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三结构域蛋白29(TRIM29)与HBV复制及聚乙二醇干扰素α-2b抗病毒作用的关联性分析
1
作者
廖心
张宝芳
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2024年第11期2191-2200,共10页
目的三结构域蛋白29(TRIM29)参与多种疾病的发生和发展,与部分DNA和RNA病毒复制密切相关,本研究对TRIM29与HBV复制及聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)α-2b抗病毒作用之间的关系展开初步讨论。方法选取2021年10月—2022年6月在贵州医科大学附属...
目的三结构域蛋白29(TRIM29)参与多种疾病的发生和发展,与部分DNA和RNA病毒复制密切相关,本研究对TRIM29与HBV复制及聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)α-2b抗病毒作用之间的关系展开初步讨论。方法选取2021年10月—2022年6月在贵州医科大学附属医院感染内科门诊就诊的CHB患者64例,其中未治疗患者34例(CHB组),经PEG-IFN-α-2b治疗患者30例,体检中心30例健康志愿者作为对照(健康对照组)。收集志愿者年龄、性别、ALT、AST、TBil、DBil、HBV DNA和外周血单个核细胞(PBMC)。采用Hep G2和Hep G2.2.15细胞作为细胞模型,将TRIM29特异性过表达质粒或si RNA和对照转染至细胞;PEG-IFN-α-2b(0、10、100、1000和10000 U/mL)处理Hep G2细胞和Huh7细胞;TRIM29特异性si-RNA或阴性对照联合PEG-IFN-α-2b处理Hep G2.2.15细胞。ELISA检测HBs Ag和HBe Ag的浓度,q RT-PCR检测TRIM29和HBV RNA相对表达水平,Western Blot检测STING、p-TBK1、TBK1、p IRF3、IRF3、MX1和IFIT1蛋白表达情况,免疫共沉淀检测TRIM29与STING蛋白相互作用关系。正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。计数资料两组间比较采用χ2检验或Fisher检验。结果CHB组患者外周血TRIM29表达明显高于健康对照组(P<0.001)。在细胞实验中,HBs Ag、HBe Ag和HBV RNA的表达均随TRIM29表达上调而升高,随TRIM29表达下调而降低(P值均<0.05)。TRIM29与STING互相结合,并通过蛋白酶降解STING,与对照组相比,过表达TRIM29对TBK1和IRF3总蛋白无明显变化,STING、p-TBK1和p-IRF3蛋白表达水平均降低(P值均<0.05)。处理Hep G2细胞和Huh7细胞的PEG-IFN-α-2b浓度越高,TRIM29蛋白和m RNA的表达水平越低(P值均<0.01)。CHB患者在PEG-IFN-α-2b治疗期间,TRIM29 mRNA表达水平逐渐降低,且早期应答组和无应答组间差异均有统计学意义(P值均<0.05)。在等量PEG-IFN-α-2b处理下,与对照相比,敲低TRIM29后Hep G2.2.15细胞的MX1和IFIT1蛋白表达水平明显增高(P值均<0.05)。在PEG-IFN-α-2b治疗早期,CHB患者PBMC中TRIM29表达逐渐降低。结论TRIM29靶向并降解STING,通过抑制STING-TBK1-IRF3信号通路促进HBV复制。TRIM29干扰PEG-IFN-α-2b的抗病毒作用,CHB患者PBMC中TRIM29的表达水平可能作为预测患者对PEG-IFN-α-2b治疗应答的指标。
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关键词
乙型肝炎病毒
三结构域蛋白29
聚乙二醇干扰素Α
信号通路
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职称材料
转染TRIM29-siRNA对胶质瘤U87MG细胞周期和凋亡的影响
2
作者
肖华
姚声涛
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期323-328,共6页
目的:探讨转染三结构域蛋白(TRIM)家族成员三结构域蛋白29(TRIM29)-siRNA对胶质瘤U87MG细胞周期和凋亡的影响,阐明TRIM29在胶质瘤发生发展中的作用。方法:将体外培养的U87MG细胞分为对照组(未转染)、NC-siRNA组(转染阴性对照NC-siRNA)和...
目的:探讨转染三结构域蛋白(TRIM)家族成员三结构域蛋白29(TRIM29)-siRNA对胶质瘤U87MG细胞周期和凋亡的影响,阐明TRIM29在胶质瘤发生发展中的作用。方法:将体外培养的U87MG细胞分为对照组(未转染)、NC-siRNA组(转染阴性对照NC-siRNA)和TRIM29-siRNA组(转染TRIM29-siRNA),采用实时荧光定量PCR法检测3组U87MG细胞中TRIM29 mRNA表达水平,流式细胞术检测3组不同细胞周期U87MG细胞百分率和凋亡率,Western blotting法检测3组细胞中TRIM29、CyclinD1、P21、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:3组细胞中TRIM29、CyclinD1、P21、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,TRIM29 mRNA表达水平,G 0/G 1期、S期、G 2/M期U87MG细胞百分率及细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,NC-siRNA组U87MG细胞中TRIM29 mRNA和TRIM29、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达水平和G 1/G 0期、S期、G 2/M期U87MG细胞百分率及细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);与对照组和NC-siRNA组比较,TRIM29-siRNA组U87MG细胞中TRIM29 mRNA和TRIM29、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达水平以及S期和G 2/M期U87MG细胞百分率均明显降低(P<0.05),G 0/G 1期U87MG细胞百分率和细胞凋亡率以及P21、Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:转染TRIM29-siRNA可诱导U87MG细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制可能与下调CyclinD1、Bcl-2蛋白表达和上调P21、Bax蛋白表达有关。
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关键词
胶质瘤
三结构域蛋白29
细胞周期
细胞凋亡
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职称材料
题名
三结构域蛋白29(TRIM29)与HBV复制及聚乙二醇干扰素α-2b抗病毒作用的关联性分析
1
作者
廖心
张宝芳
机构
贵州医科大学临床医学院
贵州医科大学附属医院感染内科
出处
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2024年第11期2191-2200,共10页
基金
国家自然科学基金地区基金(82060114)
贵州省卫健委2023年度科技基金项目(gzwkj2023-042)
贵州省卫生健康委员会2024年科技基金项目(gzwkj2024-010)。
文摘
目的三结构域蛋白29(TRIM29)参与多种疾病的发生和发展,与部分DNA和RNA病毒复制密切相关,本研究对TRIM29与HBV复制及聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)α-2b抗病毒作用之间的关系展开初步讨论。方法选取2021年10月—2022年6月在贵州医科大学附属医院感染内科门诊就诊的CHB患者64例,其中未治疗患者34例(CHB组),经PEG-IFN-α-2b治疗患者30例,体检中心30例健康志愿者作为对照(健康对照组)。收集志愿者年龄、性别、ALT、AST、TBil、DBil、HBV DNA和外周血单个核细胞(PBMC)。采用Hep G2和Hep G2.2.15细胞作为细胞模型,将TRIM29特异性过表达质粒或si RNA和对照转染至细胞;PEG-IFN-α-2b(0、10、100、1000和10000 U/mL)处理Hep G2细胞和Huh7细胞;TRIM29特异性si-RNA或阴性对照联合PEG-IFN-α-2b处理Hep G2.2.15细胞。ELISA检测HBs Ag和HBe Ag的浓度,q RT-PCR检测TRIM29和HBV RNA相对表达水平,Western Blot检测STING、p-TBK1、TBK1、p IRF3、IRF3、MX1和IFIT1蛋白表达情况,免疫共沉淀检测TRIM29与STING蛋白相互作用关系。正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。计数资料两组间比较采用χ2检验或Fisher检验。结果CHB组患者外周血TRIM29表达明显高于健康对照组(P<0.001)。在细胞实验中,HBs Ag、HBe Ag和HBV RNA的表达均随TRIM29表达上调而升高,随TRIM29表达下调而降低(P值均<0.05)。TRIM29与STING互相结合,并通过蛋白酶降解STING,与对照组相比,过表达TRIM29对TBK1和IRF3总蛋白无明显变化,STING、p-TBK1和p-IRF3蛋白表达水平均降低(P值均<0.05)。处理Hep G2细胞和Huh7细胞的PEG-IFN-α-2b浓度越高,TRIM29蛋白和m RNA的表达水平越低(P值均<0.01)。CHB患者在PEG-IFN-α-2b治疗期间,TRIM29 mRNA表达水平逐渐降低,且早期应答组和无应答组间差异均有统计学意义(P值均<0.05)。在等量PEG-IFN-α-2b处理下,与对照相比,敲低TRIM29后Hep G2.2.15细胞的MX1和IFIT1蛋白表达水平明显增高(P值均<0.05)。在PEG-IFN-α-2b治疗早期,CHB患者PBMC中TRIM29表达逐渐降低。结论TRIM29靶向并降解STING,通过抑制STING-TBK1-IRF3信号通路促进HBV复制。TRIM29干扰PEG-IFN-α-2b的抗病毒作用,CHB患者PBMC中TRIM29的表达水平可能作为预测患者对PEG-IFN-α-2b治疗应答的指标。
关键词
乙型肝炎病毒
三结构域蛋白29
聚乙二醇干扰素Α
信号通路
Keywords
Hepatitis B Virus
Tripartite Motif-Containing Protein
29
PEG-IFNα
Signaling Pathway
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
转染TRIM29-siRNA对胶质瘤U87MG细胞周期和凋亡的影响
2
作者
肖华
姚声涛
机构
遵义医科大学附属医院脑血管病科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第2期323-328,共6页
基金
贵州省科技厅科技计划项目资助课题(黔科合平台人才〔2018〕3056号)
贵州省遵义市科技局科研基金资助课题(遵市科合HZ字〔2019〕65号)。
文摘
目的:探讨转染三结构域蛋白(TRIM)家族成员三结构域蛋白29(TRIM29)-siRNA对胶质瘤U87MG细胞周期和凋亡的影响,阐明TRIM29在胶质瘤发生发展中的作用。方法:将体外培养的U87MG细胞分为对照组(未转染)、NC-siRNA组(转染阴性对照NC-siRNA)和TRIM29-siRNA组(转染TRIM29-siRNA),采用实时荧光定量PCR法检测3组U87MG细胞中TRIM29 mRNA表达水平,流式细胞术检测3组不同细胞周期U87MG细胞百分率和凋亡率,Western blotting法检测3组细胞中TRIM29、CyclinD1、P21、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:3组细胞中TRIM29、CyclinD1、P21、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,TRIM29 mRNA表达水平,G 0/G 1期、S期、G 2/M期U87MG细胞百分率及细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,NC-siRNA组U87MG细胞中TRIM29 mRNA和TRIM29、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达水平和G 1/G 0期、S期、G 2/M期U87MG细胞百分率及细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);与对照组和NC-siRNA组比较,TRIM29-siRNA组U87MG细胞中TRIM29 mRNA和TRIM29、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达水平以及S期和G 2/M期U87MG细胞百分率均明显降低(P<0.05),G 0/G 1期U87MG细胞百分率和细胞凋亡率以及P21、Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:转染TRIM29-siRNA可诱导U87MG细胞周期阻滞和凋亡,其作用机制可能与下调CyclinD1、Bcl-2蛋白表达和上调P21、Bax蛋白表达有关。
关键词
胶质瘤
三结构域蛋白29
细胞周期
细胞凋亡
Keywords
glioma
tripartite motif containing
29
cell cycle
apoptosis
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
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被引量
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1
三结构域蛋白29(TRIM29)与HBV复制及聚乙二醇干扰素α-2b抗病毒作用的关联性分析
廖心
张宝芳
《临床肝胆病杂志》
CAS
北大核心
2024
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职称材料
2
转染TRIM29-siRNA对胶质瘤U87MG细胞周期和凋亡的影响
肖华
姚声涛
《吉林大学学报（医学版）》
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北大核心
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