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类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统BPSS1395蛋白表达及其抗体制备与鉴定
被引量：
4
1
作者
胡艺
胡志强
+4 位作者
马腾飞
韩丹
李倩
方瑶
毛旭虎
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第10期941-945,共5页
目的重组表达类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统蛋白BPSS1395,利用其抗体检测该蛋白在细菌中的分布。方法以pET-22b为表达系统,采用DNA重组技术在大肠杆菌中表达BPSS1395蛋白;用纯化重组蛋白免疫新西兰大白兔,Western blot及ELISA法鉴定其免疫学性...
目的重组表达类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统蛋白BPSS1395,利用其抗体检测该蛋白在细菌中的分布。方法以pET-22b为表达系统,采用DNA重组技术在大肠杆菌中表达BPSS1395蛋白;用纯化重组蛋白免疫新西兰大白兔,Western blot及ELISA法鉴定其免疫学性质;以制备的抗血清Western blot分析该蛋白的亚细胞定位。结果从类鼻疽杆菌BPC006株基因组DNA中PCR得到了BPSS1395目的基因,并成功构建pET-22b-BPSS1395重组质粒,转化到E.coli宿主菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达、纯化得到了相对分子质量为32×10~3的高纯度BPSS1395蛋白,制备的兔抗血清ELISA效价均高达1∶1 280 000,并能与目的蛋白发生特异性抗原抗体反应。亚细胞分离后BPSS1395在类鼻疽杆菌中主要定位于细胞质。结论重组表达了具有生物活性的BPSS1395蛋白,制备了其特异性多克隆抗体,证明了该蛋白定位于细胞质。
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关键词
类鼻疽杆菌
ⅲ型分泌系统蛋白
抗体制备与鉴定
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职称材料
题名
类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统BPSS1395蛋白表达及其抗体制备与鉴定
被引量：
4
1
作者
胡艺
胡志强
马腾飞
韩丹
李倩
方瑶
毛旭虎
机构
第三军医大学西南医院医学检验系临床微生物及免疫学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第10期941-945,共5页
基金
国家自然科学基金面上项目(30973402)~~
文摘
目的重组表达类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统蛋白BPSS1395,利用其抗体检测该蛋白在细菌中的分布。方法以pET-22b为表达系统,采用DNA重组技术在大肠杆菌中表达BPSS1395蛋白;用纯化重组蛋白免疫新西兰大白兔,Western blot及ELISA法鉴定其免疫学性质;以制备的抗血清Western blot分析该蛋白的亚细胞定位。结果从类鼻疽杆菌BPC006株基因组DNA中PCR得到了BPSS1395目的基因,并成功构建pET-22b-BPSS1395重组质粒,转化到E.coli宿主菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达、纯化得到了相对分子质量为32×10~3的高纯度BPSS1395蛋白,制备的兔抗血清ELISA效价均高达1∶1 280 000,并能与目的蛋白发生特异性抗原抗体反应。亚细胞分离后BPSS1395在类鼻疽杆菌中主要定位于细胞质。结论重组表达了具有生物活性的BPSS1395蛋白,制备了其特异性多克隆抗体,证明了该蛋白定位于细胞质。
关键词
类鼻疽杆菌
ⅲ型分泌系统蛋白
抗体制备与鉴定
Keywords
Burkholderia pseudomallei
Type
ⅲ
secretion system protein
polyclonal antibodies
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
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作者
出处
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被引量
操作
1
类鼻疽杆菌Ⅲ型分泌系统BPSS1395蛋白表达及其抗体制备与鉴定
胡艺
胡志强
马腾飞
韩丹
李倩
方瑶
毛旭虎
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
4
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