检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

Ⅰ型人免疫缺陷病毒gag-gp120嵌合基因核酸疫苗的构建与鉴定被引量：4: 1; 作者江文正金宁一韩文瑜《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期341-342,345,共3页; 目的 :构建含Ⅰ型人免疫缺陷病毒 (HIV 1) gag gp12 0嵌合基因核酸疫苗的表达质粒。方法 :将gag和 gp12 0连接后的嵌合基因插入到真核表达载体 pVAX1中 ,构建真核表达质粒pVAXGE。用脂质体法将构建的重组质粒转染Hela细胞 72h后 ,取转染... 展开更多; 关键词 ⅰ型人免疫缺陷病毒 gag-gp120 嵌合基因核酸疫苗; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于细胞穿透肽技术对p38丝裂原活化蛋白激酶蛋白功能的研究被引量：3: 2; 作者杨丽萍刘志锋 +2 位作者黎永明李志杰姜勇《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期553-557,共5页; 目的构建基于TAT技术的p38MAPK蛋白转运系统并对导入细胞的融合蛋白的功能进行鉴定。方法采用亚克隆方法构建重组质粒pHis-TAT-p38和pHis-TAT-p38(AF)无活性突变体,并诱导原核表达纯化融合蛋白;将这两种蛋白加入培养的ECV304细胞,在高... 展开更多; 关键词 ⅰ型人免疫缺陷病毒转录激活蛋白 P38丝裂原活化蛋白激酶蛋白转导; 在线阅读下载PDF 职称材料

p38L12-TAT融合肽对山梨糖醇引起的ECV304细胞ATF2磷酸化的抑制作用被引量：1: 3; 作者郭爱华刘志锋 +7 位作者李海玉唐靖李志杰刘亚伟龚小卫刘靖华邓鹏姜勇《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期402-408,共7页; 构建p38Loop12(L12)的TAT融合表达载体,纯化原核表达的p38L12融合蛋白并鉴定其在真核细胞内的功能.利用PCR方法分别扩增出p38L12及其“TXY”双磷酸化位点的AF突变体p38L12(AF)片段,克隆入His标记的TATEGFP融合蛋白原核表达载体pHTE(pET1... 展开更多; 关键词 ⅰ型人免疫缺陷病毒转录激活蛋白丝裂原活化蛋白 LOOP 12 细胞转导系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1 nef基因的克隆及原核表达研究被引量：2: 4; 作者闻洁君江文正 +3 位作者郝文丽杜佳妮樊燕钱旻《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期348-350,共3页; 目的:构建HIV-1 Nef基因的原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达,初步优化其表达条件。方法:利用特异性引物PCR扩增获得HIV-1 Nef基因片段,PCR产物经限制性内切酶双酶切后连接载体pET24a(+),构建重组质粒pET24a(+)-Nef。经双酶切鉴定及... 展开更多; 关键词人免疫缺陷病毒ⅰ型 NEF蛋白原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于α螺旋肽与多酚缀合的HIV-1融合抑制剂的设计、合成及活性初筛被引量：2: 5; 作者程思绮梁国栋 +2 位作者姜喜凤王潮刘克良《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1287-1292,共6页; 将α螺旋多肽与羟基酪醇等多酚类化合物通过共价键缀合,期望二者在发挥各自生物学作用的同时产生协同效应,据此设计了HIV-1融合抑制多肽.圆二色光谱表征结果表明,所设计的缀合多肽呈典型的α螺旋结构特征,且可以与靶标N36相互作用.HIV-... 展开更多; 关键词人免疫缺陷病毒ⅰ型融合抑制剂 α螺旋肽多酚; 在线阅读下载PDF 职称材料

异肽键交联的N肽类HIV-1融合抑制剂的设计、合成及活性评价被引量：2: 6; 作者李雪来文庆 +2 位作者姜喜凤王潮刘克良《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期881-885,共5页; 报道了一种通过在HIV-1 gp41 NHR区域的多肽(N肽)之间引入异肽键稳定N3螺旋的新方法;以天然N肽序列N38为模板,采用此方法设计合成了一系列异肽键交联的N38三股α螺旋结构.该结构具有极强的热稳定性和纳摩尔水平抑制HIV-1包膜糖蛋白(Env... 展开更多; 关键词人免疫缺陷病毒ⅰ型融合抑制剂 N端重复序列卷曲螺旋; 在线阅读下载PDF 职称材料

TAR RNA结合蛋白在HIV-1感染中的作用: 7; 作者林晓燕杨怡姝曾毅《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期886-891,共6页; TARRNA结合蛋白是细胞中双链RNA结合蛋白家族成员之一.它可以结合HIV-1TARRNA,并与Tat协同作用激活LTR表达,进而促进病毒的转录与翻译.TRBP也是将干扰素抗病毒通路与RNA干扰免疫通路相连的一种细胞蛋白.在干扰素诱生的PKR反应中,TRBP通... 展开更多; 关键词反式激活应答元件RNA结合蛋白蛋白激酶R 人免疫缺陷病毒ⅰ型 RNA干扰; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Ⅰ型人免疫缺陷病毒gag-gp120嵌合基因核酸疫苗的构建与鉴定被引量：4: 1; 作者江文正金宁一韩文瑜; 机构解放军军需大学全军基因工程重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期341-342,345,共3页; 基金国家杰出青年基金资助项目 (No .3982 51 1 9); 文摘目的 :构建含Ⅰ型人免疫缺陷病毒 (HIV 1) gag gp12 0嵌合基因核酸疫苗的表达质粒。方法 :将gag和 gp12 0连接后的嵌合基因插入到真核表达载体 pVAX1中 ,构建真核表达质粒pVAXGE。用脂质体法将构建的重组质粒转染Hela细胞 72h后 ,取转染的Hela细胞进行RT PCR检测和和Dot ELISA分析。结果 :重组质粒转染细胞的总RNA中 ,可扩增出目的基因的转录产物。Dot ELISA的结果显示 ,目的基因在Hela细胞内得到表达。结论 :成功地构建了表达gag gp12 0嵌合基因的核酸疫苗质粒 ,为HIV; 关键词 ⅰ型人免疫缺陷病毒 gag-gp120 嵌合基因核酸疫苗; Keywords HIV 1 gag gp120 chimeric gene DNA vaccine; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于细胞穿透肽技术对p38丝裂原活化蛋白激酶蛋白功能的研究被引量：3: 2; 作者杨丽萍刘志锋黎永明李志杰姜勇; 机构南方医科大学病理生理学教研室/广东省功能蛋白质组学重点实验室; 出处《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期553-557,共5页; 基金广东省科技计划项目(A1090202) 广州市科技计划项目(2001-z-035-01-1) 广东省自然科学基金重点项目(13058)~~; 文摘目的构建基于TAT技术的p38MAPK蛋白转运系统并对导入细胞的融合蛋白的功能进行鉴定。方法采用亚克隆方法构建重组质粒pHis-TAT-p38和pHis-TAT-p38(AF)无活性突变体,并诱导原核表达纯化融合蛋白;将这两种蛋白加入培养的ECV304细胞,在高渗刺激下,通过检测p38底物ATF2的磷酸化水平,以观察由TAT转导进入细胞His-TAT-p38及其无活性突变体对内源性p38活性的影响。结果酶切和测序结果表明,载体构建正确;SDS-PAGE凝胶电泳可见原核表达纯化得到高纯度目的蛋白;Westernblot表明,融合蛋白His-TAT-p38及其突变体能够以一种时间和浓度依赖性方式高效转导进入细胞;导入His-TAT-p38蛋白后,结果发现导入的野生型p38可增强内源性p38的功能,而无活性突变体则竞争性抑制了内源性p38MAPK蛋白的功能,从而阻止或抑制其对内源性底物ATF2的磷酸化,使得信号不能传递下去,进而抑制p38MAPK通路的活动。结论成功建立了基于TAT的蛋白转运系统,并证实TAT能够以浓度和时间依赖方式高效转运蛋白进入真核细胞;进入细胞的His-TAT-p38和His-TAT-p38无活性突变体蛋白均具有较高的生物学活性,在高渗刺激作用下前者可以增加p38磷酸化水平,而后者则显著抑制p38信号通路的活性。; 关键词 ⅰ型人免疫缺陷病毒转录激活蛋白 P38丝裂原活化蛋白激酶蛋白转导; Keywords human immunodeficiency virus type-1 p38 mitogen-activated protein kinase protein transduction; 分类号 R341 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名p38L12-TAT融合肽对山梨糖醇引起的ECV304细胞ATF2磷酸化的抑制作用被引量：1: 3; 作者郭爱华刘志锋李海玉唐靖李志杰刘亚伟龚小卫刘靖华邓鹏姜勇; 机构南方医科大学病理生理学教研室和广东省功能蛋白质组学重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期402-408,共7页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2001AA234061) 广东省科技计划项目(NO.A1090202) +1 种基金广东省自然科学基金重点项目(No.13058)~~; 文摘构建p38Loop12(L12)的TAT融合表达载体,纯化原核表达的p38L12融合蛋白并鉴定其在真核细胞内的功能.利用PCR方法分别扩增出p38L12及其“TXY”双磷酸化位点的AF突变体p38L12(AF)片段,克隆入His标记的TATEGFP融合蛋白原核表达载体pHTE(pET14bHisTATEGFP),经酶切、测序鉴定正确后,将重组质粒转化原核表达菌,诱导表达纯化融合蛋白;将融合蛋白加入ECV304细胞后于荧光显微镜下观察并行Western印迹分析,检测融合蛋白的细胞内转导活性;通过检测内源性ATF2磷酸化水平,鉴定高渗刺激下p38L12对内源性p38活性的影响.成功构建了p38L12和p38L12(AF)片段与TAT的融合表达载体,并获得相应的融合蛋白.在ECV304细胞中可见导入的HTEp38L12和HTEp38L12(AF)融合蛋白具有较高的细胞内转导活性和转导效率,并可竞争性抑制高渗刺激对内源性p38的活化.基于HIV1TAT细胞转导系统证实p38L12可竞争性抑制高渗刺激诱导的内源性p38对ATF2的活化,从而发挥对p38激活特异性抑制的功能.; 关键词 ⅰ型人免疫缺陷病毒转录激活蛋白丝裂原活化蛋白 LOOP 12 细胞转导系统; Keywords human immunodeficiency virus type-1 trans-activator mitogen-activated protein kinase loop 12 cell transduction system; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1 nef基因的克隆及原核表达研究被引量：2: 4; 作者闻洁君江文正郝文丽杜佳妮樊燕钱旻; 机构华东师范大学生命科学学院; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期348-350,共3页; 基金上海市青年科技启明星计划资助项目(06QA14017); 文摘目的:构建HIV-1 Nef基因的原核表达载体并在大肠杆菌中进行表达,初步优化其表达条件。方法:利用特异性引物PCR扩增获得HIV-1 Nef基因片段,PCR产物经限制性内切酶双酶切后连接载体pET24a(+),构建重组质粒pET24a(+)-Nef。经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coliBL21,IPTG诱导表达目的蛋白,优化表达条件,SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达产物。结果:PCR扩增获得618bpDNA片段,酶切鉴定结果表明HIV Nef基因已克隆入原核表达载体pET24a(+)中,测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组菌诱导后可表达相对分子质量(Mr)符合预期的融合蛋白。0.1mmol/LIPTG在37℃诱导6h为最佳表达条件,重组蛋白表达量可由15.8%增加到43.9%。结论:在大肠杆菌中成功地表达了HIV Nef蛋白,并初步获得了最优化的表达条件。; 关键词人免疫缺陷病毒ⅰ型 NEF蛋白原核表达; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于α螺旋肽与多酚缀合的HIV-1融合抑制剂的设计、合成及活性初筛被引量：2: 5; 作者程思绮梁国栋姜喜凤王潮刘克良; 机构沈阳药科大学制药工程学院军事医学科学院毒物药物研究所; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1287-1292,共6页; 基金国家自然科学基金(批准号:81573266 81373266)资助~~; 文摘将α螺旋多肽与羟基酪醇等多酚类化合物通过共价键缀合,期望二者在发挥各自生物学作用的同时产生协同效应,据此设计了HIV-1融合抑制多肽.圆二色光谱表征结果表明,所设计的缀合多肽呈典型的α螺旋结构特征,且可以与靶标N36相互作用.HIV-1包膜糖蛋白(Env)介导的细胞-细胞融合活性测试结果表明,这些具有α螺旋结构的缀合多肽可以在低微摩尔水平抑制病毒融合.; 关键词人免疫缺陷病毒ⅰ型融合抑制剂 α螺旋肽多酚; Keywords Human immunodificiency virus type 1（HIV-1） Fusion inhibitor α-Helical peptide Polyphenol; 分类号 O629.72 [理学—有机化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名异肽键交联的N肽类HIV-1融合抑制剂的设计、合成及活性评价被引量：2: 6; 作者李雪来文庆姜喜凤王潮刘克良; 机构军事医学科学院毒物药物研究所; 出处《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期881-885,共5页; 基金国家自然科学基金(批准号:81373266,81573266)资助~~; 文摘报道了一种通过在HIV-1 gp41 NHR区域的多肽(N肽)之间引入异肽键稳定N3螺旋的新方法;以天然N肽序列N38为模板,采用此方法设计合成了一系列异肽键交联的N38三股α螺旋结构.该结构具有极强的热稳定性和纳摩尔水平抑制HIV-1包膜糖蛋白(Env)介导的细胞融合活性.; 关键词人免疫缺陷病毒ⅰ型融合抑制剂 N端重复序列卷曲螺旋; Keywords HIV-1 Fusion inhibitor N-terminal heptad repeat Coiled coil; 分类号 O629.72 [理学—有机化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名TAR RNA结合蛋白在HIV-1感染中的作用: 7; 作者林晓燕杨怡姝曾毅; 机构北京工业大学生命科学与生物工程学院; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期886-891,共6页; 基金国家重点基础研究发展计划(973计划 No.2009CB930202) +2 种基金 KZ200910005001) 北京市自然科学基金项目(No.5072003)~~; 文摘 TARRNA结合蛋白是细胞中双链RNA结合蛋白家族成员之一.它可以结合HIV-1TARRNA,并与Tat协同作用激活LTR表达,进而促进病毒的转录与翻译.TRBP也是将干扰素抗病毒通路与RNA干扰免疫通路相连的一种细胞蛋白.在干扰素诱生的PKR反应中,TRBP通过直接抑制PKR的自磷酸化、与PKR竞争通用的RNA底物或与PACT形成异源二聚体等机制抑制细胞内的PKR反应,从而降低了PKR介导的对病毒表达的抑制作用.TRBP与Dicer和Ago2等组成的RNA诱导沉默复合体,在RNA干扰中发挥着关键作用并调控随后的序列特异性降解.在HIV-1感染中,TRBP更倾向于促进病毒的表达与复制,因此TRBP也成为控制HIV-1感染的新靶点.; 关键词反式激活应答元件RNA结合蛋白蛋白激酶R 人免疫缺陷病毒ⅰ型 RNA干扰; Keywords transactivation response RNA binding protein（TRBP） protein kinase R（PKR） human immunodeficiency virus type 1（HIV-1） RNA interference（RNAi）; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] Q93 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Ⅰ型人免疫缺陷病毒gag-gp120嵌合基因核酸疫苗的构建与鉴定	江文正金宁一韩文瑜	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于细胞穿透肽技术对p38丝裂原活化蛋白激酶蛋白功能的研究	杨丽萍刘志锋黎永明李志杰姜勇	《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	p38L12-TAT融合肽对山梨糖醇引起的ECV304细胞ATF2磷酸化的抑制作用	郭爱华刘志锋李海玉唐靖李志杰刘亚伟龚小卫刘靖华邓鹏姜勇	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	HIV-1 nef基因的克隆及原核表达研究	闻洁君江文正郝文丽杜佳妮樊燕钱旻	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	基于α螺旋肽与多酚缀合的HIV-1融合抑制剂的设计、合成及活性初筛	程思绮梁国栋姜喜凤王潮刘克良	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	异肽键交联的N肽类HIV-1融合抑制剂的设计、合成及活性评价	李雪来文庆姜喜凤王潮刘克良	《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心	2016	2	在线阅读下载PDF 职称材料
7	TAR RNA结合蛋白在HIV-1感染中的作用	林晓燕杨怡姝曾毅	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料