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下丘脑室旁核缩宫素神经元至三叉神经脊束尾核γ-氨基丁酸能神经元通路可调控慢性偏头痛痛觉敏化
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作者 陈厚达 邹宛芸 +1 位作者 徐许峰 边疆 《浙江大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期641-652,共12页
目的:探究下丘脑室旁核(PVN)缩宫素(OXT)神经元至三叉神经脊束尾核(TNC)γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的神经通路对慢性偏头痛小鼠痛觉敏化的调控作用及潜在机制。方法:通过第1、3、5、7、9天重复5次腹腔注射1mg/mL硝酸甘油(NTG,10mg/kg)... 目的:探究下丘脑室旁核(PVN)缩宫素(OXT)神经元至三叉神经脊束尾核(TNC)γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的神经通路对慢性偏头痛小鼠痛觉敏化的调控作用及潜在机制。方法:通过第1、3、5、7、9天重复5次腹腔注射1mg/mL硝酸甘油(NTG,10mg/kg)构建慢性偏头痛小鼠模型。实验分为四部分。第一部分:取24只雄性野生型C57BL/6J小鼠随机分为单次注射对照组、单次注射NTG组、重复注射对照组、重复注射NTG组,每组6只,免疫荧光染色检测PVN的OXT及Fos原癌基因(c-Fos)表达。第二部分:取6只雄性OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠,采用Cre重组酶依赖的顺行跨单突触神经示踪病毒和RNAscope联合免疫荧光染色检测PVN OXT神经元至TNC GABA能神经元的神经通路。第三部分:取30只OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠双侧PVN注射依赖于Cre重组酶表达的化学遗传学激活病毒,随机分为五组,每组6只。氯氮平N-氧化物(CNO)组和对照组分别腹腔注射0.1 mg/mL CNO溶液(1 mg/kg)和等体积等渗氯化钠溶液,3 h后取材,免疫荧光染色检测c-Fos蛋白以验证化学遗传学激活效率。模型对照组和CNO激活模型组建立慢性偏头痛模型,第10天双侧TNC分别注射等渗氯化钠溶液和CNO;阴性对照组双侧TNC注射等渗氯化钠溶液;30 min后采用Von-Frey纤毛机械刺激针和丙酮检测这三组小鼠眶周机械痛敏阈值和眶周冷痛反应时间。第四部分:取24只雄性OXT-Cre转基因C57BL/6J小鼠双侧PVN注射依赖于Cre重组酶表达的化学遗传学激活病毒,随机分为4组,每组6只,其中模型对照组、CNO激活模型组和阿托西班组构建慢性偏头痛模型。第10天,阴性对照组和模型对照组腹腔注射等渗氯化钠溶液,CNO激活模型组和阿托西班组腹腔注射CNO,15 min后阿托西班组双侧TNC注射阿托西班,其余三组均注射含1%二甲基亚砜的等渗氯化钠溶液。15min后,四组小鼠检测眶周机械痛敏阈值和眶周冷痛反应时间,高效液相色谱分析双侧TNC中GABA含量。结果:慢性偏头痛模型小鼠眶周机械痛敏阈值减小,眶周冷痛反应时间增加,且PVN区c-Fos+神经元数及c-Fos+OXT神经元百分比增加(均P<0.05)。顺行跨单突触神经示踪病毒策略结果显示,PVNOXT神经元与TNCGABA能神经元存在神经突触联系。免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,CNO组PVNc-Fos+OXT神经元百分比增加(P<0.05)。双侧TNC注射药物实验结果显示,与模型对照组比较,CNO激活模型组眶周机械痛敏阈值增加、眶周冷痛反应时间缩短(均P<0.05)。腹腔注射药物实验结果显示,与CNO激活模型组比较,阿托西班组的眶周机械痛敏阈值减小、眶周冷痛反应时间延长(均P<0.05)。高效液相色谱分析结果显示,与阴性对照组、模型对照组及阿托西班组比较,CNO激活模型组TNC的GABA含量增加(均P<0.05)。结论:PVNOXT神经元通过其末梢释放的OXT对TNC的突触后GABA能神经元产生下行兴奋作用,从而改善慢性偏头痛的痛觉敏化。 展开更多
关键词 慢性偏头痛 缩宫素神经 下丘脑室旁 Γ-氨基丁酸能神经 三叉神经脊束尾核 小鼠
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ASIC3在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达 被引量:3
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作者 王莎 吴白雪 +3 位作者 刘超阳 秦光成 周冀英 陈力学 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2017年第12期900-906,共7页
目的:本文通过检测酸敏感离子通道3(acid sensing ion channel 3,ASIC3)在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在慢性偏头痛发病中的作用及可能机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为7组,假... 目的:本文通过检测酸敏感离子通道3(acid sensing ion channel 3,ASIC3)在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在慢性偏头痛发病中的作用及可能机制。方法:将SD雄性大鼠随机分为7组,假手术组(n=18),模型组(n=18),模型+溶剂组(n=5),模型+ASIC3抑制剂5μM组(n=5),模型+ASIC3抑制剂10μM组(n=5),模型+ASIC3激动剂100μM组(n=5),模型+ASIC3激动剂200μM组(n=5)。使用Von Frey纤维丝测定大鼠眶周及足底的机械痛阈值,实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测ASIC3 m RNA,蛋白质印迹法(Western blotting)检测ASIC3、CGRP蛋白表达,免疫荧光技术检测ASIC3和CGRP在TNC部位的表达和定位情况。结果:(1)硬脑膜反复给予"炎性汤"后,大鼠眶周及足底的机械痛阈值显著降低(P<0.01);(2)与Sham组相比,CM组大鼠ASIC3在TNC的表达明显升高(P<0.05);(3)给予ASIC3抑制剂后,大鼠眶周及足底机械痛阈值均显著增加(P<0.05),CGRP蛋白的表达也明显降低(P<0.05),而给予ASIC3激动剂后,大鼠眶周及足底机械痛阈值均显著降低(P<0.05),CGRP蛋白的表达明显增加(P<0.05);(4)免疫荧光检测显示在TNC部位,ASIC3主要表达于神经元,且与CGRP有少量共表达。结论:ASIC3在慢性偏头痛大鼠TNC部位表达上调,且通过调节机械痛阈值的变化及CGRP的表达参与了慢性偏头痛的发生发展过程。 展开更多
关键词 慢性偏头痛 ASIC3 三叉神经脊束尾核
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NLRP3炎性小体在慢性偏头痛小鼠三叉神经脊束尾核的表达及作用 被引量:2
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作者 贺维 龙婷 +3 位作者 张艺馨 秦光成 陈力学 周冀英 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期490-495,共6页
目的:观察炎性小体NLRP3(Nod-like receptor protein 3)在慢性偏头痛小鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)中的表达变化,并探讨其在慢性偏头痛中的作用。方法:C57BL6/J雄性小鼠随机分为5组,分别为生理盐水对照组(n=1... 目的:观察炎性小体NLRP3(Nod-like receptor protein 3)在慢性偏头痛小鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)中的表达变化,并探讨其在慢性偏头痛中的作用。方法:C57BL6/J雄性小鼠随机分为5组,分别为生理盐水对照组(n=16),模型组(n=16),模型+溶剂组(n=8),模型+NLRP3抑制剂5 mg/kg组(n=8),模型+NLRP3抑制剂10 mg/kg组(n=8)。采用腹腔隔日重复注射硝酸甘油(nitroglycerin,NTG)建立慢性偏头痛小鼠模型。使用von Frey test测定小鼠眶周和后足机械痛阈值。Western blot检测NLRP3及神经元活化标志蛋白p-ERK的表达变化,免疫荧光检测NLRP3在TNC的定位情况。结果:反复腹腔注射NTG后,小鼠眶周和后足的机械痛阈显著降低(P<0.05),而TNC部位的NLRP3和p-ERK蛋白表达显著增加(P<0.05)。使用NLRP3的小分子抑制剂MCC950可以显著提高小鼠眶周和足底机械痛阈值,降低p-ERK的表达。荧光染色显示NLRP3与小胶质细胞共定位。结论:本研究表明TNC部位NLRP3炎性小体上调,可能通过影响神经元活化状态参与慢性偏头痛的病理生理过程。 展开更多
关键词 NLRP3炎性小体 慢性偏头痛 小胶质细胞 三叉神经脊束尾核
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P2X4受体在慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束尾核的表达及意义 被引量:8
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作者 刘超阳 刘清 +3 位作者 王莎 秦光成 陈力学 周冀英 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期169-175,共7页
目的:观察P2X4受体(P2X4 receptor,P2X4R)在慢性偏头痛(chronic migraine,CM)大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在CM中的作用。方法:SD雄性大鼠随机分为5组,对照组(n=12)、模型组(n=12)、模型+... 目的:观察P2X4受体(P2X4 receptor,P2X4R)在慢性偏头痛(chronic migraine,CM)大鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)的表达变化,探讨其在CM中的作用。方法:SD雄性大鼠随机分为5组,对照组(n=12)、模型组(n=12)、模型+溶剂组(n=6)、模型+TNP-ATP30 nmol组(n=6)、模型+TNP-ATP 60 nmol组(n=6)。硬脑膜反复滴注"炎性汤"(inflammatory soup,IS)建立CM模型。von Frey test检测眶周及后足机械痛阈值,Western blot检测P2X4R及神经元激活标志蛋白c-Fos的表达,免疫荧光检测P2X4R定位情况。结果:荧光染色显示P2X4R主要表达于TNC小胶质细胞。与对照组相比,模型组大鼠眶周及后足痛阈值显著降低(P<0.01),P2X4R及c-Fos表达量显著上调(P<0.05)。给予P2X4R抑制剂TNP-ATP后,大鼠眶周及后足痛阈值显著升高(P<0.05),c-Fos表达量显著降低(P<0.05)。结论:TNC小胶质细胞P2X4R表达上调,可能通过影响神经元的激活从而参与CM发病过程。 展开更多
关键词 小胶质细胞 P2X4受体 慢性偏头痛 三叉神经脊束尾核
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蛋白激酶C参与大鼠慢性偏头痛中枢敏化 被引量:7
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作者 吴白雪 王莎 +5 位作者 秦光成 肖垚 谢景梅 谭戈 周冀英 陈力学 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期331-337,共7页
目的:本文旨在研究蛋白激酶C(PKC)是否通过中枢敏化参与慢性偏头痛病理生理过程。方法:SD雄性大鼠随机分为7组,假手术组(n=11),模型组(n=12),模型+溶剂组(n=8),PKC抑制剂4μg组(n=11),PKC抑制剂8μg组(n=10),PKC激动剂100 ng组(n=10),PK... 目的:本文旨在研究蛋白激酶C(PKC)是否通过中枢敏化参与慢性偏头痛病理生理过程。方法:SD雄性大鼠随机分为7组,假手术组(n=11),模型组(n=12),模型+溶剂组(n=8),PKC抑制剂4μg组(n=11),PKC抑制剂8μg组(n=10),PKC激动剂100 ng组(n=10),PKC激动剂200 ng组(n=11)。"炎性汤"反复刺激硬脑膜,模拟硬脑膜痛觉感受器的反复激活,建立慢性偏头痛大鼠模型,侧脑室给予PKC抑制剂和PKC激动剂,使用von Frey test测定大鼠面部及后足的机械痛阈值,Western blot检测PKC、CGRP、c-Fos蛋白的表达变化。结果:"炎性汤"反复刺激硬脑膜后,大鼠面部及足底的机械痛阈值显著降低,而三叉神经脊束尾核部位的CGRP、c-Fos及PKC蛋白表达显著增加。使用CHE抑制PKC可以显著增高大鼠面部及足底痛阈值,显著降低CGRP、c-Fos的表达;而使用PMA激活PKC则降低痛阈值,显著增高CGRP、c-Fos的表达。结论:本研究表明PKC可以调节机械痛阈值以及CGRP、c-Fos的表达变化,提示PKC参与慢性偏头痛中枢敏化的病理生理过程。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 慢性偏头痛 中枢敏化 三叉神经脊束尾核
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