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反相高效液相色谱法测定维生素K_2中七烯甲萘醌的含量 被引量：9
1
作者 王德伟 游景水 叶礼红 《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第8期3030-3033,共4页
目的建立维生素K2产品中七烯甲萘醌(MK-7)的反相高效液相色谱定量检测的方法。方法采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为50%甲醇/水(含0.1%乙酸)(95:5=V:V),50%异丙烷。流速为等速1.0 m L/min,检测波长270 nm,柱... 目的建立维生素K2产品中七烯甲萘醌(MK-7)的反相高效液相色谱定量检测的方法。方法采用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为50%甲醇/水(含0.1%乙酸)(95:5=V:V),50%异丙烷。流速为等速1.0 m L/min,检测波长270 nm,柱温40℃。结果 MK-7在浓度0.355~2.132 mg/m L的范围内具有良好的线性关系,相关系数在0.9999以上。重复性实验中相对标准偏差为0.41%,加标回收率为98.15%。结论此方法准确性高、重现性好、操作简单,可用于维生素K2中MK-7含量测定。 展开更多
关键词 维生素K2 反相高效液相色谱法 七烯甲萘醌
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高效液相色谱法测定多组分配方含维生素K2制剂中七烯甲萘醌的含量 被引量：7
2
作者 王颖 黄丽娟 黄瑛 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第7期2136-2139,共4页
目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定多组分配方含维生素K2制剂中七烯甲萘醌含量的方法。方法试样在酸化、酶解后,经异丙醇提取,采用反相色谱柱分离,紫外检测,外标法定量测定七烯甲萘醌含量。结... 目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定多组分配方含维生素K2制剂中七烯甲萘醌含量的方法。方法试样在酸化、酶解后,经异丙醇提取,采用反相色谱柱分离,紫外检测,外标法定量测定七烯甲萘醌含量。结果在优化的实验条件下,七烯甲萘醌在0.20~7.90μg/mL范围内线性关系良好(r^2>0.9995),方法的定量限为1.6μg/g,回收率94.55%~101.05%,相对标准偏差为2.33%(n=3)。结论该方法灵敏快速准确,适用于多组分配方制剂中七烯甲萘醌的含量检测。 展开更多
关键词 维生素K2 七烯甲萘醌 多组分配方制剂 高效液相色谱法
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高效液相色谱法测定乳粉中VK2（七烯甲萘醌）含量 被引量：4
3
作者 王瑶 张敏 +5 位作者 马晓冲 刘星 柴艳兵 张耀广 李飞 李兴佳 《乳业科学与技术》 2019年第6期30-33,共4页
建立使用高效液相色谱快速检测乳粉中VK2(七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7))含量的方法。乳粉样品用250 mg/g脂肪酶酶解2 h,经500 mg/g碳酸钾皂化,正己烷提取,旋转蒸发浓缩,甲醇-异丙醇(4∶1,V/V)复溶,用C18色谱柱及还原柱柱后衍生,经高... 建立使用高效液相色谱快速检测乳粉中VK2(七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7))含量的方法。乳粉样品用250 mg/g脂肪酶酶解2 h,经500 mg/g碳酸钾皂化,正己烷提取,旋转蒸发浓缩,甲醇-异丙醇(4∶1,V/V)复溶,用C18色谱柱及还原柱柱后衍生,经高效液相色谱-荧光检测器测定,外标法定量。结果表明:MK-7在19.47 min附近出峰,标准曲线在MK-7质量浓度0.0~1.5μg/mL范围内呈良好线性关系(R^2=0.99995);空白乳粉样品中MK-7添加量为5、10、25μg/100 g时,加标回收率为87.9%~94.3%,相对标准偏差为0.9%~6.4%;取样量为2 g、定容体积为1 mL时,MK-7检测限为0.15μg/100 g,定量限为0.5μg/100 g。本检测方法前处理简单,具有较高准确度、灵敏度和稳定性,可以用于乳粉中VK2(MK-7)含量的检测。 展开更多
关键词 乳粉 VK2 七烯甲萘醌 高效液相色谱 荧光检测器 定量测定
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高效液相色谱法测定保健食品中七烯甲萘醌 被引量：1
4
作者 程岁寒 覃先武 +3 位作者 朱金玲 潘存锋 张海波 张彦 《化学分析计量》 CAS 2021年第12期69-73,共5页
建立高效液相色谱法测定保健食品中七烯甲萘醌(MK-7)。含油脂类食品先经脂肪酶酶解,再经异丙醇提取,不含油食品直接使用异丙醇超声提取,采用高效液相紫外检测器进行检测。用Intersil ODS–3 C_(18)型色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),... 建立高效液相色谱法测定保健食品中七烯甲萘醌(MK-7)。含油脂类食品先经脂肪酶酶解,再经异丙醇提取,不含油食品直接使用异丙醇超声提取,采用高效液相紫外检测器进行检测。用Intersil ODS–3 C_(18)型色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇–异丙醇(体积比为75∶25)为流动相,流量为1.0 mL/min,检测波长为270 nm,柱温为40℃,进样体积为20μL。MK-7的质量浓度在0.4-20 mg/L的范围内与色谱峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.9998,方法检出限为0.06 mg/L,定量限为0.2 mg/L。含油脂类食品与不含油脂类食品中MK-7平均加标回收率分别为96.2%、103.2%,测定结果的相对标准偏差分别为0.9%、1.0%(n=9)。室温下,MK-7样品溶液在24 h内稳定。该方法操作简单,可用于保健食品中MK-7的含量测定。 展开更多
关键词 保健食品 七烯甲萘醌 脂肪酶 高效液相色谱
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七烯甲萘醌合成过程中关键蛋白的定位分析
5
作者 陈奇 张智航 +5 位作者 夏洪志 孙怡 金柯 吕雪芹 崔世修 刘龙 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期8-12,共5页
七烯甲萘醌作为维生素K 2的重要亚型,在细胞中主要存在于细胞膜上,在氧化磷酸化的过程中起到电子载体的作用。作为七烯甲萘醌合成过程中的关键酶,1,4-二羟基-2-萘甲酸异戊二烯基转移酶(1,4-dihydroxy-2-naphthoic acid prenyltransferas... 七烯甲萘醌作为维生素K 2的重要亚型,在细胞中主要存在于细胞膜上,在氧化磷酸化的过程中起到电子载体的作用。作为七烯甲萘醌合成过程中的关键酶,1,4-二羟基-2-萘甲酸异戊二烯基转移酶(1,4-dihydroxy-2-naphthoic acid prenyltransferase,MenA)和甲基转移酶(methyltransferase,MenH)目前研究较少,其在细胞中的分布还未被研究,这也限制了七烯甲萘醌产量的进一步提高。该研究重点关注MenA和MenH在细胞内的分布问题,首先构建MenA、MenH和eGFP的融合蛋白,利用荧光定位的方法确定MenA和MenH在细胞中的定位。然后,使用表面活性剂Triton-100破坏细胞膜的结构,发现随着表面活性剂浓度的增加,七烯甲萘醌的合成受到明显抑制。该研究表明细胞膜结构的完整性是七烯甲萘醌合成的前提条件,并且揭示了七烯甲萘醌是在细胞膜上直接被合成,不是被转运到细胞膜中。研究结果为深入探索七烯甲萘醌合成机制提供了方向。 展开更多
关键词 七烯甲萘醌 枯草芽孢杆菌 MENA MenH 细胞膜 定位
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高效液相色谱法测定复配营养强化剂维生素K_(2)的含量
6
作者 王守靖 张静 +1 位作者 赵娜 刘建宇 《中国食品工业》 2024年第9期80-82,共3页
建立高效液相色谱法测定复配营养强化剂中维生素K_(2)(七烯甲萘醌MK-7)的含量。本方法利用维生素K_(2)在波长248nm处有最大吸收,对样品进行甲醇分散,50℃提取,甲醇为流动相,高效液相色谱测定。结果表明:MK-7标准溶液峰面积与浓度有较好... 建立高效液相色谱法测定复配营养强化剂中维生素K_(2)(七烯甲萘醌MK-7)的含量。本方法利用维生素K_(2)在波长248nm处有最大吸收,对样品进行甲醇分散,50℃提取,甲醇为流动相,高效液相色谱测定。结果表明:MK-7标准溶液峰面积与浓度有较好的线性关系;不同样品的精密度试验,相对标准偏差均小于5%,加标回收率均在95%~105%之间。此方法重复性好,准确度高,可用于复配营养强化剂中MK-7的测定。 展开更多
关键词 维生素K_(2)(七烯甲萘醌MK-7) 高效液相色谱 复配营养强化剂
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高效液相色谱-荧光检测法测定食品中维生素K2的含量 被引量：11
7
作者 邓梦雅 彭祖茂 +3 位作者 朱丽 杨俊 杨世添 张协光 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第19期240-244,250,共6页
建立了高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)同时快速分离检测猪肉、猪肝、纯牛奶、酸奶、黄油、鸡蛋、豆豉、纳豆8种食品中2种维生素K2的方法。样品经酶解、皂化、萃取、氮吹复溶处理后,用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 m... 建立了高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)同时快速分离检测猪肉、猪肝、纯牛奶、酸奶、黄油、鸡蛋、豆豉、纳豆8种食品中2种维生素K2的方法。样品经酶解、皂化、萃取、氮吹复溶处理后,用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,柱后锌粉还原柱(35 mm×4.6 mm)衍生,以甲醇(含有二氯甲烷10%、冰醋酸0.03%、氯化锌1.5 g/L、无水乙酸钠0.5 g/L)为流动相,进入荧光检测器进行检测。结果表明,四烯甲萘醌(Menatetrenone4,MK-4)、七烯甲萘醌(Menatetrenone7,MK-7)在15 min内分离出峰。2种维生素K2在各自的线性范围内关系良好,相关系数r=1.0000。当取样量为2 g,定容2 mL时,MK-4的检出限为0.01μg/100 g,定量限为0.04μg/100 g;MK-7的检出限为0.06μg/100 g,定量限为0.2μg/100 g。当取样量为10 g,定容2 mL时,MK-4的检出限为0.002μg/100 g,定量限为0.008μg/100 g;MK-7的检出限为0.012μg/100 g,定量限为0.04μg/100 g。精密度(RSD)均不超过3.56%,回收率为80.6%~95.5%。8种食品中,猪肉、纯牛奶、酸奶、黄油、鸡蛋中仅含有MK-4,其中纯牛奶中含量最低,仅为(0.34±0.02)μg/100 g,鸡蛋中含量最高,达(25.38±0.85)μg/100 g。猪肝、豆豉、纳豆中仅含MK-7,其中猪肝含量较低,为(25.45±0.83)μg/100 g,纳豆中含量最为丰富,高达(923.20±11.45)μg/100 g。该法准确、可靠、高效,可用于食品中维生素K2的高通量检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD) 食品 维生素K2 四烯甲萘醌(MK-4) 七烯甲萘醌(MK-7)
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高效液相色谱法测定食品中维生素K_(1)和维生素K_(2)的含量 被引量：9
8
作者 孔凡华 郭倩 +5 位作者 白沙沙 徐佳佳 李东 王竹 张雪松 崔亚娟 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第4期226-231,共6页
建立高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定食品中维生素K1和维生素K2含量的分析方法。方法:配方奶粉、酸奶、纳豆冻干粉和鸡胗冻干粉经酶解、异丙醇分散、正己烷萃取、旋转蒸发复溶后,使用Thermo Acclaim^(TM)120C18色谱柱(150 mm... 建立高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定食品中维生素K1和维生素K2含量的分析方法。方法:配方奶粉、酸奶、纳豆冻干粉和鸡胗冻干粉经酶解、异丙醇分散、正己烷萃取、旋转蒸发复溶后,使用Thermo Acclaim^(TM)120C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,锌粉还原柱(50 mm×4.6 mm)衍生,以900 mL甲醇:100 mL四氢呋喃(含冰醋酸0.3 mL,氯化锌1.5 g,无水乙酸钠0.5 g)为流动相,激发波长为243 nm,发射波长为430 nm,分离维生素K 1(Vitamin K 1,VK 1)、四烯甲萘醌(menaquinone-4,MK-4)、七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7)和九烯甲萘醌(menaquinone-9,MK-9)。结果:VK 1、MK-4、MK-7和MK-9在20~1000μg/L范围内与峰面积有良好线性关系。配方奶粉、酸奶、纳豆冻干粉和鸡胗冻干粉中VK1、MK-4、MK-7、MK-9含量的相对标准偏差(RSD)均小于5%,表明精密度好。配方奶粉、酸奶和纳豆冻干粉不同水平加标回收率分别为85.0%~107.8%、85.8%~109.6%、85.1%~102.7%,回收率的RSD均小于5%,表明回收率高,相对标准偏差小。结论:实验建立的方法重复性好、准确度高,可以精准定量食品中维生素K_(1)和维生素K_(2)的含量。 展开更多
关键词 高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD) 维生素K_(1)(VK_(1)) 维生素K_(2)(VK_(2)) 四烯甲萘醌(MK-4) 七烯甲萘醌(MK-7) 九烯甲萘醌(MK-9)
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代谢工程改造枯草芽孢杆菌高效生产MK-7
9
作者 王永利 付刚 +2 位作者 张子梦 林心萍 张大伟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期86-94,共9页
七烯甲萘醌(MK-7)作为一种重要的K族维生素,在保健食品和医药制造领域具有良好的应用前景。为了得到一株高产MK-7菌株,作者以Bacillus subtilis 168为出发菌株,分别进行了代谢分支途径基因敲除、MK-7合成途径关键基因menA的突变体筛选... 七烯甲萘醌(MK-7)作为一种重要的K族维生素,在保健食品和医药制造领域具有良好的应用前景。为了得到一株高产MK-7菌株,作者以Bacillus subtilis 168为出发菌株,分别进行了代谢分支途径基因敲除、MK-7合成途径关键基因menA的突变体筛选优化、人工操纵子强化部分途径基因的表达来提升MK-7发酵产量。最终构建得到高产菌株MK7-13,发酵产MK-7达到(73.73±1.86)mg/L,与对照菌株相比提高了9.71倍,为后续微生物发酵法工业化生产MK-7奠定了基础。 展开更多
关键词 七烯甲萘醌 枯草芽孢杆菌 人工操纵子 点突变
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在线固相萃取-高效液相色谱法快速测定奶粉中的维生素K_(1)与维生素K_(2) 被引量：3
10
作者 毛新武 黄景初 +4 位作者 何淑明 陈悦铭 陈嘉欣 王宇 蔡伟谊 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第16期5305-5313,共9页
目的 建立在线固相萃取-高效液相色谱法快速测定奶粉中维生素K_(1) (vitamin K_(1),VK_(1))、维生素K_(2)(vitamin K_(2,)VK_(2))含量的分析方法。方法 1 g奶粉样品中加入3 m L 0.13 g/m L脂肪酶水溶液,37℃恒温酶解脂肪,并用氢氧化钾的... 目的 建立在线固相萃取-高效液相色谱法快速测定奶粉中维生素K_(1) (vitamin K_(1),VK_(1))、维生素K_(2)(vitamin K_(2,)VK_(2))含量的分析方法。方法 1 g奶粉样品中加入3 m L 0.13 g/m L脂肪酶水溶液,37℃恒温酶解脂肪,并用氢氧化钾的水-异丙醇混合溶液定容至25 m L,获得酶解液。使用在线固相萃取-高效液相色谱联用仪对酶解液进行自动化分析,其中以甲醇:水=20:80 (V:V)作为上样溶剂,甲醇作为清洗、除水溶剂,10%四氢呋喃甲醇作为转移溶剂与液相色谱流动相,Eclipse Plus C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm)作为分析柱,经过锌粉还原柱(50 mm×4.6 mm,70μm)衍生,采取荧光检测器进行检测,外标法定量,获得VK_(1)、VK_(2)含量。结果 VK_(1)、四烯甲萘醌(menaquinone-4,MK-4)、七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7)在0.002~0.100μg/m L范围内线性良好;检出限分别为0.12、0.14、0.19μg/100 g,方法定量限为0.37、0.46、0.58μg/100 g。结论 该方法操作简便、快速、灵敏度高,稳定性良好,可作为婴幼儿奶粉质量控制、监督检查的快速检验方法。 展开更多
关键词 维生素K_(1) 维生素K_(2) 四烯甲萘醌 七烯甲萘醌 在线固相萃取 高效液相色谱法
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