目的探讨姜黄素对高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)损伤的保护作用,以及β-catenin/p300相互作用与姜黄素保护AEC2的关系。方法采用分离培养的AEC2建立高氧诱导的细胞损伤模型。培养AEC2细胞,随机分为对照组、高氧组、姜黄素组(分为高、...目的探讨姜黄素对高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)损伤的保护作用,以及β-catenin/p300相互作用与姜黄素保护AEC2的关系。方法采用分离培养的AEC2建立高氧诱导的细胞损伤模型。培养AEC2细胞,随机分为对照组、高氧组、姜黄素组(分为高、中、低剂量3个亚组)、IQ-1(β-catenin/p300相互作用抑制剂)组、p300 siRNA组、siRNA阴性对照组。药物处理24 h后,CCK-8 法和细胞计数板检测AEC2细胞增殖活力和细胞总数,定量PCR检测AEC2、肺泡Ⅰ型上皮细胞(AEC1)的标记基因SP-C和AQP5 mRNA表达量,流式细胞仪检测AQP5、SP-C阳性细胞百分比,Western blot 检测β-catenin、p300蛋白表达量。结果与对照组比较,高氧组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显减少( P <0.01),而AEC1标记基因AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、AEC2向AEC1转分化的中间型细胞百分比则明显增加( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显增加( P <0.01)。姜黄素组、IQ-1组和p300 siRNA组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显增加( P <0.01),而AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、转分化中间型细胞百分比均减少( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显减小( P <0.01)。结论姜黄素对高氧诱导培养AEC2损伤具有保护作用,其机制与抑制β-catenin/p300相互作用有关。展开更多
文摘目的探讨急性肺栓塞大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞功能及形态的变化。方法 16只雄性SD大鼠以随机数字表法随机分为对照组、栓塞组,每组8只。栓塞组以明胶海绵溶液经颈静脉注入制备大鼠肺栓塞模型,经右心导管测定肺动脉压、心率、呼吸频率,并行动脉血气分析;对照组手术过程同栓塞组,颈静脉注入同等体积生理盐水。实验大鼠于造模后24 h时处死,取肺组织制备病理切片,HE染色光镜下观察肺组织病理变化,电镜下观察Ⅱ型上皮细胞形态学改变;留取支气管肺泡灌洗液(BALF)行磷脂测定,肺组织行肺表面活性物质相关蛋白A(SPA)蛋白及mRNA水平测定。结果对照组和栓塞组大鼠肺动脉平均压、动脉血氧分压(单位:mmHg)比较均有统计学差异(14.2±4.1 vs 26.1±7.5,P<0.05;94.1±8.8 vs 80.5±5.8,P<0.05)。对照组和栓塞组肺泡灌洗液磷脂水平分别为(374.17±36.55)mg/100 ml、(311.67±48.56)mg/100 ml(P<0.05)。栓塞组肺组织SPA蛋白、mRNA水平均明显低于对照组(P<0.05)。光镜下24 h时栓塞组大鼠肺组织可见多个血管腔有明胶海绵栓塞;电镜下,对照组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞形态规则,线粒体、内质网等细胞器丰富,板层小体排列整齐,肺泡表面活性物质层连续完整;栓塞组大鼠Ⅱ型上皮细胞形态欠规则,线粒体肿胀、嵴断裂,板层小体空泡化,肺泡表面活性物质层连续性中断。结论急性肺栓塞后大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞功能及形态均发生明显变化,产生表面活性物质能力显著降低,可能在肺栓塞动脉低氧血症中起重要作用。
文摘目的探讨姜黄素对高氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC2)损伤的保护作用,以及β-catenin/p300相互作用与姜黄素保护AEC2的关系。方法采用分离培养的AEC2建立高氧诱导的细胞损伤模型。培养AEC2细胞,随机分为对照组、高氧组、姜黄素组(分为高、中、低剂量3个亚组)、IQ-1(β-catenin/p300相互作用抑制剂)组、p300 siRNA组、siRNA阴性对照组。药物处理24 h后,CCK-8 法和细胞计数板检测AEC2细胞增殖活力和细胞总数,定量PCR检测AEC2、肺泡Ⅰ型上皮细胞(AEC1)的标记基因SP-C和AQP5 mRNA表达量,流式细胞仪检测AQP5、SP-C阳性细胞百分比,Western blot 检测β-catenin、p300蛋白表达量。结果与对照组比较,高氧组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显减少( P <0.01),而AEC1标记基因AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、AEC2向AEC1转分化的中间型细胞百分比则明显增加( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显增加( P <0.01)。姜黄素组、IQ-1组和p300 siRNA组AEC2细胞增殖活力、细胞计数、SP-C mRNA表达以及AEC2百分比均明显增加( P <0.01),而AQP5 mRNA表达、AEC1百分比、转分化中间型细胞百分比均减少( P <0.01),β-catenin、p300蛋白表达量明显减小( P <0.01)。结论姜黄素对高氧诱导培养AEC2损伤具有保护作用,其机制与抑制β-catenin/p300相互作用有关。
