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“睡美人”转座子的研究进展被引量：6: 1; 作者谢飞高波 +1 位作者宋成义陈国宏《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期785-792,共8页; “睡美人(Sleeping Beauty,SB)”转座系统是Tc1/mariner转座子超家族中的一员,已经失活了一千多万年。1997年,Ivics等根据积累的系统发生数据,利用生物信息学的方法,对其进行分子重建,终于唤醒了其转座活性。近年来对“睡美人”转座系... 展开更多; 关键词 “睡美人”转座子脊椎动物转座机制; 在线阅读下载PDF 职称材料

腺病毒介导的“睡美人”转座子与IL-10共表达对NOD小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响被引量：1: 2; 作者庞春艳王慧 +2 位作者王志华冯秀媛王永福《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期205-210,共6页; 目的:观察腺病毒介导的"睡美人"(SB)转座子与白细胞介素10(IL-10)共表达对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠脾细胞中Th17/Treg细胞平衡的影响,阐明IL-10对NOD小鼠的可能治疗机制。方法:提取C57BL6小鼠的脾细胞并培养,将脾细胞分为对照... 展开更多; 关键词 “睡美人”转座子白细胞介素10 Th17细胞 Teg细胞非肥胖糖尿病小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

睡美人转座子在草鱼CIK细胞中介导的高效基因整合: 3; 作者陈凯薛亭 +3 位作者王艺舟潘启华于淼陈天圣《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期264-270,共7页; 为研究睡美人(Sleeping Beauty,SB)转座子系统在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾脏细胞(CIK)中介导的整合特性,构建了SB转座子和转座酶在两个质粒的二元反式(trans)转座子系统,以及转座子和转座酶元件在同一个质粒的一元顺式(cis)转... 展开更多; 关键词睡美人转座子转座酶草鱼肾脏细胞整合位点; 在线阅读下载PDF 职称材料

SB转座子介导的hLF乳腺表达载体的构建及鉴定: 4; 作者宋洋王子玉 +7 位作者张艳丽钟部帅张国敏孟立黄荣王昌龙闫益波王锋《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期795-801,共7页; 构建了以睡美人(Sleeping beauty,SB)转座子为载体元件、β-乳球蛋白质(β-lactoglobulin,BLG)为调控区的人乳铁蛋白质(Human lactoferrin,hLF)乳腺表达载体及增强型绿色荧光蛋白质(EGFP)表达载体,便于验证SB转座子的转座效率,为hLF乳... 展开更多; 关键词 “睡美人”(sb)转座子 Β-乳球蛋白乳腺表达载体乳腺上皮细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

跳跃基因--生物进化的“分子推手”: 5; 作者陈湘静黄浩《生物学教学》 2023年第11期4-7,共4页; 跳跃基因也称为转座子,是染色体上一段能够自主复制和移位的DNA序列,存在于所有的生物体内。转座子可以随机插入基因组,可能导致插入突变、染色体畸变和产生新基因等,这些遗传效应虽然可能造成基因组的不稳定,但同时也是驱动基因组变异... 展开更多; 关键词跳跃基因转座子表观遗传进化睡美人转座系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

长效稳定表达杆状病毒基因传递载体的构建及表达效率研究: 6; 作者王志昇李梦婷 +3 位作者姬勇敢杨文杨丽杨萌萌《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第3期386-391,共6页; 目的为解决杆状病毒作为基因传递载体瞬时表达缺陷,拟构建睡美人(SB)转座子介导的杆状病毒表达载体,通过检测绿色荧光蛋白EGFP的表达变化来评价该系统在哺乳动物体内外的表达效率。方法以pFastBac DUAL质粒为骨架,将pPh启动子替换为CMV-... 展开更多; 关键词睡美人转座子杆状病毒 U87细胞持续表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

高压静脉注射转染法建立脂源性炎症介导的肝癌小鼠模型: 7; 作者卢羿同杨嘉蒙 +1 位作者赵俊龙秦鸿雁《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期122-129,共8页; 目的利用高压静脉注射转染法经小鼠尾静脉转染蛋白激酶B(AKT)、β联蛋白(β-catenin)及睡美人转座子质粒建立伴脂肪肝的炎癌转化小鼠肝癌模型并对该模型进行鉴定。方法选取6~8周龄雄性C57BL/6小鼠,通过高压静脉注射转染法在短时间内(5~9... 展开更多; 关键词肝癌炎症高压静脉注射转染法睡美人转座子(Sleeping beauty transposon) β联蛋白(β-catenin) 蛋白激酶B(AKT); 在线阅读下载PDF 职称材料

题名“睡美人”转座子的研究进展被引量：6: 1; 作者谢飞高波宋成义陈国宏; 机构扬州大学动物科学与技术学院; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期785-792,共8页; 文摘 “睡美人(Sleeping Beauty,SB)”转座系统是Tc1/mariner转座子超家族中的一员,已经失活了一千多万年。1997年,Ivics等根据积累的系统发生数据,利用生物信息学的方法,对其进行分子重建,终于唤醒了其转座活性。近年来对“睡美人”转座系统的转座效率和转座机理进行的研究,已证明SB转座子在基因筛选,转基因及基因治疗等领域具有广阔的应用前景。文章重点论述了SB转座子在结构及其优化、转座机制和应用等方面的进展,同时对其研究中出现的各种问题进行了总结并提出了一些解决方案。; 关键词 “睡美人”转座子脊椎动物转座机制; Keywords Sleeping Beauty transposon vertebrates transposition mechanism; 分类号 Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名腺病毒介导的“睡美人”转座子与IL-10共表达对NOD小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响被引量：1: 2; 作者庞春艳王慧王志华冯秀媛王永福; 机构包头医学院第一附属医院风湿免疫科包头医学院风湿免疫研究所内蒙古自治区自体免疫学重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期205-210,共6页; 基金国家自然科学基金资助课题(81360463); 文摘目的:观察腺病毒介导的"睡美人"(SB)转座子与白细胞介素10(IL-10)共表达对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠脾细胞中Th17/Treg细胞平衡的影响,阐明IL-10对NOD小鼠的可能治疗机制。方法:提取C57BL6小鼠的脾细胞并培养,将脾细胞分为对照组、空载体组和治疗组。对照组脾细胞不做任何处理,空载体组将不含IL-10基因而有转座子序列的腺病毒载体和不含转座酶的腺病毒载体共同感染小鼠脾细胞,治疗组将含有IL-10基因和转座子序列的腺病毒载体以及含有转座酶的腺病毒载体共同感染小鼠脾细胞。感染48h后RTPCR法检测各组小鼠脾细胞中IL-10mRNA表达水平。感染48h后将上述3组处理的脾细胞分别种植到对照组、空载体组和治疗组NOD小鼠右后腿的腘窝皮下,每组6只小鼠,每周注射1次,共6次。注射结束后4周处死小鼠,ELISA法检测各组NOD小鼠血清中IL-10表达水平;流式细胞术检测各组NOD小鼠脾细胞中CD4+IL-10+、CD4+IFN-γ+、Th17和Treg细胞的比例。结果:与对照组和空载体组比较,治疗组C57BL6小鼠脾细胞中IL-10mRNA表达水平明显升高(F=72.71,P<0.05),NOD小鼠血清中IL-10表达水平明显升高(F=8.89,P<0.05),NOD小鼠脾细胞中CD4+IL-10+细胞和Treg细胞比例明显升高(F=72.09,P<0.05;F=12.98,P<0.05);但治疗组小鼠脾细胞中Th17细胞比例明显下降(F=6.39,P<0.05);NOD小鼠脾细胞中CD4+IFN-γ+细胞比例在对照组、空载体组和治疗组之间比较差异无统计学意义(F=2.72,P>0.05)。结论:腺病毒介导的SB转座子与IL-10共表达后可以升高NOD小鼠血清中IL-10表达水平;同时可明显升高NOD小鼠脾细胞中CD4+IL-10+细胞比例,降低Th17细胞比例,升高Treg细胞比例,调控Th1/Th2和Th17/Treg的平衡,对NOD小鼠起到治疗作用。; 关键词 “睡美人”转座子白细胞介素10 Th17细胞 Teg细胞非肥胖糖尿病小鼠; Keywords sleeping beauty transposon interleukin-10 Th17 cells Treg cells non-obese diabetes mice; 分类号 Q754 [生物学—分子生物学] R587.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名睡美人转座子在草鱼CIK细胞中介导的高效基因整合: 3; 作者陈凯薛亭王艺舟潘启华于淼陈天圣; 机构华中农业大学水产学院河南师范大学水产学院; 出处《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期264-270,共7页; 基金国家重点基础研究计划 (2013CB967700) 国家自然科学基金(31672653和31771648) 华中农业大学自主科技创新基金(2013RC014和2662015PY049)资助; 文摘为研究睡美人(Sleeping Beauty,SB)转座子系统在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾脏细胞(CIK)中介导的整合特性,构建了SB转座子和转座酶在两个质粒的二元反式(trans)转座子系统,以及转座子和转座酶元件在同一个质粒的一元顺式(cis)转座子系统;通过转染CIK细胞,用荧光显微镜、流式细胞仪和荧光定量PCR分析了转染2d后及嘌呤霉素筛选4周后的细胞,测定Ds Red转染效率和整合效率,并结合高效热不对称交互式PCR扩增获得SB转座子整合位点的序列。结果表明,SB二元转座子系统的整合效率远高于一元系统;SB转座子与转座酶比例为1鲶2时,外源基因Ds Red的整合效率最高;SB转座子偏向于插入草鱼基因组TA序列处。研究表明优化SB转座子和转座酶的比例能提高外源基因在草鱼细胞中的整合效率并快速获得突变细胞,同时为在鱼类细胞中采用SB转座子建立突变体文库提供理论基础。; 关键词睡美人转座子转座酶草鱼肾脏细胞整合位点; Keywords Sleeping Beauty transposon Transposase CIK cells Integration sites; 分类号 S962.1 [农业科学—水产养殖] Q173 [生物学—水生生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SB转座子介导的hLF乳腺表达载体的构建及鉴定: 4; 作者宋洋王子玉张艳丽钟部帅张国敏孟立黄荣王昌龙闫益波王锋; 机构南京农业大学动物胚胎工程技术中心; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期795-801,共7页; 基金高产优质转基因奶羊新品种培育项目(2008ZXD8008004); 文摘构建了以睡美人(Sleeping beauty,SB)转座子为载体元件、β-乳球蛋白质(β-lactoglobulin,BLG)为调控区的人乳铁蛋白质(Human lactoferrin,hLF)乳腺表达载体及增强型绿色荧光蛋白质(EGFP)表达载体,便于验证SB转座子的转座效率,为hLF乳腺表达载体成功转染乳腺上皮细胞(GMC)奠定基础。采用PCR法从绵羊基因组中扩增5'、3'BLG,经TA克隆,在中间载体pcDNA3.1(-)的作用下,与hLF连接,得到pcDNA3.1(-)-BLG-hLF,然后与pT2连接,构建pT2-BLG-hLF;此外,还构建了pT2-BLG-EGFP。采用测序、酶切、PCR 3种方法鉴定阳性克隆,并用脂质体法将pT2-BLG-EGFP转染至GMC细胞中进行观察。分子鉴定结果:5'BLG、3'BLG克隆成功,pT2-BLG-hLF及pT2-BLG-EGFP构建正确;细胞鉴定结果:SB转座子介导的EGFP能在GMC细胞中高效表达。成功克隆了5'BLG、3'BLG调控区,并成功构建了乳腺表达载体pT2-BLG-hLF。; 关键词 “睡美人”(sb)转座子 Β-乳球蛋白乳腺表达载体乳腺上皮细胞; Keywords Sleeping Beauty（sb）transposon β-lactoglobulin mammary gland expression vector mammary gland epithelial cell; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名跳跃基因--生物进化的“分子推手”: 5; 作者陈湘静黄浩; 机构福建师范大学生命科学学院/福建省发育与神经生物学重点实验室; 出处《生物学教学》 2023年第11期4-7,共4页; 文摘跳跃基因也称为转座子,是染色体上一段能够自主复制和移位的DNA序列,存在于所有的生物体内。转座子可以随机插入基因组,可能导致插入突变、染色体畸变和产生新基因等,这些遗传效应虽然可能造成基因组的不稳定,但同时也是驱动基因组变异和促进生物进化的重要动力。本文综述了跳跃基因(转座子)的分类及其对基因组和生物进化的影响,并探讨其在科研和基因治疗领域中的应用。; 关键词跳跃基因转座子表观遗传进化睡美人转座系统; 分类号 Q343.1 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名长效稳定表达杆状病毒基因传递载体的构建及表达效率研究: 6; 作者王志昇李梦婷姬勇敢杨文杨丽杨萌萌; 机构宁夏医科大学药学院宁夏医科大学实验动物中心; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第3期386-391,共6页; 基金国家自然科学基金(编号:31460242) 宁夏自然科学基金(编号:NZ17067)。; 文摘目的为解决杆状病毒作为基因传递载体瞬时表达缺陷,拟构建睡美人(SB)转座子介导的杆状病毒表达载体,通过检测绿色荧光蛋白EGFP的表达变化来评价该系统在哺乳动物体内外的表达效率。方法以pFastBac DUAL质粒为骨架,将pPh启动子替换为CMV-SB100X-SV40 PA表达元件,然后在其下游插入IR/DR-CMV-EGFP-SV40 PA-IR/DR表达元件,获得的质粒命名为pBacSB-CE;同时作为对照构建pBac-CE,在pPh启动子下游插入CMV-EGFP表达元件。将构建好的重组质粒转化大肠杆菌DH10Bac,经蓝白斑筛选后转染Sf-9细胞,获得重组杆状病毒BacSB-CE和Bac-CE。将重组病毒转导人胶质瘤U87细胞,通过MTT、倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞的增殖以及EGFP的表达效率;建立裸鼠皮下胶质瘤肿瘤模型,通过组织免疫荧光进一步观察重组病毒在体内的转导效率。结果经PCR鉴定成功获得了重组病毒BacSB-CE和Bac-CE;MTT结果证实重组病毒对U87细胞的增殖无副作用;倒置荧光显微镜和流式结果显示,EGFP在BacSB-CE转导的U87细胞中至少能表达60 d,在转导15 d后仍能检测到约10^(9) a.u.总荧光强度,而在Bac-CE转导的细胞中,15 d后已检测不到荧光细胞和荧光信号;体内组织免疫荧光检测进一步显示BacSB-CE组在第10天时仍能检测到绿色荧光细胞,而Bac-CE组在第5天时基本看不到荧光细胞。结论该研究成功构建了SB转座子介导的杆状病毒基因传递系统,获得的重组病毒对哺乳动物细胞具有良好的安全性,并能介导EGFP在哺乳动物体内外持续稳定表达。; 关键词睡美人转座子杆状病毒 U87细胞持续表达; Keywords sleeping beauty transposon baculovirus U87 cells sustained expression; 分类号 R331 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高压静脉注射转染法建立脂源性炎症介导的肝癌小鼠模型: 7; 作者卢羿同杨嘉蒙赵俊龙秦鸿雁; 机构空军军医大学基础医学院医学遗传与发育生物学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期122-129,共8页; 基金国家自然科学基金面上项目(31570878,81872265)。; 文摘目的利用高压静脉注射转染法经小鼠尾静脉转染蛋白激酶B(AKT)、β联蛋白(β-catenin)及睡美人转座子质粒建立伴脂肪肝的炎癌转化小鼠肝癌模型并对该模型进行鉴定。方法选取6~8周龄雄性C57BL/6小鼠,通过高压静脉注射转染法在短时间内(5~9 s)经尾静脉注射含目的DNA的等渗生理溶液(20μg myrAKT、20μgΔN90-β-catenin和4μg Sleeping Beauty transposase溶于2 mL生理盐水),对照组采用相同方法注射对照质粒。于建模8、12、16周后,处死小鼠并收集血清及肝组织,提取RNA。HE染色检测肝脏组织结构及炎性细胞浸润程度;油红O染色检测肝细胞内脂质沉积情况;天狼星红和Masson染色检测肝组织纤维化程度;免疫组织化学染色检测肝组织KI-67抗原(ki67)表达显示细胞增殖活性、检测CD31表达显示微血管密度及分布情况;实时荧光定量PCR检测肝组织肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)的mRNA表达;流式细胞术检测肝组织内各免疫细胞亚群数量变化。结果小鼠经高压静脉注射转染法建模16周后,实验组小鼠成瘤率100%(20/20)。与对照组相比,实验组小鼠体质量增长缓慢,肝质量显著增加。HE染色结果显示,大量肝细胞出现脂肪变,炎性细胞浸润增多,肝癌组织内肿瘤细胞为类圆形或不规则形,核质比失调,异型性显著,呈团块状分布;ki67阳性细胞数增加。血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)水平显著升高,AFP mRNA表达显著上升,CD31表达检测显示微血管密度增加且结构紊乱。流式细胞术分析肝脏中大量炎性细胞浸润,且以髓系及淋巴系为主。结论通过高压静脉注射转染法在肝细胞中激活AKT和β-catenin成功建立了伴发脂肪肝的炎癌转化小鼠肝癌模型,且方法简便,诱导时间短,成瘤率高,重复性强。; 关键词肝癌炎症高压静脉注射转染法睡美人转座子(Sleeping beauty transposon) β联蛋白(β-catenin) 蛋白激酶B(AKT); Keywords liver cancer inflammation hydrodynamic transfection Sleeping Beauty transposon β-catenin AKT; 分类号 R-332 [医药卫生] R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	“睡美人”转座子的研究进展	谢飞高波宋成义陈国宏	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2007	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	腺病毒介导的“睡美人”转座子与IL-10共表达对NOD小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响	庞春艳王慧王志华冯秀媛王永福	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	睡美人转座子在草鱼CIK细胞中介导的高效基因整合	陈凯薛亭王艺舟潘启华于淼陈天圣	《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	SB转座子介导的hLF乳腺表达载体的构建及鉴定	宋洋王子玉张艳丽钟部帅张国敏孟立黄荣王昌龙闫益波王锋	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	跳跃基因--生物进化的“分子推手”	陈湘静黄浩	《生物学教学》	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	长效稳定表达杆状病毒基因传递载体的构建及表达效率研究	王志昇李梦婷姬勇敢杨文杨丽杨萌萌	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	高压静脉注射转染法建立脂源性炎症介导的肝癌小鼠模型	卢羿同杨嘉蒙赵俊龙秦鸿雁	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2020	0	在线阅读下载PDF 职称材料