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基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:4
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作者 孟春春 段云兵 +5 位作者 仇旭升 金仕强 詹媛 张向乐 于圣青 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第5期8-14,共7页
根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列,并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀... 根据Ⅶ型新城疫病毒基质蛋白基因保守序列设计并合成特异性引物,建立快速检测Ⅶ型新城疫病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。通过RT-PCR方法克隆Ⅶ型新城疫病毒M基因靶序列,并将其连入T-Easy载体,制备阳性标准品,优化反应条件,以10倍系列稀释的标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999。检测结果显示,该方法的灵敏度可达100 copies/μL,而且特异性良好,除Ⅶ型新城疫病毒外,对Ⅱ型/Ⅲ型/IV型/Ⅸ型新城疫病毒、H5亚型禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究所建立的检测方法重复性好,批内和批间变异系数均小于5%。对40份实验感染样品的检测结果表明,其检出率为95%,而常规RT-PCR方法检出率仅为70%,表明该方法比常规RT-PCR检测方法灵敏度更高、特异性更强。 展开更多
关键词 ⅶ型新城疫病毒 SYBR Green 实时荧光定量RT-PCR
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2014-2018年我国5株基因Ⅶ型新城疫病毒的基因组特性 被引量:3
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作者 王静静 于晓慧 +4 位作者 罗瑶瑶 李阳 蒋文明 刘华雷 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2020年第5期37-42,共6页
为了解我国基因Ⅶ型新城疫病毒的分子生物学特性,对2014-2018年分离的5株基因Ⅶ型新城疫病毒代表株进行了基因组测序和生物信息学分析。序列分析显示:5株病毒F蛋白裂解位点为112RRQKR/F117或112RRRKR/F117,具有强毒株的典型特征;病毒基... 为了解我国基因Ⅶ型新城疫病毒的分子生物学特性,对2014-2018年分离的5株基因Ⅶ型新城疫病毒代表株进行了基因组测序和生物信息学分析。序列分析显示:5株病毒F蛋白裂解位点为112RRQKR/F117或112RRRKR/F117,具有强毒株的典型特征;病毒基因组长度均为15 192 nt,其F蛋白融合肽、七肽重复区和跨膜区,以及HN蛋白跨膜区、中和抗原表位等功能区有多处氨基酸变异。病毒F基因遗传进化分析显示:2014-2015年分离的2株病毒属于基因Ⅶ.1.1亚型;2016-2018年分离的3株病毒属于基因Ⅶ.2亚型,暗示此亚型毒株可能已逐步取代基因Ⅶ.1.1亚型,成为家禽中的优势流行毒株。本研究进一步掌握了我国基因Ⅶ型新城疫病毒的遗传特性,从而为科学防控该病提供了参考。 展开更多
关键词 基因ⅶ型新城疫病毒 氨基酸变异 遗传进化分析
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基因Ⅶ型新城疫病毒母源抗体对雏鸡的免疫保护效果 被引量:1
3
作者 沈欣悦 李建梅 +3 位作者 刘梅 王广泽 戴亚斌 彭大新 《中国家禽》 北大核心 2019年第23期26-30,共5页
为了解基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)母源抗体对雏鸡的免疫保护作用,对雏鸡母源抗体水平与种母鸡免疫抗体间的相关性、雏鸡母源抗体衰减规律以及不同母源抗体水平对雏鸡的免疫保护效果进行了研究。结果显示:雏鸡母源抗体水平与相应种母鸡的... 为了解基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)母源抗体对雏鸡的免疫保护作用,对雏鸡母源抗体水平与种母鸡免疫抗体间的相关性、雏鸡母源抗体衰减规律以及不同母源抗体水平对雏鸡的免疫保护效果进行了研究。结果显示:雏鸡母源抗体水平与相应种母鸡的抗体水平基本一致,虽然1日龄雏鸡平均抗体滴度较相应种母鸡抗体滴度约低1.3 log2,但在其出生后最初几天内会稍有上升;雏鸡母源抗体半衰期为3.20 d;不同母源抗体水平雏鸡用基因Ⅶ型NDV强毒株攻毒后,死亡率与排毒率均随母源抗体滴度上升而呈下降趋势;母源抗体滴度达到7 log2时即对雏鸡产生95%以上的保护率,但各攻毒组均存在不同程度的排毒现象,即使其抗体滴度高达11 log2也不例外;母源抗体滴度为4 log2和5 log2的雏鸡可持续排毒至攻毒后27 d,个体排毒期为925 d,平均为15 d。 展开更多
关键词 雏鸡 基因ⅶ型新城疫病毒 母源抗体 免疫保护 排毒
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1株鸽源基因Ⅶ型新城疫强毒株的分离鉴定及全基因组分析 被引量:2
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作者 李梦娇 栗永华 +11 位作者 杨彬 徐智凯 王汉青 仇旭升 孙英杰 谭磊 廖瑛 宋翠萍 刘炜炜 丁铲 孟春春 吴艳涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第7期5-9,14,共6页
为进一步了解新城疫病毒(NDV)的遗传进化规律,从疑似NDV感染的鸽群中通过鸡胚接种分离出1株新城疫强毒株,将其命名为Pigeon/China/SHJD13/2017,经噬斑纯化后测定其鸡胚平均死亡时间(MDT)为57.2 h,1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)为2,毒力... 为进一步了解新城疫病毒(NDV)的遗传进化规律,从疑似NDV感染的鸽群中通过鸡胚接种分离出1株新城疫强毒株,将其命名为Pigeon/China/SHJD13/2017,经噬斑纯化后测定其鸡胚平均死亡时间(MDT)为57.2 h,1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)为2,毒力指标属于强毒NDV。参考GenBank公布的NDV全基因组序列,共设计了11对引物,对其进行全基因组测序,序列测定结果显示:分离株属于基因Ⅶ型NDV,其基因组全长15192 bp,登录号为MK937786,F基因共包含553个aa,裂解位点的氨基酸残基为112 R-R-Q-K-R-F 117,符合NDV强毒株的分子特征。通过序列同源性比对分析,该分离株与鸡源强毒株Chicken/China/SDWF07/2011亲缘关系较近,表明该鸽源分离毒株可能来自于感染的鸡群。 展开更多
关键词 鸽子 基因ⅶ型新城疫病毒 全基因组分析
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