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鼠伤寒沙门菌对巨噬细胞内过氧化物酶体与诱导型一氧化氮合酶结合的诱导作用
被引量：
4
1
作者
潘欣
李广波
+5 位作者
李晗
蔡家麟
陈龙
沈下贤
刘培培
吴鉴今
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1023-1026,共4页
目的探讨鼠伤寒沙门菌感染早期巨噬细胞内过氧化物酶体及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的作用。方法用pTassC-GFP质粒转染鼠巨噬细胞RAW264.7,以观察标记了绿色荧光蛋白的靶向沙门菌分泌的SpiC蛋白(TassC)在胞内的存在形式。用pDsRed2-Perxi...
目的探讨鼠伤寒沙门菌感染早期巨噬细胞内过氧化物酶体及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的作用。方法用pTassC-GFP质粒转染鼠巨噬细胞RAW264.7,以观察标记了绿色荧光蛋白的靶向沙门菌分泌的SpiC蛋白(TassC)在胞内的存在形式。用pDsRed2-Perxi和pTassC-GFP质粒共转染RAW264.7细胞,将阳性细胞命名为RAW-DT,用pDsRed2-Perxi质粒转染RAW264.7细胞,阳性细胞命名为RAW-D。采用Alexa Fluor 350对结合单抗的鼠伤寒沙门菌显色,用Alexa Fluor 488对iNOS进行显色,并在荧光显微镜下观察。用鼠伤寒沙门菌感染RAW-DT细胞,以观察鼠伤寒沙门菌与TassC和过氧化物酶体的关系;用鼠伤寒沙门菌感染RAW-D细胞,以观察iNOS与过氧化物酶体和鼠伤寒沙门菌的关系。结果免疫荧光观察显示,呈现绿色荧光的TassC-GFP有膜性结构,可与标记了红色荧光的过氧化物酶体共定位;感染1h的RAW-DT胞内鼠伤寒沙门菌吞噬泡可招募TassC-GFP和过氧化物酶体;感染1h的RAW-D胞内鼠伤寒沙门菌吞噬泡可与iNOS和过氧化物酶体共定位;在1h的观察期间,一旦鼠伤寒沙门菌进入巨噬细胞,膜性小泡(SCV)周围即可募集较多过氧化物酶体。结论野生型鼠伤寒沙门菌可诱导巨噬细胞产生iNOS,iNOS和TassC均可与过氧化物酶体结合,可能具有一定的杀菌作用。
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关键词
巨噬细胞
沙门菌
鼠伤寒
靶向沙门菌分泌的spiC蛋白(TassC)
一氧化氮合酶ⅱ型
过
氧化
物
酶
体类
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职称材料
花旗松素对H9C2细胞氧化应激保护作用机制研究
被引量：
12
2
作者
曾志辉
王晓莉
+6 位作者
叶艳琼
王甜甜
苏其利
詹纪春
申婕
曾茂君
赵明一
《中国全科医学》
CAS
北大核心
2019年第15期1794-1799,共6页
背景氧化应激(OS)与缺血性心脏病(IHD)的发生发展密切相关,抗OS损伤在IHD防治中至关重要。花旗松素(Tax)具有抗炎、抗肿瘤、抗OS作用,但其抗OS机制尚未完全明了。目的探讨Tax对过氧化氢(H_2O_2)诱导的H9C2心肌细胞OS损伤的保护机制,为O...
背景氧化应激(OS)与缺血性心脏病(IHD)的发生发展密切相关,抗OS损伤在IHD防治中至关重要。花旗松素(Tax)具有抗炎、抗肿瘤、抗OS作用,但其抗OS机制尚未完全明了。目的探讨Tax对过氧化氢(H_2O_2)诱导的H9C2心肌细胞OS损伤的保护机制,为OS损伤性疾病的新药研发提供基础依据。方法 2017年3月—2018年3月,将H9C2细胞随机分为对照组〔仅加入0.1%二甲基亚砜(DMSO)〕、H_2O_2处理组(加入200μmol/ml H_2O_2处理12 h)、Tax+H_2O_2处理组(加入100μmol/ml Tax预处理6 h,换液后加入200μmol/ml H_2O_2处理12 h)、Tax处理组(加入100μmol/ml Tax处理6 h)。对于对照组、H_2O_2处理组、Tax+H_2O_2处理组,采用光学显微镜观察细胞形态,荧光倒置显微镜观察细胞染色情况,RT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、骨桥蛋白(OPN)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)mRNA表达水平。采用Western blotting法检测对照组、Tax处理组丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路p38、磷酸化p38(p-p38)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、磷酸化ERK(p-ERK)1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)表达水平。结果与对照组相比,H_2O_2处理组细胞出现肥大,呈圆形及不规则形状,而Tax+H_2O_2处理组细胞形态接近梭形,细胞变圆及肥大程度较H_2O_2处理组轻,不规则形态细胞数量减少。H_2O_2处理组绿色荧光量较对照组明显增多且亮度增强,而Tax+H_2O_2处理组较H_2O_2处理组绿色荧光量及亮度减弱。Tax+H_2O_2处理组iNOS mRNA、OPN mRNA表达水平低于对照组、H_2O_2处理组(P<0.05);Tax+H_2O_2处理组HMGB1 mRNA表达水平高于对照组、H_2O_2处理组(P<0.05)。Tax处理组MAPK信号通路p38表达水平低于对照组,p-p38、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK表达水平高于对照组(P<0.05)。结论 Tax可以改善H_2O_2对细胞造成的形态学改变并减少细胞内OS水平,其机制可能通过激活MAPK信号通路,激活HMGB1表达,抑制OS相关基因iNOS、OPN的表达来发挥抗OS作用。
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关键词
氧化
性应激
MAP激
酶
信号系统
一氧化氮合酶ⅱ型
骨桥蛋白质
高迁移率族蛋白质类
花旗松素
H9C2细胞
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职称材料
题名
鼠伤寒沙门菌对巨噬细胞内过氧化物酶体与诱导型一氧化氮合酶结合的诱导作用
被引量：
4
1
作者
潘欣
李广波
李晗
蔡家麟
陈龙
沈下贤
刘培培
吴鉴今
机构
第二军医大学微生物学教研室
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期1023-1026,共4页
基金
国家自然科学基金(30972633)
文摘
目的探讨鼠伤寒沙门菌感染早期巨噬细胞内过氧化物酶体及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的作用。方法用pTassC-GFP质粒转染鼠巨噬细胞RAW264.7,以观察标记了绿色荧光蛋白的靶向沙门菌分泌的SpiC蛋白(TassC)在胞内的存在形式。用pDsRed2-Perxi和pTassC-GFP质粒共转染RAW264.7细胞,将阳性细胞命名为RAW-DT,用pDsRed2-Perxi质粒转染RAW264.7细胞,阳性细胞命名为RAW-D。采用Alexa Fluor 350对结合单抗的鼠伤寒沙门菌显色,用Alexa Fluor 488对iNOS进行显色,并在荧光显微镜下观察。用鼠伤寒沙门菌感染RAW-DT细胞,以观察鼠伤寒沙门菌与TassC和过氧化物酶体的关系;用鼠伤寒沙门菌感染RAW-D细胞,以观察iNOS与过氧化物酶体和鼠伤寒沙门菌的关系。结果免疫荧光观察显示,呈现绿色荧光的TassC-GFP有膜性结构,可与标记了红色荧光的过氧化物酶体共定位;感染1h的RAW-DT胞内鼠伤寒沙门菌吞噬泡可招募TassC-GFP和过氧化物酶体;感染1h的RAW-D胞内鼠伤寒沙门菌吞噬泡可与iNOS和过氧化物酶体共定位;在1h的观察期间,一旦鼠伤寒沙门菌进入巨噬细胞,膜性小泡(SCV)周围即可募集较多过氧化物酶体。结论野生型鼠伤寒沙门菌可诱导巨噬细胞产生iNOS,iNOS和TassC均可与过氧化物酶体结合,可能具有一定的杀菌作用。
关键词
巨噬细胞
沙门菌
鼠伤寒
靶向沙门菌分泌的spiC蛋白(TassC)
一氧化氮合酶ⅱ型
过
氧化
物
酶
体类
Keywords
macrophages
Salmonella typhimurium
target for Salmonella secreted protein SpiC（Tass C）
nitric oxide synthase type
ⅱ
peroxisomes
分类号
R516.3 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
花旗松素对H9C2细胞氧化应激保护作用机制研究
被引量：
12
2
作者
曾志辉
王晓莉
叶艳琼
王甜甜
苏其利
詹纪春
申婕
曾茂君
赵明一
机构
中南大学湘雅三医院儿科
湖南师范大学心脏发育研究中心蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室
广东省心血管病研究所广东省人民医院广东省医学科学院
出处
《中国全科医学》
CAS
北大核心
2019年第15期1794-1799,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(81500231)
中南大学湘雅三医院"新湘雅人才工程"(JY201524)
文摘
背景氧化应激(OS)与缺血性心脏病(IHD)的发生发展密切相关,抗OS损伤在IHD防治中至关重要。花旗松素(Tax)具有抗炎、抗肿瘤、抗OS作用,但其抗OS机制尚未完全明了。目的探讨Tax对过氧化氢(H_2O_2)诱导的H9C2心肌细胞OS损伤的保护机制,为OS损伤性疾病的新药研发提供基础依据。方法 2017年3月—2018年3月,将H9C2细胞随机分为对照组〔仅加入0.1%二甲基亚砜(DMSO)〕、H_2O_2处理组(加入200μmol/ml H_2O_2处理12 h)、Tax+H_2O_2处理组(加入100μmol/ml Tax预处理6 h,换液后加入200μmol/ml H_2O_2处理12 h)、Tax处理组(加入100μmol/ml Tax处理6 h)。对于对照组、H_2O_2处理组、Tax+H_2O_2处理组,采用光学显微镜观察细胞形态,荧光倒置显微镜观察细胞染色情况,RT-PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、骨桥蛋白(OPN)、高迁移率族蛋白1(HMGB1)mRNA表达水平。采用Western blotting法检测对照组、Tax处理组丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路p38、磷酸化p38(p-p38)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、磷酸化ERK(p-ERK)1/2、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)表达水平。结果与对照组相比,H_2O_2处理组细胞出现肥大,呈圆形及不规则形状,而Tax+H_2O_2处理组细胞形态接近梭形,细胞变圆及肥大程度较H_2O_2处理组轻,不规则形态细胞数量减少。H_2O_2处理组绿色荧光量较对照组明显增多且亮度增强,而Tax+H_2O_2处理组较H_2O_2处理组绿色荧光量及亮度减弱。Tax+H_2O_2处理组iNOS mRNA、OPN mRNA表达水平低于对照组、H_2O_2处理组(P<0.05);Tax+H_2O_2处理组HMGB1 mRNA表达水平高于对照组、H_2O_2处理组(P<0.05)。Tax处理组MAPK信号通路p38表达水平低于对照组,p-p38、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK表达水平高于对照组(P<0.05)。结论 Tax可以改善H_2O_2对细胞造成的形态学改变并减少细胞内OS水平,其机制可能通过激活MAPK信号通路,激活HMGB1表达,抑制OS相关基因iNOS、OPN的表达来发挥抗OS作用。
关键词
氧化
性应激
MAP激
酶
信号系统
一氧化氮合酶ⅱ型
骨桥蛋白质
高迁移率族蛋白质类
花旗松素
H9C2细胞
Keywords
Oxidative stress
MAP kinase signaling system
Nitric oxide synthase type
ⅱ
Osteopontin
High mobility group proteins
Taxifolin
H9C2 cells
分类号
R349.1 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鼠伤寒沙门菌对巨噬细胞内过氧化物酶体与诱导型一氧化氮合酶结合的诱导作用
潘欣
李广波
李晗
蔡家麟
陈龙
沈下贤
刘培培
吴鉴今
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
花旗松素对H9C2细胞氧化应激保护作用机制研究
曾志辉
王晓莉
叶艳琼
王甜甜
苏其利
詹纪春
申婕
曾茂君
赵明一
《中国全科医学》
CAS
北大核心
2019
12
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