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多重荧光定量聚合酶链式反应法检测水牛乳中黄牛源性成分
1
作者 梁媛媛 赵娇 +1 位作者 崔生熠 刘鹏鹏 《现代食品》 2025年第1期150-154,159,共6页
目的:建立多重荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)法同时检测水牛乳中水牛、黄牛这2种牛源性成分。方法:设计基于cytb基因的特异性引物和探针,通过优化反应体系的退火温度和循环参数,建立一种能在同一反应体系内快... 目的:建立多重荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)法同时检测水牛乳中水牛、黄牛这2种牛源性成分。方法:设计基于cytb基因的特异性引物和探针,通过优化反应体系的退火温度和循环参数,建立一种能在同一反应体系内快速检测水牛和黄牛源性成分的多重荧光定量PCR方法。同时,对该方法进行特异性、灵敏度、重复性等方法学验证。结果:该方法特异性强,能特异性检出水牛、黄牛源性成分;该方法灵敏度可达核酸浓度1.0×10^(-4) ng·μL^(-1),且重复性较好。结论:该方法操作简单,具有通量高、特异性强、灵敏度高和重复性好等优点,适用于水牛乳样品中水牛、黄牛源性成分的掺假鉴别和快速检测。 展开更多
关键词 多重荧光定量聚合酶链式反应 水牛乳 牛源性成分 快速检测
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多重荧光定量聚合酶链反应法检测肉制品中的3种食源性致病菌 被引量：1
2
作者 孙新城 李爽 +4 位作者 李侠颖 周杰 曹亚新 王宏伟 张晓根 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第9期37-43,共7页
目的建立多重荧光定量聚合酶链反应法(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)快速检测肉制品中沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H73种食源性致病菌的方法。方法根据沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌的hemolysin基因、大... 目的建立多重荧光定量聚合酶链反应法(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)快速检测肉制品中沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H73种食源性致病菌的方法。方法根据沙门氏菌的invA基因、单增李斯特菌的hemolysin基因、大肠杆菌O157:H7的rfbE基因序列分别设计特异性引物及探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度、特异性和重复性,建立了可同时检测上述3种食源性致病菌多重qPCR方法。结果该方法只扩增3种靶细菌,对其他供试菌不扩增;沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157:H7的检出限分别为10^(1)、10^(2)、10^(2)拷贝数/μL,并且拥有良好的重复性和特异性。人工污染的猪肉样品经SLE培养基富集8 h后,分别可以检测到初始菌液浓度为1.56×10^(2)CFU/25 g的沙门氏菌,2.13×10^(2)CFU/25 g的单增李斯特菌,2.32×10^(2)CFU/25 g的大肠杆菌O157:H7。结论所建立的多重qPCR灵敏度高、特异性强、重复性好,可同时检测肉制品中沙门氏菌、单增李斯特菌和大肠杆菌O157:H73种食源性致病菌,在提高食品安全和保护人类健康方面有重要意义。 展开更多
关键词 沙门氏菌 单增李斯特菌 大肠杆菌O157:H7 多重荧光定量聚合酶链反应法
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多重实时荧光定量聚合酶链式反应在芝麻酱掺假鉴别中的应用
3
作者 陈茵茵 梁颖思 +5 位作者 陈宝欣 丁清龙 苏章庭 韩志杰 陈玥 郑玥 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第12期199-209,共11页
目的研究基于分子生物学技术,建立多重实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测芝麻酱中的植物源性成分,实现芝麻酱的快速掺假鉴别,突破单标准单物种检测的局限性。方法该研究以芝麻2S albumim mRNA基因、花... 目的研究基于分子生物学技术,建立多重实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测芝麻酱中的植物源性成分,实现芝麻酱的快速掺假鉴别,突破单标准单物种检测的局限性。方法该研究以芝麻2S albumim mRNA基因、花生Ara b2基因、大豆Lectin基因、玉米adh1基因设计特异性引物和探针,优化反应体系,建立多重实时荧光定量PCR技术检测芝麻酱中的芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分,并应用于市售的芝麻酱样本检测分析。结果该方法高效低成本,特异性好,对小米、绿豆等10种非目标源性成分无特异性扩增;对芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分的最低检出限为100 pg/μL,具有较高的灵敏度;应用建立的方法,对市售21份芝麻酱样本进行检测分析,检测结果与标签标注不符合的有4份,标签标注符合率为80.95%,与参比方法检测结果一致。结论建立的多重实时荧光定量PCR技术对加工成品的检测具有较好的适用性,为芝麻酱的掺假鉴别提供了一种新的分子生物学方法。 展开更多
关键词 多重实时荧光定量聚合酶链式反应 芝麻酱 植物源性成分 掺假鉴别
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基于单核苷酸多态性位点的多重实时荧光定量聚合酶链式反应法鉴别当雄高山牦牛肉 被引量：3
4
作者 刘睿茜 其美次仁 +3 位作者 李家鹏 韦忆萱 李金春 王守伟 《肉类研究》 北大核心 2020年第10期47-52,共6页
通过比对5个不同地区牦牛线粒体基因的差异,筛选出用于鉴定当雄高山牦牛的11个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点,将这些SNP位点作为引物3′端,同时引入引物碱基错配理念,设计出8对特异性引物,构建出2个三重和1... 通过比对5个不同地区牦牛线粒体基因的差异,筛选出用于鉴定当雄高山牦牛的11个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点,将这些SNP位点作为引物3′端,同时引入引物碱基错配理念,设计出8对特异性引物,构建出2个三重和1个二重实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)体系,建立一种基于SNP位点和多重RT-PCR技术鉴别当雄高山牦牛肉的方法。结果表明:该方法特异性较好、简便快捷、结果直观可靠,能够有效鉴别当雄高山牦牛肉;方法中3个RT-PCR反应体系扩增产物对应的熔解温度(melting temperature,Tm)范围分别为反应体系A:73.1~75.2、76.0~77.3、79.0~80.0℃,反应体系B:69.5~72.8、75.0~77.9、78.5~80.0℃,反应体系C:76.1~78.1、79.5~80.7℃;根据3个反应体系中熔解曲线峰的有无以及Tm是否符合取值范围来判定样品是否为当雄高山牦牛肉;市售样品测定结果表明,该方法可用于实际样品中当雄高山牦牛肉的快速鉴别。 展开更多
关键词 当雄高山牦牛 品种鉴别 单核苷酸多态性位点 多重实时荧光定量聚合酶链式反应 熔解曲线
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多重聚合酶链反应-毛细管电泳-激光诱导荧光法检测三种食源性致病菌 被引量：6
5
作者 毛红霞 黎源倩 +2 位作者 裴晓方 何超 渠凌丽 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期473-477,共5页
建立了食品中常见致病菌大肠杆菌O157：H7的uidA基因、沙门菌的invA基因和志贺菌的ipaH基因的多重聚合酶链反应（PCR）产物的毛细管电泳快速检测方法。根据这3种致病菌的特异性基因序列设计多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系,采用7.0g/L... 建立了食品中常见致病菌大肠杆菌O157：H7的uidA基因、沙门菌的invA基因和志贺菌的ipaH基因的多重聚合酶链反应（PCR）产物的毛细管电泳快速检测方法。根据这3种致病菌的特异性基因序列设计多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系,采用7.0g/L甲基纤维素为筛分介质,毛细管电泳-激光诱导荧光检测法同时检测了3种常见致病菌的PCR扩增产物。在优化的多重PCR反应和毛细管筛分电泳条件下,该方法可以同时检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157：H7基因的多重PCR扩增产物,22min内即可完成3种常见致病菌的毛细管电泳检测。迁移时间的相对标准偏差为1.47%-2.07%。与凝胶电泳法比较,该法简便快速,灵敏度高,可用于多种致病菌脱氧核糖核酸的检测,为食品安全提供了一种可靠的快速检测方法。 展开更多
关键词 多重聚合酶链反应 毛细管电泳法 激光诱导荧光检测 食源性致病菌
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荧光定量聚合酶链反应在小儿人巨细胞病毒感染检测中应用 被引量：4
6
作者 肖晗 向赟 +2 位作者 孙红 刘秀珍 向飞艳 《生物医学工程与临床》 CAS 2015年第2期179-181,共3页
目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）在小儿人巨细胞病毒（HCMV）感染检测中的临床应用价值。方法选择2012年1月至2013年10月在武汉市妇女儿童医疗保健中心就诊的疑似HCMV感染患儿血清或尿液标本,其中血清标本454例,尿液标本1 001例... 目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）在小儿人巨细胞病毒（HCMV）感染检测中的临床应用价值。方法选择2012年1月至2013年10月在武汉市妇女儿童医疗保健中心就诊的疑似HCMV感染患儿血清或尿液标本,其中血清标本454例,尿液标本1 001例,患儿男女比为1 005∶394,年龄1天~3岁。用FQ-PCR检测疑似HCMV感染患儿血清和尿液中的HCMV-DNA,比较两种标本的阳性率。结果 1 001例尿液标本的HCMV-DNA阳性率为46.35%（464/1 001）,显著高于血清标本的阳性率5.95%（27/454）;56例血清和尿液标本HCMV-DNA进行配对检测,其中血清检测阴性的52例中有23例尿液检测为阳性,而血清检测阳性的4例尿液检测均为阳性。结论应用FQ-PCR检测患儿HCMV-DNA,采用尿液标本可提高阳性检出率。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒(HCMV) 荧光定量聚合酶链反应 血清 尿 儿童
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实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的价值 被引量：6
7
作者 宋予娟 王华 +3 位作者 李爱新 耿岚 吴园园 韩玉芳 《中国实用医药》 2015年第9期100-101,共2页
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法对362例临床确诊的结核性胸膜炎患者、可疑结核性胸膜炎患者和非结核性胸膜炎患者的胸水标本采用涂片、实时荧光定量PCR两种方法进行检测,对... 目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测结核分枝杆菌在结核性胸膜炎诊断中的价值。方法对362例临床确诊的结核性胸膜炎患者、可疑结核性胸膜炎患者和非结核性胸膜炎患者的胸水标本采用涂片、实时荧光定量PCR两种方法进行检测,对其结果进行对比分析。结果 362例胸水标本中,涂片阳性率为4.42%(16/362),PCR检测阳性率为24.31%(88/362)。胸水涂片、PCR检测102例临床确诊的结核性胸膜炎患者胸水标本阳性率分别为11.76%(12/102)和50.98(52/102);检测160例临床可疑结核性胸膜炎患者胸水阳性率分别为2.50%(4/160)和22.50%(36/160)。两种方法的阳性检测率比较差异有统计学意义(χ2=10.654,P<0.05)。100例非结核性胸膜炎患者胸水标本涂片及PCR检测均为阴性。结论荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)快速诊断结核性胸膜炎与涂片法相比较具有快速、灵敏、高特异性等优点。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 胸水涂片 荧光定量聚合酶链反应 结核性胸膜炎
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实时荧光定量聚合酶链反应检测核桃根际土壤生防菌Bacillus amyloliquefaciens和Trametes versicolor的定殖 被引量：1
8
作者 郑磊 张静 +2 位作者 彭燕 麻文建 朱天辉 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期277-284,共8页
以铁核桃根腐病为研究对象,运用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增技术,分别对铁核桃根际土壤中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和白腐菌(Trametes versicolor)2种生防菌及腐皮镰刀菌(Fusarium ... 以铁核桃根腐病为研究对象,运用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增技术,分别对铁核桃根际土壤中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和白腐菌(Trametes versicolor)2种生防菌及腐皮镰刀菌(Fusarium solani)病原菌的数量动态变化进行研究。结果表明:2种生防菌在接种后短期内都能够迅速生长繁殖,B.amyloliquefaciens相对含量在第20天达到峰值,20d后呈下降趋势,40d后趋于稳定,而T.versicolor在各时期的相对含量变化均较前者延迟10d;60d后,在施入B.amyloliquefaciens和T.versicolor的根际土壤中F.solani的相对含量极显著降低;在生防菌的相对含量达到峰值时,B.amyloliquefaciens与其对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),T.versicolor则差异有高度统计学意义(P<0.01);定殖稳定后,B.amyloliquefaciens与其对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),T.versicolor对照组与其相比差异有统计学意义(P<0.05),2种生防菌在铁核桃根际土壤中均有很强的生防效果和定殖能力,生防效果为B.amyloliquefaciens>T.versicolor,定殖能力为B.amyloliquefaciens>T.versicolor。该研究为由腐皮镰刀菌引起的病害实时监测提供了重要参考,同时为2种生防菌在土壤中的定殖检测提供了有力的技术支持。 展开更多
关键词 实时荧光定量聚合酶链反应 腐皮镰刀菌 解淀粉芽孢杆菌 白腐菌
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实时荧光定量聚合酶链反应原理和在预防兽医学中的应用及研究进展 被引量：2
9
作者 曹军平 刘秀梵 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第7期56-57,共2页
聚合酶链反应（PCR）是检测核酸的强力方法。由于PCR技术简便易行、灵敏度高等优点，该技术被广泛应用于基础研究．成为分子生物学必不可少的研究工具。由于传统的PCR技术存在不能准确定量．且操作过程中易污染而使得假阳性率高等缺点... 聚合酶链反应（PCR）是检测核酸的强力方法。由于PCR技术简便易行、灵敏度高等优点，该技术被广泛应用于基础研究．成为分子生物学必不可少的研究工具。由于传统的PCR技术存在不能准确定量．且操作过程中易污染而使得假阳性率高等缺点．使其应用受到局限。对PCR产物进行准确定量成为PCR技术发展的重要方向。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 预防兽医学 应用 反应原理 荧光定量 PCR技术 分子生物学
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荧光定量聚合酶链反应在巨细胞病毒感染检测中的应用 被引量：3
10
作者 刘秀英 《山西医科大学学报》 CAS 2003年第6期577-577,共1页
目的　为了探讨巨细胞病毒检测的新途径及FQ -PCR技术在巨细胞病毒DNA诊断中的实用价值。方法　运用FQ-PCR技术对 10 0例怀疑巨细胞病毒感染的患者进行DNA测定 ,并与微粒子发光法定量检测抗 -CMV及金标免疫斑点法检测抗 -CMV进行比较。... 目的　为了探讨巨细胞病毒检测的新途径及FQ -PCR技术在巨细胞病毒DNA诊断中的实用价值。方法　运用FQ-PCR技术对 10 0例怀疑巨细胞病毒感染的患者进行DNA测定 ,并与微粒子发光法定量检测抗 -CMV及金标免疫斑点法检测抗 -CMV进行比较。结果　FQ -PCR技术阳性率为 90 % ,微粒子发光法阳性率 86 % ,金标法阳性率为 6 2 %。结论　FQ -PCR技术不但具有明显高于微粒子发光法及金标法的阳性率 ,而且具有准确定量分析的优点 ,为病人早期诊断与药物疗效观察提供了更为精确的病原学依据 。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 巨细胞病毒感染 检测 应用 DNA探针
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荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA及临床意义评价 被引量：1
11
作者 费晓峰 吴建鸿 +1 位作者 李明 冯巧英 《抗感染药学》 2001年第3期23-26,共4页
目的:新设计荧光定量聚合酶链反应方法可定量检测血清中乙型肝炎病毒(HBV),以指导临床对乙型肝炎诊疗。方法:采用AG9900 Robo Master PCR仪及相配套Amplisensor定量试剂,全封闭、全自动地定量检测了669例临床血清标本中HBV DNA。结果:22... 目的:新设计荧光定量聚合酶链反应方法可定量检测血清中乙型肝炎病毒(HBV),以指导临床对乙型肝炎诊疗。方法:采用AG9900 Robo Master PCR仪及相配套Amplisensor定量试剂,全封闭、全自动地定量检测了669例临床血清标本中HBV DNA。结果:224例HBeAg阳性者,其HBV DNA对数均值为8.64±0.88拷贝数/毫升、阳性率为99.12％,明显高于HBeAg阴性者6.95±1.13拷贝数/毫升、阳性率50.85％(p<0.05);401例HBsAg阳性者血清中HBV DNA7.94±1.21拷贝数/毫升、明显高于HBsAg阴性者5.74±0.70拷贝数/毫升(p<0.05)。结论:能对HBV DNA准确定量,真实地反映HBV感染状况及复制水平,有助于临床对乙型肝炎及时诊断,抗病毒药物选择、疗效考核及预后判断等均有较高应用价值。并能克服普通PCR易污染、易导致假阳性等缺点。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 聚合酶链反应 荧光定量
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一步法多重荧光定量RT-PCR检测人杯状病毒的建立及应用 被引量：3
12
作者 王原 崔大伟 +1 位作者 胡正军 陈功祥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期647-651,共5页
目的建立检测人杯状病毒(human calicivirus,HuCVs,主要包括SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)的一步法多重荧光定量RTPCR(rRT-PCR)法。方法用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,通过合成的对应病毒基因的质粒来评价该方法的灵敏度、特... 目的建立检测人杯状病毒(human calicivirus,HuCVs,主要包括SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)的一步法多重荧光定量RTPCR(rRT-PCR)法。方法用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,通过合成的对应病毒基因的质粒来评价该方法的灵敏度、特异性和重复性,检测临床标本并对阳性结果进行基因测序验证。结果建立的rRT-PCR法检测SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ的灵敏度均达到103copies/mL,特异性为100%,且变异系数(CV)均≤1.275%。HuCVs检出率为21.43%(75/350),其中SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ分别为14.67%(11/75)、21.33%(16/75)和64.00%(48/75)。随机选择检测阳性结果进行测序,结果均与该法检测结果一致。结论建立的rRT-PCR法可同时检测并区分SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ病毒,可用于HuCVs引起的急性腹泻散发和暴发疫情的监测。 展开更多
关键词 人杯状病毒 札如病毒 诺如病毒 一步法多重荧光定量聚合酶链反应
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荧光定量聚合酶链反应法监测血浆EBV-DNA水平在鼻咽癌患者诊疗中价值 被引量：1
13
作者 温东辉 《中国医药科学》 2020年第11期113-115,179,共4页
目的总结鼻咽癌患者诊疗中应用荧光定量聚合酶链反应法监测血浆EBV-DNA水平变化的实际应用价值。方法观察组为2017年9月~2019年8月收治的150例鼻咽癌患者,对照组为同期体检的150例健康人员,应用荧光定量聚合酶链反应法监测两组人员血浆E... 目的总结鼻咽癌患者诊疗中应用荧光定量聚合酶链反应法监测血浆EBV-DNA水平变化的实际应用价值。方法观察组为2017年9月~2019年8月收治的150例鼻咽癌患者,对照组为同期体检的150例健康人员,应用荧光定量聚合酶链反应法监测两组人员血浆EBV-DNA水平,回顾分析EBVDNA阳性检出、治疗期间的EBV-DNA水平变化以及预后情况。结果观察组EBV-DNA阳性检出率为89.33%,高于对照组的5.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者随着治疗进行,其血浆EBVDNA水平呈现出明显下降趋势;对照组阳性患者治疗期间均有血浆EBV-DNA检出,不同预后患者在血浆EBV-DNA阳性方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论荧光定量聚合酶链反应法监测血浆EBVDNA水平能够为鼻咽癌患者的诊断与预后评价提供依据,有利于根据不同患者实际监测结果调整治疗方案,改善患者预后。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 血浆EBV-DNA水平 鼻咽癌 诊疗价值
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荧光定量聚合酶链反应检测女性生殖道分泌物沙眼衣原体等病原体
14
作者 周细国 潘高球 雷兰芳 《中国医学工程》 2002年第6期87-88,共2页
测女性生殖道分泌物中淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)的数量,以了解本地区上述3种病原体感染现状.方法:用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测了121份标本的NG-DNA和149份标本的CT-DNA与UU-DNA.结果:NG阳性率为49.6%(60/... 测女性生殖道分泌物中淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)的数量,以了解本地区上述3种病原体感染现状.方法:用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测了121份标本的NG-DNA和149份标本的CT-DNA与UU-DNA.结果:NG阳性率为49.6%(60/121),其阳性标本的平均拷贝数为3.61×105拷贝/ml;CT阳性率为23.5%(35/149),其阳性标本的平均拷贝数为9.59×104拷贝/ml;UU阳性率为34.3%(51/149),其阳性标本的平均拷贝数为4.11×105拷贝/ml.结论:FQ-PCR具有简便、快速、准确的优点,是目前快速诊断淋菌、非淋菌性阴道炎可靠准确的方法. 展开更多
关键词 淋病奈瑟菌 沙眼衣原体 解脲脲原体 荧光定量聚合酶链反应
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实时荧光定量聚合酶链反应在丙型肝炎检测中的临床应用价值分析
15
作者 汪圣强 穆会君 《中国医学工程》 2012年第12期32-33,共2页
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在检测丙型肝炎病毒(HCV)方面的差异。方法采用随机抽样分组方法,在2011年6月-2012年6月于我院就诊的HCV患者与同期在我局进行健康体检的正常人群中,各抽取90例,分为... 目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在检测丙型肝炎病毒(HCV)方面的差异。方法采用随机抽样分组方法,在2011年6月-2012年6月于我院就诊的HCV患者与同期在我局进行健康体检的正常人群中,各抽取90例,分为HCV组(A组)与正常对照组(B组)。对每一组样本,分别采用FQ-PCR和ELISA法,进行HCV-RNA和抗-HCV检测。结果 A组90例HC患者中,FQ-PCR和ELlSA分别检出阳性82例和73例,阳性率分别为91.1%和81.1%;B组90例健康对照组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阴性90例和87例,阴性率分别为100%和96.7%。结论在检测HCV方面,FQ-PCR比ELISA更具灵敏性和特异性,其临床应用价值更高,但ELISA也有操作简便,费用与耗时均较低的优点,在实际应用中可考虑两种方法联合检测,在提高了出入境人员和患者HCV的诊断准确率的同时,又可以减轻患者经济负担。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验 丙型肝炎病毒 联合检测
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荧光定量聚合酶链反应在病毒性肝炎诊疗中的应用
16
作者 陈刚 《华夏医学》 CAS 2007年第6期1412-1413,共2页
荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)是目前应用较为广泛的核酸定量方法,病毒核酸定量能直观地反映病毒在体内的复制程度,因此,FQ-PCR在对病毒性肝炎的早期诊断、治疗、疗效观察及判断预后等方面有着显著的应用价值。
关键词 病毒性肝炎 荧光定量聚合酶链反应 诊断
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不同激素处理下番茄实时荧光定量聚合酶链反应内参基因的筛选 被引量：1
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作者 白圣懿 王晓敏 +5 位作者 刘文娟 程国新 郭猛 姚文孔 高艳明 李建设 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期31-44,共14页
为筛选出在不同激素诱导下番茄中较为稳定的内参基因,本研究以脱落酸(abscisic acid,ABA)、茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)、水杨酸(salicylic acid,SA)3种外源激素分别诱导处理0、24、48、120 h的感病番茄品种‘Moneymaker’(MM)... 为筛选出在不同激素诱导下番茄中较为稳定的内参基因,本研究以脱落酸(abscisic acid,ABA)、茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)、水杨酸(salicylic acid,SA)3种外源激素分别诱导处理0、24、48、120 h的感病番茄品种‘Moneymaker’(MM)和抗病番茄自交系62579叶片为试验材料,通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)进行扩增,利用geNorm、NormFinder和BestKeeper 3个软件分析EF1α、L33、Act、Ubi、GAPDH、UK、CAC、TIP41这8个番茄候选内参基因的表达稳定性。结果表明,8个候选内参基因的平均CT值为26~34。综合3个软件的分析结果发现,在ABA诱导下,番茄中较稳定表达的内参基因为L33和Ubi;在MeJA诱导下,番茄中较稳定表达的内参基因为L33和EF1α;在SA诱导下,番茄中较稳定表达的内参基因为EF1α和L33。综上所述,L33基因是番茄在不同激素诱导下表达最稳定的候选内参基因。本研究筛选的最稳定内参基因将为后续番茄响应外源激素处理的差异基因表达分析和分子机制研究提供校准依据。 展开更多
关键词 番茄 激素诱导 实时荧光定量聚合酶链反应 内参基因
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基于实时荧光定量聚合酶链反应技术预测龋病发生的研究进展 被引量：5
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作者 孙同正 杨芳 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第1期13-15,共3页
龋病是发生在牙体组织的慢性感染性疾病,呈进行性不可逆进展,最终导致牙体组织缺损或丧失。龋病在人群中发病率极高,严重影响患者的生活质量,因此针对龋病的病因学研究及预防就显得尤其重要。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluore... 龋病是发生在牙体组织的慢性感染性疾病,呈进行性不可逆进展,最终导致牙体组织缺损或丧失。龋病在人群中发病率极高,严重影响患者的生活质量,因此针对龋病的病因学研究及预防就显得尤其重要。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)技术,可对龋病的病因学及发病机制进行定量研究,发现与龋病密切相关的菌群,并为龋病的预防和治疗策略提供新的思路。 展开更多
关键词 龋病 变异链球菌 白色念珠菌 乳酸杆菌 实时荧光定量聚合酶链反应
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TaqMan-MGB探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12 被引量：4
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作者 赵一苹 郭益文 +5 位作者 刘龙飞 胡德宝 李新 张林林 丁向彬 郭宏 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第24期9362-9370,共9页
目的建立一种TaqMan-小沟结合物(minor groove binder,MGB)探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12的分析方法。方法设计动物双歧杆菌BB-12的16SrRNA序列的MGB探针,利用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain ... 目的建立一种TaqMan-小沟结合物(minor groove binder,MGB)探针荧光定量聚合酶链式反应法检测酸奶制品中动物双歧杆菌BB-12的分析方法。方法设计动物双歧杆菌BB-12的16SrRNA序列的MGB探针,利用荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)技术,构建目标序列的过表达载体,提取质粒进行标准曲线的绘制,最后进行市售酸奶样品检测,定量酸奶中BB-12菌株的数量。结果所有载体标准品均产生显著的荧光增幅,循环阈值(cycle threshold, Ct)介于16~20之间;而以其他酸奶制品添加菌及大肠杆菌样品DNA为模板则无荧光扩增信号。在检测灵敏度方面,BB-12载体可被稳定检出的质量浓度低至0.0000584 ng/μL, Ct值平均数为28.73,即检测灵敏度低至为0.05 pg。绘制的标准曲线线性良好,扩增效率E为0.39,判定系数R^(2)=0.9999。市售酸奶样品检测特异性好、灵敏度高、定量结果准确。结论本研究建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测法可实现在酸奶中对BB-12菌种的检测及定量。 展开更多
关键词 TaqMan-MGB探针荧光定量聚合酶链反应 动物双歧杆菌BB-12 酸奶制品 定量检测
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荧光定量聚合酶链反应检测支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌脱氧核糖核酸诊断肺结核的价值 被引量：4
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作者 吴淑红 荣福 欧阳雁弟 《中国实用医药》 2018年第10期16-18,共3页
目的探讨荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TbDNA)诊断肺结核的临床价值。方法选取51例肺结核患者作为肺结核组,另选60例非肺结核患者作为对照组。所有患者均完善BALF TbDNA检测及毛刷涂... 目的探讨荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TbDNA)诊断肺结核的临床价值。方法选取51例肺结核患者作为肺结核组,另选60例非肺结核患者作为对照组。所有患者均完善BALF TbDNA检测及毛刷涂片抗酸染色镜检、痰涂片抗酸染色镜检。以评价BALF中TbDNA检测对诊断肺结核的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)。结果荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA,其阳性对肺结核诊断的敏感性、特异性、PPV、NPV分别为74.51%、96.67%、95.00%、81.69%,肺结核组毛刷涂片抗酸染色镜检的敏感性为13.73%,痰涂片抗酸染色镜检敏感性为15.69%。对照组中,荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA的特异性为96.67%,毛刷涂片抗酸染色镜检及痰涂片抗酸染色镜检的特异性均为100.00%。肺结核组荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA与痰涂片抗酸染色镜检及毛刷涂片抗酸染色镜检敏感性比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA与毛刷涂片抗酸染色镜检及痰涂片抗酸染色镜检的特异性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA有良好的特异性和敏感性,有望辅助传统的检查来早期诊断肺结核。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 支气管肺泡灌洗液 结核分枝杆菌脱氧核糖核酸 肺结核
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