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TRIM44沉默对肝癌细胞增殖的影响及分子机制研究 被引量:5
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作者 张蕴蕴 田艺 +2 位作者 周伟 孙卯 吴永忠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1972-1978,共7页
目的:研究三结构域蛋白44(tripartite motif-containing protein 44,TRIM44)对肝癌细胞增殖的影响并探讨其分子机制。方法:RT-q PCR和Western blot法分别检测TRIM44在正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织,以及永生化肝细胞和肝癌细胞系中的m... 目的:研究三结构域蛋白44(tripartite motif-containing protein 44,TRIM44)对肝癌细胞增殖的影响并探讨其分子机制。方法:RT-q PCR和Western blot法分别检测TRIM44在正常肝组织、肝癌组织和癌旁组织,以及永生化肝细胞和肝癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平;在肝癌细胞中转染靶向沉默TRIM44的shRNA,Western blot实验检测对TRIM44的沉默效果;MTS实验分析TRIM44沉默对肝癌细胞活力的影响,Ed U标记实验检测TRIM44沉默对肝癌细胞DNA合成能力的影响;软琼脂集落形成实验检测TRIM44沉默对肝癌细胞锚定非依赖生长能力的影响;Western blot法检测TRIM44沉默对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)总蛋白及磷酸化水平的影响;用m TOR激活剂MHY1485处理TRIM44沉默的肝癌细胞,并通过MTS实验分析肝癌细胞的活力。结果:TRIM44的mRNA和蛋白水平在肝癌组织中高于癌旁组织和正常肝组织,TRIM44的mRNA和蛋白水平在肝癌细胞系中高于永生化肝细胞;TRIM44沉默可抑制肝癌细胞的活力、DNA合成能力及锚定非依赖生长能力;TRIM44沉默可降低m TOR磷酸化水平,MHY1485拮抗TRIM44沉默对肝癌细胞活力的抑制作用。结论:TRIM44沉默可能通过下调m TOR活性抑制肝癌细胞增殖。 展开更多
关键词 三结构域蛋白44 肝细胞癌 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
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微小RNA-758-3p在舌鳞状细胞癌细胞株中的表达及其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响 被引量:4
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作者 王瑾 张梅君 +1 位作者 李云峰 廖立凡 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期1826-1829,共4页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-758-3p在舌鳞状细胞癌细胞株中的表达,探讨其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(qPCR)检测miR-758-3p在人舌鳞状细胞癌细胞株和人正常口腔黏膜细胞细胞中的表达。脂质体转染m... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-758-3p在舌鳞状细胞癌细胞株中的表达,探讨其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(qPCR)检测miR-758-3p在人舌鳞状细胞癌细胞株和人正常口腔黏膜细胞细胞中的表达。脂质体转染miR-NC(对照组)或miR-758-3p(实验组)至舌鳞状细胞癌细胞。生物信息学预测及双荧光素酶报告基因验证miR-758-3p和靶基因的靶向关系。qPCR和Western blot检测TRIM44基因及下游蛋白的表达。流式细胞术、MTT法和Transwell迁移实验分别检测过表达miR-758-3p对细胞周期、增殖能力和迁移能力的影响。结果 miR-758-3p在舌鳞状细胞癌细胞株中呈现低表达(P<0.01)。TRIM44为miR-758-3p的直接靶基因(P<0.01)。转染miR-758-3p后的TSCCA中,TRIM44基因表达降低(P<0.05),细胞周期进展被抑制(P<0.01),增殖能力明显下降(P<0.01),细胞迁移能力受到抑制(P<0.01)。结论 miRNA-758-3p在舌鳞状细胞癌细胞株中表达降低,通过靶向干扰TRIM44基因的表达抑制舌鳞状细胞癌细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 微小RNA-758-3p 舌鳞状细胞癌 三结构域蛋白44 增殖 迁移
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