丁香假单胞菌猕猴桃致病变种的遗传多样性及进化关系 被引量：15

1

作者 朱海云 李勃 +1 位作者 李燕 柯杨 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期66-71,共6页

猕猴桃细菌性溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性病害,在世界各大猕猴桃产区发病严重。引起该病的病原菌为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.Actinidiae,Psa)。综合当前国内外关于该病原菌的相关研究,就其分类... 猕猴桃细菌性溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性病害,在世界各大猕猴桃产区发病严重。引起该病的病原菌为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.Actinidiae,Psa)。综合当前国内外关于该病原菌的相关研究,就其分类地位、遗传多样性及起源进化等方面进行了系统综述。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌猕猴桃致病变种 猕猴桃细菌性溃疡病 遗传多样性 进化关系

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丁香假单胞菌中六个致病变种的全细胞蛋白质电泳分析 被引量：2

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作者 黄琼 任欣正 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 1996年第4期197-202,共6页

利用聚丙稀酰胺电泳技术首次对丁香假单胞菌中６个致病变种全细胞蛋白电泳，发现同一致病变种内菌株蛋白条带一致，不同致病变种之间存在差异。以往对丁香假单胞菌中致病变种的鉴定方法主要是根据致病性的差异，结合营养筛选和血清学方... 利用聚丙稀酰胺电泳技术首次对丁香假单胞菌中６个致病变种全细胞蛋白电泳，发现同一致病变种内菌株蛋白条带一致，不同致病变种之间存在差异。以往对丁香假单胞菌中致病变种的鉴定方法主要是根据致病性的差异，结合营养筛选和血清学方法来进行。对丁香假单胞菌的６个致病变种的全细胞蛋白分析表明：全细胞蛋白质电泳能成功地鉴定到致病变种。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌 致病变种 蛋白质

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双抗体夹心酶联免疫方法检测丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌 被引量：2

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作者 王文彬 孔德昭 +2 位作者 唐丽娟 马伟 匡华 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期162-165,共4页

丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌可以引起十字花科细菌性黑斑病,是侵染萝卜、白菜、花椰菜等农作物的重要病害之一。以灭活的丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌(NCPPB1820)为免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤细胞技术,筛选最终获得6株产生特异... 丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌可以引起十字花科细菌性黑斑病,是侵染萝卜、白菜、花椰菜等农作物的重要病害之一。以灭活的丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌(NCPPB1820)为免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤细胞技术,筛选最终获得6株产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。将辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)与抗体偶联,作为检测探针,分别将6种单克隆抗体作为包被抗体,进行两两配对筛选。结果表明,所制备的抗体特异性较好,对水稻细菌性谷枯病菌、水稻细菌性条斑病菌、玉米细菌性枯萎病菌、丁香假单胞菌丁香致病变种均没有交叉反应。以6号抗体作为检测抗体(6-HRP),以1号抗体作为包被抗体,建立酶联免疫分析法获得了最佳的敏感度。检测丁香假单胞杆菌斑点致病变种的最低检测限为1.5×105cfu/m L,定量限为4.12×105cfu/m L。基于双抗体夹心的酶免疫方法特异性好,便捷,可以实现对丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌高通量测定。 展开更多

关键词 酶联免疫测定 单克隆抗体 丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌

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1株三型丁香假单胞菌猕猴桃致病变种细菌全基因组扫描图测序及分析 被引量：2

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作者 邓博涵 刘丹蕾 +11 位作者 陈秋菊 倪培恩 张子蕾 王大鹏 纠松涛 王磊 马超 张才喜 王世平 沈叶鑫 鲍金平 许文平 《江苏农业科学》 2020年第20期67-74,共8页

丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,简称Psa)是引起猕猴桃细菌性溃疡病的病原菌。对从感染溃疡病的东红猕猴桃枝条中分离得到的1株Psa野生株(命名为GX05)进行全基因组测序,获得基因组草图,分析其中毒力基... 丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,简称Psa)是引起猕猴桃细菌性溃疡病的病原菌。对从感染溃疡病的东红猕猴桃枝条中分离得到的1株Psa野生株(命名为GX05)进行全基因组测序,获得基因组草图,分析其中毒力基因、耐药基因和致病基因的情况。研究发现,多位点序列分型结果显示GX05为biovar 3,与毒力因子数据库比对,GX05携带99种毒力因子及692个相关毒力基因,同源性和匹配度最高的毒力因子是PvdL和Irp1;与综合抗生素抗性基因数据库比对,GX05携带336种耐药基因,与29种抗生素有关;与病原宿主互作数据库比对,不表达导致病原菌致病力减弱的基因数量最多,其中同源性和匹配度最高的是PvdL,此外与增强致病力相关的同源性和匹配度最高的基因是hrcC。通过全基因组测序信息初步分析了1株三型Psa菌株中存在的毒力、耐药及致病基因情况,对深入研究其致病机制和合理用药有重要意义。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌猕猴桃致病变种 猕猴桃细菌性溃疡病 全基因组测序 毒力基因 耐药基因 致病基因

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丁香假单胞菌番茄致病变种DC3000甘油激酶基因的克隆与功能研究 被引量：1

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作者 刘晓柱 李银凤 +1 位作者 于志海 刘晓辉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期70-75,共6页

为研究丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pathovar tomato,Pst)DC3000甘油激酶(Glycerol kinase,GK)的功能,根据Gen Bank中登录的Pst DC3000 GK氨基酸序列设计引物,克隆了Pst DC3000 GK基因,对其生物信息学特征进行分析,... 为研究丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pathovar tomato,Pst)DC3000甘油激酶(Glycerol kinase,GK)的功能,根据Gen Bank中登录的Pst DC3000 GK氨基酸序列设计引物,克隆了Pst DC3000 GK基因,对其生物信息学特征进行分析,然后构建了GK基因敲除突变体,探讨其对菌体生理特性的影响。序列分析表明,GK基因全长1 506 bp,可编码一条501个氨基酸的多肽。生物信息学分析结果显示,Pst DC3000 GK蛋白分子质量55.8 ku,等电点5.54,富含无规卷曲结构。敲除Pst DC3000 GK后,可降低菌体在基本培养基与丰富培养基中的生长速率,增加细胞中甘油含量,同时也使菌体在拟南芥叶片上的增殖能力降低。因此,Pst DC3000 GK基因参与调控菌体的生长过程,影响菌体甘油代谢。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌番茄致病变种DC3000 甘油激酶 基因克隆 功能分析

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丁香假单胞大豆致病变种harpin编码基因的克隆表达与功能研究 被引量：4

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作者 张岩 伍辉军 +1 位作者 周晓辉 高学文 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期6-12,共7页

采用PCR方法从丁香假单胞大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)A1和S1菌株中分别克隆到大小为1 026和1 038 bp的hrpZ基因(hrpZPsgA1和hrpZPsgS1),对该基因进行了原核表达和功能研究。SDS-PAGE显示其表达产物为相对分子质量62... 采用PCR方法从丁香假单胞大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)A1和S1菌株中分别克隆到大小为1 026和1 038 bp的hrpZ基因(hrpZPsgA1和hrpZPsgS1),对该基因进行了原核表达和功能研究。SDS-PAGE显示其表达产物为相对分子质量62×103的融合蛋白,harpinZPsgA1和harpinZPsgS1的相对分子质量约为35×103。harpinZPsgS1的粗提蛋白经GSTrap FF纯化后质量浓度可达1.1 mg.mL-1。生物活性检测表明,该蛋白对热稳定,对蛋白酶K敏感,可以在非寄主植物烟草上激发过敏反应,过敏反应可以被真核生物代谢抑制剂抑制,并且对烟草有明显的促生作用。序列比对发现,来自丁香假单胞大豆致病变种的hrpZ基因可分为2类,一类以hrpZPsgA1为代表,包括hrpZPsg12,另一类以hrpZPsgS1为代表,包括来自r0和Race4菌株的hrpZ基因。这2类hrpZ基因的核苷酸同源性为79%,氨基酸同源性为77%,均富含甘氨酸,不含半胱氨酸,与假单胞菌属以外的其他革兰氏阴性植物病原细菌harpin编码基因不存在相似性。 展开更多

关键词 丁香假单胞大豆致病变种 harpin编码基因 GST融合表达 烟草 过敏性反应 促生

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几种咖啡酸酯类衍生物对桑丁香假单胞菌的抑制活性鉴定 被引量：1

7

作者 宋红志 王方芹 +2 位作者 王俊 盛晟 吴福安 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期53-60,共8页

咖啡酸是一类具有多种生物活性的物质,尤其是抑菌活性被应用于农作物病害防治。以天然咖啡酸为先导化合物合成8种咖啡酸酯类衍生物,采用平板扩散法测试咖啡酸及其酯类衍生物对桑疫病病原菌桑丁香假单胞菌Pseudomonas syringae pv.mori... 咖啡酸是一类具有多种生物活性的物质,尤其是抑菌活性被应用于农作物病害防治。以天然咖啡酸为先导化合物合成8种咖啡酸酯类衍生物,采用平板扩散法测试咖啡酸及其酯类衍生物对桑疫病病原菌桑丁香假单胞菌Pseudomonas syringae pv.mori的抑菌活性,结果表明:咖啡酸、咖啡酸甲酯、咖啡酸乙酯、咖啡酸丙酯和咖啡酸异丙酯对桑丁香假单胞菌、大肠杆菌Escherichia coli(CK)无抑制作用;而咖啡酸丁酯、咖啡酸戊酯、咖啡酸己酯和咖啡酸苯乙酯对桑丁香假单胞菌与大肠杆菌均有抑制作用,其中咖啡酸丁酯、咖啡酸苯乙酯对桑丁香假单胞菌有较强的抑制活性,抑菌圈直径>1.0 cm。进一步通过分光光度法检测初筛有抑菌活性的4种咖啡酸酯类衍生物对桑丁香假单胞菌的MIC_(50)值和MIC_(90)值,抑菌活性由强到弱依次为咖啡酸戊酯、咖啡酸丁酯、咖啡酸苯乙酯、咖啡酸己酯。试验结果提示,初筛的4种咖啡酸酯类衍生物具有开发为桑疫病防治专用抑菌剂的潜力。 展开更多

关键词 杀菌剂 咖啡酸酯类衍生物 桑丁香假单胞菌 抑菌活性

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丁香假单胞大豆致病变种不同HrpZ蛋白差异区域功能研究 被引量：2

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作者 张阳 伍辉军 +2 位作者 张宏月 赵小珍 高学文 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期89-96,共8页

[目的]丁香假单胞大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)A1和S1菌株编码产生的Hrp Z蛋白差异序列主要集中在C端的3个区域,并且这2个蛋白诱导非寄主HR的能力也存在差异。本研究将探究Hrp Z蛋白这3个差异区域在烟草上诱导HR(hyp... [目的]丁香假单胞大豆致病变种(Pseudomonas syringae pv.glycinea)A1和S1菌株编码产生的Hrp Z蛋白差异序列主要集中在C端的3个区域,并且这2个蛋白诱导非寄主HR的能力也存在差异。本研究将探究Hrp Z蛋白这3个差异区域在烟草上诱导HR(hypersensitive response)和抑制烟草花叶病毒(TMV)中所起的作用。[方法]采用常规PCR及重叠PCR方法将这2个hrp Z基因的3个差异区域分别进行互换,构建了相应的重组表达载体,表达并纯化得到了6个重组蛋白,相对分子质量均在41×103左右。并检测了其诱导HR活性、诱导植物抗病性。[结果]检测结果表明:重组蛋白Hrp ZS(S2→A2)和Hrp ZA(A3→S3)诱导HR的能力相比亲本都有所增强,6个重组蛋白诱导烟草抗TMV的活性都明显强于亲本,其中,Hrp ZA(A3→S3)和Hrp ZS(S3→A3)的活性最强。[结论]此试验表明Hrp Z蛋白的这些差异区域(第7、8、9个α-螺旋)是过敏反应能力的主要调控区域,同时C-端第8、9个α-螺旋区域与诱导植物抗病性也显著相关。本研究为改造Hrp Z类harpin蛋白激发子,提高其诱导抗性及功能域研究提供了理论依据。 展开更多

关键词 丁香假单胞大豆致病变种 HRP Z 差异序列分析 过敏性反应 诱导抗病性

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猕猴桃细菌性溃疡病菌的分离鉴定与致病性分析 被引量：1

9

作者 吴仲秋 牛向丽 +3 位作者 汪雯静 李璇 刘骏菲 邬杰涛 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第2期257-262,共6页

溃疡病是猕猴桃主要细菌性病害,其病原为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)。文章利用不同猕猴桃种植园的溃疡病发病植株进行Psa菌株分离、鉴定及致病性分析;结果显示,获得了6个具有丁香假单胞菌形... 溃疡病是猕猴桃主要细菌性病害,其病原为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)。文章利用不同猕猴桃种植园的溃疡病发病植株进行Psa菌株分离、鉴定及致病性分析;结果显示,获得了6个具有丁香假单胞菌形态特征的菌株,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定与序列同源比对,所分离菌株为Psa,该菌株在‘红阳’猕猴桃的接种检测中显示不同致病性,其中ScYbH2、ScDjyH2、ScYbH1接种植株出现溃疡病症状,而ScMbJ1、ScDjyH3、ScYaH2未表现显著致病性。烟草叶片超敏反应也显示它们具有不同的植物免疫系统激活能力。该研究获得了猕猴桃溃疡病分离菌株,其表型差异为后续的致病基因遗传分析奠定了基础。 展开更多

关键词 猕猴桃 丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Psa) 病原菌分离 致病性 超敏反应

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无花果细菌性叶斑病病原鉴定

10

作者 季梦婷 陈长江 +3 位作者 朱玲 詹梦琳 肖顺 蔡学清 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第5期1097-1106,共10页

2021—2023年,在福建省福州市的无花果果园发现细菌性叶斑病,田间株发病率达50%以上。为明确病因,采集病叶进行实验室菌株分离,经柯赫氏法则验证其致病性,并综合细菌的生物学特征、生理生化反应、多基因序列分析明确其分类地位。结果表... 2021—2023年,在福建省福州市的无花果果园发现细菌性叶斑病,田间株发病率达50%以上。为明确病因,采集病叶进行实验室菌株分离,经柯赫氏法则验证其致病性,并综合细菌的生物学特征、生理生化反应、多基因序列分析明确其分类地位。结果表明,从采集的病叶中分离纯化获得6株细菌菌株,经柯赫氏法则验证其为病原菌。菌株在NA培养基平板上的菌落为乳白色,圆形,微隆起。细菌菌体呈短杆状,极生1~6根鞭毛,革兰氏染色阴性。对菌株开展的27项生理生化测定结果与对照菌株——丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)DC3000菌株一致,在金氏B(KB)培养基平板上可产生绿色水溶性荧光色素,过氧化氢酶反应和淀粉水解的测试结果为阳性,精氨酸双水解、硝酸钾还原反应、吲哚反应、果聚糖利用和氧化酶反应的测试结果为阴性,可利用的碳水化合物为葡萄糖、甘露醇、丙二酸钠和丙三醇。基于16S rDNA序列,及gyrB、rpoD和cts的基因构建系统发育树,供试菌株与丁香假单胞菌丁香致病变种(P.syringae pv.syringae)聚为一支。综上,将分离到的细菌菌株鉴定为丁香假单胞菌丁香致病变种。这是国内首次发现丁香假单胞菌丁香致病变种在自然状态下侵染无花果并引起叶斑病。 展开更多

关键词 无花果细菌性叶斑病 病原菌鉴定 丁香假单胞菌丁香致病变种

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咖啡细菌性叶斑病病原的分离与鉴定 被引量：4

11

作者 白学慧 周丽洪 +3 位作者 胡永亮 姬广海 李锦红 张洪波 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期738-742,共5页

2012年在云南瑞丽咖啡种植苗圃发现一种细菌性病害,称为咖啡细菌性叶斑病。该病主要危害咖啡叶片。将田间感病咖啡叶片上分离所得的6个菌株进行柯赫氏法则回接试验,发病症状与田间自然症状一致,重新分离得到此病原菌,确定了病菌的致病... 2012年在云南瑞丽咖啡种植苗圃发现一种细菌性病害,称为咖啡细菌性叶斑病。该病主要危害咖啡叶片。将田间感病咖啡叶片上分离所得的6个菌株进行柯赫氏法则回接试验,发病症状与田间自然症状一致,重新分离得到此病原菌,确定了病菌的致病性。经培养性状、菌落形态观察、生理生化特性分析(Biolog系统)和ITS序列分析(NCBI acc. no. JX876899),确定该病原菌为丁香假单胞菌咖啡致病变种(Pseudomonas syringae pv. garcae)。 展开更多

关键词 咖啡 细菌性叶斑病 病原鉴定 丁香假单胞菌咖啡致病变种 BIOLOG ITS

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大连软枣猕猴桃细菌性溃疡病鉴定及药剂筛选

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作者 郑泽洋 尤文忠 +6 位作者 刘娟娟 孙俊 纪盈睿 朱可馨 李玉莹 陈喜忠 刘振盼 《辽宁农业科学》 2025年第3期1-7,共7页

软枣猕猴桃细菌性溃疡病是软枣猕猴桃产区一种毁灭性的病害。为鉴定该病害的病原菌及筛选出防治药剂,于大连金州区采集病样组织,采用组织分离法进行病原菌分离,基于形态学、生理生化特征、16S rRNA序列及致病性测定对病原菌进行鉴定。... 软枣猕猴桃细菌性溃疡病是软枣猕猴桃产区一种毁灭性的病害。为鉴定该病害的病原菌及筛选出防治药剂,于大连金州区采集病样组织,采用组织分离法进行病原菌分离,基于形态学、生理生化特征、16S rRNA序列及致病性测定对病原菌进行鉴定。测定了病原菌最适培养基和最适生长温度,并用抑菌圈法测定20种药剂对病原菌的抑制作用。结果表明,大连地区软枣猕猴桃细菌性溃疡病的病原为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种生物型2,病原菌最适培养基为LB培养基,最适生长温度为25℃。四霉素、乙蒜素、溴硝醇等9种药剂对病原菌具有抑菌效果,四霉素与乙蒜素按5∶1比例复配抑菌效果最佳。试验结果为明确软枣猕猴桃细菌性溃疡病病原及合理选用防治药剂提供科学依据。 展开更多

关键词 软枣猕猴桃 细菌性溃疡病 丁香假单胞菌猕猴桃致病变种 药剂筛选

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黄瓜细菌性茎枯萎病病原鉴定及温度对其致病力的影响 被引量：2

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作者 白雪 张晓晓 +5 位作者 季苇芹 闫建培 乔培 杨玉文 关巍 赵廷昌 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期28-37,65,共11页

自2003年以来,在我国北京、辽宁和山东等地的黄瓜上发现了一种重要细菌病害—黄瓜细菌性茎枯萎病,对黄瓜生产造成了严重危害。从发病的黄瓜叶片、茎部和果实上分离的菌株接种到黄瓜后,症状与自然发病症状完全一致。经过多位点序列分型和... 自2003年以来,在我国北京、辽宁和山东等地的黄瓜上发现了一种重要细菌病害—黄瓜细菌性茎枯萎病,对黄瓜生产造成了严重危害。从发病的黄瓜叶片、茎部和果实上分离的菌株接种到黄瓜后,症状与自然发病症状完全一致。经过多位点序列分型和BOX-PCR技术,以及LOPAT、GATTa和Ayers碳源利用试验等,确定该病害的病原菌为丁香假单胞流泪致病变种Pseudomonas syringae pv.lachrymans。以黄瓜细菌性茎枯萎病菌A2为供试菌株,黄瓜细菌性角斑病菌丁香假单胞菌流泪致病变种P.syringae pv.lachrymans pslb8为对照菌株,对其进行不同温度下致病力、体内和体外生长能力测定,结果表明:20℃条件下,A2菌株的致病力、体内和体外生长能力均强于pslb8菌株,相对低温的条件更有利于黄瓜细菌性茎枯萎病病原菌的侵染和病害的发生。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌流泪致病变种 鉴定 致病力 温度

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湘西地区猕猴桃溃疡病病原菌分离及其全基因组分析 被引量：3

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作者 杨睿 汪琳罗沙 +3 位作者 姚迪 唐蕴哲 张婧一 彭清忠 《微生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期58-67,共10页

通过了解湘西地区猕猴桃溃疡病致病菌分类地位和基因类型,初步探讨其致病的分子机理。采用纯培养法分离猕猴桃溃疡病菌;基于16S~23S rRNA基因内转录间隔序列进行病原菌的系统发育分析;通过基因组测序和生物信息学分析解析其致病的分子... 通过了解湘西地区猕猴桃溃疡病致病菌分类地位和基因类型,初步探讨其致病的分子机理。采用纯培养法分离猕猴桃溃疡病菌;基于16S~23S rRNA基因内转录间隔序列进行病原菌的系统发育分析;通过基因组测序和生物信息学分析解析其致病的分子机理。从“米良1号”和“红阳”猕猴桃感病枝条中分离获得5株溃疡病菌,编号为L211、L212、L321、L322、L323;通过形态特征和16S~23S rRNA基因内转录间隔序列分析,鉴定5株细菌均为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidae,Psa)。以菌株L211为代表进行体外猕猴桃枝条接种实验表明能引起典型溃疡病症状。通过菌株L211的全基因组测序和生物信息学分析,获得5741条基因数目,长5412072 bp;基因功能注释发现菌株L211携带121种毒力因子、71个植物互作因子和77个耐药基因;同时,基因组单核苷酸多态性分析发现病原菌L211为基因Ⅲ型Psa。引起湘西地区猕猴桃溃疡病的病原菌是丁香假单胞菌猕猴桃致病变种基因Ⅲ型,与国内外报道的引起猕猴桃溃疡病大流行的致病菌一致。猕猴桃溃疡病发病原因可能是病原菌的多种毒力基因和互作基因协同作用的结果。 展开更多

关键词 猕猴桃溃疡病 丁香假单胞菌猕猴桃致病变种 鉴定 全基因组测序 致病机理

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猕猴桃溃疡病病原菌MLVA分型引物的筛选及验证

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作者 姚令 王海 +5 位作者 黄露 安星宇 陈文 王莉爽 薛原 吴石平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1188-1198,共11页

【目的】筛选出一组可精准快速地对丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)进行分型的引物组合。【方法】针对前期文献已报道的34对引物,采用PCR技术验证该34对引物对中国Psa菌株的扩增效率及准确性;利用... 【目的】筛选出一组可精准快速地对丁香假单胞菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)进行分型的引物组合。【方法】针对前期文献已报道的34对引物,采用PCR技术验证该34对引物对中国Psa菌株的扩增效率及准确性;利用模拟PCR获取菌株串联重复(TR)数;以辛普森指数(Simpson’s index,SI)作为筛选引物组合的标准,基于R软件平台,筛选最优引物组合。【结果】34对引物对中国Psa扩增效果均良好,其中TR14与TR11II、TR19与Psa-01引物序列相同;TR8与Psa-08、TR39II与Psa-10、GM-1834与TR10I、GM-1553与TR64II、TR19Psa-01与TR19II扩增同一TR;Psa-09扩增产物串联重复单元长度不唯一,TR2II扩增产物侧翼变异较大,不能通过电泳确定串联重复数;最终确定SI值与全部引物组合相同的最低引物数量为9对,使用该9对引物的组合可将Psa已知的5种生物型准确分开。【结论】TR23/Psa-04、Psa-03、Psa-05、Psa-06、TR10IGM-1834、TR30I、TR1II、Psa-10TR39II、TR64IIGM-1553等9对引物可代表当前文献报道的34对引物,进行Psa分型研究,探索猕猴桃溃疡病的传播和流行规律,为病害防控策略的制定提供科学依据。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌猕猴桃致病变种 多位点串联重复序列分析 群体遗传结构 引物 筛选

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低温等离子活化水对猕猴桃溃疡病菌抗菌活性及机制

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作者 刘芊辰 徐明 +2 位作者 雷玉山 史文青 江昊 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第8期264-272,共9页

为了探究低温等离子体活化水(cold plasma activated water,PAW)对丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,PSA)的抗菌活性和潜在机制。该研究通过介质阻挡放电(dielectric barrier discharge,DBD)低温等离... 为了探究低温等离子体活化水(cold plasma activated water,PAW)对丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,PSA)的抗菌活性和潜在机制。该研究通过介质阻挡放电(dielectric barrier discharge,DBD)低温等离子体发生装置制备不同激活时间的PAW,考察放电时间与杀菌效果之间的关系。此外,通过评估PSA形态特征,细胞粒径、DNA、细胞膜损伤情况和胞内活性氧积累(reactive oxygen species,ROS)情况探究PAW对PSA的杀菌机制。结果表明:PAW对PSA的杀灭效果与PAW激活时间呈依赖性,与对照相比PAW处理120 s后,PSA显著(P<0.05)减少了4.38 lg CFU/mL。扫描电子显微镜(field emission scanning electron microscope,FESEM)结果清楚地表明,由于PAW处理,PSA细胞发生了明显的质壁分离。荧光染色结果显示,PSA细胞DNA、膜渗透屏障被破坏程度、内容物泄漏量和ROS积累量与PAW激活时间表现为正相关关系。因此,推测PAW由于自身酸性、较高的氧化还原电位(oxidation-reduction potential,ORP),以及水性活性物质导致细胞的氧化损伤,而且这可能是杀灭PSA的主要原因。研究结果可为PAW控制猕猴桃细菌性溃疡病提供参考。 展开更多

关键词 介质阻挡放电 低温等离子体活化水 丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种 杀菌机制 细胞 氧化损伤

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福建省番茄细菌性斑点病的病原鉴定 被引量：12

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作者 杨春泉 陈宜修 +4 位作者 林玉 蔡学清 邱思鑫 刘春莹 胡方平 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第6期570-574,共5页

2006年在福建省闽清县种植的反季节番茄上发现一种细菌病害,从病叶和茎杆上共分离到15个细菌菌株,经柯赫氏法则证明均能在番茄上引起相同症状病害,而且从接种病株上又重新分离到了相同细菌.这15个菌株致病力均无明显差异.经革兰氏染色... 2006年在福建省闽清县种植的反季节番茄上发现一种细菌病害,从病叶和茎杆上共分离到15个细菌菌株,经柯赫氏法则证明均能在番茄上引起相同症状病害,而且从接种病株上又重新分离到了相同细菌.这15个菌株致病力均无明显差异.经革兰氏染色、培养性状、生理生化特性、16S rRNA基因序列等鉴定,确认为丁香假单胞杆菌番茄致病变种.寄主范围测定的结果表明,该病菌除侵染番茄外,人工接种尚能侵染茄子. 展开更多

关键词 番茄 细菌性斑点病 病原鉴定 丁香假单胞杆菌番茄致病变种

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ClO_2对猕猴桃表面溃疡病病菌的杀菌作用及果实货架期品质的影响 被引量：9

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作者 曹凡 高贵田 +2 位作者 王铎 雷玉山 赵武奇 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期88-95,共8页

为杀灭猕猴桃果实表面溃疡病病原菌并保持果实货架期品质,以丁香假单孢杆菌猕猴桃致病变种(Psa)和海沃德猕猴桃果实为试验材料,通过单因素和响应曲面分析法研究二氧化氯(ClO_2)对Psa的杀灭效果及对猕猴桃果实货架期品质的影响。结果表明... 为杀灭猕猴桃果实表面溃疡病病原菌并保持果实货架期品质,以丁香假单孢杆菌猕猴桃致病变种(Psa)和海沃德猕猴桃果实为试验材料,通过单因素和响应曲面分析法研究二氧化氯(ClO_2)对Psa的杀灭效果及对猕猴桃果实货架期品质的影响。结果表明,最佳杀菌工艺条件为ClO_2溶液浓度115 mg·L^(-1)、处理时间8 min、pH值4,在此最佳工艺条件下,ClO_2溶液对Psa的杀菌率的最大预期值可达100%,对猕猴桃果实表面的Psa杀菌率为98.64%,并能延缓猕猴桃果实硬度的下降,保持可溶性固形物、Vc、可滴定酸的含量,延长果实的货架期。综上可知,ClO_2溶液处理既能杀灭猕猴桃表面Psa,又能保持果实货架期品质。本研究结果为控制猕猴桃果实传播Psa及其保鲜提供了理论依据。 展开更多

关键词 猕猴桃 丁香假单胞菌猕猴桃致病性变种 二氧化氯

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3种药剂对猕猴桃花粉溃疡病菌灭菌及果实产量的影响 被引量：6

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作者 曹凡 高贵田 +6 位作者 雷玉山 杜莹琳 朱丹 徐雅芬 张晓萍 李朝政 张鑫 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2018年第1期121-125,共5页

以陕西周至被溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)污染的猕猴桃花粉为原料,分别用ClO_2溶液、噻霉酮和可杀得三千进行处理,研究3种药剂处理对Psa杀灭率、花粉生活力及处理后的花粉授粉对座果率、产量、单果重和种子数的... 以陕西周至被溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.actinidiae,Psa)污染的猕猴桃花粉为原料,分别用ClO_2溶液、噻霉酮和可杀得三千进行处理,研究3种药剂处理对Psa杀灭率、花粉生活力及处理后的花粉授粉对座果率、产量、单果重和种子数的影响。结果表明,ClO_2溶液、噻霉酮和可杀得三千3种药剂处理对花粉中Psa的杀灭率分别为99.7%,99.6%,99.4%,花粉生活力分别为62.2%,50.1%,51.2%,比对照组分别下降了0.5%,19.1%,24.1%;用处理后的花粉授粉对座果率的影响极显著(P<0.01),ClO_2处理组最佳,比对照组仅降低12%;ClO_2处理组对果实的总产量、单果重和种子数均无显著性差异。说明用10mg/L ClO_2溶液处理花粉45min,对防止猕猴桃花粉传播Psa有较大应用价值。 展开更多

关键词 丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种 花粉 生活力

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贮藏期猕猴桃果实表面溃疡病病原菌的快速检测方法研究 被引量：5

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作者 朱丹 曹凡 +7 位作者 高贵田 王铎 徐雅芬 杜莹琳 张鑫 李朝正 孙强 周敏娜 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期493-499,共7页

为建立猕猴桃果实表皮溃疡病病原菌(Psa)的快速检测方法,以陕西周至县贮藏期的海沃德猕猴桃为材料,用King’s B液体培养基培养获得果实表面病原菌,采用细菌DNA提取试剂盒及热裂解法提取总DNA;根据陕西猕猴桃Psa的hrp W保守区设计2对特... 为建立猕猴桃果实表皮溃疡病病原菌(Psa)的快速检测方法,以陕西周至县贮藏期的海沃德猕猴桃为材料,用King’s B液体培养基培养获得果实表面病原菌,采用细菌DNA提取试剂盒及热裂解法提取总DNA;根据陕西猕猴桃Psa的hrp W保守区设计2对特异引物进行巢式PCR扩增,并对扩增产物进行测序。结果表明,从4个猕猴桃贮藏库抽取40个样品,其中8个样品检测出阳性扩增;对特异扩增得到的550bp的hrp W序列进行BLAST对比分析,发现该序列与丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)的hrp W序列同源性为99%。此外,本试验建立的巢式PCR检测方法对Psa的检出限为103cfu·m L^(-1),检测方法特异性强,灵敏度高,能减少假阳性的出现,保证了快速检测结果的可靠性,为控制猕猴桃果实传播Psa提供了理论依据。 展开更多

关键词 猕猴桃溃疡病 丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种 巢式PCR hrpW

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