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Ⅱ型胶原酶构建在体角膜扩张动物模型的可行性研究 被引量:3
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作者 乔静 李海丽 +5 位作者 宋文静 汤韵 荣蓓 杨松霖 吴元 晏晓明 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期984-989,共6页
背景 圆锥角膜以角膜中央或旁中央进行性变薄膨出、高度散光或角膜瘢痕为临床特征,其发病机制和防治是研究热点,但目前尚无公认的圆锥角膜动物模型建立方法。圆锥角膜的解剖病理基础是角膜扩张,探讨角膜扩张的圆锥角膜动物模型的建... 背景 圆锥角膜以角膜中央或旁中央进行性变薄膨出、高度散光或角膜瘢痕为临床特征,其发病机制和防治是研究热点,但目前尚无公认的圆锥角膜动物模型建立方法。圆锥角膜的解剖病理基础是角膜扩张,探讨角膜扩张的圆锥角膜动物模型的建立方法有助于对圆锥角膜的角膜生物力学变化进行研究。 目的 应用可视化角膜生物力学分析仪(Corvis ST)检测Ⅱ型胶原酶处理后角膜的生物力学性能,探讨利用Ⅱ型胶原酶构建在体角膜扩张模型的可行性。 方法 选取健康新西兰白兔10只,刮除兔眼角膜上皮后,将直径为8 mm的角膜环钻置于右眼角膜中央,滴入5 mg/ml Ⅱ型胶原酶(含质量分数15%右旋糖酐的PBS配制)溶液,浸泡角膜30 min制备角膜扩张模型,左眼以同样方法用含15%右旋糖酐的PBS浸泡角膜30 min作为对照。于造模前及造模后14 d,采用手持电子角膜曲率计和手持角膜超声测厚仪分别测定角膜平均曲率(Km)及中央角膜厚度(CCT),造模后14 d采用Corvis ST行在体角膜生物力学参数测定,过量麻醉法处死实验兔并收集角膜组织行组织病理学及透射电子显微镜检查。 结果 造模前,模型组和对照组兔Km值分别为(48.28±2.29)D和(48.82±1.63)D,CCT分别为(356.50±19.13)μm和(356.20±21.66)μm,差异均无统计学意义(均P〉0.05)。造模后14 d,模型组兔眼Km增加至(48.87±2.27)D,CCT减少至(340.40±19.84)μm,与对照组的(46.86±1.47)D和(367.80±23.38)μm比较,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。造模后14 d,模型组兔角膜最大压陷深度平均值为(1.25±0.07)mm,明显大于对照组的(1.15±0.13)mm,差异有统计学意义(t=2.65,P〈0.05),2个组间第1/第2压平时间、第1/第2压平角膜长度、第1/第2压平速度、最大压陷曲率半径和最大压陷时两屈膝峰间距的差异均无统计学意义(均P〉0.05)。角膜组织形态学和超微结构检查显示,与对照组比较,模型组兔角膜基质胶原纤维排列疏松、紊乱,纤维间隙增大。 结论 Ⅱ型胶原酶能降低角膜生物力学特性,可考虑用于建立动物角膜扩张模型。 展开更多
关键词 生物力学 角膜/病理状态 ⅱ型胶原酶 最大压陷深度 圆锥角膜 角膜扩张/化学诱导 可视化角膜生物力学分析仪
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不同探诊深度种植体周龈沟液中3种酶含量的检测 被引量:8
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作者 李照峰 刘宏伟 +1 位作者 徐世同 章锦才 《实用医学杂志》 CAS 2006年第13期1505-1506,共2页
目的:通过检测不同探诊深度(PD)种植体周龈沟液中Ⅱ型胶原酶(MMP-8)、碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,分析种植体周PD的变化是否对种植体周围炎的发生和发展有影响。方法:在种植义齿修复后半年,测量30个Frialit-2种植体周PD... 目的:通过检测不同探诊深度(PD)种植体周龈沟液中Ⅱ型胶原酶(MMP-8)、碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,分析种植体周PD的变化是否对种植体周围炎的发生和发展有影响。方法:在种植义齿修复后半年,测量30个Frialit-2种植体周PD,并根据深度分为3组,PD≤2mm组、2mm<PD≤4mm组、PD>4mm组,同时选择10颗天然牙齿作对照,检测龈沟液量、MMP-8、ALP、AST、种植体周骨丧失,并对检测结果进行统计学分析。结果:与其他各组相比,PD>4mm组各项检测指标均有明显增高,统计学处理差异有显著性(P<0.05)。结论:种植体周PD过大可能会增加种植体周围炎发病的风险。 展开更多
关键词 牙种植体 探诊深度 ⅱ型胶原酶 碱性磷酸酶 天冬氨酸转氨酶
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酶消化法分离培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞 被引量:3
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作者 曾健滢 李英 +3 位作者 韩前彪 潘家强 唐兆新 吴玄光 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第2期55-58,共4页
试验旨在探讨胶原酶消化法分离并培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞(pul monary artery smooth muscle cell,PASMC)的方法。将1~7日龄雏鸡的肺动脉中膜剪成小于1 mm2的组织块,0.1%Ⅱ型胶原酶消化分离PASMC并进行原代培养和传代培养。倒置显微... 试验旨在探讨胶原酶消化法分离并培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞(pul monary artery smooth muscle cell,PASMC)的方法。将1~7日龄雏鸡的肺动脉中膜剪成小于1 mm2的组织块,0.1%Ⅱ型胶原酶消化分离PASMC并进行原代培养和传代培养。倒置显微镜下观察培养细胞的形态,对培养细胞进行HE染色和光学显微镜观察,并采用抗α-肌动蛋白单克隆抗体(α-Smooth muscle actin)免疫组化染色法检测细胞胞浆内α-肌动蛋白的表达,用以鉴定所培养的细胞。结果表明,倒置显微镜下细胞为长梭形,呈典型的"峰—谷"状,未见明显异型细胞。α-actin胞浆染色阳性细胞数占总细胞数的97%以上。因此,胶原酶消化法可用于分离培养肉鸡PASMC,且有方法简单,成活细胞数多、传代周期短的特点,可用于肉鸡心血管疾病如肺动脉高压和肺血管重构的研究工作。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 细胞培养 ⅱ型胶原酶
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2种酶水解牛骨粉制备胶原多肽的研究 被引量:3
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作者 庄本庆 周国君 +3 位作者 罗应洪 韦翠 杨艳艳 罗爱平 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第9期203-206,共4页
以自制牛骨粉为原料,水解度为指标,选用Ⅱ型胶原酶与枯草中性蛋白酶对牛骨粉进行分步水解,采用L9(34)正交试验设计优化2种酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明,Ⅱ型胶原酶与枯草中性蛋白酶先后对牛骨粉酶解的水解效果比单一的Ⅱ型胶原... 以自制牛骨粉为原料,水解度为指标,选用Ⅱ型胶原酶与枯草中性蛋白酶对牛骨粉进行分步水解,采用L9(34)正交试验设计优化2种酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明,Ⅱ型胶原酶与枯草中性蛋白酶先后对牛骨粉酶解的水解效果比单一的Ⅱ型胶原酶效果好。2种酶水解的适宜工艺条件:先用Ⅱ型胶原酶在37℃条件下恒温震荡水解3 h,再用枯草中性蛋白酶在50℃条件下恒温震荡水解3 h,固液比1∶4,酶用量0.3%,2种酶用量比1∶1,pH 7.0,其水解度达16.65%,胶原多肽的分子量主要分布在30~50 kD。 展开更多
关键词 牛骨粉 ⅱ型胶原酶 枯草中性蛋白酶 水解度 胶原多肽
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