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噬菌体随机十二肽库淘选三水白虎汤作用于类风湿关节炎滑膜细胞的靶点研究 被引量:8
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作者 潘超 肖长虹 +3 位作者 高燕 赵晓峰 李凯芹 毕亚男 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期446-448,453,共4页
目的:利用噬菌体随机十二肽库淘选出与三水白虎汤(SSBH)作用的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)特异性结合的多肽,寻找SSBH治疗类风湿关节炎的蛋白靶点。方法:以SSBH处理过的RASFs为靶细胞,生理盐水(NS)处理的RASFs为吸附细胞,全细胞... 目的:利用噬菌体随机十二肽库淘选出与三水白虎汤(SSBH)作用的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)特异性结合的多肽,寻找SSBH治疗类风湿关节炎的蛋白靶点。方法:以SSBH处理过的RASFs为靶细胞,生理盐水(NS)处理的RASFs为吸附细胞,全细胞差减筛选法对噬菌体十二肽库进行3轮淘选,挑取单克隆、扩增纯化噬菌体,并初步鉴定噬菌体克隆的亲和力,阳性克隆测序后进行生物学分析。结果:3轮淘选后,随机挑选32个噬菌体克隆进行DNA序列分析,展示SGVYKVAYDWQH十二肽的噬菌体被富集约为56%(18/32)。结论:从噬菌体肽库筛选到SSBH作用RASFs的特异性结合短肽,并分析出相关作用蛋白。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 噬菌体随机十二肽库 三水白虎汤 全细胞差减筛选
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三水白虎汤含药血清抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞迁移的初步研究
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作者 赵晓峰 肖长虹 +3 位作者 潘超 崔明珠 李凯芹 陈恩生 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2508-2510,共3页
目的初步探讨三水白虎汤(SSBH)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)侵袭迁移的影响和可能的机制,为后续研究奠定基础。方法组织块培养法获得类风湿关节炎患者膝关节SFs并传代,培养3~5代进行实验。实验设置3组,即:生理盐水(N... 目的初步探讨三水白虎汤(SSBH)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(SFs)侵袭迁移的影响和可能的机制,为后续研究奠定基础。方法组织块培养法获得类风湿关节炎患者膝关节SFs并传代,培养3~5代进行实验。实验设置3组,即:生理盐水(NS)空白血清对照组,10%三水白虎汤含药血清组,sp600125(c-Jun氨基末端激酶信号通路抑制剂)药物血清组。细胞划痕实验观察RASFs在不同时间点的迁移状况并计算迁移率,Transwell实验分不同时间点观察侵袭情况并统计RASFs对小室膜的穿透数量;Western blot检测各组细胞整合素-β1(integrin-β1)的表达水平。结果划痕实验显示10%三水白虎汤组、sp600125组划痕后细胞迁移率较生理盐水组明显下降(P〈0.05),且sp600125组的抑制作用强于三水白虎汤组(P〈0.05);Transwell实验显示药物组穿过小室膜的细胞数明显减少(P〈0.05),sp600125组的透膜细胞数明显少于三水白虎汤组(P〈0.05);三水白虎汤组integrins-β1表达量明显下调(P〈0.05),sp600125组与生理盐水组相比差异无显著性(P〉0.05)。结论三水白虎汤对RASFs的浸润迁移有一定的抑制作用,机制可能与下调细胞迁移相关蛋白和抑制JNK信号通路有关。 展开更多
关键词 三水白虎汤 类风湿关节炎 成纤维细胞 迁移
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