钝顶螺旋藻多糖提取工艺的研究——三氯乙酸(TCA)法的正交实验优化 被引量：13

1

作者 孙远征 张学成 纪雷 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期42-47,共6页

研究了用三氯乙酸(TCA)脱除蛋白质提取钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)多糖的工艺,并以提取率、样品糖含量与蛋白含量为指标,应用正交实验设计优化了提取液pH值、提取温度及提取时间3个因素。结果表明,在提取液pH值为12、提取温度为90... 研究了用三氯乙酸(TCA)脱除蛋白质提取钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)多糖的工艺,并以提取率、样品糖含量与蛋白含量为指标,应用正交实验设计优化了提取液pH值、提取温度及提取时间3个因素。结果表明,在提取液pH值为12、提取温度为90℃及提取时间为8h的最佳条件下,所得螺旋藻多糖为白色粉末,提取率为3.10%,糖质量分数为81.79%,蛋白质量分数为0.57%。 展开更多

关键词 钝顶螺旋藻多糖 三氯乙酸(tca) 正交实验设计

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铝在三氯乙酸介质中的腐蚀动力学 被引量：1

2

作者 赵建国 鲍宇 梁作舟 《腐蚀与防护》 CAS 北大核心 2011年第11期888-891,共4页

采用失重法、极化曲线法和动力学分析,研究了铝在三氯乙酸(TCA)中的腐蚀行为,分析了TCA的浓度和温度对铝腐蚀速率的影响,导出了相应的动力学方程,求得了有关的动力学参数,测算出腐蚀电流密度和腐蚀电位等电化学参数,探讨了铝在TCA中的... 采用失重法、极化曲线法和动力学分析,研究了铝在三氯乙酸(TCA)中的腐蚀行为,分析了TCA的浓度和温度对铝腐蚀速率的影响,导出了相应的动力学方程,求得了有关的动力学参数,测算出腐蚀电流密度和腐蚀电位等电化学参数,探讨了铝在TCA中的阳极溶解机理和阴极析氢机理。结果表明,在研究浓度范围内,铝在TCA中为匀速腐蚀,受活化控制;腐蚀速率与TCA浓度的关系遵循Mathur经验式,腐蚀速率和温度的关系符合Arrhenius公式;阴极和阳极反应动力学方程在理论和试验上一致;极化曲线法和失重法结果相吻合,腐蚀过程中铝表面无钝化层产生。 展开更多

关键词 tca(三氯乙酸) 腐蚀 动力学 机理

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以醪中的丙酮酸为指标进行的发酵管理 被引量：1

3

作者 伊藤和树 佐藤时习 宋钢（译） 《中国酿造》 CAS 北大核心 2007年第10期77-77,共1页

丙酮酸是糖分解系统的中间体，是TCA循环分支点的重要有机酸。一般的酒醪在发酵初期，丙酮酸生成量最高，以后逐渐减少。若对丙酮酸含量最高的初期醪进行压榨，丙酮酸会大量转换成乙醛，形成一种木香味。后期酒醪中有少量丙酮酸，能增... 丙酮酸是糖分解系统的中间体，是TCA循环分支点的重要有机酸。一般的酒醪在发酵初期，丙酮酸生成量最高，以后逐渐减少。若对丙酮酸含量最高的初期醪进行压榨，丙酮酸会大量转换成乙醛，形成一种木香味。后期酒醪中有少量丙酮酸，能增强酒味的刚性，如果丙酮酸含量接近0mg／L，则酒味显得缠绵。佐藤等报告认为丙酮酸与酵母的增值、活性和发酵有关。为此，用吟酿酒醪为样品，测定其丙酮酸浓度、波美度、日本酒度、酒精含量、氨基酸、酵母数、ATP浓度，结果表明，丙酮酸浓度值与醪的熟成度有很大关系，是决定醪可否进行压榨的重要指标。 展开更多

关键词 丙酮酸含量 发酵管理 tca循环 ATP浓度 分解系统 酒精含量 中间体 有机酸

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适用于盐生植物的双向电泳样品制备方法 被引量：22

4

作者 李肖芳 韩和平 +2 位作者 王旭初 范鹏祥 李银心 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1848-1853,共6页

比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)、三氯乙酸沉淀法(E-TCA)和酚抽法(Phe)3种方法对盐生植物盐角草(SalicorniaeuropaeaL.)总蛋白的提取效果。3种方法分别得到579、343和535个蛋白点;TCA和E-TCA法所得图谱均存在严重的横向纹理,Phe法所得... 比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)、三氯乙酸沉淀法(E-TCA)和酚抽法(Phe)3种方法对盐生植物盐角草(SalicorniaeuropaeaL.)总蛋白的提取效果。3种方法分别得到579、343和535个蛋白点;TCA和E-TCA法所得图谱均存在严重的横向纹理,Phe法所得图谱则背景干净,基本上没有纹理。说明Phe法不仅能很好地提取盐角草蛋白,而且能有效去除样品中的盐分。对Phe法的提取液进行了改进,所得图谱背景更加清晰,蛋白点数增加。为其他盐生植物以及嗜盐微生物蛋白质的提取提供了重要参考。 展开更多

关键词 蛋白质提取 双向电泳(2-DE) 酚 三氯乙酸(tca) 盐角草

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双向电泳比较两种方法获得的水稻叶片蛋白 被引量：11

5

作者 梁书剑 张萌 +2 位作者 王巍 关双红 孙野青 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期68-71,共4页

水稻是研究单子叶植物遗传和分子生物学的模式植物,是研究植物基因组学和蛋白质组学的一个重要的生物材料。双向电泳作为蛋白质组学中蛋白分离的主要方法,其关键步骤在于蛋白质的提取。为了比较不同蛋白提取方法,采用TCA/丙酮沉淀法和Mg... 水稻是研究单子叶植物遗传和分子生物学的模式植物,是研究植物基因组学和蛋白质组学的一个重要的生物材料。双向电泳作为蛋白质组学中蛋白分离的主要方法,其关键步骤在于蛋白质的提取。为了比较不同蛋白提取方法,采用TCA/丙酮沉淀法和Mg/NP-40提取法分别提取水稻叶片总蛋白,用双向凝胶电泳分离两种方法获得的蛋白。结果表明,在双向图谱中,Mg/NP-40提取法分离的蛋白点数较多,RuBisCO大亚基的含量较低,适于分离等电点在5～7范围内、分子量在14～20kD和高于67kD的水稻叶片蛋白质;TCA/丙酮沉淀法分离的蛋白点数较少,适于分离等电点在4～5范围内、分子量在31～67kD内的水稻叶片蛋白质。 展开更多

关键词 水稻蛋白 双向电泳 tca/丙酮沉淀法 Mg/NP-40提取法

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2型猪链球菌分泌组双向电泳样品制备方法的建立 被引量：6

6

作者 张爱玲 王兴龙 +2 位作者 王英超 党源 张复贤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期776-779,共4页

为改进适用于2型猪链球菌分泌组双向电泳样品的制备方法,本研究将无蛋白细菌培养液培养2型猪链球菌,分别以超滤-冻干法、超滤-冻干-丙酮沉淀法和改良超滤-冻干-三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法富集培养物上清中的细菌分泌蛋白质,通过比较双向... 为改进适用于2型猪链球菌分泌组双向电泳样品的制备方法,本研究将无蛋白细菌培养液培养2型猪链球菌,分别以超滤-冻干法、超滤-冻干-丙酮沉淀法和改良超滤-冻干-三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法富集培养物上清中的细菌分泌蛋白质,通过比较双向电泳的结果优选最佳的样品制备方法。结果证明改良浓缩-冻干-TCA/丙酮沉淀法较为理想,蛋白丢失少、溶解性佳,所得双向电泳图谱清晰,分辨率高。因此,改良浓缩-冻干-TCA/丙酮沉淀法更适用于制备体外培养的2型猪链球菌分泌组双向电泳样品,并可以满足进一步研究的需要。 展开更多

关键词 2型猪链球菌 分泌组 双向电泳 丙酮沉淀法 tca/丙酮沉淀法

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大鼠皮质双向电泳样品制备方法的优化 被引量：5

7

作者 张永杰 徐雅飞 +1 位作者 王群 王建枝 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期121-123,共3页

目的优化大鼠皮质双向电泳样品制备方法,初步建立双向电泳条件,提高电泳分辨率和重复性。方法分别应用三氯乙酸/丙酮沉淀法、超速离心法及改良超速离心法制备电泳样品,并比较各处理方法对电泳的影响。改良超速离心法即将混合了匀浆液Ⅱ... 目的优化大鼠皮质双向电泳样品制备方法,初步建立双向电泳条件,提高电泳分辨率和重复性。方法分别应用三氯乙酸/丙酮沉淀法、超速离心法及改良超速离心法制备电泳样品,并比较各处理方法对电泳的影响。改良超速离心法即将混合了匀浆液Ⅱ的匀浆物4℃放置过夜后再进行后续处理。结果改良超速离心法所制备的电泳样品,不仅可以减少蛋白的降解,还可以增加蛋白的溶解性,从而获得分辨率较高、重复性较好的双向电泳图谱。结论改良超速离心法更适于制备来源于中枢神经系统双向电泳样品。 展开更多

关键词 皮质 双向电泳 三氯乙酸/丙酮沉淀法 超速离心法

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烟草叶片蛋白3种提取方法的比较研究 被引量：4

8

作者 韦玉梅 李佳素 +3 位作者 周杰 王春台 刘学群 程钢 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第23期4968-4970,共3页

使用酚/SDS法、Tris-HCl法及TCA/丙酮沉淀法提取烟草(Nicotiana tabacum)叶片蛋白,从终产物形式、颜色、提取时间、蛋白产量、SDS-PAGE电泳图谱等方面对3种方法进行比较,对提取的烟草叶片蛋白进行Western Blotting检测来评价3种方法提... 使用酚/SDS法、Tris-HCl法及TCA/丙酮沉淀法提取烟草(Nicotiana tabacum)叶片蛋白,从终产物形式、颜色、提取时间、蛋白产量、SDS-PAGE电泳图谱等方面对3种方法进行比较,对提取的烟草叶片蛋白进行Western Blotting检测来评价3种方法提取蛋白的效果。结果表明,与2种常用方法相比,酚/SDS法具有快速、操作方便等特点,提取的蛋白纯度高、种类丰富,可用于Western Blotting检测,是一种合适的提取植物组织中蛋白的方法。 展开更多

关键词 烟草(Nicotiana tabacum)叶片 蛋白 Tris-HCl法 tca/丙酮沉淀法 酚/SDS法

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米糠多糖脱蛋白方法及条件的优化 被引量：4

9

作者 肖云 张迎庆 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第20期5014-5017,共4页

木瓜蛋白酶结合三氯乙酸(TCA)法对米糠粗多糖进行脱蛋白,研究不同的酶添加量、酶解温度、酶解pH、酶解时间、TCA用量、TCA处理次数、TCA处理时间对米糠粗多糖脱除蛋白效果和多糖损失的影响。结果表明,米糠粗多糖脱蛋白最佳工艺条件为酶... 木瓜蛋白酶结合三氯乙酸(TCA)法对米糠粗多糖进行脱蛋白,研究不同的酶添加量、酶解温度、酶解pH、酶解时间、TCA用量、TCA处理次数、TCA处理时间对米糠粗多糖脱除蛋白效果和多糖损失的影响。结果表明,米糠粗多糖脱蛋白最佳工艺条件为酶添加量140 U/mL,酶解最适温度55℃,最适pH6.0,时间60 min;再用6%TCA作用30 min,3次重复,蛋白质脱除率为85.52%,多糖损失率为11.20%。 展开更多

关键词 米糠多糖 脱蛋白 三氯乙酸(tca)法 蛋白质脱除率 多糖损失率

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银杏小孢子叶球蛋白提取和双向电泳体系优化(Ⅱ) 被引量：4

10

作者 杨妮娜 崔彬彬 +6 位作者 孙宇涵 李允菲 王亚茹 陈欣 李云 邓高松 苗少波 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期55-57,共3页

以银杏小孢子叶球为材料,比较了不同的提取的方法、蛋白质裂解液组成、pH值范围以及不同质量浓度SDS-PAGE凝胶对双向电泳的影响。结果表明:TCA/丙酮/酚法比TCA/丙酮法更适合于银杏小孢子叶球蛋白的提取;含有硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ,可显... 以银杏小孢子叶球为材料,比较了不同的提取的方法、蛋白质裂解液组成、pH值范围以及不同质量浓度SDS-PAGE凝胶对双向电泳的影响。结果表明:TCA/丙酮/酚法比TCA/丙酮法更适合于银杏小孢子叶球蛋白的提取;含有硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ,可显著提高蛋白质的溶解性,在2-DE图谱上可分辨出748个蛋白质点,比用蛋白质裂解液Ⅰ提取的蛋白点数多620个。采用pH3-10的胶条分离时,蛋白点集中在pH=4～8,使用pH=4～7的胶条,图谱胶点重叠少,也较清晰,更利于低丰度蛋白的检出。用TCA/丙酮/酚提取蛋白,并以蛋白质裂解液Ⅱ溶解蛋白,采用pH=4～7线性17 cm的IPG胶条1,2%SDS-PAGE凝胶进行双向凝胶电泳,银杏小孢子叶球蛋白质能得到较好的分离,图谱清晰。 展开更多

关键词 银杏 tca/丙酮/酚 双向电泳技术

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2种预处理对玉米组织全蛋白质双向电泳图谱的影响 被引量：1

11

作者 安素妨 侯锦娜 +2 位作者 王艳 鲁丹丹 李保全 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第2期17-21,共5页

为探索适用于双向电泳分析的玉米组织全蛋白质提取的最佳方法,建立适用于玉米组织的全蛋白质双向电泳体系,以玉米叶片和花粉为材料,在相同条件下采用PDQuest分析,分别比较了丙酮预处理和TCA/丙酮预处理玉米组织对全蛋白质双向电泳图谱... 为探索适用于双向电泳分析的玉米组织全蛋白质提取的最佳方法,建立适用于玉米组织的全蛋白质双向电泳体系,以玉米叶片和花粉为材料,在相同条件下采用PDQuest分析,分别比较了丙酮预处理和TCA/丙酮预处理玉米组织对全蛋白质双向电泳图谱的影响。结果表明,丙酮预处理和TCA/丙酮2种预处理提取法在玉米叶片中分别检测到634个和540个清晰的蛋白质点,在玉米花粉中分别检测到410个和320个清晰的蛋白质点。丙酮预处理的玉米组织有少量拖尾,蛋白质点丰度高,适合做质谱分析;TCA/丙酮预处理的玉米组织拖尾较轻,蛋白质点丰度较低,适合做蛋白质差异分析。 展开更多

关键词 预处理 玉米 叶片 花粉 蛋白质 丙酮 三氯乙酸(tca)/丙酮

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植物蛋白质双向电泳样品制备研究进展 被引量：2

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作者 陈舒博 丁彦芬 +2 位作者 赵天鹏 吴琼 杜禹延 《天津农业科学》 CAS 2015年第6期7-10,共4页

蛋白质双向电泳是蛋白质组学的支撑技术,在微生物和动物蛋白质分析上取得较大进展,但在植物蛋白质分析上却进展不大,究其原因在于难以制备到适于双向电泳的植物蛋白质样品。笔者综述了植物蛋白质双向电泳样品制备的方法,分析各种方法的... 蛋白质双向电泳是蛋白质组学的支撑技术,在微生物和动物蛋白质分析上取得较大进展,但在植物蛋白质分析上却进展不大,究其原因在于难以制备到适于双向电泳的植物蛋白质样品。笔者综述了植物蛋白质双向电泳样品制备的方法,分析各种方法的优缺点,并提出今后植物蛋白质样品制备的研究重点。 展开更多

关键词 蛋白质双向电泳 植物蛋白质样品制备 tca/丙酮法 酚抽法

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适用于双向电泳分析的链格孢菌体蛋白提取方法的筛选 被引量：1

13

作者 李贞彪 王军节 王鹏 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期138-144,共7页

为筛选出一套适用于双向电泳分析的链格孢菌蛋白的提取方法,以该菌为研究材料,首先采用TCA-丙酮法、磷酸-TCA-丙酮法、SDS提取法和TCA/丙酮-SDS/酚抽提法分别提取菌丝蛋白质,然后进行蛋白质浓度的测定和单向SDS-PAGE试验,并建立双向电... 为筛选出一套适用于双向电泳分析的链格孢菌蛋白的提取方法,以该菌为研究材料,首先采用TCA-丙酮法、磷酸-TCA-丙酮法、SDS提取法和TCA/丙酮-SDS/酚抽提法分别提取菌丝蛋白质,然后进行蛋白质浓度的测定和单向SDS-PAGE试验,并建立双向电泳体系。结果表明:TCA/丙酮-SDS/酚抽提法所获得的蛋白质浓度为15.9 mg/mL,分别是其他三种方法所得蛋白浓度的2.64、4.61和1.43倍;SDS-PAGE图谱中形成的条带数目最多、丰度最好;所获得的2-DE图谱背景清晰干净,无明显的横纵条纹,分辨率高,可辨别的蛋白质点数为1 138个,是TCA-丙酮法所分离蛋白点数的1.89倍。由此可知,TCA/丙酮-SDS/酚抽提法为链格孢菌蛋白提取的最优方法,该方法所提取的蛋白质适用于双向电泳分析及后续的蛋白质组学研究。 展开更多

关键词 链格孢 采后病害 蛋白质提取 双向电泳 tca/丙酮-SDS/酚抽提法

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