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人类逆转录病毒的长末段重复序列(HRTVLTR)的表达与肺癌转移的关系
1
作者
连祺周
庄建良
+1 位作者
路刚
夏建川
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期1123-1128,共6页
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一 .肺腺癌很容易发生转移 .实验以 17例肺癌 (5例肺腺癌、1例腺鳞癌、7例肺鳞癌及 4例小细胞末分化癌 )的原发灶、癌旁正常组织及转移淋巴结为材料 ,采用PCR及非放射性标记的 RNA斑点杂交分析 L TR在基因组的...
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一 .肺腺癌很容易发生转移 .实验以 17例肺癌 (5例肺腺癌、1例腺鳞癌、7例肺鳞癌及 4例小细胞末分化癌 )的原发灶、癌旁正常组织及转移淋巴结为材料 ,采用PCR及非放射性标记的 RNA斑点杂交分析 L TR在基因组的存在及其表达情况 .研究结果发现 :LTR序列在 17例肺癌病人的正常组织及肿瘤组织的基因组中普遍存在 ,L TR致肺癌转移与其插入基因组中无关 ;L TR致肺癌转移与其表达增高有关 ,而且其高表达与小细胞肺癌的转移无关 ,而与非小细胞肺癌的转移密切相关 .提示 L TR参与了非小细胞肺癌的转移过程 .
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关键词
逆转录病毒
长末
段
重复
序列
基因
表达
肺癌转移
肺腺癌
MRNA差异显示技术
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职称材料
家蚕丝素重链非重复区肽段在大肠埃希菌中的优化表达
被引量：
3
2
作者
武明扬
吴悦
+1 位作者
杨高强
王建南
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期238-244,共7页
丝素重链是家蚕丝素蛋白的主要组成部分,位于丝素重链中间的核心区域由12个重复区肽段和11个非重复区肽段组成,非重复区是含有大量极性侧基的亲水性肽段。为了研究丝素重链各重复区组成序列的结构及其在生物医学领域的适用范围,需要对...
丝素重链是家蚕丝素蛋白的主要组成部分,位于丝素重链中间的核心区域由12个重复区肽段和11个非重复区肽段组成,非重复区是含有大量极性侧基的亲水性肽段。为了研究丝素重链各重复区组成序列的结构及其在生物医学领域的适用范围,需要对其进行高纯度分离。克隆了丝素重链非重复区编码基因片段f(1)及其延伸片段f(4)和f(8),并构建重组质粒在大肠埃希菌(Escherichia coli)中诱导表达融合蛋白GST-F(1)、GST-F(4)和GST-F(8)。通过三点设计法优化诱导剂IPTG浓度、起始菌密度和诱导时间,采用SDS-PAGE电泳和BCA蛋白浓度检测法定性、定量分析融合蛋白的表达水平,确定了融合蛋白GST-F(1)、GST-F(4)和GST-F(8)的最佳诱导表达条件:起始菌密度D(600 nm)值分别为1.5、1.2和0.9,诱导剂浓度分别为0.2 mmol/L、0.2 mmol/L和0.3 mmol/L,诱导时间分别为3 h、4 h和5 h。在上述最佳诱导表达条件下,3种融合蛋白的表达量达到50~90 mg/L,可满足后续研究的需求。
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关键词
家蚕丝素重链
非
重复
区肽
段
原核
表达
诱导剂浓度
起始菌密度
三
点设计法
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职称材料
抗人LOC339524单克隆抗体的制备和应用
被引量：
1
3
作者
龙宗泓
李洪
+1 位作者
陈凤
易维京
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期1693-1697,1701,共6页
目的制备特异性抗人LOC339524的单克隆抗体(m Ab)并进行应用。方法将LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的编码基因进行三段重复表达,合成的基因克隆到质粒p ET28a上。采用大肠杆菌表达系统获得LOC339524重组蛋白,以此作为免疫原免疫BALB/...
目的制备特异性抗人LOC339524的单克隆抗体(m Ab)并进行应用。方法将LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的编码基因进行三段重复表达,合成的基因克隆到质粒p ET28a上。采用大肠杆菌表达系统获得LOC339524重组蛋白,以此作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得m Ab。ELISA测定抗体特异性及效价。Western blot法鉴定LOC339524重组蛋白、免疫组织化学技术分别检测人心肌组织和H9C2细胞中LOC339524蛋白的表达,采用制备的抗体检测不同心脏病患者血清LOC339524水平。结果筛选出2株能稳定分泌抗人LOC339524蛋白m Ab的杂交瘤细胞株,5-D3和4-F8。其中5-D3效价高于4-F8,达2×106。Western blot法、免疫组织化学技术证明5-D3能特异性识别人和大鼠LOC339524蛋白,应用制备的抗体可成功检测不同心脏病患者血清LOC339524的水平。结论成功制备了特异性好、效价高的抗人LOC339524蛋白m Ab。
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关键词
LOC339524
三段重复表达抗原序列
单克隆抗体
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职称材料
题名
人类逆转录病毒的长末段重复序列(HRTVLTR)的表达与肺癌转移的关系
1
作者
连祺周
庄建良
路刚
夏建川
机构
厦门大学生命科学学院
泉州市第一医院外科
哈尔滨医科大学医学遗传学研究室
出处
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期1123-1128,共6页
文摘
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一 .肺腺癌很容易发生转移 .实验以 17例肺癌 (5例肺腺癌、1例腺鳞癌、7例肺鳞癌及 4例小细胞末分化癌 )的原发灶、癌旁正常组织及转移淋巴结为材料 ,采用PCR及非放射性标记的 RNA斑点杂交分析 L TR在基因组的存在及其表达情况 .研究结果发现 :LTR序列在 17例肺癌病人的正常组织及肿瘤组织的基因组中普遍存在 ,L TR致肺癌转移与其插入基因组中无关 ;L TR致肺癌转移与其表达增高有关 ,而且其高表达与小细胞肺癌的转移无关 ,而与非小细胞肺癌的转移密切相关 .提示 L TR参与了非小细胞肺癌的转移过程 .
关键词
逆转录病毒
长末
段
重复
序列
基因
表达
肺癌转移
肺腺癌
MRNA差异显示技术
Keywords
gene expression
long terminal repeats of human retrovirus gene
metastasis of lung cancer
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
R73－37 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
家蚕丝素重链非重复区肽段在大肠埃希菌中的优化表达
被引量：
3
2
作者
武明扬
吴悦
杨高强
王建南
机构
现代丝绸国家工程实验室(苏州)
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第2期238-244,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.51173125
51473108)
+1 种基金
江苏省自然科学基金项目(No.BK20141210
BY2015039-02)
文摘
丝素重链是家蚕丝素蛋白的主要组成部分,位于丝素重链中间的核心区域由12个重复区肽段和11个非重复区肽段组成,非重复区是含有大量极性侧基的亲水性肽段。为了研究丝素重链各重复区组成序列的结构及其在生物医学领域的适用范围,需要对其进行高纯度分离。克隆了丝素重链非重复区编码基因片段f(1)及其延伸片段f(4)和f(8),并构建重组质粒在大肠埃希菌(Escherichia coli)中诱导表达融合蛋白GST-F(1)、GST-F(4)和GST-F(8)。通过三点设计法优化诱导剂IPTG浓度、起始菌密度和诱导时间,采用SDS-PAGE电泳和BCA蛋白浓度检测法定性、定量分析融合蛋白的表达水平,确定了融合蛋白GST-F(1)、GST-F(4)和GST-F(8)的最佳诱导表达条件:起始菌密度D(600 nm)值分别为1.5、1.2和0.9,诱导剂浓度分别为0.2 mmol/L、0.2 mmol/L和0.3 mmol/L,诱导时间分别为3 h、4 h和5 h。在上述最佳诱导表达条件下,3种融合蛋白的表达量达到50~90 mg/L,可满足后续研究的需求。
关键词
家蚕丝素重链
非
重复
区肽
段
原核
表达
诱导剂浓度
起始菌密度
三
点设计法
Keywords
Fibroin heaw chain of Bombyx mori
Non-re- petitive polypeptide
Prokaryotic expression
Inducer conc- entration
Initial bacterial density
Three-point design method
分类号
S881.2 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
抗人LOC339524单克隆抗体的制备和应用
被引量：
1
3
作者
龙宗泓
李洪
陈凤
易维京
机构
第三军医大学第二附属医院麻醉科
第三军医大学临床生物化学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期1693-1697,1701,共6页
基金
重庆市自然科学基金(2013C292)
文摘
目的制备特异性抗人LOC339524的单克隆抗体(m Ab)并进行应用。方法将LOC339524蛋白的非糖基化抗原序列的编码基因进行三段重复表达,合成的基因克隆到质粒p ET28a上。采用大肠杆菌表达系统获得LOC339524重组蛋白,以此作为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得m Ab。ELISA测定抗体特异性及效价。Western blot法鉴定LOC339524重组蛋白、免疫组织化学技术分别检测人心肌组织和H9C2细胞中LOC339524蛋白的表达,采用制备的抗体检测不同心脏病患者血清LOC339524水平。结果筛选出2株能稳定分泌抗人LOC339524蛋白m Ab的杂交瘤细胞株,5-D3和4-F8。其中5-D3效价高于4-F8,达2×106。Western blot法、免疫组织化学技术证明5-D3能特异性识别人和大鼠LOC339524蛋白,应用制备的抗体可成功检测不同心脏病患者血清LOC339524的水平。结论成功制备了特异性好、效价高的抗人LOC339524蛋白m Ab。
关键词
LOC339524
三段重复表达抗原序列
单克隆抗体
Keywords
LOC339524
antigenic sequence in triplicate
monoclonal antibody
分类号
Q813.2 [生物学—生物工程]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人类逆转录病毒的长末段重复序列(HRTVLTR)的表达与肺癌转移的关系
连祺周
庄建良
路刚
夏建川
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2001
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
家蚕丝素重链非重复区肽段在大肠埃希菌中的优化表达
武明扬
吴悦
杨高强
王建南
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
在线阅读
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职称材料
3
抗人LOC339524单克隆抗体的制备和应用
龙宗泓
李洪
陈凤
易维京
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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职称材料
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