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题名一步抽提酶法快速测定红细胞内还原型三磷酸吡啶核苷
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作者
张德太
宋斌
张科
胡丽华
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机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科
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出处
《医学研究生学报》
CAS
2009年第9期936-938,943,共4页
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基金
湖北省自然科学基金资助项目(批准号:2004ABA189)
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文摘
目的：还原型三磷酸吡啶核苷（NADPH）是体内重要的还原当量,测定NADPH可以评估机体的氧化-还原状态,文中旨在建立一种快速测定外周血红细胞内NADPH的方法。方法：制备红细胞溶血液,谷胱甘肽还原酶（GR）能选择性将NADPH转化成其氧化形式（NADP^＋）,而NADPH在340 nm有特异吸收峰,利用GR处理前后吸光度的变化从NADPH标准曲线上即可对还原型NADPH进行定量,在此基础上对建立的方法进行初步评价。结果：该法检测NADPH的灵敏度为0.003mmol/L,批内变异（CV）为6.93%,回收率为97.0%-104.3%,用该法制备的溶血液中NADPH可稳定180m in;随机选择25例体检健康人员用本法与传统方法测定外周血红细胞NADPH水平,结果相关性好（r=0.937 7,P〈0.01）,2种方法测定结果无显著性差异（t=0.390 3,P〉0.05）,平均偏差为0.932%,平均NADPH水平为（0.153 6±0.030 6）μmol/gHb。结论：该法简单、方便、快速,可批量用于活细胞内NADPH水平测定。
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关键词
三磷酸吡啶核苷
谷胱甘肽还原酶
氧化自由基
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Keywords
Nicotinamide adenine dinucleotide
Glutathione reductase
Oxidized radical
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分类号
Q591.3
[生物学—生物化学]
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