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组蛋白甲基转移酶SMYD2对巨噬细胞-肌成纤维细胞转化促进糖尿病肾病肾纤维化的影响
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作者 杨元 彭睿 +9 位作者 刘泽莹 邹雪 李霞 元辉雄 龙合花 王腾 岑明杰 郭兵 朱丽英 刘丽荣 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期239-249,共11页
目的:探讨组蛋白甲基转移酶SMYD2(SET and MYND domain containing 2)在巨噬细胞转化促进糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾纤维化中的作用。方法:(1)C57BL/6J小鼠给予55 mg/kg链脲佐菌素腹腔注射,建立糖尿病模型。实验分为正... 目的:探讨组蛋白甲基转移酶SMYD2(SET and MYND domain containing 2)在巨噬细胞转化促进糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)肾纤维化中的作用。方法:(1)C57BL/6J小鼠给予55 mg/kg链脲佐菌素腹腔注射,建立糖尿病模型。实验分为正常对照(normal control,NC)组(n=5)、糖尿病20周组(n=5)、糖尿病28周组(n=5)和糖尿病36周组(n=5)。生化分析仪检测小鼠血糖(blood glucose,BG)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)和Masson染色观察小鼠肾组织形态学及纤维化改变情况;Western blot检测SMYD2、组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(histone H3 lysine 4 trimethylation,H3K4me3)、精氨酸酶1(arginase-1)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、I型胶原(collagen type I,Col I)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的蛋白水平;免疫荧光染色观察F4/80、α-SMA、SMYD2、CD86、CD206和CD163蛋白的定位及表达情况。(2)体外培养小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),分为正常糖(normal glucose,NG)+敲减对照(negative control siRNA,siNC)组、高糖(high glucose,HG)+siNC组、NG+SMYD2敲减(SMYD2 siRNA,siSMYD2)组和HG+siSMYD2组。Western blot检测相关蛋白表达情况。结果:(1)与NC组相比,糖尿病28周和糖尿病36周组的BG、SCr和BUN均增高(P<0.05),肾组织可见肾小管萎缩、扩张及胶原纤维沉积,H3K4me3、arginase-1、MMP9、Col I和α-SMA蛋白表达上调(P<0.05)。CD86、CD206、CD163和F4/80主要表达在肾小管间质巨噬细胞,α-SMA主要表达在肾间质,SMYD2主要表达在肾小管上皮细胞及肾间质。(2)与NG+siNC组相比,HG+siNC组SMYD2、H3K4me3、arginase-1、CD163、Col I、α-SMA、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和p-Smad3蛋白水平显著升高(P<0.05);敲减SMYD2后上述指标水平降低(P<0.05)。结论:SMYD2可通过巨噬细胞-肌成纤维细胞转化促进DKD肾纤维化,其机制可能与调控TGF-β1/Smad3信号通路有关。 展开更多
关键词 甲基转移酶 SMYD2蛋白 糖尿病肾病 纤维 巨噬细胞 纤维细胞
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周细胞向肌成纤维细胞转化在组织纤维化中的研究进展
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作者 唐蕾 史俊(综述) 王朝(审校) 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第8期873-879,共7页
周细胞是具有产生细胞外基质作用的一个功能独特的细胞亚群,被证实是环绕微血管的间充质起源的收缩细胞。肌成纤维细胞的活化、增殖被认为是纤维化病理进程中的核心因素。随着遗传谱系追踪和单细胞RNA测序等技术的应用,周细胞-肌成纤维... 周细胞是具有产生细胞外基质作用的一个功能独特的细胞亚群,被证实是环绕微血管的间充质起源的收缩细胞。肌成纤维细胞的活化、增殖被认为是纤维化病理进程中的核心因素。随着遗传谱系追踪和单细胞RNA测序等技术的应用,周细胞-肌成纤维细胞转化被证实是肌成纤维细胞活化的新途径。文章主要就周细胞-肌成纤维细胞转化参与组织纤维化过程中涉及的多条信号转导途径以及代谢重编程、细胞外囊泡、内皮祖细胞旁分泌、周细胞-内皮细胞间通讯、蛋白质糖基化反应等干预靶点进行综述。 展开更多
关键词 纤维 细胞 细胞-纤维细胞转化 细胞外基质
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5-Aza-CdR通过抑制大鼠原代肾肌成纤维细胞Epo基因启动子高甲基化逆转PMT
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作者 袁玲 王蕾 +2 位作者 程鹏 江茜 崔晓雪 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第1期79-85,共7页
目的观察去甲基化剂5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对大鼠原代肾肌成纤维细胞的周细胞肌成纤维细胞转化(pericyte-myofibroblast transition,PMT)的影响。方法取5-Aza-CdR 250 ng/mL处理大鼠原代肾肌成纤维细胞... 目的观察去甲基化剂5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对大鼠原代肾肌成纤维细胞的周细胞肌成纤维细胞转化(pericyte-myofibroblast transition,PMT)的影响。方法取5-Aza-CdR 250 ng/mL处理大鼠原代肾肌成纤维细胞72 h,采用焦磷酸测序方法检测促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)基因启动子甲基化程度,采用免疫荧光与Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMΑ)、血小板源性生长因子受体β(platelet-derived growth factor receptorβ,PDGFRβ)和DNA甲基转移酶3a(DNA methyltransferase 3a,Dnmt3a)的蛋白表达水平,并检测细胞上清液EPO水平。结果与对照组相比,5-Aza-CdR处理能显著降低Dnmt3a的表达和Epo启动子高甲基化水平,并随之降低了肌成纤维细胞中α-SMA的表达及α-SMA与PDGFRβ的表达比例,同时,5-Aza-CdR处理提高了细胞上清液中EPO的水平。结论5-Aza-CdR可通过抑制大鼠原代肾肌成纤维细胞Epo启动子高甲基化逆转PMT。 展开更多
关键词 细胞-纤维细胞转化 EPO DNA甲基化 5-氮杂-2’脱氧胞苷 DNA甲基转移酶
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肌成纤维细胞在牙龈纤维化疾病中致病作用的研究进展
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作者 霍雅茹 刘敏 《口腔医学研究》 北大核心 2025年第1期12-15,共4页
在口腔、皮肤、心脏、肝脏、肾脏等多数器官,大多慢性进行性疾病的最终结果都是组织纤维化或瘢痕形成,肌成纤维细胞几乎是所有器官纤维化的关键效应细胞。在牙龈纤维化疾病中,肌成纤维细胞推动纤维化进程,在该过程中过度合成、沉积和重... 在口腔、皮肤、心脏、肝脏、肾脏等多数器官,大多慢性进行性疾病的最终结果都是组织纤维化或瘢痕形成,肌成纤维细胞几乎是所有器官纤维化的关键效应细胞。在牙龈纤维化疾病中,肌成纤维细胞推动纤维化进程,在该过程中过度合成、沉积和重塑细胞外基质蛋白,特别是Ⅰ型胶原,导致牙龈正常生理外形及结构改变,进而影响患者咀嚼、美观等功能。本文结合近年来国内外相关研究进展,讨论了在以家族性牙龈纤维瘤病、药物性牙龈肥大为代表的牙龈纤维化疾病中,肌成纤维细胞的生物学特点、来源、特性、转分化的调控过程及结局,了解转化生长因子β介导的成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化及调控过程。作为牙龈纤维化的关键效应细胞,肌成纤维细胞是抗纤维化治疗重要的靶标,因此其对于发现和开发有前途的抗纤维化候选药物至关重要。 展开更多
关键词 纤维 纤维细胞 药物性牙龈肥大 家族性牙龈纤维瘤病
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艾拉莫德抑制巨噬细胞向肌成纤维细胞转分化减缓慢性移植肾间质纤维化
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作者 杨铖铖 倪斌 +3 位作者 郑明 谭若芸 顾民 沈百欣 《南京医科大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第5期619-626,共8页
目的:探讨艾拉莫德(iguratimod,IGT)在慢性移植肾间质纤维化中的作用和机制。方法:构建并鉴定了同种异体小鼠慢性移植肾失功(chronic renal allograft dysfunction,CAD)模型,并使用IGT灌胃干预,通过组织学染色评估移植肾损伤及纤维化程... 目的:探讨艾拉莫德(iguratimod,IGT)在慢性移植肾间质纤维化中的作用和机制。方法:构建并鉴定了同种异体小鼠慢性移植肾失功(chronic renal allograft dysfunction,CAD)模型,并使用IGT灌胃干预,通过组织学染色评估移植肾损伤及纤维化程度,通过免疫荧光染色、Western blot及qRT⁃PCR等方法检测IGT干预后的CAD小鼠移植肾中纤维化指标和巨噬细胞向肌成纤维细胞转分化(macrophage⁃to⁃myofibrolast transition,MMT)的变化。使用转化生长因子(transforming growth factor,TGF)⁃β诱导小鼠原代骨髓来源巨噬细胞(bone marrow⁃derived macrophage,BMDM)发生MMT并使用IGT干预,转录组测序用于探索IGT调节MMT的下游分子机制。结果:同种异体小鼠CAD模型出现了显著的移植肾间质纤维化,免疫荧光染色显示MMT相关标志物在移植肾中显著上调,IGT可显著减轻16周时CAD小鼠的移植肾间质纤维化,并减少MMT细胞的数量。体外实验表明IGT可显著减缓TGF⁃β诱导的MMT,细胞转录组测序结果表明IGT可能通过诱导铁死亡相关通路抑制MMT、减轻纤维化。结论:IGT可能通过诱导铁死亡相关通路抑制MMT并减轻移植肾间质纤维化。这可能为IGT在同种异体肾移植中的应用提供新见解。 展开更多
关键词 艾拉莫德 慢性移植肾失功 巨噬细胞纤维细胞转分化 间质纤维 铁死亡
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温阳通络方调控类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞上皮间质转化的机制研究
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作者 田亚丹 李冬艳 +2 位作者 罗定霞 宋佳欣 吴晶金 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第8期167-170,I0001,I0002,共6页
目的研究温阳通络方对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synovial cells,FLS)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用,探讨其作用机制。方法CCK-8实验筛选温阳通络方最... 目的研究温阳通络方对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synovial cells,FLS)上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的调控作用,探讨其作用机制。方法CCK-8实验筛选温阳通络方最佳含药血清浓度;将细胞分为正常关节成纤维样滑膜细胞(human fibroblast-like synovial cells,HFLS)组、人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(human rheumatoid arthritis synovial fibroblasts,MH7A)组、MH7A+温阳通络方含药血清(medicated serum,MS)组,Western Blot检测EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和波形蛋白(vimentin,VM)的表达;CCK-8实验检测各组细胞活性;Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果96 h时15%温阳通络方含药血清干预后MH7A细胞活性最接近正常细胞的一半,即半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50);MH7A细胞中E-cad的表达水平降低(P<0.05)、FN和VM的表达水平升高(P<0.05),细胞的活性、迁移和侵袭能力增强(P<0.05);温阳通络方含药血清干预MH7A细胞后,细胞中E-cad的表达水平升高(P<0.05)、FN和VM的表达水平降低(P<0.05),细胞的活性、迁移和侵袭能力减弱(P<0.05)。结论温阳通络方可能通过抑制MH7A的EMT现象,抑制滑膜细胞的活性、迁移和侵袭,从而发挥对RA的治疗作用。 展开更多
关键词 温阳通络方 类风湿关节炎 纤维样滑膜细胞 上皮间质转化
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C6TSEDRVAJZ小分子化合物组合诱导人胎盘成纤维细胞分化为上皮样细胞
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作者 代振佳 高群伟 +6 位作者 应梦娇 王澳 洪娟 王春景 郭俣 刘长青 刘高峰 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期322-330,共9页
目的利用小分子化合物组合将人胎盘成纤维细胞(HPFs)重编程为化学诱导上皮样细胞(ciEP-Ls)。方法常氧条件下培养HPFs细胞,通过免疫荧光、PCR和染色体核型分析鉴定HPFs。生理性低氧条件下(37℃,5%O2),HPFs在含有小分子化合物C6TSEDRVAJZ(... 目的利用小分子化合物组合将人胎盘成纤维细胞(HPFs)重编程为化学诱导上皮样细胞(ciEP-Ls)。方法常氧条件下培养HPFs细胞,通过免疫荧光、PCR和染色体核型分析鉴定HPFs。生理性低氧条件下(37℃,5%O2),HPFs在含有小分子化合物C6TSEDRVAJZ(CHIR99021、616452、TTNPB、SAG、EPZ5676、DZNep、Ruxolitinib、VTP50469、Afuresertib、JNK-IN-8、EZM0414)的培养基中进行诱导,诱导期间每日定时观察细胞形态。通过免疫荧光法、Western blotting和PCR技术检测上皮细胞标志物的表达水平。对诱导细胞进行染色体核型分析,并计算诱导效率。结果HPFs免疫荧光结果显示,表达成纤维表面标记物CD34和Vimentin,不表达上皮表面标志物;PCR结果显示,成纤维特异性基因S100A4、COL1A1高表达,且具有人正常二倍体核型。在低氧条件下诱导1 d后,部分HPFs细胞形态发生改变,由多突的纺锤形变成圆形或多边形,具有ciEP-Ls形态特征。诱导处理完成第4天,免疫荧光和Western blotting结果显示,诱导细胞能够高表达上皮细胞特征性标志物E-Cadherin和Lin28A(P<0.05)。PCR结果表明,细胞显著表达上皮标志物Smad3,GLi3,PAX8,WT1,KRT19和KRT18,而成纤维细胞表面标记物表达均下调,且诱导细胞具有人正常二倍体核型,HPFs重编程效率为(64.53±2.80)%~(68.10±3.60)%。结论小分子组合C6TSEDRVAJZ在低氧条件下成功将HPFs诱导为ciEP-Ls,且具有较高的诱导效率。 展开更多
关键词 化学重编程 小分子诱导 纤维细胞 上皮细胞
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牛磺熊去氧胆酸通过调节内质网应激抑制转化生长因子β1所诱导的心肌成纤维细胞纤维化 被引量:4
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作者 张含林 林辉 郭航远 《中国心血管杂志》 北大核心 2024年第1期56-64,共9页
目的探讨牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的心肌成纤维细胞(CFs)活化的作用及相关机制,为TUDCA治疗糖尿病心肌纤维化提供新的治疗目标。方法提取原代SD乳鼠CFs和心肌细胞,通过免疫荧光法鉴定CFs的纯度。分别将... 目的探讨牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)对转化生长因子β1(TGF-β1)所诱导的心肌成纤维细胞(CFs)活化的作用及相关机制,为TUDCA治疗糖尿病心肌纤维化提供新的治疗目标。方法提取原代SD乳鼠CFs和心肌细胞,通过免疫荧光法鉴定CFs的纯度。分别将高糖培养下的CFs用不同时间的TGF-β1干预,用Western blot检测内质网应激(ERS)通路相关蛋白和纤维化指标的表达,探讨TGF-β1对CFs活化及ERS相关通路的影响。用Western blot检测CFs和心肌细胞内同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1(Herpud1)的表达情况。通过沉默Herpud1的表达及用Transwell和Western blot检测沉默Herpud1后CFs纤维化指标的表达,探讨Herpud1在TGF-β1诱导的CFs活化中的作用。用CCK-8检测不同浓度的TUDCA处理下CFs的活力。用免疫荧光和Western blot检测TUDCA对TGF-β1诱导的CFs中Herpud1、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录激活因子6(ATF6)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)和Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达的影响。为进一步明确Herpud1在TUDCA抑制CFs活化中的作用,用Western blot检测过表达Herpud1后相关蛋白的表达情况。结果在成功构建CFs纤维化模型的基础上,TGF-β1能够诱导CFs活化及ERS通路相关蛋白的表达;Herpud1在CFs中的表达高于心肌细胞;敲除Herpud1可抑制TGF-β1所诱导的CFs活化;TUDCA能显著降低TGF-β1诱导的CFs中GRP78、ATF6、α-SMA、Vimentin和CollagenⅠ的表达水平;此外,过表达Herpud1还可逆转TUDCA对TGF-β1诱导的CFs活化的抑制。结论下调Herpud1基因的表达是TUDCA抑制TGF-β1诱导的CFs纤维化的机制之一。 展开更多
关键词 纤维细胞 Herpud1 牛磺熊去氧胆酸 转化生长因子Β1 纤维
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托法替布通过JAK/STAT3通路抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化 被引量:2
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作者 何珊 陈炘 +5 位作者 程琦 朱灵江 张培玉 童淑婷 薛静 杜燕 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期505-511,共7页
目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提... 目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提供理论依据。方法:(1)体外培养人胚胎肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblast 1,HFL-1),设立6个组,分别为DMSO空白对照组、TGF-β1诱导组、TGF-β1联合不同浓度托法替布(0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L)药物干预实验组。采用CCK-8法检测细胞活力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力。(2)采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)、蛋白免疫印迹实验(Western blotting)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL1)基因及蛋白的表达水平。应用RT-PCR和酶联免疫吸附试验检测各组白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的基因和细胞培养上清液中的蛋白水平。(3)在不同组的细胞培养基中加入DMSO载体对照,以1.0μmol/L和5.0μmol/L的托法替布预培养30 min,然后加入TGF-β1处理1 h、6 h和24 h。以Western blotting检测Smad2/3、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白磷酸化水平。结果:(1)托法替布抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞活力及迁移能力。(2)与空白对照组相比,TGF-β1诱导组HFL-1的α-SMA、COL1A1和FN1基因表达显著上调(P<0.05)。5.0μmol/L托法替布干预组的α-SMA基因表达与TGF-β1诱导组相比显著下调(P<0.05)。0.5~5.0μmol/L托法替布各干预组与TGF-β1诱导组相比均可抑制FN1基因表达(P<0.05)。各干预组与TGF-β1诱导组相比,COL1A1基因的表达无明显变化。(3)Western blotting结果提示,TGF-β1诱导组细胞α-SMA、FN1蛋白水平较对照组显著增加(P<0.05),COL1A1表达未见明显差异。托法替布不同浓度干预组与TGF-β1诱导组相比,α-SMA蛋白表达均有下降,其中2.0μmol/L和5.0μmol/L干预组与诱导组间的差异有统计学意义(P<0.05)。托法替布不同浓度干预组的FN1蛋白水平均有下降,但与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。各干预组的COL1A1蛋白表达与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。(4)TGF-β1诱导48 h,HFL-1细胞中IL-6基因及培养上清液中IL-6的表达水平较对照组显著升高,各浓度托法替布干预组与TGF-β1诱导组相比均有所降低。TGF-β1诱导1 h、6 h和24 h,STAT3蛋白磷酸化水平增加,托法替布预刺激抑制了6 h时Smad2/3的磷酸化水平,在1 h、6 h和24 h时均抑制了STAT3的磷酸化水平。结论:托法替布能抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞向肌成纤维细胞方向转化,其机制可能是通过抑制Smad2/3经典通路以及抑制TGF-β1所诱导的STAT3磷酸化,从而对肺纤维化疾病进展发挥保护作用。 展开更多
关键词 托法替布 纤维 纤维细胞 纤维细胞 STAT3转录因子
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癌症相关成纤维细胞在转移前生态位形成中的作用
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作者 王紫婷 杨贯彤 +4 位作者 樊建春 郜思齐 郭睿 蒋丽娜 郭亚雄 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第1期127-138,共12页
随着全球癌症发病率的不断上升,肿瘤转移已成为导致大多数癌症患者死亡的主要原因。转移前生态位(pre-metastatic niche,PMN)的形成为肿瘤细胞的定植和转移提供了理想的微环境,极大地促进了肿瘤的扩散。在这一过程中,癌症相关成纤维细胞... 随着全球癌症发病率的不断上升,肿瘤转移已成为导致大多数癌症患者死亡的主要原因。转移前生态位(pre-metastatic niche,PMN)的形成为肿瘤细胞的定植和转移提供了理想的微环境,极大地促进了肿瘤的扩散。在这一过程中,癌症相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)因其在肿瘤进展中的多重作用而备受关注。CAFs通过重塑细胞外基质、诱导上皮间质转化、刺激新生血管生成以及调控肿瘤免疫微环境,推动了PMN的建立和肿瘤细胞的侵袭性行为。这些作用不仅加速了肿瘤的转移进程,还为肿瘤的免疫逃逸创造了条件。本文综述了CAFs在肿瘤转移中的核心机制和功能,探讨了其在癌症研究和治疗中的潜在应用,为抗肿瘤转移策略的开发提供了新的视角与方向。 展开更多
关键词 癌症相关纤维细胞 转移前生态位 细胞外基质 上皮间质转化 肿瘤免疫
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A+肌成纤维细胞中X对肺纤维化的影响及其作用机制研究
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作者 徐丽然 李婷 +4 位作者 曹亚朋 贺雨 闫炀 袁祖贻 王胜鹏 《医用生物力学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第S01期576-576,共1页
目的特发性肺纤维化(IPF)是一种破坏性的间质性肺病。IPF的标志性特征是活化肌成纤维细胞分泌大量的细胞外基质(ECM)蛋白,导致进行性瘢痕形成和机械应力。然而,肌成纤维细胞的细胞起源和命运仍然存在争议,肌成纤细胞感知肺部机械信号的... 目的特发性肺纤维化(IPF)是一种破坏性的间质性肺病。IPF的标志性特征是活化肌成纤维细胞分泌大量的细胞外基质(ECM)蛋白,导致进行性瘢痕形成和机械应力。然而,肌成纤维细胞的细胞起源和命运仍然存在争议,肌成纤细胞感知肺部机械信号的机制尚不清楚。方法A-Cre ERT2;ROSA-mT/mG和ROSA-iDTR小鼠用于细胞谱系追踪和肌成纤维细胞的消融。构建肌成纤维细胞特异性X和Y/Z敲除小鼠,以研究X和Y/Z在博来霉素诱导的肺纤维化中的作用。使用人IPF样本进一步证实A和X在肌成纤维细胞中的相关性。结果A是肌成纤维细胞的可靠和独特的标志物,而损伤后切除A+肌成纤维细胞可以改善肺纤维化。X在A+肌成纤维细胞中高度表达,在A+肌成纤维细胞的机械活化和肺纤维化的发展中起着至关重要的作用。X的条件性缺失通过抑制肌成纤维细胞的活化和增殖而显著抑制肺纤维化。X的缺失导致肌动蛋白组织的破坏和Y/Z核定位的阻止,从而将肌成纤维细胞从增殖状态转变为应激和凋亡状态。此外,肌成纤维细胞特异性Y/Z缺失完全概括了A-Cre ERT2-X-KO小鼠的保护表型。结论本研究证明肺肌成纤维细胞是一种表达A的细胞类型,并且X介导的机械传导对肺肌成纤维细胞的激活至关重要。表达A的细胞是治疗肺纤维化疾病的新选择。 展开更多
关键词 纤维细胞 纤维 间质性肺病 瘢痕形 博来霉素 增殖状态 细胞起源 细胞类型
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黄芪协同红花-葶苈子抑制内皮细胞旁分泌改善心肌纤维化机制 被引量:2
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作者 王咏 王悠草 +2 位作者 王丽丽 马度芳 李晓 《世界中医药》 北大核心 2025年第3期429-439,共11页
目的:观察黄芪协同红花-葶苈子抑制心肌纤维化的作用及机制。方法:结扎前降支制备心肌梗死后心力衰竭大鼠,红花-葶苈子(C-L)、黄芪(HR)与黄芪-红花-葶苈子(A-C-L)干预,马松染色检测纤维化程度,蛋白质印迹法检测血管性血友病因子(νWF)和... 目的:观察黄芪协同红花-葶苈子抑制心肌纤维化的作用及机制。方法:结扎前降支制备心肌梗死后心力衰竭大鼠,红花-葶苈子(C-L)、黄芪(HR)与黄芪-红花-葶苈子(A-C-L)干预,马松染色检测纤维化程度,蛋白质印迹法检测血管性血友病因子(νWF)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),蛋白质印迹法及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、蜗牛家族转录抑制因子1(Snail)。构建缺氧心脏微血管内皮细胞(HCMEC),C-L、HR及A-C-L含药血清干预,免疫荧光(IF)检测血小板内皮细胞黏附分子(CD31)和α-SMA。A-C-L含药血清联合TGF-β1激活剂(SRI-011381)干预HCMEC,IF观察内皮细胞间充质转化,蛋白质印迹法和RT-PCR检测TGF-β1/Snail表达。提取HCMEC上清液干预心脏成纤维细胞(CF),酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测上清液结缔组织生长因子(CTGF),检测CF增殖及胶原合成。结果:A-C-L抑制心力衰竭大鼠心肌纤维化效果最佳。C-L、HR及A-C-L均上调心力衰竭大鼠心肌和缺氧内皮细胞CD31、vWF及下调α-SMA表达,又以A-C-L效果最佳。联合应用SRI-011381后A-C-L抑制内皮间充质转化作用减弱。A-C-L抑制HCMEC中TGF-β1/Snail表达、下调CTGF分泌。提取A-C-L干预的HCMEC上清液培养CF,其CF活化和胶原合成低于HCMEC上清液培养的CF。结论:黄芪协同红花-葶苈子抑制心肌纤维化,其机制,抑制内皮间充质转化,下调内皮细胞中TGF-β1/Snail,以旁分泌方式抑制成纤维细胞增殖和胶原合成。 展开更多
关键词 纤维 内皮细胞间充质转化 旁分泌 黄芪 红花-葶苈子药对 转化生长因子-β1/Snail通路 协同 纤维细胞 心脏微血管内皮细胞
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高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞向肌成纤维细胞转化 被引量:2
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作者 王东 吴永贵 齐向明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第6期847-854,共8页
目的 探讨高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞向肌成纤维细胞转化的作用与机制。方法 正常糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)分别处理人肾小管上皮细胞(HK2)48 h,收集上清液提取并鉴定外泌体;观察人急性单核细胞白血病细... 目的 探讨高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞向肌成纤维细胞转化的作用与机制。方法 正常糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)分别处理人肾小管上皮细胞(HK2)48 h,收集上清液提取并鉴定外泌体;观察人急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)巨噬细胞是否吞噬PKH67标记的外泌体;通过检测诱导性氮氧化物合酶(iNOS)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、甘露醇受体(CD206)的表达,以确定分化为M1和M2型巨噬细胞的最佳浓度及时间点;激光共聚焦检测CD206与α-SMA、IV型胶原(Col-IV)、纤维连接蛋白(FN)的荧光共表达。qRT-PCR与ELISA法测定转化生长因子受体-β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-6水平。Western blot测定TGF-β1、Smad3和p-Smad3蛋白表达。结果 上清液离心获取标本后检测到白细胞分化抗原群63(CD63)和肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)阳性、内质网分子伴侣蛋白(Calnexin)阴性,确认为外泌体并且纯度较高;THP-1巨噬细胞能够吞噬各组外泌体;各组外泌体刺激的最佳浓度为40 mg/L、最佳时间为96 h。高糖外泌体刺激24 h巨噬细胞以M1型为主,96 h则以M2型为主。与正常糖组相比,高糖组M2型巨噬细胞CD206、α-SMA、Col-IV、FN的荧光表达均增强,TGF-β1、IL-10的表达和分泌水平均上调(均P<0.05),IL-6的表达和分泌则下调(P<0.05),TGF-β1、p-Smad3蛋白表达也显著升高(均P<0.05)。结论 高糖环境下HK2分泌的外泌体能够诱导M2型巨噬细胞向肌成纤维细胞转化,其机制可能与TGF-β1/Smad3信号通路的激活相关。 展开更多
关键词 外泌体 巨噬细胞 纤维细胞
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黄芩素对TGF-β_1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响 被引量:21
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作者 董丽霞 蒋小岗 +3 位作者 李梦姣 毛新妍 侯燕 顾振纶 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期406-412,共7页
目的观察黄芩素(黄芩苷元,baicalein,BAE)对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法体外培养人胚胎肺成纤维细胞(WI-38),TGF-β1诱导后,通过Western blot检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-S... 目的观察黄芩素(黄芩苷元,baicalein,BAE)对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响。方法体外培养人胚胎肺成纤维细胞(WI-38),TGF-β1诱导后,通过Western blot检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)相关蛋白表达的变化,同时采用免疫组化法观察细胞形态变化。TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞WI-38成肌成纤维细胞模型,再给予不同剂量的黄芩素,检测转化过程中相关蛋白α-SMA、collagen 1、Smad 2、p-Smad 2的表达变化。结果与模型组相比,黄芩素2 000nmol.L-1~125 nmol.L-1对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化有抑制作用。黄芩素组以剂量依赖性下调α-SMA(P<0.01)、collagen 1(P<0.01)、Smad 2(P<0.05)、p-Smad 2(P<0.05)蛋白的表达。结论黄芩素对TGF-β1体外诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化过程中有一定的抑制作用,该作用与下调α-SMA,抑制细胞内胶原合成及干预TGF-β/Smads信号通路有关。 展开更多
关键词 黄芩素 纤维细胞 纤维细胞 纤维 Α-SMA WI-38 TGF-β1
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补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏肌成纤维细胞异常转化的机制研究 被引量:8
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作者 曲怡 李欣欣 +1 位作者 王建波 张立德 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期2203-2205,共3页
目的:通过观察补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏TGF-β_1/Smads通路信号分子的表达作用,阐释补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏肌成纤维细胞异常转化,延缓肾脏病理损伤的作用。方法:将20只雄性盐抵抗大鼠(dahl salt resistant rat,SS)... 目的:通过观察补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏TGF-β_1/Smads通路信号分子的表达作用,阐释补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏肌成纤维细胞异常转化,延缓肾脏病理损伤的作用。方法:将20只雄性盐抵抗大鼠(dahl salt resistant rat,SS)随机分为正常对照组,中药对照组,20只雄性dahl盐敏感大鼠(dahl salt sensitive rat,DS)随机分为模型组和中药治疗组,每组10只。高盐饲料喂养12 d后,中药对照组和中药治疗组予以补阳还五汤灌胃治疗,每日1次,共治疗5周。治疗结束后取大鼠左肾组织检测TGF-β_1Smad2 Smad7及α-SMA的mRNA表达和P-Smad2蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组TGF-β_1Smad2和α-SMA的mRNA表达升高(P<0.05),Smad7mRNA表达降低(P<0.05),P-Smad2蛋白表达升高(P<0.05);补阳还五汤治疗后,与模型组比较中药治疗组TGF-β_1Smad2和α-SMA的mRNA表达降低(P<0.05);Smad7mRNA表达升高(P<0.05),P-Smad2蛋白表达降低(P<0.05)。结论:补阳还五汤可能是通过调节肾脏TGF-β_1/Smads通路相关信号分子的表达抑制肌成纤维细胞异常转化,延缓肾脏病理损伤。 展开更多
关键词 补阳还五汤 肾脏 上皮细胞 纤维细胞
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转化生长因子β1诱导皮肤成纤维细胞向肌成纤维细胞表型转分化的机制研究 被引量:5
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作者 熊杰 夏照帆 +2 位作者 吕开阳 王钰 韩姝 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1175-1179,共5页
目的:探讨TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞(FB)向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。方法:将野生型和Smad3基因敲除(KO)型小鼠皮肤FB分为9组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Sma... 目的:探讨TGF-β1诱导皮肤成纤维细胞(FB)向肌成纤维细胞转分化的可能途径和调控机制。方法:将野生型和Smad3基因敲除(KO)型小鼠皮肤FB分为9组:野生型FB组、野生型FB+TGF-β1组、野生型FB+SB431542组、野生型FB+SB431542+TGF-β1组、Smad3KOFB组、Smad3KOFB+TGF-β1组、野生型FB+SB203580+TGF-β1组、野生型FB+PD98059+TGF-β1组和野生型FB+SP600125+TGF-β1组。各组细胞经同步化处理后,直接以TGF-β1刺激或经上述各激酶抑制剂预处理后再以TGF-β1刺激。收集细胞,一部分以单细胞RT-PCR检测α-SMA阳性表达百分比,另一部分细胞抽提总RNA后采用实时荧光定量RT-PCR检测α-SMA的表达水平变化。结果:Smad3KO组与SB431542组的α-SMA表达水平和阳性百分比显著升高(Smad3KOFB组vs野生型FB组;野生型FB+SB431542+TGF-β1组vs野生型FB+SB431542组;Smad3KOFB+TGF-β1组vsSmad3KOFB组,P<0.01),而SB203580组和SP600125组中α-SMA表达水平和阳性百分比升高的作用则被显著抑制(野生型FB+SB203580+TGF-β1组、野生型FB+SP600125+TGF-β1组vs野生型FB+TGF-β1组,P<0.05)。结论:在TGF-β1诱导成纤维细胞向肌成纤维细胞的转分化过程中,Smad3途径介导抑制作用,而p38/MAPK、JNK/MAPK途径则介导正向调节作用。 展开更多
关键词 转化生长因子Β SMAD3 纤维细胞 纤维细胞 转分化 小鼠 基因敲除
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血小板反应蛋白1在转化生长因子β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞中的作用 被引量:10
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作者 陈玲 胡建新 +4 位作者 程晓曙 苏海 洪葵 李菊香 吴延庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期69-72,共4页
目的:观察血小板反应蛋白1(TSP-1)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠心肌成纤维细胞中的作用。方法:差速贴壁法分离新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌成纤维细胞(CFs)。MTT法测CFs生长,羟脯氨酸法测CFs胶原含量,RT-PCR法测TSP-1 mRNA表... 目的:观察血小板反应蛋白1(TSP-1)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠心肌成纤维细胞中的作用。方法:差速贴壁法分离新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌成纤维细胞(CFs)。MTT法测CFs生长,羟脯氨酸法测CFs胶原含量,RT-PCR法测TSP-1 mRNA表达。结果:TGF-β1诱导CFs TSP-1的表达呈浓度-时间依赖性增加(P<0.01)。TGF-β1(20μg/L)作用下24 h可诱导CFs增殖和胶原合成(P<0.01)。TSP-1反义寡核苷酸作用后的CFs的MTTA值、胶原含量减少(P<0.01)。结论:TGF-β1可诱导新生大鼠CFs TSP-1表达,TSP-1反义寡核苷酸对TGF-β1诱导大鼠CFs增殖与胶原合成具有明显的抑制作用,TSP-1在TGF-β1诱导大鼠心肌纤维化中可能具有重要的作用。 展开更多
关键词 凝血酶敏感蛋白1 纤维细胞 转化生长因子Β
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转化生长因子-β1通过产生活性氧诱导骨髓间充质干细胞分化为肌成纤维细胞 被引量:7
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作者 贾双双 李伟阳 +1 位作者 刘欣 李丽英 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期737-742,共6页
目的:研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导骨髓间充质干细胞(bone marrowderived mesenchymal stem cells,BMSCs)向肌成纤维细胞分化的机制。方法:采用全骨髓贴壁培养法体外培养小鼠原代BMSCs,将... 目的:研究转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导骨髓间充质干细胞(bone marrowderived mesenchymal stem cells,BMSCs)向肌成纤维细胞分化的机制。方法:采用全骨髓贴壁培养法体外培养小鼠原代BMSCs,将对数生长期的P3∽P5代BMSCs作为实验细胞,使用不同浓度的TGF-β1诱导BMSCs向肌成纤维细胞分化,并在此基础上观察加入自由基清除剂N-乙酰-半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对其分化的影响。采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测BMSCs分化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原[collagenα1(Ⅰ),Colα1(Ⅰ)]和Ⅲ型胶原[collagenα1(Ⅲ),Colα1(Ⅲ)]的表达情况。使用2’,7’-dichlorohydrofluorescein diacetate(DCFH-DA)预孵育BMSCs 15 min,然后加入TGF-β1处理不同时间,检测TGF-β1刺激下BMSCs中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生,并使用高内涵方法对BMSCs中产生的ROS进行统计分析。结果:TGF-β1可以剂量依赖地诱导BMSCs向肌成纤维细胞分化,上调α-SMA、Colα1(Ⅰ)和Colα1(Ⅲ)的表达。TGF-β1诱导BMSCs分化的作用可以被NAC阻断。TGF-β1在BMSCs中能够引起ROS的产生,且该过程迅速而短暂,当TGF-β1作用30 min时,其在BMSCs中诱发的ROS达到峰值。结论:TGF-β1通过产生ROS介导BMSCs向肌成纤维细胞分化。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 间充质细胞 细胞分化 活性氧 纤维细胞
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黄芪对心肌成纤维细胞增殖及分泌转化生长因子-β_1的影响 被引量:12
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作者 阮滔 何学华 +5 位作者 刘丽萍 袁勇华 潘丽 刘震宇 罗建红 胡沙雅 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期284-286,共3页
目的观察黄芪注射液对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞分泌转化生长因子(TGF-β1)的影响。方法体外培养乳鼠心脏成纤维细胞并制成单细胞悬液,分为对照组,黄芪低、中、高剂量组,AngⅡ组,AngⅡ联合黄芪低、中、高剂量组,分别加... 目的观察黄芪注射液对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞分泌转化生长因子(TGF-β1)的影响。方法体外培养乳鼠心脏成纤维细胞并制成单细胞悬液,分为对照组,黄芪低、中、高剂量组,AngⅡ组,AngⅡ联合黄芪低、中、高剂量组,分别加入50、100、200 mg/ml黄芪注射液,以及10-7 mol/L AngⅡ,共同培育2 d。用四甲基偶氮哇盐法测定各组细胞增殖情况,ELISA法测定培养上清TGF-β1分泌情况。结果各组间细胞增殖率差异有统计学意义(F=71.84,P=0.000);AngⅡ组的细胞增殖率明显升高,与其余各组比较均有统计学意义(P均<0.05);AngⅡ联合黄芪后,随着黄芪剂量的逐渐增加,细胞增殖率逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。各组间TGF-β1分泌量差异也有统计学意义(F=786.81,P=0.000);黄芪低、中、高剂量组的TGF-β1分泌量均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);AngⅡ组的TGF-β1分泌量为各组中最高,与其余各组比较均有统计学意义(P均<0.05);AngⅡ联合黄芪后,随着黄芪剂量的逐渐增加,TGF-β1分泌量逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AngⅡ可刺激心肌成纤维细胞增殖,促进心肌成纤维细胞分泌TGF-β1,而黄芪注射液可明显抑制AngⅡ诱导心肌成纤维细胞的增殖作用,并且减少心肌成纤维细胞分泌TGF-β1。 展开更多
关键词 黄芪 血管紧张素Ⅱ 心脏纤维细胞 转化生长因子Β1 体外研究
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TGF-β1诱导CD90^+和CD90^-眼眶成纤维细胞亚群肌成纤维细胞转化的研究 被引量:3
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作者 唐莉 罗清礼 +3 位作者 廖咏川 刘东劲 骆洪梅 唐建 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期564-567,共4页
目的依据培养的甲状腺相关性眼病患者眼眶成纤维细胞是否表达CD90分为两个亚群,分离这两个细胞亚群,分别进行肌成纤维诱导,研究它们在眼外肌纤维化中所起的不同作用。方法免疫磁分离法分离CD90+和CD90-的眼眶成纤维细胞,TGF-β1诱导CD90... 目的依据培养的甲状腺相关性眼病患者眼眶成纤维细胞是否表达CD90分为两个亚群,分离这两个细胞亚群,分别进行肌成纤维诱导,研究它们在眼外肌纤维化中所起的不同作用。方法免疫磁分离法分离CD90+和CD90-的眼眶成纤维细胞,TGF-β1诱导CD90+和CD90-成纤维细胞亚群转化为肌成纤维细胞(MFB),免疫细胞化学法检测代表MFB标志的平滑肌动蛋白α-SMA的表达情况。结果在TGF-β1的作用下,48 h后部分CD90+细胞开始出现α-SMA弱表达,4 d后大部分细胞呈阳性。CD90-细胞不表达α-SMA。结论CD90+与CD90-眼眶成纤维细胞具有不同的功能,CD90+细胞群具有转化为MFB的潜能,与眼外肌纤维化和细胞外基质积聚有关;CD90-成纤维细胞不能转化为MFB。 展开更多
关键词 甲状腺相关性眼病 眼眶纤维细胞亚群 纤维细胞 转化生长因子Β1 CD90 α平滑动蛋白
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