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改进猪圆环病毒Ⅱ型感染的免疫治疗方法探究 被引量：1
1
作者 谭连弟 袁敏仪 《中国动物保健》 2025年第2期137-138,共2页
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)对全球养猪业构成严重威胁。文中探讨了改进PCV2传染的免疫疗法方式,包含非特异性免疫细胞医治(如树突状细胞疫苗和自然杀伤细胞医治)、使用新的免疫增强剂(β-葡聚糖与细胞因素联合应用)以及联合免疫疗法方案。希... 猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)对全球养猪业构成严重威胁。文中探讨了改进PCV2传染的免疫疗法方式,包含非特异性免疫细胞医治(如树突状细胞疫苗和自然杀伤细胞医治)、使用新的免疫增强剂(β-葡聚糖与细胞因素联合应用)以及联合免疫疗法方案。希望能为PCV2感染工作的防控给予新的思路和技术手段。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型感染 免疫治疗方法 联合免疫
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猪圆环病毒Ⅱ型感染3D4/2细胞的转录组学分析
2
作者 陈虹伶 赵怡 +5 位作者 陈家骥 韦秋旭 李禧梦 冯国越 胡焜翔 胡庭俊 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期42-51,共10页
【目的】通过转录组测序筛选猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus typeⅡ,PCV2)感染猪肺泡巨噬细胞系(3D4/2)差异表达基因,为了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和抗PCV2感染药物研发奠定基础。【方法】用感染复数(multiplicity of infection,... 【目的】通过转录组测序筛选猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus typeⅡ,PCV2)感染猪肺泡巨噬细胞系(3D4/2)差异表达基因,为了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和抗PCV2感染药物研发奠定基础。【方法】用感染复数(multiplicity of infection, MOI)为1的PCV2 NJ2002株处理3D4/2细胞,利用Illumina NovaSeq 6000测序平台进行转录组测序。使用DeSeq 2.0软件进行差异表达基因分析,并对差异表达基因进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能分析及转录因子靶向分析,选取免疫及凋亡相关基因进行实时荧光定量PCR验证,用Western blotting技术检测细胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)及磷酸化胞内磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达水平。【结果】转录组测序结果显示,与对照组相比,PCV2感染组共获得713个差异表达基因,其中313个上调,400个下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,差异表达基因与免疫应答等相关,主要富集在细胞外基质受体互作通路、新陈代谢通路、HIF-1信号通路、病毒致癌作用、PI3K-Akt等信号通路。实时荧光定量PCR结果与转录组测序的基因表达水平保持一致。Western blotting检测结果显示,PCV2感染3D4/2细胞24 h后PI3K和Akt蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05)。转录因子靶向分析表明,差异表达基因与核转录因子Y亚基β(NFYB)和ETS转录因子(ELK4)联系紧密。【结论】PCV2可能通过PI3K-Akt信号通路影响下游炎症信号通路和凋亡信号通路增强自身复制能力。NFYB和ELK4转录因子在PCV2感染过程中可能发挥重要作用,可考虑作为抗PCV2药物靶点。研究结果为深入了解PCV2感染宿主免疫细胞机制和相关药物开发提供了理论基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 3D4/2细胞 转录组测序 差异表达基因 转录因子
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江苏省及周边地区猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)分子流行病学调查 被引量：28
3
作者 曹东阳 王小敏 +2 位作者 钱爱东 何孔旺 茅爱华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第2期390-398,共9页
为了解中国江苏省及周边地区猪圆环病毒Ⅱ型（ PCV2）的分子流行病学以及毒株的遗传变异情况，本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序，共获得18株PCV2全基因序列，并对所得... 为了解中国江苏省及周边地区猪圆环病毒Ⅱ型（ PCV2）的分子流行病学以及毒株的遗传变异情况，本研究运用PCR技术对来源于不同地区、不同猪场且PCV2检测为阳性的样品进行全基因组序列的扩增和测序，共获得18株PCV2全基因序列，并对所得到的毒株进行遗传变异分析。结果表明，18株毒株与国内外的参考毒株同源性为93．5％～99？7％，而ORF2核苷酸及其推导的氨基酸序列同源性分别为87．1％～99？9％和84．2％～99？6％，说明毒株存在一定程度的变异。系统进化树分析结果显示18株毒株中有5株PCV2a，7株PCV2b，6株PCV2d，其中20150429YC全长为1766 bp，与（HM038031．1 PCV2d等）参考毒株的同源性为100？0％，未发现PCV2c。同时，Cap蛋白的抗原表位和抗原性也发生了变化。说明，目前江苏省及周边地区猪群中PCV2感染较为普遍，PCV2的流行毒株以PCV2b基因型为主，PCV2d次之。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 分子流行病学 遗传变异
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猪圆环病毒Ⅱ型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量：8
4
作者 曹伟伟 郭抗抗 +7 位作者 许信刚 宁蓬勃 刘伟 程敏 董玲娟 徐磊 高婉俊 任敏 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第1期13-18,共6页
【目的】建立一种能在临床上快速、准确检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)的TaqMan实时荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank中已公布的PCV-2陕西分离株的全基因序列,在PCV-2的ORF2核苷酸序列的保守区域,设计合成1条TaqMan探针和1对特异性引物... 【目的】建立一种能在临床上快速、准确检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)的TaqMan实时荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank中已公布的PCV-2陕西分离株的全基因序列,在PCV-2的ORF2核苷酸序列的保守区域,设计合成1条TaqMan探针和1对特异性引物;利用设计的引物扩增ORF2部分基因并鉴定后,回收PCR扩增产物,连接pMD19-T载体,转化DH5α大肠杆菌,涂布Amp+琼脂平板,挑取阳性克隆进行PCR及测序鉴定后提取质粒,作为荧光定量PCR的标准品;以标准品为模板建立检测PCV-2的TaqMan实时荧光定量PCR方法,并对该方法的灵敏度、稳定性和特异性进行评价;用建立的荧光定量方法对56份临床样品进行检测,并将检测结果与传统PCR方法进行比较。【结果】建立了PCV-2的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,其标准曲线的斜率为-3.383,R2=0.998,具有良好的线性关系;重复性试验结果表明,该方法循环数阈值Ct的变异系数(CV)为0.86%～1.02%,具有良好的稳定性;敏感性检测结果表明,该方法的最低检测限度为5.06copies/μL;特异性检测结果显示,该方法对猪圆环病毒Ⅰ型(PCV-1)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)的检测结果均为阴性,对PCV-2标准品的检测结果为阳性,说明该方法具有较好的特异性。临床样品的检测中,所建立的Taq-Man实时荧光定量PCR检测方法的检出阳性率较传统PCR方法高14.3%。【结论】成功建立了PCV-2的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,该方法可用于临床上对PCV-2的检测。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 TaqMan荧光定量PCR 病毒检测
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猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：8
5
作者 元永平 丛丽媛 +3 位作者 陈德坤 蒋智勇 张春红 宋长绪 《西北农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期15-19,共5页
以纯化复性的猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）Cap重组蛋白作为免疫原，按常规方法免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与SP2／0细胞融合，经间接ELISA筛选，获得了3株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为1C7A4、4F3F5和4G8F7，其染色... 以纯化复性的猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）Cap重组蛋白作为免疫原，按常规方法免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与SP2／0细胞融合，经间接ELISA筛选，获得了3株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，分别命名为1C7A4、4F3F5和4G8F7，其染色体平均数为98～103，间接ELISA检测3株细胞培养上清效价分别为1：3125、1：3125、1：15625，小鼠腹水效价分别为1：390000、1：390000、1：1950000。ELISA结果显示，1C7A4、4F3F5和4G87F仅与融合表达的PCV2-Cap蛋白反应，而与PET-32a载体表达的蛋白不反应。相加ELISA结果显示3株单克隆抗体对应两个不同的病毒抗原位点。间接免疫荧光结果显示，1C7A4、4F3F5和4G8F7能与PCV2发生反应，而不与PCV1发生交叉反应。结果表明所获得的3株单抗是PCV2型特异性的，为PCV1和PCV2鉴别诊断方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 ORF2重组蛋白 单克隆抗体
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猪圆环病毒Ⅱ型核酸诊断方法的建立和初步应用 被引量：4
6
作者 高骏 胡建华 +3 位作者 孙凤萍 李春华 王英 蒋凤英 《上海农业学报》 CSCD 2007年第4期102-104,共3页
根据Genebank上已发表的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)序列设计1对引物PL1/PL2,通过对反应条件的优化,建立了有效的猪圆环病毒Ⅱ型的PCR诊断方法,并对沪郊1株PCV-2分离毒进行了检测和测序鉴定,结果显示此株分离毒为PCV-2病毒。结果显示:新建立... 根据Genebank上已发表的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)序列设计1对引物PL1/PL2,通过对反应条件的优化,建立了有效的猪圆环病毒Ⅱ型的PCR诊断方法,并对沪郊1株PCV-2分离毒进行了检测和测序鉴定,结果显示此株分离毒为PCV-2病毒。结果显示:新建立的PCV-2的PCR诊断方法具有快速、准确等优点。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 PCV-2 PCR
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猪圆环病毒Ⅱ型在育肥猪机体内的残留时间检测 被引量：3
7
作者 甘振磊 汤德元 +3 位作者 罗险峰 曾智勇 王凤 李春燕 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第10期126-127,129,共3页
为弄清猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)对其正常生长及繁殖性能的影响,采用ELISA及PCR检测方法,对1例感染PCV病毒的长白猪进行PCV2的抗体水平检测及其在猪机体的残留时间研究。结果表明:ELISA检测,2月龄、4月龄、6月龄和8月龄的血清抗体值分别为0.... 为弄清猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)对其正常生长及繁殖性能的影响,采用ELISA及PCR检测方法,对1例感染PCV病毒的长白猪进行PCV2的抗体水平检测及其在猪机体的残留时间研究。结果表明:ELISA检测,2月龄、4月龄、6月龄和8月龄的血清抗体值分别为0.445、0.522、0.396和0.225,PCV2抗体水平呈先增高后降低的趋势;PCR检测诊断,不同时期的检测结果均为阳性,但病情逐渐恢复到正常状态,生产性能有所下降。该猪感染PCV2后患病猪病情即使逐渐好转,但PCV2仍在机体内长期存留,使猪群长期不断地向外界排毒,给周围的环境造成严重危害。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 ELISA检测 PCR技术 残留检测
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猪圆环病毒Ⅱ型ORF3基因缺失突变毒株对仔猪的致病性及免疫原性研究 被引量：7
8
作者 杨晓农 郭万柱 +4 位作者 徐志文 朱玲 王新 曾秀 王小玉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1094-1099,共6页
15头28～30日龄健康仔猪分成A、B、C3组（5头／组），分别肌注接种PCV2ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C、亲本毒株PCV2-CD以及生理盐水。用PCR-RFLP和PCR方法，分别从A组和B组屠宰仔猪的腹股沟淋巴结中特异性检测到mPCV2-C和PCV2-CDDNA，发... 15头28～30日龄健康仔猪分成A、B、C3组（5头／组），分别肌注接种PCV2ORF3基因缺失突变毒株mPCV2-C、亲本毒株PCV2-CD以及生理盐水。用PCR-RFLP和PCR方法，分别从A组和B组屠宰仔猪的腹股沟淋巴结中特异性检测到mPCV2-C和PCV2-CDDNA，发现mPCV2-C能够在仔猪体内复制增殖。组织病理学结果表明；A组和B组腹股沟淋巴结、肝细胞及肺泡壁上皮细胞呈现病变，其中B组病变较严重，证实ORF3基因缺失未改变PCV2的组织嗜性。外周血T淋巴细胞亚群含量动态检测结果表明：与C组相比，A组、B组外周血CD3^＋、CD4^＋细胞百分含量降低，而A组CD8^＋细胞于免疫后第14天回升，高于B组和C组，表明ORF3基因缺失使病毒对T淋巴细胞亚群的影响有所减弱，并有诱导仔猪细胞免疫应答的趋势。上述结果提示ORF3缺失致使病毒的致病力有降低的趋势。PCV2抗体动态检测发现：mPCV2-C明显诱导了仔猪的体液免疫，具有良好的免疫原性。mPCV2-C可作为PCV2基因缺失疫苗候选毒株。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型(PCV2) ORF3基因 基因缺失 致病性 免疫原性
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猪圆环病毒Ⅱ型特异抗体检测间接ELISA法的建立 被引量：3
9
作者 魏凡华 曹瑞兵 +4 位作者 张玉颖 吴润 吴延功 张晓勇 陈溥言 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期10-13,共4页
利用巴斯德毕赤酵母表达的猪圆环病毒2型株Cap蛋白为包被抗原,成功地建立了一种检测血清中PCV-2特异抗体的间接ELISA方法.确定了血清样品阴、阳性判定标准.临床检测结果表明,自建ELISA试剂盒具有较高的敏感性和特异性.
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 重组CAP蛋白 间接ELISA
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猪圆环病毒Ⅱ型广东分离株全基因组的克隆和序列分析 被引量：2
10
作者 王宪文 曹永长 +6 位作者 马静云 田纯见 覃健萍 詹爱军 周庆丰 于康震 毕英佐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期5-8,共4页
分离了9株猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)广东地方分离株,并进行了全基因组序列测定;对这9株PCV2广东分离毒株的ORF1和ORF2基因的序列分析表明ORF2的变异程度要比ORF1的变异程度大;对PCV2衣壳蛋白的氨基酸序列同源性比较发现了PCV2毒株间存在1个... 分离了9株猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)广东地方分离株,并进行了全基因组序列测定;对这9株PCV2广东分离毒株的ORF1和ORF2基因的序列分析表明ORF2的变异程度要比ORF1的变异程度大;对PCV2衣壳蛋白的氨基酸序列同源性比较发现了PCV2毒株间存在1个氨基酸变异程度较大的区域和2个氨基酸变异程度较小的区域,其中前两个区域与两个主要的免疫反应区域相对应;将这9个毒株的全基因组序列与GenBank上收录的18个PCV2毒株的全基因组序列基因进化树分析表明,这9个PCV2广东分离株彼此之间及与国内PCV2分离株、欧洲株之间更接近,而与韩国、中国台湾、日本和美洲毒株之间则稍远,因而在选PCV2疫苗免疫时,建议尽量使用国内生产的疫苗或自制组织灭活疫苗进行免疫。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 序列分析
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猪圆环病毒Ⅱ型单克隆抗体的制备及应用 被引量：2
11
作者 车勇良 周伦江 +4 位作者 王隆柏 魏宏 陈少莺 陈如敬 庄向生 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第3期12-16,22,共6页
【目的】制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体,并对其进行鉴定和应用。【方法】以超离纯化的猪圆环病毒Ⅱ型作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经间接ELISA筛选获得了2株分泌PCV2-Cap蛋白... 【目的】制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体,并对其进行鉴定和应用。【方法】以超离纯化的猪圆环病毒Ⅱ型作为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经间接ELISA筛选获得了2株分泌PCV2-Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为8-60和10-48,对其生物学特性进行鉴定,并将其作为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。【结果】8-60和10-48的染色体数平均为98～105对,间接ELISA检测其细胞培养上清液效价分别为1∶16和1∶32,小鼠腹水效价分别为1∶3×212和1∶3×213,抗体的免疫球蛋白亚型均为IgM。间接免疫荧光结果显示,8-60和10-48能与PCV2发生反应;利用这种特性,建立了能诊断PCV2病原的间接免疫荧光诊断方法,实际应用结果表明,其诊断结果与PCR方法诊断结果基本一致,阳性和阴性的符合率分别为93.75%和100%。【结论】以制备的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体为一抗,建立了间接免疫荧光诊断方法。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 单克隆抗体 CAP蛋白 ELISA方法 间接免疫荧光
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猪圆环病毒Ⅱ型和巨噬细胞对体外培养仔猪淋巴细胞白介素-6和白介素-10及其受体表达的影响 被引量：7
12
作者 陈耿 华利忠 张书霞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第5期993-998,共6页
选取5头猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清抗体阴性的普通断奶仔猪,无菌取其脾脏制成单细胞悬液后,分设淋巴细胞(L组)、淋巴细胞+PCV2(L+V组)、淋巴细胞+巨噬细胞(L+M组)和淋巴细胞+巨噬细胞+PCV2(L+M+V组)4组... 选取5头猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)血清抗体阴性的普通断奶仔猪,无菌取其脾脏制成单细胞悬液后,分设淋巴细胞(L组)、淋巴细胞+PCV2(L+V组)、淋巴细胞+巨噬细胞(L+M组)和淋巴细胞+巨噬细胞+PCV2(L+M+V组)4组进行体外培养。分别在培养后0 h、6 h、12 h和24 h收获淋巴细胞及其上清液。用ELISA检测上清液中猪淋巴细胞白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)的含量,用RT-PCR检测淋巴细胞中IL-6、IL-6R、IL-10和IL-10RmRNA的表达。结果显示:与L组相比,L+V组中IL-6的含量在攻毒后24 h显著升高(P<0.05);PCV2在攻毒后12 h对IL-6RmRNA的表达呈显著抑制(P<0.05);PCV2在攻毒后6 h显著促进IL-10的表达(P<0.05)。上述结果表明,PCV2能促进淋巴细胞中IL-6和IL-10的表达;而巨噬细胞能抑制PCV2对淋巴细胞中IL-6表达的上调作用,同时协同PCV2促进淋巴细胞中IL-10及其受体持续性高表达,导致持续的免疫抑制,在PCV2的致病过程中扮演重要角色。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 巨噬细胞 淋巴细胞 白介素-6 白介素-10
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3株猪Ⅱ型圆环病毒的分离及基因组序列分析 被引量：1
13
作者 刘业兵 孙跃辉 +3 位作者 张磊 薛青红 宁宜宝 黄金海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期635-637,共3页
为了解混合感染中猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)毒株的遗传变异特性,本研究对2009年与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的病料中分离的3株PCV2通过PCR、免疫荧光等进行初步鉴定,并扩增病毒全基因组,用DNAStar对序列进行拼接和分析。结果... 为了解混合感染中猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)毒株的遗传变异特性,本研究对2009年与高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的病料中分离的3株PCV2通过PCR、免疫荧光等进行初步鉴定,并扩增病毒全基因组,用DNAStar对序列进行拼接和分析。结果表明:分离得到的HUN-09株(GQ449670)、HUB-09株(GQ449671)和SD-09株(GQ449669)3个PCV2毒株其全基因组长度均为1768bp,与国内外参考毒株核苷酸序列同源性为95%～99.7%,3个分离株之间的核苷酸序列同源性为97.6%～98.5%,与PCV1分离株核苷酸序列同源性为69%～70%。进化分析表明,本研究2009年分离的3株PCV2属于基因型PCV-2a。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 分离 基因组 序列分析
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猪圆环病毒Ⅱ型血清抗体ELISA检测方法的建立 被引量：1
14
作者 车勇良 石运通 +6 位作者 陈少莺 王隆柏 魏宏 吴振糜 庄向生 陈如敬 周伦江 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第3期279-285,共7页
为了检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体,本试验建立了快速、敏感的ELISA诊断方法.通过比较差速离心、蔗糖不连续梯度离心、氯化铯等密度梯度离心和氯仿抽提结合超速离心等4种方法纯化PCV2抗原的包被效果,来确定最佳的PCV2包被抗原纯化方法,... 为了检测猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)抗体,本试验建立了快速、敏感的ELISA诊断方法.通过比较差速离心、蔗糖不连续梯度离心、氯化铯等密度梯度离心和氯仿抽提结合超速离心等4种方法纯化PCV2抗原的包被效果,来确定最佳的PCV2包被抗原纯化方法,在此基础上,通过全病毒抗原最适包被浓度和二抗HRP-SPA稀释倍数的确定、待测血清稀释倍数的确定、封闭液浓度的确定、封闭时间的确定、HRP-SPA反应时间的确定、临界值的确定、特异性测定、重复性测定、符合率比较等,进一步优化检测PCV2抗体的间接ELISA方法.结果表明:对猪的多种病毒阳性血清进行ELISA检测,只有PCV2阳性血清呈阳性;对6份血清进行4次重复试验,方差分析显示P>0.05,差异不显著;与PCV2-ELISA试剂盒(INGEZIM公司生产)的符合率比较,其总符合率达88.89%.可见,优化建立的检测PCV2抗体的间接ELISA方法特异性强、重复性高、稳定性好,可用于PCV2血清学诊断和血清学普查. 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 ELISA方法 抗体
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猪圆环病毒Ⅱ型ORF2重组蛋白抗体诊断试剂IgG的研制 被引量：1
15
作者 陆英杰 林涛 +3 位作者 欧阳峰 谭铁兵 马春全 邓桦 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期64-66,共3页
应用猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus 2,PCV2)ORF2重组蛋白,研制诊断PCV2的抗体试剂。利用原核表达系统表达PCV2 ORF2蛋白,经12%浓度的SDS-PAGE凝胶电泳分析后免疫家兔制备抗PCV2ORF2重组蛋白抗体,并用间接酶联免疫吸附试验(indirect... 应用猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus 2,PCV2)ORF2重组蛋白,研制诊断PCV2的抗体试剂。利用原核表达系统表达PCV2 ORF2蛋白,经12%浓度的SDS-PAGE凝胶电泳分析后免疫家兔制备抗PCV2ORF2重组蛋白抗体,并用间接酶联免疫吸附试验(indirect-ELISA)确定其效价,然后以Western blotting法分析该抗体特异性。结果表明:PCV2 ORF2重组蛋白被表达,且在免疫家兔后获得效价高、特异性好的抗体。兔抗PCV2-ORF2重组蛋白抗体以其特异性好的特点可以作为免疫诊断试剂。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 ORF2 抗体诊断试剂IgG
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猪圆环病毒Ⅱ型的分离与全基因组序列分析 被引量：1
16
作者 周伦江 王隆柏 +4 位作者 车勇良 魏宏 陈少莺 刘玉涛 庄向生 《福建农业学报》 CAS 2006年第2期118-122,共5页
从福建省表现为断奶猪多系统衰竭综合征的猪群中分离到两株猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2),分别命名为FUQING0401和PUTIAN0401。通过对这两个分离株的全基因组序列测定,并同GenBank登录的12个代表毒株进行了遗传进化分析,结果表明：福建省两分离... 从福建省表现为断奶猪多系统衰竭综合征的猪群中分离到两株猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2),分别命名为FUQING0401和PUTIAN0401。通过对这两个分离株的全基因组序列测定,并同GenBank登录的12个代表毒株进行了遗传进化分析,结果表明：福建省两分离株的ORF1核苷酸同源率为97.5％,rep蛋白之间有6个氨基酸的差别,ORF2的核苷酸同源率为99.7％,而两者氨基酸同源率为98.7％。福建省两分离株与加拿大、美国、欧洲以及中国其他地方毒株之间的同源性很高,遗传进化分析表明这两毒株与其他代表毒株可分为几个小分支,但它们之间的核苷酸同源率在91.6％～99.9％,并没有发现福建的两个毒株之间存在地区特异性。 展开更多
关键词 断奶猪多系统衰竭综合征 猪圆环病毒ⅱ型 猪 序列分析
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猪圆环病毒Ⅱ型盐城株的全基因组克隆与序列分析 被引量：1
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作者 陶宏卫 郭广富 +6 位作者 曹军平 申建荣 张晋川 练国俊 朱爱萍 张佳浩 朱金其 《江苏农业科学》 2018年第16期39-41,共3页
采用PCR方法对采集自盐城地区的疑似猪圆环病毒病病料进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV 2)全基因组的扩增,确定了2份病料中的PCV 2的分子特征,分别命名为BH07株和BH11株,对其进行克隆、测序后,应用软件进行全基因组核苷酸序列比对分析。结果显示,... 采用PCR方法对采集自盐城地区的疑似猪圆环病毒病病料进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV 2)全基因组的扩增,确定了2份病料中的PCV 2的分子特征,分别命名为BH07株和BH11株,对其进行克隆、测序后,应用软件进行全基因组核苷酸序列比对分析。结果显示,BH07株基因全长1 767 bp,BH11株全长为1 766 bp,它们与天津的AY181946株同源性分别为97. 6%、97. 8%;通过与6个不同基因亚型的8个参考株的猪圆环病毒全基因组序列进化分析,发现BH07株和BH11株均为PCV2d亚型。 展开更多
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 全基因组 序列分析
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猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒Ⅱ型副猪嗜血杆菌和猪巴氏杆菌混合感染的诊治 被引量：2
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作者 黄小波 曹三杰 +1 位作者 刘伍梅 陈朝红 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第1期73-74,共2页
关键词 副猪嗜血杆菌 猪圆环病毒ⅱ型 猪伪狂犬病病毒 混合感染 巴氏杆菌 规模化猪场 诊治 猪瘟疫苗
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四川猪圆环病毒Ⅱ型的检测 被引量：4
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作者 李金海 王泽洲 +8 位作者 张东 马孟根 陈斌 邢坤 李春 张永宁 张代芬 郭莉 喻英 《四川畜牧兽医》 2004年第9期33-33,35,共2页
据文献资料设计一对引物,初步建立了检测猪圆环病毒II型(PCV-2)核酸片段的PCR方法。从可疑病料中扩增出了预期长度为473bp的DNA片段,用另一套引物证实了PCR产物的特异性。首次证实了四川地区猪群中存在PCV-2感染,为进一步研究打下了基础。
关键词 四川 猪圆环病毒ⅱ型 检测 PCR 断奶仔猪多系统衰竭综合征
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近两年我国猪圆环病毒Ⅱ型流行病学调查 被引量：5
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作者 金爱华 卫秀余 沈强 《今日养猪业》 2010年第3期17-18,共2页
猪圆环病毒（PCV）发现于1982年,属于圆环病毒科、圆环病毒属,是已知最小的动物病毒之一。根据猪圆环病毒的致病性、抗原性及核苷酸序列,将其分为PCV1和PCV2两个型,其中PCV1无致病性,而PCV2被认为是新生乳猪先天性颤抖的病原,
关键词 猪圆环病毒ⅱ型 流行病学调查 PCV2 核苷酸序列 动物病毒 致病性 抗原性 先天性
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