺损伤 被引量：5

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作者 冯帮海 任颖聪 +4 位作者 袁平 刘君亚 王炜鑫 覃松 陈淼 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期2222-2230,共9页

目的探讨Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)来源外泌体(exosomes,Exos)-miR-21-5p(miR-21)调控上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)对高氧性急性肺损伤(hyperoxia-induced acute lung injury,HALI... 目的探讨Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)来源外泌体(exosomes,Exos)-miR-21-5p(miR-21)调控上皮钠离子通道(epithelial sodium channel,ENaC)对高氧性急性肺损伤(hyperoxia-induced acute lung injury,HALI)的保护效应及可能机制。方法6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠60只,其中20只使用差速贴壁离心法提取原代AEC-Ⅱ并培养,采用密度梯度离心法提取AEC-Ⅱ来源外泌体,透射电镜鉴定外泌体形态。余40只小鼠按随机数字表法分为(n=10):常氧(Control)组、高氧(HALI)组、高氧+Exos-miR-21(HALI+miR-21)组和高氧+siPI3K+Exos-miR-21(HALI+siPI3K+miR-21)组。除Control组外,余3组小鼠暴露于95%O 2的自制高氧饲养箱中构建HALI模型。72 h后RT-qPCR检测肺组织及外泌体miR-21表达;HE染色观察肺组织形态学变化并行肺损伤病理评分,计算肺组织湿/干质量比及肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC);可见分光光度法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)水平;荧光分光光度法测定活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平;Western blot检测PTEN、AKT、p-AKT、PI3K及α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与PTEN靶向关系。结果原代AEC-Ⅱ提取的囊泡状物质经鉴定为外泌体,外泌体中miR-21表达显著增高(P<0.05),PTEN为miR-21靶基因。与Control组比较,HALI组HE染色可见肺组织肺间隔增厚、大量炎症细胞浸润及肺泡萎陷,HALI组、HALI+miR-21组及HALI+siPI3K+miR-21组肺损伤病理评分、肺湿/干质量比、MDA及PTEN蛋白表达升高(P<0.05);SOD、T-AOC、AFC、miR-21及p-Akt、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达水平降低(P<0.05),以HALI+siPI3K+miR-21组最明显。与HALI组比较,HALI+miR-21组HE染色可见肺间隔增厚、炎症细胞浸润明显减少,肺泡萎陷显著减轻;肺损伤病理评分、肺湿/干质量比、MDA及PTEN蛋白表达显著降低(P<0.05);而SOD、T-AOC、AFC、miR-21及p-Akt、α-ENaC、β-ENaC、γ-ENaC蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p通过靶向PTEN激活PI3K/AKT信号通路调控上皮钠离子通道减轻高氧性急性肺损伤。 展开更多

关键词 Ⅱ型肺泡上皮细胞 外泌体 微小RNA-21-5p 上皮钠离子通道 高氧性急性肺损伤 PI3K/Akt信号通路

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钠离子对成骨细胞的影响及其与上皮钠通道的关系 被引量：13

6

作者 卢丽 吴亮 +3 位作者 陈珺 林晓慧 万超 李青南 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1871-1874,共4页

探讨不同浓度钠离子（Na ＋ ）对大鼠成骨细胞（Ob）成骨功能的影响，及其与上皮钠通道（ENaC）的相关性。方法 Ob经1×10 -4 ~1 mol/L Na ＋ 处理后，检测Ob的增殖和分化情况。再从中选3个浓度Na ＋ 处理Ob，RT-PCR测定成骨功能相... 探讨不同浓度钠离子（Na ＋ ）对大鼠成骨细胞（Ob）成骨功能的影响，及其与上皮钠通道（ENaC）的相关性。方法 Ob经1×10 -4 ~1 mol/L Na ＋ 处理后，检测Ob的增殖和分化情况。再从中选3个浓度Na ＋ 处理Ob，RT-PCR测定成骨功能相关基因（Cbfa1，OPN，OC）及ENaC-α的表达变化。结果 在1×10 -4 ~1 mol/L范围内，Na ＋ 对Ob具有双向影响作用，与对照组相比低浓度Na ＋ 明显促进Ob分化，升高Na＋浓度则抑制Ob分化，而Na＋对Ob的增殖无影响。RT-PCR示：Na ＋ 对Ob中 Cbfa1、OPN 及 OC 表达同样具有双向作用，低浓度促进表达，高浓度抑制；并且 ENaC-α mRNA 在 Na ＋ 调控下的变化情况与成骨功能相关基因及Ob分化活性的变化相一致。 结论 Na ＋ 可直接影响Ob的分化及成骨功能相关基因的表达，而且 Na ＋ 对Ob的影响作用与ENaC相关。 展开更多

关键词 钠离子 成骨细胞 上皮钠离子通道

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雄激素剥夺对油酸诱导急性肺损伤肺泡上皮钠离子通道表达的研究 被引量：2

7

作者 张虹 刘海波 +1 位作者 周兰 周发春 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1240-1244,共5页

目的:观察通过手术去势方法降低大鼠体内雄激素水平对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome,ALI/ARDS)肺组织中肺泡上皮钠离子通道α亚基(epithelial sodium channel alpha-subunit,EN... 目的:观察通过手术去势方法降低大鼠体内雄激素水平对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome,ALI/ARDS)肺组织中肺泡上皮钠离子通道α亚基(epithelial sodium channel alpha-subunit,ENaC-α)的影响。方法:20只Sprague-Dawley(SD)大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、假手术模型组、去势手术模型组4组,每组5只。以尾静脉注射油酸(oleic acid,OA)0.15 ml/kg复制ALI/ARDS模型,去势手术模型组和假手术模型组分别于造模前2周(14 d)行开腹双侧睾丸切除术或开腹但不行睾丸切除。于造模成功6 h后行开胸手术,测定肺湿重/干重比值(wet/ery,W/D),用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot测定肺组织中ENaC-αmRNA及蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组比较,所有模型组大鼠肺组织病理学改变明显且W/D比值明显增加(模型组与正常对照组,P=0.000;假手术模型组与正常对照组,P=0.000;去势手术模型组与正常对照组,P=0.000)、ENaC-α的mRNA和蛋白表达明显降低(ENaC-αmRNA:模型组与正常对照组,P=0.000;假手术模型组与正常对照组,P=0.000;去势手术模型组与正常对照组,P=0.001;ENaC-α蛋白:模型组与正常对照组,P=0.000;假手术模型组与正常对照组,P=0.000;去势手术模型组与正常对照组,P=0.045)。(2)与模型组相比,去势手术组大鼠肺组织病理学改变较减轻,W/D比值明显降低(P=0.000)、ENaC-α的mRNA和蛋白表达明显上调(ENaC-αmRNA:去势手术模型组与模型组,P=0.002;ENaC-α蛋白:去势手术模型组vs.模型组,P=0.030)。结论:在ALI/ARDS发生时,雄激素本身对急性肺损伤时肺泡上皮细胞中ENaC-α的表达具有抑制作用,降低体内雄激素水平可以提高肺组织中ENaC-α的mRNA和蛋白的表达,降低肺组织水肿程度。 展开更多

关键词 雄激素 肺泡上皮钠离子通道α亚基 急性肺损伤 急性呼吸窘迫综合征

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β2肾上腺素受体基因、α上皮细胞钠通道基因和G蛋白β3亚基基因联合变异与维吾尔族人群高血压的关系 被引量：2

8

作者 刘文娟 杨文清 +2 位作者 王蕾 王笑峰 甘子明 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2009年第6期446-450,共5页

目的:探索β2肾上腺素受体(ADRB2)基因G1023A,α上皮细胞钠通道(ENaC)基因G2139A和G蛋白β3亚基(GNB3)基因C825T多态性与新疆维吾尔族人群原发性高血压的关系。方法:采用人群为基础的病例对照研究,高血压组269例,正常血压组229例。用聚... 目的:探索β2肾上腺素受体(ADRB2)基因G1023A,α上皮细胞钠通道(ENaC)基因G2139A和G蛋白β3亚基(GNB3)基因C825T多态性与新疆维吾尔族人群原发性高血压的关系。方法:采用人群为基础的病例对照研究,高血压组269例,正常血压组229例。用聚合酶链反应一限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测ADRB2基因G1023A基因型、ENaC基因G2139A基因型和GNB3基因C825T基因型,分析其与与维尔族人群高血压的关系。结果:高血压组和正常血压组的ADRB2基因型分布分别为GG:0.202、0.147;AG:0.266、0.339;AA:0.532、0.513,差异无统计学意义(P=0.119)。高血压组和血压正常组的ENaC基因型分布分别为GG:0.249、0.266;AG:0.472、0.476;AA:0.281、0.260,差异无统计学意义(P=0.840);高血压组和血压正常组的GNB3基因型分布分别为CC:0.346、0.293;CT:0.394、0.437;TT:0.260、0.271,差异无统计学意义(P=0.418)。用Logistic回归模型校正年龄、性别、吸烟、体重指数、腰围、臀围、血糖、甘油三酯、总胆固醇及胆红素之后,亦未发现三个位点与原发性高血压有关。进一步分析未发现三个位点对维吾尔族高血压的发病有交互作用(P=0.080)。结论:在新疆维吾尔人群中,未发现ADRB2基因G1023A、ENaC基因和GNB3基因多态性单独或联合作用在高血压发病中起作用。 展开更多

关键词 高血压 维吾尔族 β2肾上腺素受体基因 α上皮细胞钠通道基因 G蛋白β3亚基基因

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胰岛素通过PI3K信号通路对肺泡上皮钠通道β亚基表达的调控 被引量：1

9

作者 邓旺 赵燕 +1 位作者 何婧 王导新 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期233-237,共5页

目的:探讨胰岛素对肺泡上皮细胞A549上皮钠通道β亚基(β-ENaC)表达的影响,阐明胰岛素调控β-ENaC的可能信号途径。方法:体外培养肺泡上皮细胞A549,将细胞分为对照组、胰岛素组[分别以不同浓度(2、20和200mU·L-1)胰岛素作用不同时... 目的:探讨胰岛素对肺泡上皮细胞A549上皮钠通道β亚基(β-ENaC)表达的影响,阐明胰岛素调控β-ENaC的可能信号途径。方法:体外培养肺泡上皮细胞A549,将细胞分为对照组、胰岛素组[分别以不同浓度(2、20和200mU·L-1)胰岛素作用不同时间(30、60和120min)]和LY294002组(胰岛素+LY294002)。采用RT-PCR和Western blotting法测定各组细胞中β-ENaC mRNA和蛋白表达水平以及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,给予不同浓度(2、20和200mU·L-1)胰岛素作用后,β-ENaC mRNA和蛋白表达水平随浓度增加而增加(P<0.05)。与对照组比较,给予不同浓度(2、20和200mU·L-1)的胰岛素作用后,p-Akt蛋白表达水平随浓度增加而增加(P<0.05)。与对照组比较,胰岛素作用不同时间(30、60和120min)后,β-ENaC mRNA和蛋白表达水平随时间延长而增加(P<0.05)。与胰岛素组比较,LY294002组β-ENaC mRNA和蛋白表达及p-Akt蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:激活PI3K/Akt通路能上调β-ENaC mRNA和蛋白表达水平,有益于肺水肿液的清除。 展开更多

关键词 肺泡上皮钠离子通道β亚基 磷酯酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 信号通路 胰岛素

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氯离子转运通道在人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中的作用

10

作者 梁巍 郑雅娟 辛华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期1-4,F0002,共5页

目的:探讨丁脲胺或DNDS作用下视网膜色素上皮(RPE)细胞顶端膜和基底膜上氯离子转运通道对RPE吞噬功能的影响,阐明氯离子转运通道参与PRE吞噬作用的机制。方法:利用微孔滤膜培养系统体外培养极性化单层RPE细胞,以荧光包被的乳胶株作为吞... 目的:探讨丁脲胺或DNDS作用下视网膜色素上皮(RPE)细胞顶端膜和基底膜上氯离子转运通道对RPE吞噬功能的影响,阐明氯离子转运通道参与PRE吞噬作用的机制。方法:利用微孔滤膜培养系统体外培养极性化单层RPE细胞,以荧光包被的乳胶株作为吞噬标记物,建立RPE细胞吞噬模型,分别以1、5、10、50、100、500和1000μmol.L-1丁脲胺,以及0.01、0.10、0.50、1.00、3.00、5.00和10.00mmol.L-1DNDS作用RPE细胞6h后,应用流式细胞仪定量检测RPE细胞吞噬指数。结果:不同浓度丁脲胺作用于RPE细胞顶端膜或基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05);0.01和0.10μmol.L-1DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数与对照组比较差异无显著性(P>0.05),而0.50、1.00、3.00、5.00、10.00mmol.L-1的DNDS作用于RPE细胞基底膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数降低(P<0.05或P<0.01),并随着浓度的增加,吞噬指数逐渐降低;但同样浓度的DNDS作用于RPE细胞顶端膜,RPE细胞对乳胶株的吞噬指数无明显改变(P>0.05)。结论:顶端膜的丁脲胺敏感性Na+-K+-2Cl-协同转运载体不参与RPE吞噬乳胶株的过程,而基底膜的DNDS敏感性Cl-/HCO3-交换蛋白及氯离子通道在DNDS作用后,对人RPE细胞非特异性吞噬过程发挥抑制作用。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮细胞 吞噬作用 钠钾氯化物协同转运子 阴离子交换蛋白 离子通道

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FOXO1对急性肺损伤小鼠肺泡上皮钠通道的调控作用及其机制 被引量：7

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作者 何婧 王导新 邓旺 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1155-1161,I0003,共8页

目的:探讨叉头框蛋白O1(FOXO1)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤小鼠肺泡上皮钠通道(ENaC)的调控作用,并阐明其可能的作用机制。方法:20只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和LPS组,每组10只。经相应处理后分别留取标本,HE染色观察2组小鼠肺组... 目的:探讨叉头框蛋白O1(FOXO1)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤小鼠肺泡上皮钠通道(ENaC)的调控作用,并阐明其可能的作用机制。方法:20只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和LPS组,每组10只。经相应处理后分别留取标本,HE染色观察2组小鼠肺组织病理形态表现,RT-PCR和Western blotting法检测2组小鼠肺组织中α亚基ΕΝαC(αENaC)mRNA表达水平及磷酸化FOXO1(pFOXO1)表达水平。培养肺泡上皮A549细胞,分别进行基因干预,使A549细胞过表达或沉默FOXO1基因,RT-PCR法检测αENaC mRNA表达水平。A549细胞分为对照组、胰岛素组、胰岛素+PI3K抑制剂组和胰岛素+AKT抑制剂组,分别干预后收集细胞,Western blotting法检测各组A549细胞中pFOXO1(Ser256)蛋白表达水平,RT-PCR法检测各组A549细胞中αENaC mRNA表达水平,免疫荧光法检测FOXO1在细胞中的定位情况。结果:与对照组比较,LPS组小鼠肺组织病理评分明显升高(P<0.05),肺组织中pFOXO1(Ser256)和αENaC蛋白表达水平降低(P<0.05),二者呈正相关关系(r=0.703,P<0.05);与对照组比较,过表达FOXO1组A549细胞中αENaC mRNA表达水平降低(P<0.05),沉默FOXO1组αENaC mRNA表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,胰岛素组A549细胞中pFOXO1(Ser256)蛋白和αENaC mRNA表达水平升高(P<0.05),pFOXO1主要分布于细胞质中,而胰岛素+PI3K抑制剂和胰岛素+AKT抑制剂组A549细胞中αENaC mRNA和pFOXO1蛋白表达水平低于胰岛素组P<0.05)。结论:FOXO1磷酸化失活后由细胞核穿梭至细胞浆,对αENaC的抑制作用减弱,从而上调αENaC表达。 展开更多

关键词 叉头框蛋白O1 上皮细胞钠离子通道 胰岛素 急性肺损伤 急性呼吸窘迫综合征

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NF-κB对纤溶酶调控小鼠集合管M-1细胞γ-ENaC表达的影响

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作者 张文馨 李蕾 +3 位作者 葛皖粤 许在平 王运来 许钒 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第4期723-731,共9页

目的:探讨纤溶酶对小鼠肾皮质集合管上皮细胞(M-1细胞)上皮钠离子通道γ亚基(epithelial sodium channel γ-subunit, γ-ENaC)激活的影响及核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)的作用。方法:本研究以小鼠M-1细胞为对象,设计三个实... 目的:探讨纤溶酶对小鼠肾皮质集合管上皮细胞(M-1细胞)上皮钠离子通道γ亚基(epithelial sodium channel γ-subunit, γ-ENaC)激活的影响及核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)的作用。方法:本研究以小鼠M-1细胞为对象,设计三个实验部分:第一部分将细胞分为对照组、纤溶酶组、纤溶酶+BAY 11-7082(NF-κB抑制剂)组以探讨纤溶酶对炎症因子及γ-ENaC的作用;第二部分分为对照组、BAY 11-7082组、BAY 11-7082+纤溶酶组,用BAY 11-7082预先处理M-1细胞,以探讨纤溶酶调控γ-ENaC表达中NF-κB的作用;第三部分分为对照组、纤溶酶组、白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)组,用纤溶酶或IL-6处理M-1细胞,以探讨NF-κB下游的IL-6对γ-ENaC的调控作用。药物干预后,ELISA法检测各组细胞培养上清液中IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)和IL-1β水平,Western blot检测磷酸化核因子κB抑制蛋白α (phosphorylated inhibitor of nuclear factor-κB α,p-IκBα)/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65和γ-ENaC蛋白水平,免疫荧光染色检测γ-ENaC膜上分布情况。结果:与对照组相比,10 mg/L纤溶酶作用24 h后细胞上清液IL-6、TNF-α、MCP-1和IL-1β含量上升(n=3,P<0.01),p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65和γ-ENaC蛋白表达升高(n=5,P<0.01),膜上γ-ENaC分布增加。与纤溶酶组相比,纤溶酶与BAY 11-7082共培养后各组细胞IL-6、TNF-α、MCP-1和IL-1β含量下降(n=3,P<0.05或P<0.01),p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65和γ-ENaC蛋白表达降低(n=5,P<0.05或P<0.01),膜上γ-ENaC分布减少。单纯给予BAY 11-7082组与对照组相比,p-NF-κB p65/NF-κB p65表达降低(n=5,P<0.05或P<0.01),γ-ENaC没有明显变化,再给予纤溶酶刺激后,p-IκBα/IκBα、p-NF-κB p65/NF-κB p65及γ-ENaC表达升高(n=5,P<0.05),膜上分布增加。NF-κB下游中的IL-6干预24 h后细胞γ-ENaC蛋白表达增加(n=5,P<0.05),γ-ENaC膜上分布增加。结论:纤溶酶调控小鼠M-1细胞γ-ENaC表达与NF-κB激活后引起炎症因子异常升高有关。 展开更多

关键词 上皮钠离子通道γ亚基 纤溶酶 核因子ΚB 炎症因子

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醛固酮对成骨细胞增殖分化及成骨相关基因表达的影响 被引量：4

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作者 陈珺 谢芳梅 +5 位作者 林鑫 林思慧 杨国柱 卢丽 陆幸妍 李青南 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1489-1493,共5页

目的探讨外源性醛固酮对大鼠原代培养的成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性及成骨相关基因表达的影响及其机制。方法采用酶消化法体外培养大鼠成骨细胞,CCK-8试剂盒和AKP试剂盒分别检测成骨细胞的增殖和碱性磷酸酶活性情况,半定量RT-PCR和Wes... 目的探讨外源性醛固酮对大鼠原代培养的成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性及成骨相关基因表达的影响及其机制。方法采用酶消化法体外培养大鼠成骨细胞,CCK-8试剂盒和AKP试剂盒分别检测成骨细胞的增殖和碱性磷酸酶活性情况,半定量RT-PCR和Western blotting检测成骨细胞骨形成活性相关标志物和上皮钠离子通道(α-ENaC)基因的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,醛固酮浓度为1×10^(-2)~1 μmol/L范围内可以促进成骨细胞增殖,浓度为1×10^(-3) μmol/L和10 μmol/L时对成骨细胞增殖无显著影响;但醛固酮在1×10^(-3)~10 μmol/L浓度范围内对成骨细胞碱性磷酸酶活性均无明显影响。与对照组相比,醛固酮浓度为1×10^(-2)~1 μmol/L时均能上调成骨细胞中成骨细胞骨形成活性相关标志物I型胶原蛋白(Coll-Ia)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)和α-ENaC基因的mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05)。结论醛固酮(1×10^(-2)~1 μmol/L)能明显促进成骨细胞增殖并上调成骨细胞骨形成活性相关标志物的表达,且同时上调ENaC基因的表达,提示ENa C可能是醛固酮调节成骨细胞功能的作用靶点之一。 展开更多

关键词 醛固酮 成骨细胞 成骨功能 上皮钠离子通道

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