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芪玉三龙方通过Wnt5a/β-catenin信号通路逆转上皮—间充质转化抑制肺癌细胞侵袭和转移
1
作者 张裕 童佳兵 +1 位作者 李泽庚 高雅婷 《安徽中医药大学学报》 CAS 2024年第2期81-89,共9页
目的从细胞水平探讨芪玉三龙方是否通过Wnt5a/β-catenin信号通路抑制上皮—间充质细胞转化,抑制肺癌转移。方法将重组慢病毒转染小鼠肺癌细胞建立稳定过表达Wnt5a的细胞系,同时构建Wnt5a干扰和空载细胞株。qRT-PCR法检测Wnt5a、β-cate... 目的从细胞水平探讨芪玉三龙方是否通过Wnt5a/β-catenin信号通路抑制上皮—间充质细胞转化,抑制肺癌转移。方法将重组慢病毒转染小鼠肺癌细胞建立稳定过表达Wnt5a的细胞系,同时构建Wnt5a干扰和空载细胞株。qRT-PCR法检测Wnt5a、β-catenin mRNA的表达水平。CCK8、EdU实验检测肺癌细胞的增殖活性,Transwell实验检测肺癌细胞的迁移和侵袭能力。Western blot法检测Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin、E-cadherin、Snail蛋白表达水平。结果与对照组比较,芪玉三龙方组Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著降低(P<0.05)。Wnt5a过表达组中Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平增加(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著增强(P<0.05);Wnt5a干扰组Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力显著下降(P<0.05),明显抑制EMT的发生。芪玉三龙方处理后,Wnt5a过表达组Wnt5a、β-catenin、c-Myc、Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin、Snail表达水平下降(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖活性、侵袭和迁移能力得到抑制。结论芪玉三龙方可能通过Wnt5a/β-catenin信号通路逆转上皮—间充质转化,抑制肺癌细胞增殖和转移。 展开更多
关键词 芪玉三龙方 WNT5A Β-CATENIN 信号通路 上皮—间充质转化 增殖 迁移
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子宫内膜癌组织中GPX4、ELK1表达变化及其与上皮—间充质转化和预后的关系
2
作者 董瑞丽 毛建英 周秀枝 《山东医药》 CAS 2024年第20期16-20,共5页
目的 观察子宫内膜癌(EC)组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、含ETS域转录因子Elk1(ELK1)表达变化,分析二者与上皮—间充质转化(EMT)及预后的关系。方法 EC患者90例,留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用免疫组化法检测GPX4、ELK1蛋白,采用... 目的 观察子宫内膜癌(EC)组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、含ETS域转录因子Elk1(ELK1)表达变化,分析二者与上皮—间充质转化(EMT)及预后的关系。方法 EC患者90例,留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用免疫组化法检测GPX4、ELK1蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测GPX4 mRNA、ELK1 mRNA及EMT相关基因[E-钙黏素(E-cad)、N-钙黏素(N-cad)、碱性螺旋—环—螺旋转录因子(TWIST)mRNA]。采用Pearson相关分析法分析EC组织中GPX4 mRNA、ELK1 mRNA与E-cad mRNA、N-cad mRNA、TWIST mRNA表达的相关性。采用R软件分析癌症基因组图谱数据库中EC的RNA-seq数据,绘制Kaplan-Meier曲线,比较不同GPX4、ELK1 mRNA表达情况EC患者的预后。结果 EC组织中GPX4、ELK1蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05)。EC组织中GPX4、ELK1、N-cad、TWIST mRNA表达高于癌旁组织,E-cad mRNA表达低于癌旁组织(P均<0.05)。EC组织中GPX4 mRNA与ELK1 mRNA表达呈正相关;GPX4 mRNA、ELK1 mRNA表达与E-cad mRNA表达呈负相关,与N-cad mRNA、TWIST mRNA表达呈正相关(P均<0.05)。EC组织中GPX4、ELK1 mRNA表达与FIGO分期、组织学分级和淋巴结转移有关,FIGO分期越高、组织学分级越高、有淋巴结转移者肿瘤组织中GPX4、ELK1 mRNA表达更高(P均<0.05)。GPX4 mRNA高表达组、ELK1 mRNA高表达组5年总生存率分别低于低表达组(P均<0.05)。结论 EC组织中GPX4、ELK1呈高表达,二者表达与EMT、患者预后有关,有望成为EC患者预后评估的标志物。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 谷胱甘肽过氧化物酶4 含ETS域转录因子Elk1 上皮—间充质转化
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加入脐带间充质干细胞来源外泌体培养的肝癌细胞生物学行为变化及其机制
3
作者 金凯 李美乐 +1 位作者 谢文锴 谢裕安 《山东医药》 CAS 2024年第35期21-25,共5页
目的观察脐带间充质干细胞来源外泌体(UCMSCs-Exo)对肝癌细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将对数生长期的肝癌MHCC-97H细胞分为UCMSCs-Exo组和对照组,分别加入UCMSCs-Exo10µg/mL和等量PBS。取两组细胞,采用克隆形成... 目的观察脐带间充质干细胞来源外泌体(UCMSCs-Exo)对肝癌细胞生物学行为的影响,并探讨其可能的机制。方法将对数生长期的肝癌MHCC-97H细胞分为UCMSCs-Exo组和对照组,分别加入UCMSCs-Exo10µg/mL和等量PBS。取两组细胞,采用克隆形成实验检测克隆形成率、划痕愈合实验检测划痕愈合率、流式细胞术检测细胞凋亡率,采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测上皮—间充质转化(EMT)相关指标N-cadherin、Vimentin、Snail及凋亡相关指标Bcl-2、Bax mRNA和蛋白相对表达量,采用转录组测序的方法筛选差异表达基因并进行基因本体论(GO)功能、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路和疾病本体论(DO)富集分析。结果UCMSCs-Exo组克隆形成率低于对照组,划痕愈合率、细胞凋亡率均高于对照组(P均<0.05)。UCMSCs-Exo组N-cadherin、Vimentin、Snail、Bax mRNA及蛋白相对表达量均高于对照组,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05)。与对照组比较,UCMSCs-Exo组细胞有74个差异表达基因,其中表达上调43个、下调31个;GO功能富集分析结果显示,差异基因主要富集在细胞外区域、趋化因子受体结合、细胞增殖、代谢等方面;KEGG通路富集分析结果显示,差异表达基因主要涉及白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子(TNF)、转化生长因子β(TGF-β)和NF-κB等信号通路;DO富集分析结果显示,差异表达基因主要参与结直肠癌、肝癌、胃肠道和代谢类疾病的发生发展。结论UCMSCs-Exo可抑制肝癌细胞增殖并促进其迁移、凋亡,其机制可能与调控IL-17、TNF、TGF-β和NF-κB等信号通路而诱导肝癌细胞发生EMT有关。 展开更多
关键词 外泌体 脐带间充质干细胞 肝癌 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 上皮—间充质转化
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桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β_(1)诱导的人肾小管上皮细胞EMT的抑制作用及其机制 被引量：2
4
作者 孙妍 李清初 +3 位作者 谷翠芝 葛汝村 孟凡华 毕慧欣 《山东医药》 CAS 2022年第26期41-44,共4页
目的观察桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β_(1)诱导的人肾小管上皮细胞上皮—间充质转化(EMT)的影响,并探讨其作用机制。方法取雄性SD大鼠40只,随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组各10只,其中低剂量组、中剂量组、... 目的观察桂枝去桂加茯苓白术汤含药血清对TGF-β_(1)诱导的人肾小管上皮细胞上皮—间充质转化(EMT)的影响,并探讨其作用机制。方法取雄性SD大鼠40只,随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组和空白对照组各10只,其中低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予桂枝去桂加茯苓白术汤5、10、20 g/(kg·d)灌胃,空白对照组给予等体积生理盐水灌胃,连续7 d。腹主动脉采血,取上清。将HK-2细胞分为5组,空白对照组加入空白对照组大鼠血清;TGF-β_(1)组加入5 ng/mLTGF-β_(1);低浓度含药血清干预组先加入低剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mLTGF-β_(1);中浓度含药血清干预组先加入中剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mLTGF-β_(1);高浓度含药血清干预组先加入高剂量组大鼠含药血清后,再加入5 ng/mLTGF-β_(1);各组均培养48 h。采用Westernblotting法检测各组细胞EMT标志蛋白E-cadherin、α-SMA、Vimintin蛋白表达,MAPK信号通路相关蛋白ERK1/2、p38、JNK及其磷酸化水平,Smad3信号通路中Smad3及p-Smad3蛋白表达。结果与空白对照组比较,TGF-β_(1)组α-SMA、Vimintin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05或<0.01);与TGF-β_(1)组比较,低浓度含药血清干预组E-cadherin及α-SMA蛋白表达差异无统计学意义;中浓度及高浓度含药血清干预组α-SMA、Vimintin蛋白水平降低,E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05或<0.01)。与空白对照组比较,TGF-β_(1)组ERK1/2、JNK、P38、Smad3蛋白磷酸化水平均升高(P均<0.05);与TGF-β_(1)组比较,低浓度含药血清干预组p38蛋白磷酸化水平降低,中浓度含药血清干预组JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平降低,高浓度含药血清干预组ERK1/2、JNK、p38、Smad3蛋白磷酸化水平均降低(P<0.05或<0.01)。结论桂枝去桂加茯苓白术汤能够抑制TGF-β_(1)诱导的HK-2细胞EMT过程,其作用机制可能与抑制TGF-β_(1)/Smad3、TGF-β_(1)/MAPK信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 桂枝去桂加茯苓白术汤 上皮—间充质转化 转化生长因子β_(1) SMAD3 丝裂原激活的蛋白激酶 肾脏纤维化
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CENPM基因表达下调的前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、侵袭能力及EMT表型变化
5
作者 张磊 何泽来 《山东医药》 CAS 2024年第32期38-41,共4页
目的观察着丝粒蛋白M(CENPM)基因表达下调对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、侵袭能力及上皮—间充质转化(EMT)表型的影响。方法体外培养人前列腺癌PC3细胞并分为实验组和对照组,实验组转染CENPM shRNA,对照组转染阴性对照shRNA。采用CCK-8... 目的观察着丝粒蛋白M(CENPM)基因表达下调对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡、侵袭能力及上皮—间充质转化(EMT)表型的影响。方法体外培养人前列腺癌PC3细胞并分为实验组和对照组,实验组转染CENPM shRNA,对照组转染阴性对照shRNA。采用CCK-8法检测细胞增殖能力并计算增殖率,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况并计算凋亡率,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,采用Western blotting法检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、N-cadherin。结果实验组细胞增殖率、侵袭能力及Vimentin、N-cadherin蛋白表达低于对照组,细胞凋亡率及E-cadherin蛋白表达高于对照组(P均<0.05)。结论CENPM基因表达下调可降低前列腺癌PC3细胞的增殖和侵袭能力,抑制EMT,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 CENPM基因 前列腺肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 肿瘤浸润 上皮—间充质转化
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长链非编码RNA在胰腺癌发生发展中的作用机制研究进展
6
作者 宋孟婷 刘兴贵 《山东医药》 CAS 2024年第29期107-110,共4页
胰腺癌是临床常见的消化系统恶性肿瘤,目前对于胰腺癌发生发展的分子机制尚未阐明,临床缺乏早期诊断的生物标志物以及有效的治疗方案。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸且不具有编码蛋白质能力的RNA,主要存在于细胞核中... 胰腺癌是临床常见的消化系统恶性肿瘤,目前对于胰腺癌发生发展的分子机制尚未阐明,临床缺乏早期诊断的生物标志物以及有效的治疗方案。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸且不具有编码蛋白质能力的RNA,主要存在于细胞核中,具有很强的组织特异性。lncRNA在细胞生长、分化、代谢等生物学过程中起关键作用,lncRNA异常表达与肿瘤的发生发展有关,可作为肿瘤诊断和预后的潜在生物标志物和治疗靶点。lncRNA参与了胰腺癌的增殖、转移、侵袭、血管生成、干细胞性和化疗耐药过程,可通过诱导上皮间充质转化、调节血管生成、调控干细胞性促进胰腺癌发生发展,还可通过调控肿瘤微环境和化疗耐药参与胰腺癌的进展。lncRNA有潜力作为胰腺癌诊断和治疗、预测预后和复发的新型生物标志物。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 胰腺肿瘤 上皮—间充质转化 血管内皮生长因子 肿瘤干细胞 肿瘤微环境 耐药性
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绿原酸灌胃对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的改善作用及其机制 被引量：1
7
作者 王倩 刘宇 王荣丽 《山东医药》 CAS 2023年第18期44-49,共6页
目的观察绿原酸(CGA)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为CGA低剂量组、CGA中剂量组、CGA高剂量一组、CGA高剂量二组、模型组及对照组,每组各10只。除对照组外其余5组... 目的观察绿原酸(CGA)对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为CGA低剂量组、CGA中剂量组、CGA高剂量一组、CGA高剂量二组、模型组及对照组,每组各10只。除对照组外其余5组小鼠均气管内一次性注入博莱霉素2 mg/kg(记作第1天),第1天小鼠自然苏醒后,CGA高剂量二组小鼠继续予CGA 80 mg/kg灌胃,1次/天,连续灌胃14天;第8天时CGA低剂量组、CGA中剂量组、CGA高剂量一组分别予绿原酸20、40、80 mg/kg灌胃,1次/天,连续灌胃14天;第8天时对照组及模型组予等体积超纯水连续灌胃,1次/天,连续灌胃14天。第21天后处死各组小鼠取肺组织,观察各组小鼠肺组织肺纤维化程度(肺系数、HE染色观察肺组织形态学、Masson染色观察肺组织胶原纤维沉积及Ashcroft评分);采用免疫荧光法检测各组肺组织α⁃平滑肌肌动蛋白(α⁃SMA)表达,采用免疫组化法检测各组肺组织胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、波形蛋白(Vimentin)、转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)、Smad2/3蛋白表达,采用TBA法检测各组肺组织丙二醛(MDA)含量,采用RT⁃qPCR法检测各组肺组织E⁃钙连蛋白(E⁃cadherin)及α⁃SMA mRNA。结果与对照组相比,模型组小鼠肺组织正常结构遭到严重破坏,胶原纤维大量沉积,肺系数及Ashcroft评分高(P<0.001);与模型组相比,CGA各剂量组小鼠肺组织结构破坏程度减轻,胶原纤维沉积减少,肺系数及Ashcroft评分低(P均<0.001),且呈剂量依赖性(P<0.001);与对照组比较,模型组小鼠肺组织中MDA含量高,肺组织E⁃cadherin mRNA相对表达量低、α⁃SMA mRNA相对表达量高,肺组织α⁃SMA、Col⁃lagenⅠ、Vimentin、TGF-β1、Smads2/3蛋白相对表达量高(P均<0.001);与模型组比较,CGA各剂量组随作用浓度升高,各组小鼠肺组织α⁃SMA、CollagenⅠ、Vimentin、TGF-β1、Smads2/3蛋白相对表达量降低(P均<0.01),α⁃SMA mRNA相对表达量降低(P<0.001)、E⁃cadherin mRNA相对表达量升高(P<0.01);与CGA高剂量一组比较,CGA高剂量二组小鼠肺系数低(P<0.001),CollagenⅠ、Vimentin及TGF-β1、Smads2/3蛋白相对表达量低(P<0.001),MDA含量低(P<0.05)。结论在一定浓度范围内,CGA可改善博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化程度,且呈剂量依赖性。CGA可能通过抑制TGF-β1、Smads2/3等TGF-β1/Smads信号通路蛋白表达从而上调E⁃cadherin,下调α⁃SMA、Vimentin等标志物的表达来抑制上皮—间充质转化(EMT),改善博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化。 展开更多
关键词 绿原酸 肺纤维化 特发性肺纤维化 博莱霉素 上皮—间充质转化 TGF⁃β1/Smads信号通路
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